OPU기술 이용 칡소 및 한우 난포란 발생 · 난자회수 및 수정란발달에 관한 연구

김동교,김남태,김성우,김찬란,김민수,김수정,김향숙,성환후 한국동물생명공학회(구 한국동물번식학회) 2016 발생공학 국제심포지엄 및 학술대회 Vol.2016 No.10

개 성숙난자에서 BDNF, GDNF 및 그 수용체의 발현 분석

김동교,노진구,최미경,양병철,류재규,박진기,김동훈 한국동물생명공학회(구 한국동물번식학회) 2013 발생공학 국제심포지엄 및 학술대회 Vol.2013 No.1

기후 변화가 한우 OPU 유래 난자 회수율에 미치는 영향

김동교,김남태,전향아,유대중,김현,최창용,김성우,성환후 한국동물생명공학회(구 한국동물번식학회) 2015 발생공학 국제심포지엄 및 학술대회 Vol.2015 No.10

OPU기술 이용 칡소 및 한우 난포란 발생 · 난자회수 및 수정란발달에 관한 연구

김동교,김남태,김성우,김찬란,김민수,김수정,김향숙,성환후 한국수정란이식학회 2016 한국수정란이식학회 학술대회 Vol.2016 No.10

난자생검(Ovum pick up, 이하 OPU) 기법은 유효축군 조기확보 및 우수한우 유전자 원의 조기증식, 희소유전자원 다량확보를 위해 매우 중요한 기법으로 주목받고 있다. 이 러한 OPU기술에는 체외배양기술 외에도 현장의 환경과 시기에 따라 회수되는 난자의 수 역시 중요하다. 현재, 가축센터에서는 한우의 유전자 다양성 확보를 위한 일반 한우 외에 도 희소한우 증식을 위한 연구를 진행 중에 있다. 본 연구는 OPU기법을 활용하여 가축 유전자원센터에서 보유중인 한우 또는 칡소를 대상으로 계절별 및 모색별로 난포란의 개 수와 난자회수율의 차이를 비교 · 검토하고자 실험을 진행하였다. 실험시기는 3월에서 5 월(봄), 6월에서 8월(여름), 9월부터 11월(가을)까지 구분하여 실시하였으며, 계절별 및 모 색별로 채취되는 난자의 개수와 회수율을 분석을 하였다. 봄에는 8.20±6.57, 여름에는 5.47±4.01, 가을에는 5.88±3.65개가 회수되었으며, 또한 계통별로는 가을에 실시한 결과 한 우는 6.40±6.15개, 칡소는 2.75±0.55개가 회수되었다. 그리고, 계통별로 수정란발달률은 한 우는 난할률이 25.0±44.4%, 배반포발달률이 6.3±50.0%, 칡소의 경우 난할률이 27.3±21.0%, 배반포발달률이 9.1±16.7%로 나타났다. 계절별로 OPU를 실시한 결과 여름, 가을경에 실 시하는 것에 비해서 봄에 실시를 하였을 경우 회수되는 난자의 수가 많은 것으로 확인을 하였다. 그리고, 현재 일반한우가 칡소에 비해서 회수되는 난자가 더 많은 것으로 확인되 었다. 이에 반하여 난할률 및 배반포발달률은 차이가 없는 것으로 확인되었으나, 향후 실 험진행에 따라 정확한 결과를 도출할 것으로 사료된다.

엘크사슴 녹용의 조기 절각에 따른 성분변화 분석

김동교(Dong-kyo Kim),이상훈(Sang-Hoon Lee),이은도(Eun-Do Lee),이진욱(Jinwook Lee),노희종(Hee-Jong Roh),이성수(Sung-Soo Lee),장애라(Aera Jang),김관우(Kwan-Woo Kim) 한국산학기술학회 2021 한국산학기술학회논문지 Vol.22 No.2

엘크 녹용의 부위별 및 성장일수별 성분변화를 측정하기 위하여 각각 녹용 성장일수가 40일령, 60일령의 녹용을 채취하였다. 채취된 샘플은 부위별로 분골, 상대, 중대, 하대로 구분하여 수분, 조단백질, 조지방, 조회분, 조섬유, pH, 무기질(Ca, P, K, Mg, Fe, Mn, Zn, Cu, Pb), 지방산 및 아미노산 함량을 분석하였다. 부위별로는 분골에서 조단백질, 조지방 함량이 높았으며, 하대에서 건물, 조회분 함량이 높게 나타났다. 조단백질은 상대에서 성장일수에 따라 증가하였으나 하대에서는 성장일수가 경과할수록 조단백질 함량은 낮아졌다. 반면에 조섬유, 조회분 함량은 증가하였다. pH는 분골에서 수치가 낮게 나타났다. 무기물에서는 칼슘(Ca), 인(P), 칼륨(K)이 중대에서 성장일수별로 유의적인 차이가 나타났다. 포화지방산은 함량이 증가하고, 불포화지방산은 감소하는 경향이 있었으나 두 성분 모두 유의적인 차이는 없었다. 대부분의 아미노산은 60일령에 높았으나 이소류신(Ile)은 60일령에서 낮았다. 이 결과는 조기에 절각을 진행할 경우에 녹용의 성분함량 변화에 대한 정보를 제공할 수 있을 것으로 사료된다. This study was undertaken to measure changes in the composition of elk velvet antlers, by considering the part and growth days (40<SUP>th</SUP> day, 60<SUP>th</SUP> day). The collected samples were divided into the tip, upper, middle, and base part by position. Samples were analyzed for moisture, crude protein, crude fat, crude ash, crude fiber, pH, minerals, and fatty acid and amino acid contents. The amounts of crude protein and crude fat were determined to be highest at the tip of the velvet antler by position, whereas dry matter and crude ash were high at the base. Crude protein contents were increased in the upper part but were decreased at the base, when assessed by growth day. Conversely, crude fiber and crude ash were found to be increased at the base by growth day. The pH value was determined to be lower at the tip, but did not differ when evaluated by growth day. Mineral contents (Ca, P, K) differed significantly by growth day in the middle portion of the antler. Saturated fatty acids tended to increase by growth day, whereas unsaturated fatty acids showed a decreasing trend. However, no significant difference was obtained for any of the components. Most amino acids were found to be high in the 60 days velvet antler, except isoleucine (Ile), which showed low levels at day 60. These results provide information on the changes in the composition of antlers, in cases of early cutting.

침투성 동결보호제가 포유류 초기배자의 생존성에 미치는 영향

김현,조상래,김동교,최창용,성환후 한국수정란이식학회 2015 한국동물생명공학회지 Vol.30 No.3

The objective of this study was to evaluate the toxicities of permeable cryoprotectants and finally to establish the cryopreservation method of surplus embryos obtained during assisted reproductive technology (ART). Toxicities of permeable cryoprotectants, dimethyl sulfoxide (DMSO), ethylene glycol (EG), Glycerol, and 1,2-PROH were investigated using a murine embryo model. Female F-1 mice were stimulated with gonadotropin, induced ovulation with hCG and mated. Two cell embryos were collected and cultured after exposure to among DMSO, EG, Glycerol, and 1,2-PROH. Embryo development was evaluated up to the blastocyst stage. The total cell count of blastocysts that were treated with DMSO and Glycerol at the 2-cell stage was significantly lower than that were treated with EG (81.1±15.1), 1,2-PROH (88.0±21.1) or the control (99.9±21.3) (p<0.001). On comparison of four cryoprotectant treated groups, the DMSO and Glycerol treated group showed a decreased cell count compared with the EG and 1,2-PROH treated group (p<0.05). Both DMSO (14.7±1.3), EG (12.1±1.1), Glycerol (15.2±1.8), and 1,2-PROH (11.5±1.3) treated groups showed higher apoptosis rates of cells in the blastocyst compared with the control (6.5±0.7, p<0.0001). In addition, the DMSO or Glycerol treated group showed more apoptotic cells than the EG or 1,2-PROH treated group (p<0.001). The potential toxicity of cryoprotectants was uncovered by prolonged exposure of murine embryos to among DMSO, EG, Glycerol, and 1,2-PROH at room temperature. When comparing four permeable cryoprotective agents, EG and 1,2-PROH appeared to be less toxic than DMSO and Glycerol at least in a murine embryo model.

백한우의 성판별 정액을 이용한 수태율 추정에 관한 연구

김성우,최진석,최창용,김동교,고응규,소충실,성환후 한국수정란이식학회 2015 한국동물생명공학회지 Vol.30 No.1

The purpose of this study is to produce wanted sex progeny of genetically confined White Hanwoo (albinism) with preselected sex sperm. One bull of White Hanwoo was chosen for semen donor and X sperm was sorted by MoFlo XDP cell sorter. To compare the pregnancy and birth rates, KPN straw was used as control, total number of unsorted sperm was 20×106/straw. Sexed X frozen semen with 2×106 cells or 4×106 cells per straw were in seminated twice on Hanwoo heifers. The abnormality of the sexed X semen was 24.9 ± 7.31% and distal reflex abnormality of mid piece was significantly (p<0.05) higher (11.7%) compared with that of KPN 768 (5.6%). There were no differences on the pregnancy and birth rates between 2×106 cells or 4×106 cells of X-sperm but KPN semen showed significant differences (p<0.05). The pregnancy rates of KPN 768, 2×106 cells and 4×106 cells X-sperm of White Hanwoo cattle were 85.0%, 26.3% and 50%. The birth rates were 80.0%, 15.8% and 21.4%, respectively. The female offspring rates of KPN 768, 2×106 cells and 4×106 cells X-sperm of White Hanwoo cattle were 43.8%, 100% and 100% (p<0.05). These results indicated that sex sorted White Hanwoo could be used for the production of wanted progeny with 2×106 cells/straw for AI. To increase the efficiency of calf production, the sperm number of sex sorted semen will be optimized for sex selection of White Hanwoo progeny.

Ovum Pick-Up 기술을 이용한 난자 채취 시 회수압력에 따른 엘크 암사슴의 수정란 생산 효율조사

이은도,김동교,최봉환,김관우 한국산학기술학회 2022 한국산학기술학회논문지 Vol.23 No.8

본 연구는 엘크 암사슴에서 초음파 유래 OPU(Ovum Pick-Up) 기술을 이용하여 난자를 채취할 시 회수압력을 다르게 하여 회수효율과 수정란발달 효율을 비교하기 위하여 실시하였다. 난자는 초음파 진단기를 이용하여 사슴 난소의 난포를 흡입하였고, 회수 시 압력은 50-80 mmHg 범위 내에서 회수하였다. 회수 압력은 4그룹으로(50 mmHg, 60 mmHg, 70 mmHg, 80 mmHg) 나누어 회수율과 수정율 그리고 배반포 발달율을 조사하였다. 회수율은 66.03%, 57.22%, 7 62.33%, 81.17%의 회수율을 보였다. A+B의 난자 등급 비율은 55.71%, 36.31%로 50 mmHg 그룹과 60 mmHg 그룹에서 유의적으로 높은 결과를 보였다. 수정율에 있어서는 81.25%, 66.67%로 50 mmHg 그룹과 60 mmHg 그룹에서 유의적으로 높은 결과를 보였다. 배반포 발달율은 36.94%, 41.67%, 16.67%, 10.37%의 발달율을 보였다. 50 mmHg 그룹과 60 mmHg 그룹에서 유의적으로 높은 결과를 보였다. 본 연구 결과로, 난자 채취 시 회수압력이 높을수록 회수율이 높지만 난자등급, 수정율 및 배반포 발달율에 있어서는 효율이 떨어지는 결과를 확인하였다. 추가적인 연구를 통해 엘크 체외수정란 이식을 성공시키기 위한 난자 회수조건 최적화 및 체외배양 효율을 향상시키는 연구를 진행해야 한다. This study was undertaken to determine the oocyte recovery and embryo development efficiency in elk using an ultrasonic-derived OPU (Ovum Pick-Up) technology. The oocytes were collected after retrieving the follicles of the elk ovary using an ultrasonic diagnostic device under recovery pressures ranging from 50 to 80 mmHg. Based on the recovery pressure used, the oocytes were segregated into four groups: 50 mmHg, 60 mmHg, 70 mmHg, and 80 mmHg. The influence of increasing recovery pressure was evaluated on parameters such as recovery rate, fertilization rate, and embryonic development. We obtained a recovery rate of 66.03%, 57.22%, 62.33%, and 81.17% for the 50, 60, 70, and 80 mmHg groups, respectively. The ratios of grade A and B oocytes retrieved were significantly higher in the 50 mmHg and 60 mmHg groups (55.71% and 36.31%, respectively). The 50 and 60 mmHg groups also showed significantly higher fertilization rate percentages of 81.25% and 66.67%, respectively and significantly higher blastocyst development rates of 36.94% and 41.67%, respectively. Our results indicate that although a higher recovery pressure improved the recovery rate, it negatively influenced the oocyte grade, fertilization rate, and blastocyst development rate. Future research should focus on optimizing the recovery conditions and in vitro culture efficiency for successful Elk embryo transplantation.

Diff-Quik 염색방법에 의한 오계 닭 정자의 염색질 이상과 운동성 추정에 관한 연구

김성우,최창용,김동교,성환후,조창연,최성복,김종대 한국가금학회 2015 한국가금학회 정기총회 및 학술발표회 Vol.2015 No.11

닭 정액의 희석배율이 정자의 생존성에 미치는 영향

김성우,최창용,김동교,성환후 한국동물생명공학회(구 한국동물번식학회) 2015 발생공학 국제심포지엄 및 학술대회 Vol.2015 No.10