The Effects of Yacon (Smallanthus sonchifolius) Extract on Pancreatic Fibrosis in the Rat

Nan Hee Choi(최난희),Jong Bong Kim(김종봉),Jin Teak Kim(김진택),In-Sick Park(박인식) 한국생명과학회 2012 생명과학회지 Vol.22 No.7

야콘(Smallanthus sonchifolius)은 저혈당에 민간요법으로 이용해 오고 있는 구근작물이다. 최근에는 야콘잎이 항산화, 항균, 항진균 활성과 세포보호 기능이 있다고 보고되고 있다. 본 실험에서는 이러한 생리활성을 지니는 야콘잎을 이용하여 흰쥐에 DBTC (8 mg/kg)를 주사하여 췌장염을 유발시킨 후 1% 야콘추출물이 췌장의 섬유화에 미치는 영향을 연구하였다. 유발 21일째 처리군에서 췌장의 실질조직의 많은 부분이 collagen으로 재구성되어 있었으나 유발군에서는 처리군에 비해 현저히 감소되어 있었다. COX-2 발현에서, 대조군은 반응이 나타나지 않거나 매우 약한 반응이었으나, 유발군에서는 14일째 매우 증가되었으며, 특히 21일째는 침윤하고 있는 많은 염증세포에서 COX-2의 발현이 확인되었다. 처리군은 유발군에 비해 발현이 감소되었다. TGF-β1 발현은 21일째 염증세포에서는 유발군이 처리군에 비해 현저한 증가 현상이 나타났으나, 샘꽈리세포에서의 TGF-β1의 발현은 처리군에서 증가되었다. VEGF 발현은 TGF-β1의 발현과 거의 유사한 경향으로 나타났다. 그러므로 야콘추출물이 DBTC로 유도된 췌장염의 섬유화 진행을 억제하는데 매우 효과적임을 확인하였다. Yacon has been used in folk medicines as a medicinal tea for hypoglycemia treatment. In a recent study described herein, antioxidative, antibacterial, antifungal activities, and cell-protective functions of yacon leaves have been reported. To evaluate the effects on fibrosis on pancreatitis, the efficacy of 1% of yacon extract (YE) on dibutyltin dichloride (DBTC) (8 mg/kg)-induced pancreatitis in rats was examined. On the 21st day after the DBTC treatment, a large increase in collagen was observed in the pancreas in the DBTC-treatment group (DT). But this was noticeably decreased with YE. In relation to the expression of COX-2, there was no response or a very weak response in the pancreas of the control group (CON). However, in DT, strong expression of COX-2 was observed in the pancreas on the 14th day, and COX-2 was present in inflammatory cells in the pancreas of the DT, especially on the 21st day. The expression was decreased for YE compared with DT. A remarkable increase in TGF-β1 expression was observed in inflammatory cells in the pancreas in DT on the 21st day, whereas the expression was not found in YE after 21 days. However, on the 21th day, TGF-β1 expression was increased in acinar cells of YE compared with DT. VEGF expression was very similar to the expression of in the pancreas. These results suggest that YE has an inhibitory effect on DBTC-induced pancreatic fibrosis.

야콘 (Smallanthus sonchifolius) 추출물이 Dibutyltin Dichloride로 유발된 췌장염에 미치는 영향

최난희(Nan Hee Choi),최성훈(Seong Hun Choi),임성우(Seong-Woo Lim),박인식(In-Sick Park) 대한해부학회 2007 Anatomy & Cell Biology Vol.40 No.3

야콘은 민간 요법에서 고혈당에 대한 차로 이용되고 있으며, 최근 연구에서, 야콘잎은 항산화, 항균, 항진균 효과 및 세포 보호기능이 있음이 보고되고 있다. 본 연구에서는 야콘 추출물에 의한 췌장염의 효과를 확인해 보기 위하여 DBTC (8 mg/kg)로 유발된 췌장염에서 그 효과를 실험하였다. 췌장염 유발군은 DBTC 투여 21일째 염증관련 세포의 급증과 샘꽈리세포의 괴사가 심해지면서 주변의 결합조직이 매우 증가된 반면, 1% 야콘추출물을 음용한 처리군에서는 유발군에 비해 염증 진행이 매우 억제되어 있었다. HSP27, HSP70, MAC387에 대한 면역반응에서 정상군은 모두 양성반응이 거의 나타나지 않았으나, 유발군의 HSP27과 HSP70에 대한 면역반응에서는 췌장염 유발 14일째까지 샘꽈리세포와 도관세포에서 양성반응이 증가되었으며, 21일째 HSP27에 대한 면역반응은 샘꽈리세포에서는 오히려 감소되고 도관과 혈관에서는 강한 양성반응을 나타낸 반면, HSP70의 면역반응은 샘꽈리세포와 도관 및 혈관에서도 거의 나타나지 않거나 매우 약한반응을 보였다. MAC387에 대한 면역반응에서 유발군은 시간이 경과되면서 면역반응을 나타내는 세포가 증가하였다. 반면, 야콘 추출물을 음용한 군의 HSP27과 HSP70에 대한 면역반응은 DBTC투여 후 14일째까지 약한반응을 보이다가 21일째 강한 양성반응을 나타내는 세포가 다소 증가되었으며, MAC387에 대한 반응은 7일째보다 14일째 오히려 감소한 경향을 보였으며 21일째 다시 증가되었으나 유발군에 비해 매우 낮은 정도였다. 이러한 결과로, 1% 야콘 추출물은 췌장염에 대한 염증진행을 억제 및 완화시키는 효과가 있음을 확인하였다. Yacon is used in folk medicines as a medicinal tea for hypoglycemia. In a recent study described herein, anti-oxidative, -bacterial, -fungal activities and cell protective functions of leaf extract of Smallanthus sonchifolius have been reported. In this study, to evaluate the effect on pancreatitis by using yacon extract (YE), we examined the efficacy of YE on DBTC (8 mg/kg)-induced pancreatitis in rats. After the treatment of DBTC on day 21, highly increased inflammatory cells, necrosis of acinar cells and connective tissues were observed. However, the inflammation was strongly inhibited in YE as compared to control group (CON). As a result of immunoreactions against HSP27, HSP70 and MAC387, weak or no possibilities of normal group (NOR) were observed in pancreas, whereas in immunoreactions against HSP27 and HSP70, strong expression of CON was observed in acinar and duct cells on day 14. However, the expression of HSP27 was decreased in acinar cells for CON treatment on day 21 as compared to 14 days observation, whereas strong expression of HSP27 was observed in duct cells and blood vessels on day 21. As regards the immunoreactions against HSP70, weak or no possibilities of CON were observed in duct cells and blood vessels as well as in acinar cells on day 21. In CON, time-dependent increase of MAC387 was observed. However, the expressions of HSP27 and HSP70 were weakly observed in YE as compared to CON on day 14 with strong positive reaction in acinar cells on day 21. Immunoreactions against MAC387 were decreased in YE on day 14 than day 7, which increased on day 21 as compared to day 14. These results suggested that yacon extract has inhibitory and mitigatory effects against DBTC-induced pancreatitis.

Storage enhancement of ginkgo nuts by treatment with ethanol extract of Sophora flavescens Ait

Sun-Chul Kang(강선철),Nan-Hee Choi(최난희) 한국생물공학회 2004 한국생물공학회 학술대회 Vol.2004 No.4

섬유근통 동물모델의 특정 뇌영역에서 심층수 음용후 세로토닌의 변화

김성호 ( Seong Ho Kim ),최난희 ( Nan Hee Choi ),박인식 ( In Sick Park ),남경수 ( Kyung Soo Nam ) 대한류마티스학회 2008 대한류마티스학회지 Vol.15 No.2

Objective: The acidic saline animal model of pain has been suggested to mimic fibromyalgia (FM). In this model, repeated intramuscular (IM) injections of acidic saline produce a widespread hyperalgesia that persists without evidence of significant peripheral tissue damage or inflammation, and is believed to be centrally maintained. We examined the changes of pain-related neurotransmitters in specific brain regions of this model after deep-sea water (DSW) drinking. Methods: Rats were injected with 100 μL of acidic saline (pH 4.0) at days 0 and 5 into the left gastrocnemius muscle. Control rats received identical injections of physiological saline (pH 7.2) on the same schedule. Two acidic saline rats were given DSW from 1 week following the last IM injection to sacrifice. All rats were sacrificed on day 20. All regions of interest were examined for the changes of pain-related neurotransmitters with immunohistochemistry. Results: Preliminary results showed that compared to controls, acid injected rats demonstrated strong expression of serotonin in red and raphe nucleus. Acid injected rats showed significant reductions of the serotonin expression in red and raphe nucleus after DSW drinking. Conclusion: IM acid injections increased the expression of serotonin in red and raphe nucleus of rats. The overwhelming reduction of serotonin expression in the nuclei after DSW drinking suggests DSW might be helpful for pain and anxiety. These preliminary data support the validity of acidic saline treatment as a model of FM, and provide a foundation for future analyses of specific brain regions that contribute to this syndrome.

한국산 다모환충유 2 미기록종

백의인(Eui In Paik),최난희(Nan Hee Choi) 대구가톨릭대학교 자연과학연구소 1993 基礎科學硏究論集 Vol.7 No.-

Lipopolysaccharide 로 유발된 생쥐 무릎관절낭 염증에 관한 형태학적 연구 : 윤활관절막과 섬유관절막의 변화를 중심으로 Based on the Morphological Changes of Synovial Membrane and Fibrous Membrane

김진택,안상현,최난희,정재만,박인식,강윤호,김호현,이해풍 동국대학교 한의학연구소 1999 東國韓醫學硏究所論文集 Vol.7 No.2

본 연구는 관절염 유발시 일어나는 관절낭의 형태학적 변화를 조사하기위해 ljpopolysaccharide(LPS)주사로 인위적 관절낭 염증을 유발시킨 후 시간경과에 따른 윤활관절막과 섬유관절막의 형태 변화를 관찰하였다. BALB/C 암컷 생쥐 오른쪽 무릎관절낭에 LPS 300㎍/㎏를 주사한 후 3, 7 그리고 14일에 무릎관절을 얻었다. 무릎관절은 4주동안 EDTA용액에 탈회한 후 통상적 방법으로 paraffin에 포매하였다. 또한 윤활관절막의 미세구조변화는 embed812로 포매한 후 관찰하였다. LPS 주사후 관절연골 인접부위의 윤활관절막에서 시작된 세포과형성(hyperplasia)은 시간 경과후 전체 윤활관절막으로 확대되었다. 윤활관절막내의 미세구조의 변화로는 윤활포식세포(type 1)가 관절강내로의 많은 돌기(filopodia)를 내었고, 잘 발달된 과립형질내세망을 가지는 type 2 윤활분비세포의 숫적 증가가 보였다. 한편 LPS 주사후 섬유관절막에서 나타나는 형태학적 변화는 collagen fiber 생성에 의한 섬유화가 증가되며, 이러한 섬유화를 주도하는 섬유모세포의 이주증가파 관찰되었다. 또한 혈관 주위에서는 백혈구의 이주 증가가 나타났으며, 탈과립형(degranulated type) 비만세포가 많이 관찰되었다. 이상의 결과로 LPS 주사로 관절낭에서 염증이 유발되어 윤활관전막과 섬유관절막에서 형태학적 변화가 나타났다. 이러한 일련의 형태학적 변화는 발병초기 류마티스성 관절염에서 나타나는 병리학적 소건과 동일한 결과로서, 앞으로 진행될 치료제 개발과 유발기전에 관한 해석을 위한 in vivo 실험의 적절한 모델로 기여한 것으로 기대된다. Synovial joint of BALB/C mice were injeced with Lipopolysaccharide(LPS) were observed to investigate the morphological changes of synovial capsule caused by rheumatoid arthritis(RA). The RA on female Balb/c mice were induced by LPS injection, as dose of 300㎍/㎏, into synovial cavity of knee joint. And then these specimen were fixed in 10% neutral buffered formalin and were decalcificated in EDTA solution for 4 weeks. The hyperplasia of synovium were appeared in synovial membrane. The filopodia of phagocytic like synoviocyte(type Ⅰ synoviocyte) projected into synovial cavity and the number of fibroblast like synoviocyte(type Ⅱ synoviocyte) with well-developed endoplasmic reticulum were increased in synovium. In fibrous membrane, the fibrosis induced by synthesis of collagen fiber were enlarged to all fibrous membrane, and the number of fibroblast were increased. A great number of inflammation component cell as Iymphocyte and neutrophil leukocyte were infiltrated around capillary and the degranulate typed mast cell were increased. As results indicated that the hyperplasia of synovium induced by LPS, subsequently to cause the fibrosis, infiltration of imflammation component cell, and increase of degranulated type mast call as same as symptoms of RA.

Triton WR-1339 주사에 의한 고지혈증 유발 생쥐 신장에 미치는 참홑파래 추출물의 지방축적 억제 영향

박인식,안상현,최난희,김진택 동국대학교 한의학연구소 1998 東國韓醫學硏究所論文集 Vol.6 No.2

본 실험은 참흩파래 추출물의 항고지혈증 효과의 조사를 위해 시행된 것으로 ICR 생쥐에 Triton WR-1339(TX) 복강주사로 고지혈증을 유발시킨 후 참흩파래 추출물(30mg/kg)를 복강주사하여 시간의 경과에 따른 신장조직의 일반적인 형태변화와 콜레스테롤을 비롯한 지방입자 축적양상 변화를 관찰하였다. TX 주사 후 신장조직에서 나타나는 일반적인 형태변화는 콩팥소체의 혈관극과 요세관극 모두에서 단층편평상피인 보우만주머니의 외벽이 비후되어 단층입방상피의 형태로 바뀌었으며 요세관 공간도 확장되었다. 지방입자는 사구체 전지역, 근위곱슬세관, 원위곱슬세관 그리고 헨레고리에서 침착이 증가된 것으로 나타났으며, 지방입자의 크기도 증가하였다. 또한 콜레스테롤 입자도 전 지역에서 월등하게 증가한 분포양상을 보였다. 그러나 TX 주사 후 참흩파래 추출물 처리군에서는 보우만주머니 외벽세포의 비후와 요세관공간의 확장을 일부 콩팥소체에서만 관찰할 수 있었으며, 대부분은 정상적인 신장형태를 유지하고 있는 것으로 나타났다. 한편 지방입자는 TX 주사군에 비해 그 분포와 크기가 감소한 것 나타났으며, 또한 콜레스테롤입자도 일부 지역에서 나타나 그 분포가 감소된 것으로 나타났다. 이상의 결과로 볼 때 참흩파래 추출물은 TX 주사로 고지혈증이 유발된 생쥐에 대해 콜레스테롤을 비롯한 지방축적을 억제하는 항고지혈증 효과를 하는 것으로 사료된다. Renal tissues of ICR mouse were intraperitoneally injeced with Monostroma nitidum extract(ME) after Triton WR-1339(TX) injection were observed to investigate the lipid accumulation suppressive effect of ME. The renal tissues were obtained at hour 24, 48, and 72 after TX injection that were fixed in fromol-calcium solution and were cryocut. The tissue stained by H&E for general morphology, sudan black B for lipid and perchloric acid-naphthoquinone method for cholesterol. The parietal layer of Bowman's capsule is swelled as cuboidal type at hour 48 after TX injection and the lipid blot and cholesterol particle were noticeably increased in glomerulus than control of group and these appeared in convoluted tubule, collecting tubule, and Helen's loop. But the parietal layer of Bowman's capsule was shaped as squamous type that was looked like as normal morphology in ME treated group after TX injection and the lipld blot and cholestero1 particle were considerably decreased in glomerulus than TX group. As results indicated that the accumulation of lipid including cholesterol caused by TX injection were mitigated in renal tissues by the antihyperlipidermic effect of ME.

Cyclosporin A 로 유도된 생쥐 림프절의 세포성 면역억제에 관한 면역조직화학적 연구 : T 림프구, IL-2 수용기 및 NK세포의 변화를 중심으로 Based on the change of T lymphocytes, Il-2 receptors, and NK cells

김진택,박인식,안상현,최난희,김동환 동국대학교 한의학연구소 1998 東國韓醫學硏究所論文集 Vol.6 No.2

본 실험은 cyclosporin A(CsA)에 의한 시간의 경과에 따른 림프절에서의 세포성 면역억제를 조사하기 위해서 시행된 것으로 BALB/C계 생쥐에 10일동안 CsA(45mg/kg/day) 투여 후 림프절에서의 T 림프구, IL-2 수용기 그리고 자연살해(NK)세포의 분포 변화를 관찰하였다. 대조군의 림프절에서는 L3T4(CD4)에 양성반응을 보이는 도움 T림프구, Ly2(CD8)에 양성반응을 보이는 세포독성 T 림프구 그리고 CD25R에 양성반응을 보이는 IL-2 수용기를 가진 세포는 곁피질(paracortex)과 수질동(medullary sinus)에서 분포하였다. CsA투여 후 처음 3일까지는 이들 양성반웅세포의 분포 변화는 없었으며 양성반응성의 변화도 없었다. 그러나 CsA 투여 7일부터 양성반응 세포수의 감소와 양성반응성의 약화가 관찰되기 시작하였으며 이러한 변화는 시간이 경과하여 14일에 이르렀을 때 가장 큰 감소추세로 나타났다. 한편 NKl.1(CD56)에 양성반응을 보이는 자연살해세포는 피질과 수질에 분포하였으며 CsA 투여 후 시간의 경과에 따라 양성반응 세포수가 감소하였으며, 이러한 감소는 14일에서 가장 큰 것으로 나타났다. 이상의 결과로 미루어보아 CsA 투여는 림프절에서의 IL-2 분비저해를 통해 T 림프구와 NK세포의 활성을 차단하여 선택적이면서 효과적인 세포성 면역억제작용을 하고 있는 것으로 사료된다. Cyclosporin A(CsA) is a selective immunosuppressive agent that has been credited with improved survival of solid organ allografts. Lymph node of BALB/C mouse administered CsA immunohistochemically observed to understand immunosuppressive effects of CsA on T lymphocytes, IL-2 receptors, and natural killer NK cells in lymph node. CsA orally administered daily for 10days at the dose 4smg/kg/day/. The lymph node were obtained at day 3, 7, and 14 after CsA administration and embeded with paraffin, and then stained by following ABC method that used monoclonal antibody including L3T4(CD4), Ly2(CD8), IL-2R(CD25), and NK-1.1(CD56). There were little changes of reactive degree and number of helper T lymphocytes, cytotoxic T lymphocytes, IL.-2 receptors, and NK cells at day 3 after CsA administration, but they began to decrease at day 7. These decrease were greatest at day 14. The helper T lymphocytes, cytotoxic T lymphocytes, IL-2 receptors, and NK cells distributed in paracortex and medullary sinus. These results indicated that the secretion of IL-2 began to decrease at day 7 after CsA administration and subsequently to suppress T lymphocytes and NK cell as components of cell-mediated immunity.

Immunohistochemical Study on the Activation of Splenic Cell Mediated Immunity in Mouse by Sarcoma 180 Cells : Based on the change of T lymphocytes,IL-2 receptors, and NK cells T 림프구, IL-2 수용기 및 NK 세포의 변화를 중심으로

Kim, Jin-Taek,Ahn, Sang-Hyun,Park, In-Sick,Choi, Nan-Hee,Kim, Dong-Hoan 동국대학교 경주대학 1997 東國論集 Vol.16 No.2

비정상적인 성장을 하고 전이를 통해서 다른 정상적인 조직까지도 파괴하는 것으로 알려진 암이 ICR계 생쥐 비장의 세포성 면역활성에 미치는 영향을 조사하기 위해서 복수암세포 sarcoma 180 cells를 1 X 10^6 cells씩 복강주사하여 비장을 적출한 후 항 CD4항체, 항 CD8항체, 항 IL-2 receptor항체 그리고 항 NK-1.1항체와 같은 monoclonal antibody를 사용한 ABC법으로 면역조직화학적 염색을 한 후 T 림프구, IL-2 수용기 그리고 자연살해세포의 변화를 관찰하였다. 그 결과 비장에서의 도움 T 림프구, 세포독성 T 림프구, IL-2 receptor 그리고 NK 세포는 복수암세포 접종 후 3일까지는 별 변화가 없었으나 7일 이후 서서히 증가하기 시작하여 21일에는 양성반응 세포수와 반응성이 최고에 이으렀다. 그리고 이들 양성반응세포의 분포 지역은 백색수질의 림프성동맥주위집, 적색수질의 붓털소동맥 주변부였다. 아울러 백색수질의 가장자리부분 크기와 적색수질에는 큰대식세포수도 증가한 것으로 관찰되었다. 이상의 결과로 볼 때 이종 암항원은 면역계에 7일 이후 노출되어 비장에서 T 림프구와 NK 세포의 활성과 증식이 일어나며, 이것은 암세포를 파괴하기 위한 세포성 면역반응의 활성에 의한 것으로 사료된다. Splenic tissues of ICR mouse intraperitoneally injected with sarcoma 180 cells were immunohistochemically observed to investigate the change of splenic T lymphocytes and NK cells by tumor cell. The spleens were obtained at day-3, 7, 14, and 21 after sarcoma 180 cell's injection and embedded with paraffin, and then stained by following ABC method that used monoclonal antibody including L3T4, Ly-2, IL-2 receptor, and NK 1,1. There were little changes of helper T lymphocytes, cytotoxic T lymphocytes, IL-2 receptors positive reacted cells, and NK cells at day-3 after the initial injection of sarcoma 180 cells, but they began to increase at day-7. The number of positive reacted cells and reactive degree were peaked at day-21. Helper T lymphocytes, cytotoxic T lymphocytes, IL-2 receptors expressed cells, and NK cells were found in PALS of white pulp and penicilla artery of red pulp. The size of marginal zone in white pulp was enlarged and the number of macrophages in red pulp was increased. These results indicates that immune system begin to detect the tumor antigen at day-7 after the initial induction with tumor cells and subsequently to activate and proliferate splenic T lymphocytes and NK cells as component of cell mediated immunity for destroying tumor cells.