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볏짚으로부터의 Bacillus coagulans 빠른 분리법
이빛나라 ( Bitnara Lee ),이현동 ( Hyun Dong Lee ),정도원 ( Do Won Jeong ),이종훈 ( Jong Hoon Lee ) 한국미생물생명공학회(구 한국산업미생물학회) 2015 한국미생물·생명공학회지 Vol.43 No.4
Bacillus coagulans는 프로바이오틱스 및 내열성 생물소재의 생산에 활용 가능성이 높은 미생물로 주목받고 있지만, 우리나라에서는 관심의 대상이 되지 못하고 있으며 상용화된 바 없다. 따라서 기능연구를 통한 산업화 대상 균주가 국내에는 충분히 확보되지 못한 상태에 있다. 본 연구자들은 미래 활용을 위한 B. coagulans의 확보를 위하여 볏짚으로 부터 B. coagulans의 빠른 분리법을 개발하였다. 50°C에서의 집적배양, 산 생성 확인을 통한 Bacillus 속 균주의 제거, 선택배지를 이용한 enterococci 균주의 제거는 B. coagulans 선발을 위한 빠르고 정확한 방법이 될 수 있는 것으로 확인되었다. Bacillus coagulans has been considered to be a prominent candidate for probiotics as well as a thermotolerant biomaterial producer. However, the species has not attracted the attention of Korean researchers, nor has it been commercialized in Korea. Therefore, isolates for functional studies are not readily available. To secure B. coagulans resources for future applications, we developed a rapid isolation method for the species from rice straw. Introduction of the enrichment culture at 50oC, the selection of acid producers with CaCO3 supplemented medium, and the elimination of enterococci by selective medium, rendered the successful and rapid isolation of B. coagulans strains.
Violacein을 생산하는 Massilia sp. EP15224 균주
윤상홍 ( Sang Hong Yoon ),백희진 ( Hee Jin Baek ),권순우 ( Soon Wu Kwon ),이창묵 ( Chang Muk Lee ),심준수 ( Joon Soo Sim ),한범수 ( Bum Soo Hahn ),구본성 ( Bon Sung Koo ) 한국미생물생명공학회(구 한국산업미생물학회) 2014 한국미생물·생명공학회지 Vol.42 No.4
비올라세인은 항균, 항암, 항산화, 항말라리아, 항설사 활성과 같은 다양한 생리활성을 가지는 보라색소 물질로 알려져 있다. 본 연구에서는 한국의 산림토양에서 분리되었으며 보라색 색소를 생산하는 EP15224 균주를 선발하여 16S rRNA유전자의 염기서열을 분석하였다. 그 결과 Massilia sp. BS-1과 97%의 가장 높은상동성을 보였다. 또한 16S rRNA 유전자에 근거한 계통분류학적 분석에서 EP15224는 기존 보고된 비올라세인 생산 세균들과는 별개로 구분되는 Massilia속의 새로운 종임을 확인하였다. 이 균주가 생산하는 보라색소물질을 분리하여 LC/MS/MS로 분석한 결과, 분자량이 343.34인 비올라세인과 일치하였다. 또한 비올라세인의 생산효율을 높여주는 최적의 배지성분[glucose 2 g/l, (NH4)2SO4 1 g/l, Na2HPO4· 7H2O 2 g/l, KH2PO4 1 g/l, MgSO4· 7H2O0.1 g/l, L-tryptophan 0.24 g/l]과 배양조건[25oC에서 72시간배양, 250 rpm, 10% 접종량]을 조사하였으며 이 조건에서 액체배양 하였을 때 리터 당 280 mg의 비올라세인이 생산되었다. Violacein has received much attention due to its various important biological activities, including broad-spectrum antibacterial and antifungal activity, anti-malarial, anti-tumoral, anti-oxidant, and anti-diarrheal activities. EP15224 strain isolated from forest soils in Korea was found to be a new species belonged to the genus Massilia based on its 16S ribosomal DNA sequences. The 16S ribosomal DNA of strain EP15224 displayed 97% homology with Massilia sp. BS-1, the nearest violacein-producing bacterium. Strain EP15224 produced bluish-purple pigment well in a synthetic MM2 medium containing glucose, (NH4)2SO4, Na2HPO4·7H2O, KH2PO4, MgSO4·7H2O, and 1 mM L-tryptophan. The chemical analysis of the pigment by LC/MS/MS showed that it is violacein with molecular weight of 343.34. This is the second report on the production of violacein by a Massilia species. In this study, the optimal culture conditions for violacein production were established under which 280 mg/l crude violacein was produced : glucose 2 g/l, (NH4)2SO4 1 g/l, Na2HPO4·7H2O 2 g/l, KH2PO4 1 g/l, MgSO4·7H2O 0.1 g/l, L-tryptophan 0.24 g/l, 25 ml medium in a 250 ml flask, with an inoculumn size of 10% (v/v), 72 h of cultivation with 250 rpm at 25oC.