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폐경 전,후 여성의 질조직에서의 NOS (Nitric Oxide Synthase) 발현
유은희 ( Eun Hee Yoo ),전호영 ( Ho Young Chun ),홍옥기 ( Ok Ki Hong ) 대한폐경학회 2007 대한폐경학회지 Vol.13 No.3
연구목적: 질식 수술에서 얻어진 폐경 전·후 여성의 질 조직의 섬유화를 비교하고 NOS의 발현도를 확인하고자 하였다. NOS 중 NOS I (neuronal NOS), NOS III (endothelial NOS)의 발현도를 폐경 전·후 질조직에서 발현도의 차이가 있는지를 확인하여 성호르몬의 영향하에 있는지를 간접적으로 확인하고자 하였다. 연구재료 및 방법: 부인과적 적응증으로 질식수술을 시행한 폐경 전 여성 13, 폐경 후 여성 10, 총 23예를 대상으로 질조직을 얻어 면역화학염색으로 masson`s trichrome 염색을 시행하고, eNOS, nNOS의 발현도를 western blotting assay와 면역화학염색으로 그 발현도와 분비장소를 확인하였다 결과: 폐경 여성의 질은 masson`s trichrome 염색에 의해 폐경 전에 비해 질벽의 아교질 침착이 두드러지며, 질상피세포의 위축이 심하여 질의 탄력성 및 유연성이 떨어지는 것을 조직학적으로 확인할 수 있었으며, 이러한 폐경 전ㆍ후 질조직 모두에서 NOS가 발현되고 있었으며, 질조직의 혈관내피세포, 신경섬유에서 NO가 분비되고 있음을 확인할 수 있었다. 그러나 폐경 전·후에 따른 여성 호르몬의 차이에 따른 NOS의 발현도의 차이는 발견할 수 없었다. 결론: 폐경 전·후의 질조직에서 NOS의 발현도의 차이를 보고자 한 본 예비연구에서 폐경 전·후 여성의 질조직에서 eNOS, nNOS 모두 발현되는 것을 확인할 수 있었으나, 아쉽게도 폐경 전·후에 따른 그 차이를 볼 수 없었다. Objectives: To identify the expression an topographic localization of NOS in vagina of pre- and postmenopausal women and determine the change of NOS after menopause Methods: The vaginal tissues were obtained during anterior or posterior colporrhaphy from 13 premenopausal and 10 postmenopausal women. The expression of neuronal and endothelial NOS were examined with Western blotting. The cellular localization of nNOS and eNOS was confirmed with immunohistochemistry. Trichrome staining was performed to determine smooth muscle/collagen ratios. Results: Using immunohistochemistry, eNOS was localized in vascular endothelium and smooth muscle cells of mural and extramural arteries and arterioles. The immunoreactive pattern for neuronal NOS was found in nerve fibers, ganglias and smooth muscle fibers within nerve plexus of vaginal wall. By Western immunoblot analysis, neuronal NOS and eNOS protein expression were demonstrated. There were no differences of eNOS and nNOS expression between pre- and postmenopausal vagina tissues. By Masson`s trichrome staining, increased amount of collagen deposition with vaginal atrophy was confirmed in the postmenopausal vaginal tissue. Conclusion: Immunohistochemical and Western blotting study have demonstrated the presence of NOS in the human vagina. However, the alteration of eNOS and nNOS expression of vagina after menopause was not demonstrated.
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3T3-L1 지방세포에서 Giα 단백들의 과표현이 인슐린 작용에 미치는 영향
손현식,차봉연,문성대,이정민,홍옥기,장상아,안유배,윤건호,이광우,손호영,강성구 대한당뇨병학회 2002 Diabetes and Metabolism Journal Vol.24 No.4
연구배경:G 단백은 인슐린의 작용에 관련되어 있으며 특히 Gs 단백보다는 Gi 단백의 관련성이 큰 것으로 알려져 있다. Gi 단백은 Gia₁Gia₂및 Gia₃등 세 가지 이상의 아형이 존재하는 것으로 알려져 있으며 세포내 발현정도와 그에 따른 기능상의 차이 또한 있는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 Gi단백의 아형에 따른 인슐린의 생물학적 작용에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 방법:Gi 단백의 세 가지 아형인 Gia₁,Gia₂및 Gia₃단백 유전자 각각을 DNApolylysineadenovirus complex gene delivery 방법을 이용하여 3T3L1 지방세포에 transfection 하여 이들을 과표현 시킨 다음 인슐린 처리 전후에 있어 인슐린 수용체 βsubunit의 자가인산화, IRS1의 인산화, 포도당 섭취율 및 글리코겐 전환율을 대조균의 결과와 비교 분석하였다. 결과:인슐린 자극에 의한 인슐린 슈용체 βsubunit의 자가인산화, IRS1의 인산화, 포도당 섭취율은 Gia₂단백의 과표현 후 증가되는 양상을 관찰할 수 있었으나 Gia₁과 Gia₃단백의 과표현 군에서는 대조군에 비해 유의한 차이를 관찰할 수 없었다. 한편 글리코겐 전환율은 세 아형 군 모두에서 유의한 차이를 관찰할 수 없었다. 결론:본 연구의 결과로 볼 때 인슐린의 생물학적 작용에 미치는 Gia 단백의 작용은 아형에 따른 차이가 있음을 확인할 수 있었으며 Gi단백의 여러 아형들중 Gia₂단백이 인슐린의 작용에 관여 하는 것으로 생각돤다. Background : I has been reported that G proteins are involved in biological actions of insulin. Especially, Gi protein is more associated with insulin actions than Gs proteins. Gi protein has at least three different subtypes of Gi_α1, Gi_α2 and Gi_α3 protein. However, it is not certain which subtypes of Gi_α proteins are associated with biological actions of insulin. Methods : ‘I’o investigate which subtypes of Gi_α proteins are associated with insulin action, we overexpressed three different kinds of Gi_α protein, Gi_α1, Gi_α2 and Gi_ α3 protein, in 3T3-L1 adipocytes using DNA-polylysine-adenovirus complex transfection method. After incubating for 2 hours, 3’13-L1 adipocytes were treated with 100 nM insulin for the evaluation of biological actions of insulin. Moreover, to elucidate insulin stimulated insulin receptor autophosphorylation and IRS-1 phosphorylation, 3’13-L1 adipocytes were stimulated with 100 nM insulin for 10 minutes, homogenized and immunoprecipitated with anti-phosphotyrosine antibody. Results : Transfection with Gi_α2 gene resulted in increment in insulin-stimulated [3H]2-deoxyglucose (DOG) uptake without affecting basa 12-DOG uptake, but not with Gi_α1 and Gi_α3 gene transfection. There was unchanged glycogen synthesis rate in all three Gi_n subtypes. Insulin-induced increments of insulin receptor autophosphorylation and IRS-1 phosphorylation were found in Gi_α2 protein overexpressed group, only. Conclusion : These results suggest that Gi_α2 protein may be associated with regulation of biological actions of insulin (J Kor Diabetes Asso 404~412, 2000).
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