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        • KCI등재후보

          고장성 식염수 주사에 의한 흰쥐 정소의 해부학적 변화

          곽병국,이철상,이성호 한국발생생물학회 2010 발생과 생식 Vol.14 No.4

          Recent evidence has revealed that the intratesticular injection of hypertonic saline(20%) resulted in a chemically castrated state such as nadir testosterone levels in rats. To confirm the efficacy of this simple saline-injection method further, we investigated the changes in the gross and microscopic anatomy of testis. Our study comprised three groups; intac t(control) group, orchidectomy group and saline-injection (experimental) group. Single dose of hypertonic saline (sterilized, 750 ㎕/testis) were directly administered into both testis of adult rats (about 300 g BW). Bilateral orchidectomy was performed at the same day of saline injection. Following 30 days post-injection, reproductive tissues were surgically removed, weighed and fixed for histological examination. The body weights were not changed in both orchidectomy group and saline-injection group when compared to those in intact group. The wet weights of testis were significantly decreased in saline-injection group when compared to those in intact group. The wet weights of epididymis and seminal vesicle and prostate were significantly decreased in orchidectomy group and saline-injection group when compared to those in intact group. Macroscopically, the testes exerted slight atrophy and the tunica albuginea seemed to be intact in saline injection group. Histologically, however, larger parts of testicular tissue underwent necrosis and were barely recognizable after hematoxylin-eosin staining. In the same section, only the opposite part of the injection site was stained showing abnormal state of cell layers mostly fibrosis and infiltrated leukocytes. Sloughing of immature germ cells from the basement membrane along with shedding cells in the intraluminal space was notable in most seminiferous tubules from the saline injected testis. The present study confirmed that the direct injection of hypertonic saline into testis can induce a castration-like, testosterone-depriving effects on accessory sex organs. Our findings suggest that the efficacy of this less expensive and minimally invasive method seems to be almost even with that of conventional orchidectomy and chemical castration, though more in-depth evaluation should be supported.

        • KCI등재

          Evaluation of Newly Developed Chemical Castration Method: Changes in Hormone Gene Expression of Hypothalamic-Pituitary Axis

          곽병국,이성호 한국발생생물학회 2017 발생과 생식 Vol.21 No.3

          Surgical castration (also known as orchidectomy, ORX) has been frequently performed to avoid uncontrolled breeding. However, it has some serious disadvantages. Several laboratories have developed chemical castration methods, using bilateral intratesticular injection (BITI) of simple chemical solutions. The present study was undertaken to compare the effects of ORX and of hypertonic saline BITI on the androgen-sensitive tissues such as pituitary and hypothalamus. Serum testosterone (T) levels of ORX animals and hypertonic saline BITI animals (SAL) after 4 weeks of the manipulations exhibited significantly drops as compared with the levels of intact animals (Intact:ORX:SAL = 7.74± 1.31:1.34±0.19:1.28±0.18 ng/ml, p<0.001). Both ORX and BITI method induced similar stimulatory effects on the pituitary gonadotropin subunits and hypothalamic KiSS-1 gene expressions. In contrast, the effects of ORX and hypertonic saline BITI on hypothalamic GnRH gene expression were different from these gene expressions, shown an inverse relationship between the two groups (Intact:ORX:SAL = 1:0.45±0.06:1:2.07±0.41:1.51±0.37 AU; ORX, p<0.001; SAL, p< 0.05). In conclusion, we provided evidence that hypertonic saline BITI method has equivalent efficacy of T depletion to surgical castration in rats. The present study suggests the hypertonic saline BITI could be a promising substitute to conventional surgical castration.

        • KCI등재

          토끼 뒷다리 만성허혈모델에서 $phVEGF_{165}$ 유전자 치료: 동맥내 주입과 근육내 주사의 비교

          곽병국,심형진,김건상,이종범,송인섭,정진욱,박재형,Gwak,,Byeong-Guk,Sim,,Hyeong-Jin,Kim,,Geon-Sang,Lee,,Jong-Beom,Song,,In-Seop,Jeong,,Jin-Uk,Park,,Jae-Hyeong 대한영상의학회 2003 대한영상의학회지 Vol.48 No.5

          목적:혈관신생의 기능이 있는 $phVEGF_{165}$ 를 합성하고,토끼 뒷다리의 만성허혈모델에서 동맥내 주입과 근육내 주사를 통하여 혈관신생의 효과를 비교하고자 하였다. 대상과 방법:토끼의 좌측 뒷다리에 만성허혈모델을 만들고,대조군 6마리와 동맥내 주입군 7마리,근육내 주사군 5마리로 나누었다.HL60 세포주로부터 혈관내피세포성장인자 (VEGF)를발현하는 $phVEGF_{165}$ 를 제조하여,CHO 세포주에 유전자 전달감염시켜 western blot 분석을 하고,CPAE 세포주에 대한 증식효과를 분석하였다.만성허혈모델을 만든 2주째에 $phVEGF_{165}$500 $\mu\textrm{g}$/2.5 ml를 동맥내 주입군은 좌측 총장골동맥으로,근육내 주사군은 대퇴부 근육내 주사하였다. 유전자 주입 전과 주입 후 4주째에 혈관조영영상을 얻었다. 영상분석은 대퇴골의 수직이등분선과 만나는 혈관의 개수의 비를 구하였다. 유전자 주입 후 0,4,7,14,21일에 혈청 $VEGF_{165}$ 양을 측정하였다.통계분석은 Wilcoxon signed rank test로 하였다. 결과:유전자가 전달감염된 CHO 세포주의 배양배지에서 $VEGF_{165}$ 단백질 발현이 확인되었다. CPAE 세포주의 증식실험에서 흡광도가 대조군은 0.73 $\pm$0.043, $phVEGF_{165}$ 은 1.09 $\pm$0.015를 보여 증식효과가 있었다.토끼 뒷다리 만성허혈모델에서 유전자 치료 전후에 혈관 수의 변화가 대조군은 1.32 $\pm$0.13과 1.30 $\pm$0.07,동맥내 주입군은 1.42 $\pm$0.15와 1.59 $\pm$0.09, 근육내 주사군은 1.59 $\pm$0.27과 1.14 $\pm$0.12를 보였으나,p>0.05로서 유전자 치료전후에 두군 모두 통계적인 유의성은 없었다. 혈청내 VEGF는 동맥내 주입군에서는 유전자 주입 전 39.96 $\pm$1.08 pg/ml, 4일째 44.99 $\pm$2.13 pg/ml,1 주 째 48.18 $\pm$1.49 pg/ml,2주째 45.70 $\pm$3.77 pg/ml,3주째 46.54$\pm$5.47 pg/ml로 증가를 보였다. 대조군과 근육내 주사군에서는 증가가 관찰되지 않았다. 결론:제작된 $phVEGF_{165}$ 가 실험실내에서 혈관내피세포의 증식에 효과가 있었다.토끼 뒷다리 만성허혈모델에서 $phVEGF_{165}$ 유전자 치료는 동맥내 주입과 근육내 주사 간에 혈관조영술과 혈청 VEGF 측정의 결과에서 차이가 없었다. Purpose: To obtain $phVEGF_{165}$ for angiogenesis and to compare the effects of its intra-arterial and intramuscular administration in a chronic ischemic rabbit hindimb model Materials and Methods: Chronic ischemic models were constructed in the left hindlimb of rabbits and divided into control (n=6), intra-arterial (n=7) and intramuscular groups (n=5). Plasmid DNA ($phVEGF_{165}$) expressing vascular endothelial growth factor (VEGF) was obtained from HL60 cells, and transfection into CHO cells and western blot analysis of the medium, as well as proliferation assay of CPAE cells were performed. Two weeks after construction of the models, 500 $\mu\textrm{g}$ $phVEGF_{165}$ was injected into both the left common iliac artery and thigh muscles. Angiography was performed and the number of vessels counted, and ELISA was used to determine the quantity of VEGF in blood samples. Wilcoxon signed rank test was employed for statistical analysis. Results: VEGF165 was expressed on western blot of the culture medium. Proliferation assay showed that optical densities were 0.73${\pm}$0.043 in the control study and 1.09${\pm}$0.015 in $phVEGF_{165}$. The angiographic scores were 1.32${\pm}$0.13 (pre-gene therapy) and 1.30${\pm}$0.07 (post-gene therapy) in the control group, 1.42${\pm}$0.15 and 1.59${\pm}$0.09 in the intra-arterial group, 1.59${\pm}$0.27 and 1.14${\pm}$0.12 in the intramuscular group. The differences were not statistically significant. In the intra-arterial group, serum VEGF levels were 39.96${\pm}$1.08 pg/ml (pregene therapy), 44.99${\pm}$2.13 pg/ml (4th day), 48.18${\pm}$1.49 pg/ml (1st week), 45.70${\pm}$3.77 pg/ml (2nd week), and 46.54${\pm}$5.47 pg/ml (3rd week), but in the control and intramuscular groups there were no increases. Conclusion: $phVEGF_{165}$ affected the proliferation of CPAE cells. There was no difference in angiographic scores and serum VEGF levels between intra-arterial and intramuscular administrations.

        • KCI등재후보

          Gene Transfer in Normal and Ischemic Tibialis Anterior Muscle of Rat by In Vivo Electroporation

          곽병국,김지숙,김홍진 대한의생명과학회 2007 Biomedical Science Letters Vol.13 No.3

          The purpose of this preliminary study is to improve the efficiency of gene transfer of nonviral plasmid DNA by in vivo electroporation in ischemic hindlimb muscle, tibialis anterior. Hindlimb ischemic model was aseptically made by excision of left femoral artery. Each 50 μg of pEGFP-C1 and pGL3-control in 100 μl 0.9% NaCl was injected in tibialis anterior muscle. In vivo electroporation was applied on the same site with 10 mm-distance 2 needle array electrodes and ECM830. In 3 groups of normal rat with different electric field strength 0, 200 and 800 V/cm, the expression of pEGFP-C1 was comparatively evaluated. In 8 groups of normal rats, the expression of pGL3-control was evaluated in 0, 40, 50, 80, 100, 150, 200 and 300 V/cm of electric field strength. In 5 groups of ischemic models, the expression of pGL3-control was analyzed on 0, 4, 7, 10 and 14 days elapsed after making ischemic models. In 9 groups of ischemic rats, the expression of pGL3-control was analyzed in the electric field strength 0, 60, 70, 80, 100, 150, 200, 250 and 300 V/cm. GFP expressions in normal tibialis anterior were high in the extent and degree in order of electric field strength of 200, 800 and 0 V/cm. Luciferase value was highest in 50~100 V/cm electric field strength. In the case of ischemic models, luciferase expression was significantly increasing in the order elapsed time after making the model. The degree of luciferase expression was higher in cases of application of in vivo electroporation than in that of non-application and was highest in 100~150 V/cm. In conclusion, in vivo electroporation is effective in transfer and expression of plasmid DNA in normal and ischemic tibialis anterior of rat.

        • Ethane dimethane sulfonate (EDS)를 투여한 성체 흰쥐에서의 생식내분비 활성 변화

          곽병국,이성호 한국발생생물학회 2010 한국발생생물학회 학술발표대회 Vol.29 No.-

          Ethane dimethane sulfonate (EDS) 주사 흰쥐모델은 단 1회의 복강주사 (75 ㎎/㎏ BW)로 3일 이내에 성체형으로 분화된 Leydig cell들의 특이적인 사멸을 초래한다. 그 결과, 주사 후 3주까지 혈중 androgen 수준이 급감하지만, 이 기간 중 정소 안에 미리 존재하는 전구세포들로 부터의 분화와 증식이 일어나 주사 3주 후부터 androgen 분비가 재개되어 주사 6~7주 후에는 주사 전 수준으로 회복된다. 생식생리 연구에서 널리 사용되는 정소절제 후 안드로겐 보충모델 (Orchidectomy and androgen supplement model)에 비해 EDS 주사모델은 정상에 가까운 조건으로 가역적인 생식내분비 변화를 야기하므로 독특한 가치를 갖는다. 이러한 장점에도 불구하고, 이 모델을 사용한 hypothalamus-pituitary-testis (HPT) hormone axis 전반의 활성조절에 대한 연구는 매우 드문 상태이다. 따라서 본 연구는 HPT hormone axis의 활성, androgen의 주요 표적인 부정소에서의 유전자 발현 패턴과 생리적인 변화를 조사하였다. EDS 주사후 3주 이내에 시상하부 KiSS-1, GPR54, GnRH mRNA 수준이 유의하게 증가하였고, 뇌하수체 common α, LHβ, FSHβ subunit mTNA 수준이 주사 후 2~4주에서 유의하게 증가하였으며, 정소에서의 3β-HSD, StAR, LH 수용체 mRNA 수준은 주사 후 1~3주에서 유의하게 감소하였다. 부정소에서 estrogen 수용체인 ERα와 ERβ mRNA 수준은 주사 1주 후 유의하게 증가하였는데, 이후 ER α는 변화가 없었고 ERβ는 주사 후 2~3주에 유의하게 감소하였으며, androgen 수용체 mRNA는 주사 2주 후 유의하게 증가하였고, aromatase mRNA 수준은 주사 1~3주 후 유의한 감소를 보였다. 조직학적 연구를 통해 EDS 주사 후 정소와 부정소의 조직 구조에 뚜렷한 변화가 초래되었다가 점차 정상으로 회복됨을 확인하였다. 본 연구결과는 EDS 주사 후 HPT 축에서 androgen에 의한 전형적인 음성되먹임의 소실과 회복을 보여주고 있지만, 일부 유전자 발현의 경우는 되먹임 이론으로 잘 설명되지 않았다. 이 연구는 EDS 주사 흰쥐 모델이 HPT 축 상의 생식내분비 활성 변화와 안드로겐 의존성 조직들의 생리적인 변화를 조사함에 있어서 유용함을 보여준다.

        • 정소절제모델과 고장성 식염수주사 모델의 비교

          곽병국,이성호,유다경 한국발생생물학회 2011 한국발생생물학회 학술발표대회 Vol.30 No.-

          본 연구진 등은 고장성(20%) 생리식염수를 흰쥐 정소에 직접 주사할 경우, 혈중 테스토스테론 수준이 최저 수준에 도달하고 정소 조직이 완전히 파괴됨을 보고한 바 있다. 본 연구는 이러한 기능적 ‘거세' 효과를 유발하는 생리식염수 주사 모델의 효용성을 확인하기 위해 정소절제모델과의 비교를 시도하였다. 생후 5개월 된 수컷 흰쥐(SD strain)를 무처리군(intact; control), 정소절제군(orchidectomy), 그리고 식염수주사군(saline-injection)으로 나누어 식염수주사군에는 정소당 750 ㎕의 고장성 식염수를 직접 주사하였다. 정소제거 수술은 식염수 주사가 행해진 날에 시행하였다. 주사 후 30일 후 동물을 희생하여 혈액과 조직들을 채취하고, 조직 무게를 측정한 후 조직학적 조사를 위해 고정시켰다. 혈중 테스토스테론 농도의 경우 무처리군과 비교하여 정소절제군과 식염수주사군 모두에서 유의하게 감소하였다(p<0.001). 체중의 경우 무처리군에 비해 식염수주사군은 유의하게 감소하였으며(p<0.05), 정소절제군에서는 감소 경향은 있었으나 유의성은 없었다. 식염수주사군의 정소 무게는 무처리군에 비해 유의하게 감소하였다(p<0.001). 부정소, 저정낭 그리고 전립선의 무게의 경우 무처리군에 비해 정조절제군과 식염수주사군 모두에서 유의하게 감소하였다(p<0.001). 조직학적 조사에서 식염수주사군의 정소 대부분에서 괴사가 발견되었고, 세정관내 정자를 확인할 수 없었으며 백막 부근에서 단핵구들이 대량 관찰되었다. 부정소 두부와 미부에서는 정소절제군과 식염수주사군 공히 도관의 내강 내 정자가 관찰되지 않았으며, 내강 측 상피세포층이 이상 증식으로 비대해짐이 관찰되었다. 한편, 저정낭의 경우 정소절제군과 식염수주사군 모두 내강 면적이 무처리군에 비해 크게 감소함이 관찰되었다. 전립선의 경우도 정소절제군과 식염수주사군 모두 상피세포의 세포질이 감소하여 세포층이 얇아짐이 관찰되었다. 본 연구는 고장성 식염수의 정소내 직접 주사모델이 정소절제와 유사한 테스토스테론 제거 효과를 유발할 수 있음을 해부학적으로 확인한 것이다. 향후 안정성과 효용성에 대해 심층적인 연구가 필요하지만, 고장성 식염수 주사모델은 외과적 거세를 대체하면서 동시에 시간과 비용을 크게 절감할 수 있는 유용한 실험법이 될 수 있음을 시사한다.

        • KCI등재

          가토에서 생검총을 이용한 간생검후 충전 물질에 관한 실험적 연구 : 젤폼, 섬유소밀봉제(Fibrin Sealant) 및 NBCA의 비교

          곽병국,정걸호,최치훈,윤혜란,박용옥,이창준,김희곤,장희진,심형진 대한영상의학회 1998 대한영상의학회지 Vol.39 No.1

          Purpose : To evaluate the effect of plugging the biopsy tract in rabbit liver and the pathologic changes caused by plugging materials. Materials and Methods : Thirty-two New Zealand White rabbits were divided into four groups(eight rabbits in each) and compared with one another. They were labeled group A(control), B(gelfoam), C(fibrin sealant) or D(NBCA). The liver was exposed and biopsied with an 18G disposible biopsy gun. The inner Tru-cut needle was withdrawn and plugging was undertaken through the outer cannula of the biopsy gun. Bleeding times of each material were compared. The rabbits were sacrificed and pathologically evaluated for 17 days. Results : Mean bleeding times were 46.7$\pm$34.5 sec in group A, 42.9$\pm$54.7 sec in group B, 12.6$\pm$15.0 sec in group C, and 0 sec in group D. In groups C and D, these results were statistically significant(p<0.01). Pathologically, fibrin sealant was lowest in foreign body reaction and fibrosis. NBCA was effective for the prevention of hemorrhage. Conclusion : NBCA and fibrin sealant effectively plug the biopsy tract through the outer cannula of an18 G biopsy gun.

        • 고장성 식염수 주사모델과 정소절제모델의 비교

          곽병국,유다경,이성호 한국발생생물학회 2012 한국발생생물학회 학술발표대회 Vol.31 No.-

          최근 고장성(20%) 생리식염수를 흰쥐 정소에 직접 주사할 경우, 혈중 테스토스테론 수준이 최저 수준에 도달하고 정소 조직이 완전히 파괴됨을 보고한 바 있다. 본 연구는 이러한 기능적 ‘거세' 효과를 유발하는 생리식염수 주사 모델의 효용성을 확인하기 위해 생식기관의 무게와 해부학적 변화, 그리고 생식에 영향을 주는 유전자 발현을 정소절제모델과의 비교를 시도하였다. 생후 5개월된 수컷 흰쥐(S.D. strain)를 무처리군(intact; control), 정소절제군(orchidectomy), 식염수 주사군(saline-injection)으로 나누어 식염수 주사군에는 정소 당 750 ㎕의 멸균한 20% 식염수를 직접 주사하였고, 정소절제 수술은 식염수 주사가 행해진 날에 시행하였다. 주사 후 1, 2, 4주 및 3개월 경과 후에 동물을 희생하여 생식조직들을 채취하였다. 체중의 경우 무처리군과 비교하여 정소절제군과 식염수 주사군 모두에서 유의한 변화는 없었다. 식염수 주사군의 정소 무게는 무처리군에 비해 유의하게 감소하였다. 부정소와 저정낭 그리고 전립선의 무게의 경우 무처리군에 비해 정소절제군과 식염수 주사군 모두에서 유의하게 감소하였다. 조직학적 조사에서 식염수 주사군의 정소 대부분에서 괴사가 발견되었으며, 세정관내 정자를 확인할 수 없었다. 정소절제군과 식염수 주사군의 부정소, 저정낭 그리고 전립선 모두에서 무처리군에 비해 내강이 수축하여 면적이 크게 감소함이 관찰되었다. 시상하부에서 Kisspeptin의 mRNA 수준은 정소절제군과 식염수 주사군 모두에서 유의하게 증가하였다. 뇌하수체 호르몬 발현(Common alpha, LH-beta 그리고 FSH-beta subunit)은 대조군 대비 식염수 주사군에서 대체로 증가하는 양상을 보였다. 본 연구는 정소 내 고장성 식염수 직접 주사모델이 정소절제와 유사한 테스토스테론 제거 효과를 유발할 수 있음을 확인하였다. 향후 안정성과 효용성에 대해 심층적인 연구가 필요하지만, 고장성 식염수 주사모델은 외과적 거세를 대체하면서 동시에 시간과 비용을 크게 절감할 수 있는 유용한 실험법이 될 수 있음을 시사한다.

        • KCI등재

          폐암의 종격동임파절 전이양사의 CT소견

          곽병국 대한영상의학회 1989 대한영상의학회지 Vol.25 No.6

          Small cell carcinoma of the lung is different from non-small cell carcinoma of the lung in many respects such as its tendency toward earlier distant metastasis and principles of treatment. Although radiological findings of small cell carcinoma of the lung are well known including CT and many articles are published about the bronchogenic carcinoma and criteria of mediastinal lymph node metastasis by its size. None of them deals with the possibilities of differentiating small cell carcinoma and non-small cell carcinoma of the lung by the morphologic characteristics of metastasized mediastinal lymph nodes. We analyzed retrospectively CT scans of 31 patients with pathologically proven bron-chogenic carcinoma of the lung who had mediastinal lymph node metastasis with special attention to the possibilities of differentiating small cell carcinoma from non-small cell carcino-ma by the morphologic characteristics of lymph nodes. 11 of the 31 patients were small cell carcinoma of the lung and 20 patients were non-small cell carcinoma including 17 cases of squamous cell carcinoma 1 cases of adenocarcinoma large cell undifferentiated carcinoma and bronchioloalveolar cell carcinoma respectively. Mediastinal lymph nodes in small cell carcinomas tends to be larger in size (over 2cm in two-thirds of patients) than non-small cell carcinoma. mean number of the involved lymph nodes in small cell carcinoma are twice as many as that of non-small cell carcinoma High incidence of central low density of involved lymph node was found in both small cell carcinoma(80.5%) and non-small cell carcinoma(77.5%) but homogeneous central low density is more frequent in small cell carcinoma(50%) than non-small cell carcinoma(23.6%) High incidence of peripheral rim enhancement of involved lumph nodes was found both in small cell carcinoma(79.0%) and non-small cell carcinoma(87.3%) there was no difference between small cell carcinoma and non-small cell carcinoma in respect to involved nodal groups.

        • 간내담관의 해부학적 변이와 잔류담석의 분포 : Radiological Anatomy and Prevalence of Intrahepatic Stones

          곽병국,이화연,이종범,심형진,김영구,김선상 중앙대학교 의과대학 의과학연구소 1995 中央醫大誌 Vol.20 No.2

          The purpose of this study was to know the confluental anatomy of the intrahepatic biliary duct and the occurrence of the stone according to each segmental biliary duct in the recurrent pyogenic cholangitis. We classified 139 of T-tube cholangiography(AP and oblique view the confluence of intrahepatic biliary tracts. Prevalence, size and number of the stones were evaluated according to each hepatic segmental duct. The confluence of the right and left main hepatic ducts was the most popular type(57.6%). The right main hepatic duct was abscent in 38.8% and the left main hepatic duct was abscent in 2.9%. The occurence of the stones was high in left lateral segmental duct(50.4%) and then right posterior segmental duct(32.4%), right anterior segmental duct(23.0%) and left medial segmental duct(12.2%) in descending order. There were no stones in caudate lobe. There was no difference in the size according to each segmental duct. he number of the stones was high in right posteior duct(17.5) and left lateral duct(17.1). But there was no statistical meaning in size and number. The incidence of the each confluental type was similar to other previous study. There was no stones in caudate lobe. The longer and wider of the duct, the more stasis of the bile, the more stones occured. There was no size difference. The number of the stones is high in right posterior and left lateral duct, but there was no statistical meaning.

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