Murine Macrophage RAW 264.7 세포에서 구실잣밤나무 추출물의 항염증 효과

고영종,송상목,현우철,양수경,송창길,이동선,윤원종 한국자원식물학회 2014 한국자원식물학회지 Vol.27 No.5

This study describes a preliminary evaluation of the anti-inflammatory activity of Castanopsis cuspidata extracts. C. cuspidata was extracted using 80% ethanol and then fractionated sequentially with n-hexane, dichloromethane, ethylacetate, and butanol. To screen for anti-inflammatory agents effectively, we first examined the inhibitory effect of the C. cuspidata extracts on the production of pro-inflammatory factors and cytokines stimulated with lipopolysaccharide. In addition, we examined the inhibitory effect of C. cuspidata extracts on pro-inflammatory mediators (NO, iNOS, COX-2) in murine macrophage RAW 264.7 cells. The amounts of protein levels were determined by immunoblotting. Of the sequential solvent fractions of C. cuspidata, the n‑hexane, dichloromethane and ethylacetate fractions inhibited the mRNA expression of pro-inflammatory cytokines (IL-1β and IL-6), production of NO, and the protein level of iNOS and COX-2. These results suggest that C. cuspidata may have significant effects on inflammatory factors and may be provided as a possible anti-inflammatory therapeutic plant. 본 연구는 구실잣밤나무(C. cuspidate) 잎 추출물의 항염증활성이 염증성 매개인자 생성 저해 및 염증성 사이토카인의 억제와 관련이 있을 것으로 예상되어짐에 따라, 구실잣밤나무를대상으로 80% 에탄올를 가지고 추출한 후 추출물을 극성에 따라 순차적으로 용매분획을 실시하여, 구실잣밤나무 80% 에탄올 추출물 및 용매분획물들이 염증반응의 주체가 되는 대식세포 계열인 RAW 264.7 세포에서 LPS로 유도된 NO의 생성억제효과, 그리고 iNOS와 COX-2의 mRNA와 단백질 발현 억제효과 및 IL-6와 IL-1β와 같은 염증성 사이토카인 생성 억제효과등을 알아보았다. 대식세포 계열인 RAW 264.7 세포에 LPS로자극을 주고 구실잣밤나무 80% 에탄올 추출물 및 분획물을 처리하여 확인해본 결과, 헥산, 디클로로메탄 및 에틸아세테이트분획물에서 NO의 생성억제 효과가 강하게 나타났으며, 헥산과디클로로메탄 분획물에서는 iNOS와 COX-2 생성 억제 효과가다른 분획물에 비해 강하게 나타났으며 염증성 사이토카인 생성 억제 효능도 80% 에탄올 추출물 및 분획물들이 다소 차이는있었지만 헥산과 디클로로메탄 분획물에서 IL-6와 IL-1β에서생성억제 효과가 나타났다. 이러한 결과는 구실잣밤나무 잎에서 유효성분 추출을 통한 항염증 물질의 연구 또는 예방하거나치료할 수 있는 염증 억제 성분의 분리 및 그 작용기전 연구에중요한 기초 자료가 될 것이라 사료된다. 또한 구실잣밤나무 추출물로부터 염증억제 성분을 도출하고자 활성분획인 디클로로메탄 분획물에 대하여 활성성분의 분리가 진행 중이다.

까마귀쪽나무 열매 추출물의 골관절염 억제 효과

윤원종,송상목,오대주,고창식,윤선아,이용범,박대원,정용준,권정은,조영미,조주현,김창숙,강세찬,함영민 한국자원식물학회 2015 한국자원식물학회지 Vol.28 No.5

Osteoarthritis (OA) is a degenerative disease characterized by the progressive degradation of joint cartilage and is accompanied by secondary inflammation of synovial membranes. The purpose of this study describes a preliminary evaluation of the anti-inflammatory activity on test material of Litsea japonica. fruit (LJTM) Also, this study was to evaluate the effects of LJTM on the joint cartilage of rat with OA induced by monosodium iodoacetate (MIA). To study for anti-inflammatory agents effectively, we first examined the inhibitory effect of the LJTM on the production of pro-inflammatory factors and cytokines stimulated with lipopolysaccharide. We identified anti-nociceptive effects of the LJTM by using in vivo peripheral and central nervous pain models. In addition, the aim of this study was to evaluate the effects on mRNA expression of MMP-2, -3, -7, -9, -13, TIMP-1 and –2 in cartilage of OA. In the LJTM inhibited production of pro-inflammatory mediators (NO and PGE2) and pro-inflammatory cytokines (TNF-α and IL-6). In cartilage, Expression of MMPs and TIMPs mRNA was suppressed in LJTM treatment group than in the control group. This study suggests that LJTM are potential candidates as anti-inflammation and anti-osteoarthritis agents (painkillers) for the treatment of OA. 본 연구는 까마귀쪽나무 열매 70% 주정에탄올 추출물을 가지고 제작된 인체적용시험시료(LJTM)의 항염증 및 골관절염biomarker의 변화를 통한 관절건강 기능성식품을 개발하기 위하여 인체적용시험시료를 제작한 후 이에 대한 유효성분의 함량을 평가하고, 인체적용시험전에 그 효력이 유지됨을 확인하기 위하여 수행되었다. 본 연구에 사용된 시료 LJTM은 NO생성이 억제되는 농도에서 세포독성이 관찰되지 않았으며, TNF-α 와 IL-6 생성이 농도 의존적으로 억제되고 PGE2를 억제하였다. 또한 동물시험에서 골관절염의 biomarker인 MMP-2, 3, 7, 9 와 TIMP-1, 2에 대한 mRNA 발현이 농도 의존적으로 억제되었으며, 중추신경계 및 말초신경계에 의한 통증을 억제하는 것으로 평가되었다. 따라서 까마귀쪽나무 열매 70% 추출물이 함유된 인체적용시험시료(LJTM)는 골관절염과 진통억제에 우수한효과가 있는 것으로 확인되었다.

신서란(Phormium tenax) 잎 조추출물 및 용매 분획물의 항염증 및 항아토피 효과

양권민,송상목,이도승,윤원종,김찬식,김창숙 한국자원식물학회 2019 한국자원식물학회지 Vol.32 No.5

This study describes a preliminary evaluation of the anti-inflammatory activity and anti-atopic activity ofPhormium tenax leaf extracts. P. tenax leaf was extracted using 70% ethanol and then fractionated sequentially withn-hexane, methylene chloride, ethyl acetate, n-butanol. In order to effectively screen for anti-inflammatory agents, we firstinvestigated the inhibitory effects of P. tenax leaf crude extracts and solvent fractions on production of pro-inflammatoryfactors[nitric oxide(NO), prostaglandin E2(PGE2), inducible nitric oxide synthase(iNOS) and cyclooxygenase-2(COX-2)]and pro-inflammatory cytokines [tumor necrosis factor-α(TNF-α), interleukin-6(IL-6) and interleukin-1β(IL-1β)] inlipopolysaccharide(LPS)-stimulated RAW 264.7 cells. In addition, we also evaluated of their inhibitory effect on the atopicdermatitis-like inflammatory markers such as macrophage-derived chemokine(MDC) and thymus and activation-regulatedchemokine(TARC) in HaCaT cells. Among the five solvent fractions of P. tenax, methylene chloride and ethyl acetatefractions inhibited production of pro-inflammatory factors and pro-inflammatory cytokines in a dose dependent manner,respectively. These fractions were also showed inhibitory activity for MDC and TARC expression levels in IFN-γ-stimulated HaCaT cells, respectively. These results suggest that P. tenax have significantly effects of anti-inflammatoryactivity and anti-atopic activity that might be beneficial for the topical treatment of inflammatory skin disorders. 본 연구는 하라케케(Harakeke)로 불리는 신서란(Phormiumtenax)를 화장품 및 의약품산업의 기능성 소재로서의 이용 가능성을 확인하기 위하여 신서란 잎을 대상으로 70% 에탄올 추출물과 용매 분획물을 제조하여, 이것들의 항염증 및 항아토피의효과를 조사하였다. LPS로 유도된 RAW 264.7 세포에서 신서란에탄올 추출물과 용매 분획물의 항염증 효과를 조사한 결과,methylene chloride와 ethyl acetate 분획물에서 NO와 PGE2 생성 억제 활성이 가장 높게 나타났으며, 농도 의존적으로 NO와 PGE2 생성 억제 활성을 보였다. 또한, 이들 분획물에서는iNOS 및 COX-2 발현 억제 활성을 보였다. 신서란 잎 조추출물과 용매 분획물에 의한 NO, PGE2 생성 억제 활성이 NOS 및COX-2 발현 억제에 의한 것임을 제시한다. 더불어, hIFN-γ로자극된 HaCaT 세포에 용매 분획물을 처리하여 MDC 및 TRAC생성억제 효과를 조사한 바, methylene chloride 분획물은MDC 및 TATC의 생성을 각각 65%, 52% 생성억제 시켰으며,ethyl acetate 분획물은 MDC 및 TATC의 생성을 각각93%, 84%억제 효과를 보였다. 이상의 결과는 신서란 잎 조추출물과 용매분획물을 이용한 항염증 및 항아토피 효능을 갖는 유효성분 분리 및 활용화 연구에 중요한 기초자료가 될 것이며, 기능성 화장품, 의약외품 및 의약품 소재 개발에 적용 가능성이 높다고 사료된다.

Murine Macrophage RAW 264.7 세포에서누은분홍잎(Acrosorium yendoi Yamada)의 추출물과 에틸아세테이트 분획물에 대한 항염증 효과

고창식,현우철,김지현,고영종,송상목,고미희,이종철,김창숙,윤원종 한국자원식물학회 2015 한국자원식물학회지 Vol.28 No.5

This study describes a preliminary evaluation of the anti-inflammatory activity of Acrosorium yendoi Yamada extracts. A. yendoi Yamada was extracted using 80% ethanol and then fractionated sequentially with n-hexane, ethyl acetate and butanol. To screen for anti-inflammatory agents effectively, we first examined the inhibitory effect of 80% EtOH extract and solvent fractions of A. yendoi Yamada on the production of pro-inflammatory factors and cytokines stimulated with lipopolysaccharide. In addition, we examined the inhibitory effect of 80% EtOH extract and solvent fractions of A. yendoi Yamada on pro-inflammatory mediators (NO, iNOS, PGE2, and COX-2) in RAW 264.7 cells. In the sequential fractions of n-hexane and EtOAc inhibited the NO and PGE2 production and the protein level of iNOS and COX-2, and protein expression of pro-inflammatory cytokines (TNF-α, and IL-6). These results suggest that A. yendoi Yamada may have significant effects on inflammatory factors and may be provided as possible anti-inflammatory therapeutic seaweed. 본 연구는 누은분홍잎(Acrosorium yendoi Yamada) 80% 에탄올를 가지고 추출한 후 추출물을 극성에 따라 순차적으로 용매분획을 실시하여, 80% 에탄올 추출물 및 그 분획물들의 염증반응의 주체가 되는 대식세포 계열인 RAW 264.7 세포에서 LPS 로 유도된 NO의 생성억제 효과, 그리고 iNOS와 COX-2의 단백질 발현 억제효과, PGE2 생성 억제 효과 및 TNF-α와 IL-6등과같은 pro-inflammatory cytokines 생성 억제효과 등을 알아보았다. 대식세포 계열인 RAW 264.7 세포에 LPS로 자극을 주고누은분홍잎 80% 에탄올 추출물 및 분획물을 처리하여 확인해본결과, 에틸아세테이트 분획물에서 NO와 PGE2 생성 억제 활성

반응표면분석법을 이용한 개조개(Saxidomus purpuratus) 패각분말로부터 가용성 초산칼슘의 제조 및 특성

이현지(Hyun Ji Lee),정남영(Nam Young Jung),박성환(Sung Hwan Park),송상목(Sang Mok Song),강상인(Sang In Kang),김진수(Jin-Soo Kim),허민수(Min Soo Heu) 한국식품영양과학회 2015 한국식품영양과학회지 Vol.44 No.6

패류의 주된 가공부산물인 패각은 주성분이 불용성의 탄산칼슘으로, 이를 천연 칼슘소재로 활용하기 위해 개조개 패각의 소성분말로부터 가용성 개선 유기산(초산) 처리 칼슘 제조의 최적조건을 구명하고자 하였다. 반응표면분석법을 이용하여 제조한 11개의 시제 초산칼슘의 pH, 용해도 및 수율로부터 구명한 최적 반응조건은 초산 2.70 M 비율에 대하여 개조개 소성분말 1.05 M이었으며, 이의 최적조건을 적용한 개조개 초산칼슘의 실측 pH, 용해도 및 수율은 각각 pH7.04, 93.0% 및 267.5%로 예측치와 유사한 결과를 얻었다. 시제 초산칼슘의 완충능은 pH 4.88~4.92 범위였으며, 칼슘함량과 용해도는 20.7~22.8 g/100 g과 97.2~99.6%였다. FT-IR, XRD 분석 및 FESEM을 통한 미세구조는 비정형결정으로 calcium acetate monohydrate로 확인되었다. 개조개 패각은 칼슘소재뿐만 아니라 가용성을 높인 유기산 칼슘으로 칼슘강화용 식품소재로의 이용 가능성이 높을 것으로 판단되었다. For effective utilization of butter clam shell as a natural calcium resource, the optimal conditions for preparation of calcium acetate (BCCA) with high solubility were determined using response surface methodology (RSM). The polynomial models developed by RSM for pH, solubility, and yield were highly effective in describing the relationships between factors (P<0.05). Increased molar ratio of calcined powder (BCCP) from butter clam shell led to reduction of solubility, yield, color values, and overall quality. Critical values of multiple response optimization to independent variables were 2.70 M and 1.05 M for acetic acid and BCCP, respectively. The actual values (pH 7.04, 93.0% for solubility and 267.5% for yield) under optimization conditions were similar to predicted values. White indices of BCCAs were in the range of 89.7∼93.3. Therefore, color value was improved by calcination and organic acid treatment. Buffering capacity of BCCAs was strong at pH 4.88 to 4.92 upon addition of ∼2 mL of 1 N HCl. Calcium content and solubility of BCCAs were 20.7∼22.8 g/100 g and 97.2∼99.6%, respectively. The patterns of fourier transform infrared spectrometer and X-ray diffractometer analyses from BCCA were identified as calcium acetate monohydrate, and microstructure by field emission scanning electron microscope showed an irregular form.

어류 알로부터 Protease - inhibitors의 단백질 용해도 차이에 의한 분획 특성

김현정 ( Hyeon Jeong Kim ),김기현 ( Ki Hyun Kim ),송상목 ( Sang Mok Song ),김일용 ( Ii Yong Kim ),박성환 ( Sung Hwan Park ),구은지 ( Eun Ji Gu ),이현지 ( Huyn Ji Lee ),김진수 ( Jin Soo Kim ),허민수 ( Min Soo Heu ) 한국수산과학회 2013 한국수산과학회지 Vol.46 No.2

A protease inhibitor was fractionated from fish eggs using methods based on protein solubility. Fractionation efficiency was evaluated with regard to percent recovery and total inhibitory activity (U). The fractionation of protease inhibitor(P1) from egg extracts of skipjack tuna (ST, Katsuwonus pelamis), yellowfin tuna (YT, Thunnus albacores), and Alaska pollock (AP, Theragra chalcogramma) was performed by precipitation with cold acetone or ammonium sulfate (AS). Fractions exhibiting the strongest inhibitory activity contained 20-40% (v/v) cold acetone or 40-60% saturated AS fractions. AS fractionation was more effective in isolating Pt than was precipitation with acetone. The total inhibitory activity and percent recovery of fraction obtained with AS 40-60% toward tlypsin and Na-benzoyl-Larginine-p-nitroanilide(RAPNA)were4,976 Uand 24,2% for ST. 3,331 U and 38.1% for YT. and 4,750 U and 43.8% for AP, respectively. In comparisons against six commercial proteases, 40-80% AS fractions, made by combining the 40-60% and 60-80% AS fractions from fish egg extract, exhibited the strongest inhibition of trypsin when using a casein substrate. These results suggest that fish eggs act as serine protease inhibitors and may be useful for protease inhibition in foodstuffs.

삼채의 조추출물과 유기용매 분획물에 대한 항산화 및 항염증 효과

이용범(Yong-Bum Lee),함영민(Young-Min Ham),윤선아(Seon-A Yoon),오대주(Dae-Ju Oh),송상목(Sang-Mok Song),홍인철(In-Choel Hong),이시택(Si Taek Lee),현호봉(Ho Bong Hyun),김창숙(Chang-Suk Kim),윤원종(Weon-Jong Yoon) 한국식품영양과학회 2017 한국식품영양과학회지 Vol.46 No.1

본 연구는 삼채의 조추출물과 유기용매 분획물들을 가지고 DPPH 라디칼 소거 활성에 의한 항산화 활성 검색 결과 디클로로메탄(CH2Cl2) 분획물과 에틸아세테이트(EtOAc) 분획물에서 라디칼 소거 활성을 나타냈으며, xanthine oxidase 억제 효과는 DPPH 활성 라디칼 소거 활성에서 제일 뛰어났던 에틸아세테이트 분획물에서, superoxide 소거 활성은 헥산(n-hexane) 분획물에서 활성이 나타났다. RAW 264.7 세포에 lipopolysaccharide로 자극을 주고 삼채 주정 추출물 및 유기용매 분획물들을 처리하여 확인해본 결과, 조추출물과 물 분획물을 제외한 나머지 유기용매 분획물에서 염증 유발 인자(NO, PGE2, iNOS, COX-2, IL-6 및 IL-1β) 생성억제 효과가 나타났으며, 그중 디클로로메탄 분획물과 에틸아세테이트 분획물에서 억제 효과를 확인할 수 있었다. 본 실험 결과 삼채 조추출물과 유기용매 분획물에서 항산화 효과 및 염증 유발 인자의 생성 억제 효과가 나타났으며, 이러한 결과 삼채에서 유효성분 추출을 통한 항산화, 항염증 물질의 연구 또는 예방하거나 치료할 수 있는 염증 억제 성분의 분리 및 그 작용기전 연구에 중요한 기초 자료가 될 것이라 생각한다. This study describes the preliminary evaluation of antioxidant and anti-inflammatory activities of Allium hookeri. A. hookeri was extracted using crude extract and then fractionated sequentially with n-hexane, CH2Cl2, EtOAc, and n-BuOH. To screen for antioxidant and anti-inflammatory agents effectively, we first examined the inhibitory effect of A. hookeri extracts on production of oxidant stresses (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl, xanthine oxidase, and superoxide). In addition, we examined the inhibitory effects of A. hookeri on production of pro-inflammatory factors (nitric oxide, prostaglandin E2, inducible nitric oxide synthase, and cyclooxygenase-2) in murine macrophage RAW 264.7 cells stimulated with lipopolysaccharide. Of the sequential solvent fractions of A. hookeri, EtOAc fractions showed decreased production of oxidant stresses, and CH2Cl2 and EtOAc fractions of A. hookeri inhibited production of pro-inflammatory factors. EtOAc fraction inhibited production of pro-inflammatory cytokines (interleukin-6 and -1β). These results suggest that A. hookeri has significant effects on oxidant stresses and pro-inflammatory factors and is a possible antioxidant and anti-inflammatory therapeutic and preventive material.