Bone morphogenic protein-7이 복막의 섬유화에 미치는 효과

하헌주 ( Hun Joo Ha ) 대한신장학회 2008 Kidney Research and Clinical Practice Vol.27 No.4

마취된 당뇨 흰쥐의 신혈류량 감소에 관여하는 기전 : 내인성 쓰롬복산계의 무관성

하헌주(Hun-joo Ha),Earl W. Dunham 대한약리학회 1988 대한약리학잡지 Vol.24 No.2

본 연구는 스트렙토조토신 투여에의해 유도된 인슐린 의존적 당뇨 흰쥐에서 관찰되는 신혈류량의 감소가 내인성 혈관 수축계의 하나인 쓰롬복산의 영향이 증가된 때문인지를 규명하고자 하였다. 펜토바비탈을 이용하여 마취를 유도한 후 주어진 시간동안 아무런 약리학적 자극이 없는 상태에서 신동맥의 헐류량 (ml min^-1 gKw^-1), 혈압 (mm Hg) 및 그때의 신동맥 저항 (혈압/신동맥의 혈류량)을 관찰하였다. 그 각각에 대응하는 값은 당뇨쥐에서는 5.9 ± 0.3(P<0.01, 대조군과 비교), 115 ± 3 및 20.3 ± 1.0(P<0.01, 대조군과 비교)이었고, 연령 대조군에서는 각각 8.4 ± 0.4, 123 ± 3및 15.1 ± 0.8이었다. 스트렙토조토신에 의한 고혈당 유도를 방지한다고 알려진 3-O-메칠 글루코즈로 진처리한 후에 스트렙토조토신을 투여한 흰쥐에서 관찰되는 혈압 및 신동맥의 혈류량은 연령 대조군의 값과 동일하였다. 신동맥이 확장될 수 있음이 확인된 상태에서, 쓰롬복산의 합성을 저해할 수 있는 용량의 OKY-1581(1 mg/kg, i.v.에 뒤이은 0.4mg/kg min 지속적 투여)는 대조군 (n=4)뿐 아니라 실험군(n=4) 흰쥐의 혈압, 신혈류량 및 신동맥의 저항을 변화시키지 많았다. 마찬가지로 쓰롬복산/프로스타글란딘 엔도펄옥사이드 효현제인 U46619에 의한 신동맥 수축을 저해할 수 있는 용량의 쓰롬복산 수용체에대한 길항제인 SQ29548(100 ng/m1 신혈류량)을 신동맥으로 투여했을 때에도, 관찰되는 신혈류역학에 아무런 변화가 없었다(n=8 각 군). OKY-1581 투여후에 사이클로옥시게나아제의 활성을 저해하는 약물인 인도메타신(2 mg/kg)을투여했을 때에도 관찰되는 신동맥의 저항은 대조군에서 뿐만 아니라 실험군인 당뇨쥐에서도 변화가 없었다. 따라서 본 연구 결과는 스트렙토조토신 투여후 관찰되는 신동맥의 저항 증가는 약물의 신장에대한 직접적인 독성이 아닌, 유도된 당뇨에 기인함을 제시하였고, 이러한 신동맥 저항 증가는 고조된 내인성 혈관 수축계의 하나인 쓰롬복산의 영향이 아님을 시사하고 있다. Studies were conducted to determine whether reduced renal blood flow (RBF) exhibited by rats with uncontrolled, streptozotocin (STZ)-induced diabetes is attributable to diabetes-associated, enhanced renal vasoconstrictor influence of endogenous thromboxane (TX)A₂. Rats which were injected with STZ after pretreatment with 3-O-methyl glucose (3OMG), an agent which prevents STZ-induced hyperglycemia, were also studied. Basal values of total RBF (RBF; ml min^-1 gKw^-1; electromagnetic flow probe), systemic arterial pressure (BP; mm Hg) and renal vascular resistance (RVR;BP RBF^-1)in pentobarbital-anesthetized rats during a control period were 5.9 ± 0.3(P<0.1_VS. CR), 115 ± 3 and 20.3 ± 1.0(P<0.1_VS. CR) for STZR (n=15), and 8.4 ± 0.4, 123 ± 3 and 15.1 ± 0.8 for age-matched control rats (CR; n= 15), respectively. Basal values of RBF, BP and RVR in 3OMG pretreated STZR were identical to CR. In preparations shown capable of renal vasodilatation, OKY 1581 (1 mg/kg, i.v. followed by 0.4 mg/kg min infusion) abolished arachidonate-induced TXA₂ synthesis, but did not alter basal BP, RBF or RVR in either STZR or CR (n=4/group). Similarly, i.r.a. infusion of SQ29548 (100 ng/ml RBF) abolished renal vasoconstriction induced by a TX/prostaglandin endoperoxide mimic, U46619, but had no discern able affect on RVR in either STZR (n=8) or CR (n=8). The data indicates that TXA₂ does not participate in the elevated basal RVR of STZR which are associated with the diabetic state.

사람 폐 섬유아세포의 전환성장인자-β1에 의한 fibronectin 분비와 α-smooth muscle actin 표현에 있어서 활성산소족의 역할

하헌주 ( Hun Joo Ha ),유미라 ( Mi Ra Yu ),어수택 ( Soo Taek Uh ),박춘식 ( Choon Sik Park ),이희발 ( Hi Bahl Lee ) 대한결핵 및 호흡기학회 2005 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.58 No.3

연구배경 : 전환성장인자-β1(transforming growth factor-β1: TGF-β1)은 폐 섬유화를 매개하는 주된 인자이지만 TGF-β1에 의한 폐 섬유화의 발생과 진행기전의 이해는 아직 불완전하다. TGF-β1은 다양한 세포에서 활성산소족(reactive oxygen species: ROS)을 통하여 세포내 신호를 전달하고 α-smooth muscle actin (α-SMA)의 신생합성을 통하여 상피세포와 폐 섬유아세포를 근 섬유아세포 Background : The transforming growth factor-β1 (TGF-β1) plays a key role in lung fibrosis. However, the molecular mechanisms involved in TGF-β1-induced lung fibrosis are unclear. TGF-β1 is the key inducer of myofibroblast transdifferentiation via de novo

Induction of Heat Shock Protein 70 Inhibits Tumor Necrosis $Factor{\alpha}-induced$ Lipid Peroxidation in Rat Mesangial Cells

하헌주,박영미,안영수,김경환,Ha, Hun-Joo,Park, Young-Mee,Ahn, Young-Soo,Kim, Kyung-Hwan The Korean Society of Pharmacology 1995 대한약리학잡지 Vol.31 No.3

사구체내 단핵구의 침윤은 면역학적뿐 아니라 비면역학적 사구체 질환 발생 초기에 특징적으로 관찰된다. 단핵구에서 합성되는 대표적인 사이토 카인인 tumor necrosis factor $(TNF){\alpha}$의 합성이 각종 사구체 질환과 관련되어 증가할 뿐 아니라 외부에서 투여한 $TNF{\alpha}$는 사구체 질환의 발생과 진행에 수반된 유사한 증세를 초래한다. 따라서 본 연구에서는 사구체 질환의 표적세포인 혈관간 세포를 이용하여 $TNF{\alpha}$에 의한 세포독성 기전을 검색하고자 하였다. 표준화된 체걸름법을 이용하여 사구체를 분리한후 collagenase로 처리하여 배양하므로써 혈관간 세포의 특징을 지닌 일차 배양 혈관간 세포계를 수립하였다. 세포독성의 지표로서 지질과산화물을 측정했을때, $TNF{\alpha}$는 용량의존적으로 배양 혈관간 세포의 지질과산화를 증가시켰다. 배양혈관간 세포를 $45^{\circ}C$에서 30분간 처리했을 때 heat shock protein 70의 합성이 증가함을 western 분석으로 확인하였을 뿐 아니라, $TNF{\alpha}$에 의한 지질과산화 증가를 효과적으로 억제함을 관찰하였다. 이상의 결과는 $TNF{\alpha}$에 의한 지질과산화 증가가 사구체 질환의 발생이나 진행에 관하여할 수 있음과 고온 전처리에 의해서 heat shock 반응을 초래하므로써 $TNF{\alpha}$에 의한 사구체 손상을 보호할 수 있음을 시사하였다. Monocyte/macrophage infiltration is the well known initial features associated with the development of glomerular disease including non-immune mediated nephropathy. Tumor necrosis factor ${\alpha}(TNF{\alpha})$, a cytokine produced primarily by monocyte/macrophage, exhibits similar effects as observed at the initial stages and during the progression of glomerular injury. Because the mesangial cells are target cells for glomerular injury, the present study examined the effect of $TNF{\alpha}$ on glomerular mesangial cell membrane lipid peroxidation as an index of cytotoxicity attributing to $TNF{\alpha}$. Primary culture of rat mesangial cell was established by incubation of glomeruli isolated from male Sprague-Dawley rat kidneys utilizing a standard sieving method. The levels of lipid peroxides in the mesangial cells were quantitated by malondialdehyde- thiobarbituric acid adduct formation. During an 8 hour incubation at $37^{\circ}C$, $TNF{\alpha}$ at 10 to 10,000 units/ml increased the levels of lipid peroxides dose dependently. Western blot analysis demonstrated that a short thermal stress induced heat shock response and the synthesis of heat shock protein 70(hsp70) in this mesangial cells. Further, this induction of hsp 70 prevented increase of lipid peroxides in the mesangial cells exposed to $TNF{\alpha}$. These data suggest that $TNF{\alpha}-induced$ lipid peroxidation in the mesangial cells may have pathophysiological relevance to glomerular injury and prior induction of heat shock response may play a role in the cellular resistance against $TNF{\alpha}-induced$ glomerular injury.

Blockade of Thromboxane Influences Does Not Affect Renal Blood Flow Deficit in Anesthetized Diabetic Rats

하헌주,얼웨인던함,Ha, Hun-Joo,Dunham, Earl W. The Korean Society of Pharmacology 1988 대한약리학잡지 Vol.24 No.2

본 연구는 스트렙토조토신 투여에의해 유도된 인슐린 의존적 당뇨 흰쥐에서 관찰되는 신혈류량의 감소가 내인성 혈관 수축계의 하나인 쓰롬복산의 영향이 증가된 때문인지를 규명하고자 하였다. 펜토바비탈을 이용하여 마취를 유도한 후 주어진 시간동안 아무런 약리학적 자극이 없는 상태에서 신동맥의 헐류량 (ml $min^{-1}$ $gKw^{-1})$, 혈압 (mm Hg) 및 그때의 신동맥 저항 (혈압/신동맥의 혈류량)을 관찰하였다. 그 각각에 대응하는 값은 당뇨쥐에서는 $5.9{\pm}0.3$(P<0.01, 대조군과 비교), $115{\pm}3$ 및 $20.3{\pm}1.0$(P<0.01, 대조군과 비교)이었고, 연령 대조군에서는 각각 $8.4{\pm}0.4$, $123{\pm}3$및 $15.1{\pm}0.8$이었다. 스트렙토조토신에 의한 고혈당 유도를 방지한다고 알려진 3-O-메칠 글루코즈로 진처리한 후에 스트렙토조토신을 투여한 흰쥐에서 관찰되는 혈압 및 신동맥의 혈류량은 연령 대조군의 값과 동일하였다. 신동맥이 확장될 수 있음이 확인된 상태에서, 쓰롬복산의 합성을 저해할 수 있는 용량의 OKY-1581(1 mg/kg, i.v.에 뒤이은 0.4mg/kg min 지속적 투여)는 대조군 (n=4)뿐 아니라 실험군(n=4) 흰쥐의 혈압, 신혈류량 및 신동맥의 저항을 변화시키지 많았다. 마찬가지로 쓰롬복산/프로스타글란딘 엔도펄옥사이드 효현제인 U46619에 의한 신동맥 수축을 저해할 수 있는 용량의 쓰롬복산 수용체에대한 길항제인 SQ29548(100 ng/m1 신혈류량)을 신동맥으로 투여했을 때에도, 관찰되는 신혈류역학에 아무런 변화가 없었다(n=8 각 군). OKY-1581 투여후에 사이클로옥시게나아제의 활성을 저해하는 약물인 인도메타신(2 mg/kg)을투여했을 때에도 관찰되는 신동맥의 저항은 대조군에서 뿐만 아니라 실험군인 당뇨쥐에서도 변화가 없었다. 따라서 본 연구 결과는 스트렙토조토신 투여후 관찰되는 신동맥의 저항 증가는 약물의 신장에대한 직접적인 독성이 아닌, 유도된 당뇨에 기인함을 제시하였고, 이러한 신동맥 저항 증가는 고조된 내인성 혈관 수축계의 하나인 쓰롬복산의 영향이 아님을 시사하고 있다. Studies were conducted to determine whether reduced renal blood flow (RBF) exhibited by rats with uncontrolled, streptozotocin (STZ)-induced diabetes is attributable to diabetes-associated, enhanced renal vasoconstrictor influence of endogenous thromboxane $(TX)A_2$. Rats which were injected with STZ after pretreatment with 3-O-methyl glucose (3OMG), an agent which prevents STZ-induced hyperglycemia, were also studied. Basal values of total RBF (RBF; ml $min^{-1}$ $gKw^{-1}$; electromagnetic flow probe), systemic arterial pressure (BP; mm Hg) and renal vascular resistance (RVR;BP $RBF^{-1})$in pentobarbital-anesthetized rats during a control period were $5.9{\pm}0.3$(P<0.1_{VS}. CR), $115{\pm}3$ and $20.3{\pm}1.0$(P<0.1_{VS}. CR) for STZR (n=15), and $8.4{\pm}0.4$, $123{\pm}3$ and $15.1{\pm}0.8$ for age-matched control rats (CR; n= 15), respectively. Basal values of RBF, BP and RVR in 3OMG pretreated STZR were identical to CR. In preparations shown capable of renal vasodilatation, OKY 1581 (1 mg/kg, i.v. followed by 0.4 mg/kg min infusion) abolished arachidonate-induced $(TX)A_2$ synthesis, but did not alter basal BP, RBF or RVR in either STZR or CR (n=4/group). Similarly, i.r.a. infusion of SQ29548 (100 ng/ml RBF) abolished renal vasoconstriction induced by a TX/prostaglandin endoperoxide mimic, U46619, but had no discern able affect on RVR in either STZR (n=8) or CR (n=8). The data indicates that $TXA_2$ does not participate in the elevated basal RVR of STZR which are associated with the diabetic state.

조선족의 거주지 분리

김석호(Hun-Joo Ha),하헌주(Seok-Ho Kim) 한국이민학회 2014 한국이민학 = Korean journal of international migration Vol.5 No.1

HeLa세포에서 IgE-dependent Histamine-releasing Factor의 인산화가 Na,K-ATPase의 활성에 미치는 영향

김정아 ( Jung A Kim ),하헌주 ( Hun Joo Ha ),이경림 ( Kyung Lim Lee ) 한국미생물생명공학회 2005 한국미생물·생명공학회지 Vol.33 No.3

Mycophenolic Acid가 PDGF에 의해 증식 유도된 흰쥐 혈관평활근 세포에서 NAD(P)H Oxidase, 세포내 활성산소족 및 Mitogen-activated Protein Kinases에 미치는 영향

박제현 ( Je Hyun Park ),하헌주 ( Hun Joo Ha ),김명수 ( Myoung Soo Kim ),허규하 ( Kyu Ha Huh ),김유선 ( Yu Seun Kim ) 대한신장학회 2004 Kidney Research and Clinical Practice Vol.23 No.4

Bone Morphogenic Protein-7의 복막섬유화 억제효과와 기전

서지연 ( Ji Yeon Seo ),하헌주 ( Hun Joo Ha ),유미라 ( Mi Ra Yu ),김재룡 ( Jae Ryong Kim ),안면환 ( Myun Whan Ahn ),이희발 ( Hi Bahl Lee ) 대한신장학회 2007 Kidney Research and Clinical Practice Vol.26 No.1

Purpose: Bone morphogenic protein (BMP)-7, a member of TGF-β1 superfamily, is an endogenous antifibrotic protein highly expressed in normal kidney. It is not known, however, whether human peritoneal mesothelial cells (HPMC) express BMP-7 or if BMP-7 protects against peritoneal fibrosis and by what mechanism. We examined the effect of BMP-7 overexpression in TGF-β1-induced epithelial-mesenchymal transition (EMT) of HPMC and in TGF-β1 signaling in HPMC to elucidate the mechanisms of antifibrotic effect of BMP-7. Methods: Growth arrested and synchronized HPMC were stimulated with 2 ng/mL of TGF-β1 to induce EMT. HPMC were transiently transfected with adenovirus-mediated human BMP-7 (AdBMP-7) or with GFP (AdGFP). EMT was defined as downregulation of E-cadherin and upregulation of α-smooth muscle actin (SMA). Results: HPMC constitutively expressed BMP-7 mRNA and protein. BMP-7 mRNA and protein expression were significantly inhibited by 50 mM D-glucose, 2x diluted commercial peritoneal dialysis solution, and 2 ng/ml of TGF-β1. Transfection of AdBMP-7 resulted in 2.5-fold increase in BMP-7 mRNA expression in HPMC. TGF-β1 significantly decreased E-cadherin and increased α-SMA expression in GFP transfected cells. BMP-7 overexpression effectively reversed TGF-β1-induced E-cadherin and α-SMA expression and significantly suppressed TGF-β1-induced phosphorylation of Smad2/3, ERK1/2, JNK, and p38 MAPK in HPMC as compared to GFP transfected cells. Conclusion: BMP-7 is an endogenous antifibrotic protein and downregulation of BMP-7 in HPMC by high glucose, PD solution, and TGF-β1 may permit the development of peritoneal fibrosis during long-term PD. Our data demonstrate that BMP-7 overexpression reverses TGF-β1-induced EMT of HPMC and consequent peritoneal fibrosis possibly through inhibition of Smad2/3 and MAPK phosphorylation.

삼투압과 삼투 물질이 사람 복막 중피 세포의 사망과 증식에 미치는 영향

차미경(Mi Kyung Cha),하헌주(Hun Joo Ha),유미라(Mi Ra Yu),최후남(Hoo Nam Choi),이희발(Hi Bahl Lee) 대한신장학회 2001 Kidney Research and Clinical Practice Vol.20 No.5

고포도당은 사람 복막 중피 세포를 자극하여 protein kinas e C를 활성화시키고, 활성산소족의 생산을 유도하며, 전환성장인자(transforming growth factor : TGF )-β1과 fibronectin의 발현을 증가시킴으로써 복막의 섬유화에 관여할 것으로 보이고 또 고삼투압에 노출된 사람 복막중피 세포는 용적이 감소하여 세포 용적을 다시 증가시키기 위한 조절 기전으로 아미노산을 세포내에 축적시키고 세포막 효소계를 활성화시키는 것으로 알려져 있다. 이러한 관찰을 근거로 하여 포도당 중합체를 삼투 물질로 이용한 등장성 복막 투석액이 개발되었다. 본 연구는 삼투압(os molality : 고장액 대 등장액) 및 삼투 물질(osmotic ag ent : 포도당, mannitol 및 icodextrin )이 사람 복막 중피 세포의 생존 및 증식에 미치는 역할을 알아보고자 하였다. 제왕 절개술을 받는 건강한 임산부나 비응급 복부 수술을 받는 환자의 장간막을 얻어 중피 세포를 분리 배양하고 2-3회 계대 배양 후 실험에 이용하였다. 혈청 배제 M199 배양액에 48시간 배양하여 성장을 동일화한 복막 중피 세포를 서로 다른 농도의 포도당, mannitol 및 icodextrin에 96시간까지 노출 시킨 후 lactate dehydrog enas e (이하 LDH) 유리를 측정하여 세포 사망을, [3H]- thymidine incorpor ation을 측정하여 세포 증식을 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1) 포도당과 mannitol은 각각 30(305 mOsm), 50(325 mOsm) 및 100(375 mOsm) mM 농도에서 LDH 유리를 증가시키지 않았다. 2) Icodextrin은 2, 4, 7.5 및 9% 농도에서 LDH 유리를 증가시키지 않았다. 3) 포도당은 24시간과 48시간에 30, 50 및 100 mM 농도에서, mannitol은 24시간에 같은 농도에서 세포 증식을 억제시켰다(p<0.05). 4) M- 199 배지에 icodextrin을 2, 4, 7.5 및 9%까지 서로 다른 농도로 첨가하여 복막 중피 세포를 배양한 결과 24시간에 9% 농도에서 세포 증식을 유의하게 감소시켰으나(p< 0.05), 48시간에서 96시간에는 어느 농도에서도 세포 증식에 유의한 차이를 보이지 않았다. Icodextrin 9% 용액의 삼투압은 305 mOsm로서 mannitol 30 mM과 유사하였다. 결론으로, 고삼투압 자체는 사람 복막 중피 세포 사망에는 영향을 주지 않았으나 세포증식을 초기에 의미 있게 억제하였다. 고농도의 포도당은 48시간과 72시간에도 농도 의존적으로 세포 증식을 억제하였으나 mannitol은 48시간에 100 mM 농도에서만 세포 증식을 억제하여 고포도당 자체가 삼투압과 별도로 세포 증식을 억제하는 것으로 보인다. Icodextrin은 삼투압이 305 mOsm인 9%에서는 복막 중피 세포의 증식을 억제하였으나 세포 사망에는 별 영향이 없었다. N/A