RAPD 마커를 이용한 멧누에와 집누에 계통간의 분자적 유연관계 분석

황재삼,이진성,구태원,강현아,손해룡,김호락,Hwang, Jae-Sam,Lee, Jin-Sung,Goo, Tae-Won,Kang, Hyun-Ah,Sohn, Hae-Ryong,Kim, Ho-Rak 한국생명과학회 1998 생명과학회지 Vol.8 No.4

본 연구는 RAPD마커를 이용, 멧누에와 집누에의 분자적 유연관계를 분석하였다. 공시한 35개의 primer에서 166개의 RAPD마커를 얻었으며, 이들 마커를 UPGMA에 의해 분석한 결과, 멧누에와 분자적 유사계수가 가장 낮은 품종은 잠305였고, 가장 높은 품종은 Bibaekjam이었다. 또한, 분자적 유사계수 0.55에서 멧누에와 집누에 계통군으로 분류되고, 0.60에서 3개의 아군 그룹과 2개의 독립개체로 분류되었다. 제1아군에는 J111(일본종계),$pnd^{ps}$(일본종계), Bibaekjam(일본종계)이, 제2아군에는 Galwon(중국종계), C18(중국종계), od yujam JAM306(중국종계), C108(중국종계)이, 제3아군에는 R-hwang(중국종계)이 포함되어 있었고, zebra(유럽종계)와 JAM305(일본종게)는 독립개체로 분류되었다. The molecular relationships have analyzed between the Bombyx mandarina(wild silkworm) and Bombyx mori strains (domesticated silkworm, geographical silkworms). A total of 166 polymorphic RAPD markers amplified from 35 different primers were used to analyze the molecular relationships among thirteen silkworm strains. The genetic similarity coefficient between Bombyx mandarina and Jam305 showed the lowest genetic similarity value with 0.451, Bombyx mandarina and Bibaekjam showed the highest genetic similarity value with 0.958. These strains were classified into Bombyx mandarina(a wild silkworm) and Bombyx mori(twelve domesticated silkworm) groups upon the genetic similary coefficient of 0.55. Further classificient of 0.60; the 1st sub-group (J111, Bibaekjam, $pnd^{ps}$), the 2nd sub-group (Galwon, C18, od yujam, JAM306, C108), the 3rd sub-group(R-hwang, p50), the 4th sub-group(zebra) and the 5th sub-group(JAM305). According to this study, RAPD markers seems to be a valuable tool for molecular relationships and classification among the silkworms.

세계 ATM 교환기 기술 개발 동향 및 시장 분석

황정연(Jung-Yeon Hwang),이해룡(Hae-Ryong Lee),강병용(Byung-Ryong Kang) 한국통신학회 1999 한국통신학회 학술대회논문집 Vol.1999 No.11

세계 공중망 ATM 교환기 시장 전망

황정연(Jung-Yeon Hwang),이해룡(Hae-Ryong Lee),강병용(Byung-Ryong Kang) 한국통신학회 1999 한국통신학회 학술대회논문집 Vol.1999 No.7

구멍을 통과하는 계면균열의 전파거동

이억섭,윤해룡,황시원,Lee, Eok-Seop,Yun, Hae-Ryong,Hwang, Si-Won 대한기계학회 2000 大韓機械學會論文集A Vol.24 No.11

The dynamic photoelasticity with the aid of Cranz-Shardin type high speed camera system is utilized to record the dynamically propagating behavior of an interface crack. This paper investigates determined the effects of the hole (exited on the path of the crack propagation) on the crack propagation behavior by comparing the experiment isochromatic fringes to the theoretical stress fields.

접합전달을 이용한 Streptomyces natalensis ATCC27448의 형질전환 최적화 및 attB-site의 특성연구

이강무,최선욱,박해룡,황용일,Lee Kang-Mu,Choi Sun-Uk,Park Hae-Ryong,Hwang Yong-Il 한국미생물학회 2005 미생물학회지 Vol.41 No.2

상업적으로 중요한 macrolide계 항진균 학생물질인 natamycin을 생산하는 Streptomyces natalensis ATCC27448의 환자 유전학적인 연구를 위해 대장균으로부터 S. natalensis로 plasmid DNA를 직접 도입하는 형질전환법을 확립하였다. 이러한 S. natalensis의 형질전환은 oriT와 attP 단편을 가지고 있는, ${\Phi}C31$ 유래의 integration 벡터인 pSET152를 이용하여 Escherichia coli ET12567/pUZ28002을 DNA 공여체(donor)로 이용한 접합전달법(conjugal transfer)을 사용하여 확립하였다. 접합전달의 가장 높은 효율은 10 mM의 $MgCl_2$를 포함한 MS 배지에서, $6.25\times10^8$의 E. coli 공여체와 열처리를 하지 않은 S. natalensis의 포자를 사용하여 얻어졌다. 또 얻어진 접합전달체 (exconjugant)에 대하여 southern blot hybridization과 벡터가 삽입된 염색체부분의 염기서열분석을 통해 attB site와 pseudo-attB site를 확인하다. attB site의 경우에는 다른 방선균들처럼 S. natalensis 염색체의 pirin 상동체를 코드하는 ORF내에 존재하였으나 pseudo-attB site는 염색체내 다른 site (GenBank accession no. $YP\_117731$)에 존재하였고 그 염기서열은 attB 염기서열과 차이를 나타내었다. Streptomyces natalensis ATCC27448 produces natamycin, a commercially important macrolide antifungal antibiotic. For molecular genetic study of S. natalensis, we have developed a system for introducing DNA into S. natalensis via conjugal transfer from Escherichia coli. An effective transformation procedure for S. natalensis was established based on transconjugation from E, coli ET12567/pUZ8002 using a ${\Phi}C31$-derived integration vector, pSET152, containing oriT and attP fragments. The high frequency was obtained on MS medium containing 10 mM $MgCl_2$ using $6.25\times10^8$ of E.coli donor cells without heat treatment of spores. In addition, southern blot analysis of exconjugants and the sequence of plasmids containing DNA flanking the insertion sites from the chromosome revealed that S. natalensis contains a single ${\Phi}C31$ attB site and at least a secondary or pseudo attB site. Similar to the case of various Streptomyces species, a single ${\Phi}C31$ attB site of S. natalensis is present within an ORF encoding a pirin-homolog, but a pseudo-attB site is present within a distinct site (GenBank accession no. $YP\_117731$) and also its sequence deviates from the consensus sequences of attB sequence.

당근과 시금치 저장에 있어서 자몽종자추출물의 항균효과

김미경,박미숙,최선욱,박해룡,황용일,Kim Mi-Kyung,Park Mi-Suk,Choi Sun-Uk,Park Hae-Ryong,Hwang Yong-Il 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.1

In order to preserve the freshness of vegetables and to reduce the rate of decay, grapefruit seed extract (GFSE), a natural microorganism growth inhibiting agent, was applied during the preservation process of heat treated carrot and spinach. To investigate synergic effect of heat and GFSE treatment, carrots and spinaches were treated with or without 10 ppm of GFSE at $70^{\circ}C$. Surface color, texture and microbial counts of the samples were measured during storage at $4^{\circ}C$. GFSE showed an effective inhibitory activity against aerobic bacteria and yeast which might be involved in the decay of vegetables. Heat treatment at 2 min at $70^{\circ}C$ could also well preserve the color and texture of the vegetables. From the results, optimal concentrations of GFSE were 10 ppm and 50 ppm with heat treatment of 2 min $70^{\circ}C$ for the growth inhibitory effect to aerobic bacteria and yeast and preservation of color and texture. 본 연구에서는 천연 항균제 CFSE를 이용하여 적절한 온도 하에서 당근과 시금치의 저장성 향상에 대한 효과를 보았다. 먼저, $70^{\circ}C$ 및 $90^{\circ}C$에서의 당근과 시금치의 열처리에 대한 영향과 아울러 GFSE 첨가시의 효과에 대한 예비 실험을 실시한 결과, 당근과 시금치의 경우 CFSE첨가에 관계없이 $70^{\circ}C$에서 2 분간 열처리하였을 때 비교적 정상적인 색상과 texture유지 및 미생물의 생육억제 가능성을 나타내었다. 이들 예비실험으로부터 이후 열처리는 $70^{\circ}C$에서 고정하고 GFSE의 농도별 영향을 실시한 결과, GFSE를 10 ppm 이상 첨가한 경우 당근이나 시금치 모두 $4^{\circ}C$에서 저장 17일까지 호기성세균 및 yeast의 성장을 억제하는 효과를 보였으며 특히 50 ppm 이상에서는 뚜렷한 억제 효과를 보였다. 당근과 시금치의 다양한 농도의 GFSE 첨가와 아울러 $70^{\circ}C$ 2 분간 처리는 이미 1차 실험에서와 같이 색상 및 조직의 연화에는 영향이 없었다. 그러므로 잔류독성 문제가 대두되고 있는 화학 항균제가 아닌 천연 항균제 GFSE를 활용한 과일과 채소류의 저장성을 높인 상품을 개발함으로서 소비자들에게 호응을 얻을 수 있는 식품으로써의 개발이 가능할 것이다.

Streptomyces griseus IFO13350 유래 sprA 및 sprB 유전자를 이용한 Pretense 생산균주 개발

황지환,이창권,이강무,조병기,박해룡,황용일,Hwang Ji-Hwan,Lee Chang-Kwon,Lee Kang-Mu,Jo Byoung-Kee,Park Hae-Ryong,Hwang Yong-Il 한국미생물학회 2005 미생물학회지 Vol.41 No.1

Pronase, a protease produced for commercial purpose by Streptomyces griseus, was composed of serine protease, alkaline protease, aminopeptidase and carboxypeptidase complex, and it has been widely used as anti-inflammatory drugs for human therapy. In this study, we developed a new integration vector, pHJ101 derived from pSET152, containing strong promoter, ermE, to overexpress a certain protease gene. Specific PCR primers for cloning of sprA (a gene for S. griseus protease A) and sprB (a gene for S. griseus protease B) genes were designed from the basis of nucleotide sequence in databases and amplified by PCR. Plasmid pHJ201 and pHJ202 were constructed by inserting of amplified each gene in a vector pHJ101. S. griseus HA and S. griseus HB were respectively obtained by conjugal process of a parent strain, S. griseus IFO 13350 with the recombinant Escherichia coli harboring plasmid pHJ201 or pHJ202. When protease activity was measured in flask cultivation, produced protease levels of S. griseus HA and S. griseus HB increased about 5.3 times and 5 times, respectively, more than that of parent strain. And, the constructed integrating plasmid pHJ101 was applicable for overexpression of a certain gene in Streptomyces sp. 방선균 Streptomyces griseus에서 상업적 목적으로 생산되는 protease인 protease는 serine protease, alkaline protease, aminopeptidase및 carboxypeptidase로 구성되어 있는 복합체로서 의 약용 소염제로 널리 사용되어지고 있다. 본 연구에서는 기존에 개발되어 있는 방선균용 integration vector인 pSET152로부터 목적산물의 대량발현을 위해 방선균용 promoter ermE가 cloning된 새로운 integration vector인 pHJ101을 개발하였고, pretense의 생산량 증대에 사용하였다. 새로 개발된 integration vector에 S. griseus protease A를 코드하고 있는 유전자, sprA와 S. griseus pretense B유전자, sprB를 각각 cloning하여 plasmid pHJ201과 pHJ202를 구축하였다. 이들 plasmid들을 S. griseus IFO 13350에 형질전환하여 발현용plasmid가 chromosome에 integration된 재조합 균주 S. gliseus HA와 S. griseus HB를 얻었다. 이들 재조합균주로부터 전체 protease의 생산량을 확인한 결과, 모균주보다 각각 S. griseus HA는 약 5.3 배, S. griseus HB는 약 5 배 정도 생산량이 증대되었다. 이들 결과로부터 특정유전자의 고발현용 integration vector의 제작이 확인되었으며, 전체 protease의 생산량 증대의 가능성이 시사되었다.

The Application of Nanoliposome Composed of Ceramide as an Anti-irritant in Cosmetics

조병기,안기웅,신봉수,정지헌,박해룡,황용일,Jo Byoung Kee,Ahn Gi Woong,Shin Bong Soo,Jeong Ji Hean,Park Hae-Ryong,Hwang Yong-Il Korean Society of Life Science 2005 생명과학회지 Vol.15 No.2

본 연구는 화장품에서 사용되는 다양한 자극원에 대한 자극완화제로서의 세라마이드를 구성성분으로 하는 나노리포좀의 잠재적 가능성을 알아보고자 하였다. 세라마이드는 인체로부터 수분 손실을 막고, 외부의 물리적, 화학적, 그리고 미생물에 의한 손상으로부터 신체를 보호함으로써 인간의 생리작용에 있어 중요한 부분을 담당하는 것으로 알려진 표피 투과 장벽의 주요한 구조적 구성 성분이다. 본 연구 결과에 의하면 피부 장벽 기능 강화와 자극완화 효과가 제형 내에 단순히 분산된 세라마이드보다 세라마이드를 구성성분으로 하는 나노리포좀을 함유하는 경우 보다 우수하게 나타났다. 그리고, 자극원으로서 제형 내 함유되어 있는 젖산의 피부 투과도에 있어서 세라마이드를 구성성분으로 하는 나노리포좀의 영향을 평가하기 위해 무모 생쥐에서 얻어낸 피부 막으로 horizontal franz diffusion cells을 이용한 in vitro 피부 투과 시험을 수행해 보았다. 시험 결과, 세라마이드로 구성되 나노리포좀의 항자극 효과는 자극원의 피부 투과도를 감소시키는 것으로 확인하였다. 결론적으로, 본 연구에서는 새로운 자극완화 시스템의 개발이 가능하였고 이러한 세라마이드를 구성성분으로 하는 나노리포좀을 화장품에 적용 가능하였다. The objective of this study is to suggest the potentialities of nanoliposome composed of ceramide as an anti-irritant against various irritants used in cosmetics. Ceramides are major structural components of the epidermal permeability barrier, which is known to play an essential part in human physiology by not only preventing the loss of water from the body but also protecting the body from external physical, chemical, and microbial insults. According to the results, better effects on reinforcement of skin barrier function and anti-irritation were obtained with nanoliposome composed of ceramide than with dispersed ceramide. And, we performed in vitro skin penetration test using horizontal Franz diffusion cells with skin membrane prepared from hairless mouse to evaluate the influence of nanoliposome composed of ceramide on the skin penetration of lactic acid in formulations. From the results, we found that the anti-irritation effects of nanoliposome containing ceramide were due to reduced penetration rate of irritants. Conclusively, we could develop a new anti-irritation system and apply this nanoliposome composed of ceramide to the final cosmetic products successfully.

디지털 유압센서를 활용한 OF(Oil-Field) 케이블 유압감시 신뢰도 향상

이호용(Ho-Yong Lee),황해룡(Hae-Ryong Hwang),주기남(Gi-Nam Joo),이주연(Ju-Yeon Lee),박정섭(Jeong-Seop Park) 대한전기학회 2020 대한전기학회 학술대회 논문집 Vol.2020 No.7

참곱슬이(Plocamium telfairiae) 추출물의 암세포 성장억제 효과

김주영,황지환,차미란,최병대,최선욱,박해룡,황용일,Kim, Ju-Young,Hwang, Ji-Hwan,Cha, Mi-Ran,Choi, Byeong-Dae,Choi, Sun-Uk,Park, Hae-Ryong,Hwang, Yong-Il 한국생명과학회 2006 생명과학회지 Vol.16 No.4

해조류로부터 항암활성을 가지는 생리활성물질을 탐색하기 위하여 홍조해조류의 하나인 참곱슬이를 용매별 추출한 후, 분획하여 암세포 성장 억제효과를 연구하였다. 참곱슬이를 이용하여 대장암 세포주 HT-29에 대해 methanol, ethanol 및 acetone 추출물을 처리했을 때 모두 농도에 의존적으로 성장저해 효과가 나타났고, 그 중에서도 methanol 추출물에서는 50 mg/ml 농도 처리 시 12% 이하의 생존률을 보이는 가장 강한 암세포 성장 억제효과를 보였다. 또한 HT-29 암세포 성장에 대한 현미경 관찰 결과 methanol 추출물은 대조구에 비하여 암세포 성장 억제 정도와 세포의 수축등 형태변화가 두드러지게 나타났다. 그리고 가장 활성이 좋은 methanol 추출물을 용매 분획하여 얻은 분획물 중 n-hexane과 diethyl ether 분획물에서 암세포 성장 억제효과를 보였으며, n-hexane 분획물이 HT-29 세포주에 대하여 가장 높은 항암활성을 나타내었다. 따라서 n-hexane 분획물에 대한 여러 인체 암세포주에 대해 항암활성을 확인하기 위하여 HT-29와 같은 대장암 유래의 세포주 SW620, 자궁경부암 세포 HeLa 및 유방암세포 MCF-7에 대한 암세포 성장 억제효과를 확인한 결과, 3종의 암세포주에서 모두 농도 의존적으로 높은 항암활성을 보임에 따라 참곱슬이에 여러 인체 암세포 성장 억제효과를 가지는 생리활성 물질이 함유되어 있음을 알 수 있다. The extracts of Plocamium telfairiae using several solvents with different polarities were prepared and their growth inhibitory effects were examined on the human cancer cells. We investigated the cytotoxic effects of P. telfairiae extracts on HT-29 cells by the MTT reduction assay and examining the morphological change under the inverted microscope. Among three extracts, the methanol extract showed the strongest inhibitory effect on the growth of HT-29 cells. The methanol extract was further fractionated sequentially with n-hexane, diethyl ether, ethyl acetate, and aqueous for purifying crude methanol extract. The n-hexane layer among the fractioned layers showed remarkable inhibitory activity on the growth of HT-29 cells. Moreover n-hexane layer showed the notable growth inhibition effects with a dose-dependent manner against SW620, HeLa, and MCF-7 cells as well as HT-29 cells. These results indicated that P. telfairiae extracts may be contained bioactive materials with inhibitory effect on the growth of human cancer cells.