핵전이에 의한 Aspergillus niger 와 Penicillium notatum 잡종에서의 lipase 고생산 균주의 개발

양영기,문명님,이윤희,강희경,이정섭,임채영,김종세,이영하 ( Young Ki Yang,Myeng Nim Moon,Yoon Hee Lee,Hee Kyoung Kang,Jung Sup Lee,Chae Young Lim,Jong Se Kim,Young Ha Rhee ) 한국균학회 1997 韓國菌學會誌 Vol.25 No.2

Al-1 wt % Mg 합금의 일방향응고시 고/액 계면의 형상에 미치는 강화중력의 영향

양영기,강춘식,이진형,이경환,백홍구,윤우영,황장모 대한금속재료학회(대한금속학회) 1999 대한금속·재료학회지 Vol.37 No.3

Al-1wt%Mg was unidirectionally solidified to investigate the effect of enhanced gravity on the planar interface morphology. Planar solid/liquid interface morphology became unstable with increasing centrifugal force up to 15G but stabilized again at 20G. Surface stabilization of this alloy with increasing centrifugal force can be explained by thermosolutal convection.

Aspergillus nidulans 에서의 핵전이에 의한 종내잡종 형성

양영기,박열,이영하,맹필재 ( Young Ki Yang,Yeol Park,Young Ha Rhee,Pil Jae Maeng ) 한국균학회 1989 韓國菌學會誌 Vol.17 No.3

市販 香辛料의 細菌學的 調査

梁永基 조선대학교 농업연구소 1985 農業硏究 Vol.1985 No.1

The contamination rate of red pepper powder being on sale was higher than that of red pepper being on the market, and when red pepper was wiped five times with the sterilized dried cloth the decreasing rate in the number or microorganism was higher much more. Compositions of coliform group were 12% reel pepper and its powder, 21% ginger and 20% garlic among Citrobacfer freundii group, 88% red pepper and its powder, 79% ginger, 80% garlic and 100% seaweed, Gloiopelitis furcata var. intrica among Klebsiella aerogenes group, but anything was not detected among Escherichia coli group.

Aspergillus nidulans 에서의 핵전이에 의한 종내잡종 형성

양영기,박열,이영하,맹필재 충남대학교부설 생명공학연구소 1991 생물공학연구지 Vol.1 No.-

The nuclear transfer technique was employed to obtain intraspecific hybrids in Aspergillus nidulans. Nuclei isolated from either a wild type or an auxotrophic mutant strain (FGSC 475) were transferred into the protoplasts of a recipient strain (FGSC 514). The frequency of hybrid formation (4.8% and 10.1%, respectively) by nuclear transfer was higher than the frequency (0.6%) by protoplast fusion. Furthermore, most of the hybrids formed showed increased activity of some components of cellulase system, xylanase system, and mannanase. The hybrids were analyzed to be either diploid or aneuploid. These results suggest that nuclear transfer technique is more efficient in the formation of intraspecific hybrids than protoplast fusion method and is useful for the improvement of Aspergillus strains.

光州市場의 高等蔬菜類에 對한 細菌學的 硏究

梁永基,金英珠,朴悅 조선의대 1985 The Medical Journal of Chosun University Vol.10 No.1

핵전이에 의한 Aspergillus속과 Penicillium 속의 잡종으로부터 생산된 esterase특성

양영기,문명님,임채영 조선대학교 부설 유전생물공학연구소 1994 유전생물공학연구지 Vol.4 No.-

핵전이에 의해 Aspergillus oryzae var oryzae와 MPV 31 사이의 잡종을 획득하였고, 그특성과 esterase 활성 및 동위효소 양상을 조사한 결과는 다음과 같다. UV와 MNNG의 이중처리에 의해 A. oryzae var oryzae와 P. verruculosum F-3의 영양요구성 돌연변이를 각각 3주, 6주를 획득하였으며, 핵전이를 위한 원형질체 형성의 최적조건은 PH 5.8, 1.0% Novozym 234, 0.6 M KCl 그리고 효소의 처리시간은 2 시간으로 하였다. 또한 원형질체 재생을 위한 삼투안정제도 역시 0.6 M KCl이었으며, 재생율은 각각 56.4%, 52.3%로 나타났다. 핵전이에 의한 형질전환율은 3.0 x 10<윗첨자>-5</윗첨자>~1.0 x 1<윗첨자>-5</윗첨자>으로 나타났으며, 형질전환체의 유전적 안정성과 conidial size, 핵염색, 그리고 DNA 함량의 측정결과핵형은 aneuploid로 추정되었고 효소 활성의 측정결과 형질전환체가 모균주에 비해 1.3~2.2배 가량 증가하였으며, 동위효소 양상은 형질전환체와 모균주에서 유사하게 나타났으나 효소활성에 차이가 있음을 알수 있었다. Intergeneric hybrids formed between Aspergillus oryzae var oryzae and Penicillium verruculosum F-3 were obtained by nuclear transfer technique. Several auxotrophic mutants isolated from conidiospores of the two strains mutagenized with ultraviolet and N-methyl-N-nitrosoguani-dine. Optimal conditions for formation of intergeneric hybrids were investigated. Frequencies of hybrid formation by nuclear transfer were 1 x 10<윗첨자>-5</윗첨자>~3 x 10<윗첨자>-5</윗첨자>. From observation of genetic stability, conidial size, DNA content, nuclear stain, it was suggested that their karyptypes are aneuploid. The hybrid posses the 1.2~l.8 fold higher esterase activities than those of parental strains. It was also revealed that some hybrids had different isozyme patterns compared with those of parental strains by esterase activity assays.

原形質體 融合에 依한 Aspergillus nidulans의 Cellulase 및 Xylanase 生成에 關한 遺傳學的 硏究

梁永基 조선대학교 기초과학연구소 1988 自然科學硏究 Vol.11 No.1

섬유소 분해균으로 잘 알려진 Aspergillus nidulans 돌연변이 균주들을 재료로 하여 균주개발에 유용한 원형질체 융합기술의 원리와 방법을 도입하여 원형질체 형성과 융합의 최적조건을 파악하고 융합모균과 원형질체 융합에 비해 얻어진 hybrd 균주의 Cellulase system과 Xylanase system 효소 활성을 비교 조사하였으며 또한 CMCase와 β-Glucosidase의 전기영동 양상을 관찰하였다. 원형질체 혈성은 0.6M KCI을 삼투안정제로 0.5%의 Novozym 234를 2시간 처리했을 때 최적이었다. 원형질체 융합에 대한 PEG, CaCl_2와 glycine의 최적농도는 30%, 10mM, 0.05M이었고, 최적 PH와 반응시간은 각각 5.8과 10분 이었으며, 융합빈도율은 3.8x10^-1~5.8X10^-1범위였다. 효소활성은 효소에 따라 부분적으로 증진되어 활성이 높은 균주가 있으나 대체로 비슷하거나 낮았으며, electrophoresis에 의한 양상은 parental strain과 큰 차이가 없는 것으로 나타났다. The optimum conditions of the protoplast formation and fusion was studied in the auxotrophic mutants of Aspergillus nidulans. The enzyme activity of cellulase and xylanase system between parental strain and hybrid was investigated and the electrophoretic patterns of CMCase and β-Glucosidase was studied. Protoplast formation was the best result in the conditions of 2 hour treatment, 0.5% Novozym 234 and 0.6M KCI in osmotic stabilizer. It was found that optimal concentration of polyethylene glycol, CaCl_2 and glycine are 30%, 10mM and 0.05M while optimal pH and exposure time are 5.8 and 10 min. its fusion frequency ranged from 3.8. X 10^-1 to 5.8X10^-1. Some enzyme activities of hybrids were increased or same and others had 1ower than activities of parental strains. The electrophoresis patterns had no difference between parental strain and hybrid.

핵전이에 의한 Aspergillus niger와 Penicillium chrysogenum의 잡종에서의 Lipase 고생산균주의 개발

양영기,문명님,이윤희,임채영 한국미생물학회 1997 미생물학회지 Vol.33 No.1

Aspergillus niger와 Penicillium chrysogenum간의 lipase 우수 생성 종간 형질전환체를 획득하고, 유전분석을 통하여 다음과 같은 결과를 얻었다. (1) P. chrysogenum의 영양요구물을 확인하여 본 결과 Tyrosine 요구성임을 알 수 있었다. (2) 핵전이를 위한 원형질체 형성 및 재생 조건에서는 Novozym 234의 농도 1%, 삼투안정제는 0.6M KCl, 효소의 처리 시간은 180분 그리고 최적 pH는 5.8로 나타났다. (3) 핵전이에 의한 형질전환의 빈도는 $1.3{\times}$10^{-3}$$ $-3.8{\times}$10^{-3}$$으로 비교적 낮은 편이었다. (4) 유전적 안정성, conidia의 크기, DNA 함량의 측정 그리고 핵염색의 결과 형질전환체의 핵형은 aneuploid로 추정되었다. (5) 형질전환체의 lipase활성은 모균주와 비교하여 1.4-2.2배 증가하였다. Intergeneric hybrids between Aspergillus niger and Perricillium ch~y.sop~um(Tyr ), hyperlipolytic enzyne-producing fungi, were obtained by nuclear transfer technique:. Optimal conditions for formation of intergeneric hybrids were investigated. Maximum production of protoplasts were obtainrd by 1% Novozym 234 at $30^{\circ}C$ for 3 hrs and the most effective osmotic stabilizers for the isolation of protoplasts were 0.6 M KC]. Frequencies of hybrid formation by nuclear transfer were $1.3{\times}$10^{-3}$$ $-3.8{\times}$10^{-3}$$. From the chervation of genetic stability, conidial size, DNA content, ;md nuclear stain, it was suggested that their karyotypes are aneuploid. The hybrids showed 1.4-2.2 fold higher lipase activities than parental strains. It was strongly supported by results of this study that nuclear transfer technique is much more efficient in the formation of intergeneric hybrids than protoplast fusion and is very useful for the improvement of strains.

핵전이에 의한 Aspergillus oryzae var oryzae와 Penicillium verruculosum F-3의 잡종으로부터 Amylase 생산

양영기,박열,김성준,문명님,박형남,임채영,이영하 한국산업미생물학회 1994 한국미생물·생명공학회지 Vol.22 No.1

핵전이에 의해 Aspergillus oryzae var oryzae와 MPV 31 사이의 잡종을 획득하였고, 그 특성과 Amylase 활성 및 동위효소 양상을 조사한 결과는 다음과 같다. UV와 MNNG의 이중처리에 의해 A. oryzae var oryzae와 P. verruculosum F-3의 영양요구성 돌연변이를 각각 3주, 6주를 획득하였으며, 핵전이를 위한 원형질체 형성의 최적조건은 pH 5.8, 1.0% Novozym234, 0.6 M KCI 그리고 효소의 처리시간은 2시간으로 하였다. 또한 원형질체 재생을 위한 삼투안정제도 역시 0.6 M KCI이었으며, 재생율은 각각 56.4%, 52.3%로 나타났다. 핵전이에 의한 형질전환율은 3.0×10exp(-5)∼1.0×1^(-5)으로 나타났으며, 형질전환체의 유전적 안정성과 conidial size, 핵염색, 그리고 DNA 함량의 측정결과 핵형은 aneuploid로 추정되었고 total amylase의 측정 결과 형질전환체가 모균주에 비해 1.3∼2.2배 가량 증가하였으며, 동위효소 양상은 형질전환체와 모균주에서 유사하게 나타났으나 amylase 활성에 차이가 있음을 알 수 있었다. Intergeneric hybrids formed between Aspergillus oryzae var oryzae and Penicillium verruculosum F-3 were obtained by nuclear transfer technique. Several auxotrophic mutants isolated from conidio-spores of theh two strains mutagenized with ultraviolet and N-methyl-N-nitrosoguanidine. Optimal conditions for formation of intergeneric hybrids were investigated. Frequencies of hybrid formation by nuclear transfer were 3×10exp(-5)∼1×10exp(-5). From observation of genetic stability, conidial size, DNA content, nuclear stain, it was suggested that their karyptypes are aneuploid. The hybrid posses the 1.3∼2.2 fold higher amylase activities than those of parental strains. It was also revealed that some hybrids had different isozyme patterns compared to those of parental strains by amylase activity assays.