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        Lipid A of Salmonella typhimurium Suppressed T-cell Mitogen-Induced Proliferation of Murine spleen Cells in the Presence of Macrophage

        강경숙,정경태,Kang, Gyong-Suk,Chung, Kyung-Tae Korean Society of Life Science 2007 생명과학회지 Vol.17 No.1

        사람의 장티푸스 연구는 생쥐에 감염되는 Salmonella typhimurium를 모델로 연구되고 있으며, 생쥐에 있어서 S. typhimurium의 감염은 이자세포의 증식반응을 감소시키는 것으로 알려져 있다. S. typhimurium lipid A의 처리가 T세포 mitogen에 의한 이자 세포의 증식에 어떤 영향을 주는 가를 in vitro와 ex vivo조건에서 알아 보았다. Lipid A 단독 처리는 이자 세포의 증식을 보였으나, lipid A 처리 후 T 세포 mitogen인 concanavalin A (Con A)와 phytohemagglutinin (PHA)에 의한 in vitro와 ex vivo 조건에서의 이차 처리는 오히려 세포증식이 억제되었다. Lipid A를 주사한 생쥐로부터 분리한 이자 세포에서 대식세포를 제거하였을 조건에서는 T 세포 mitogen에 의한 증식 효과가 유지되었으나 대식세포를 제거하지 않았을 경우에는 T세포 mitogen에 의한 증식 효과가 억제되었다. Lipid A를 주사한 생쥐에서 얻은 대식세포를 포함한 이자세포의 숫자를 증가하면서 Lipid A를 주사하지 않은 생쥐에서 얻은 이자세포와 혼합 배양하였을 때 Lipid A를 주사한 생쥐에서 얻은 대식세포를 포함한 이자세포의 숫자가 높을수록 Con A와 PHA에 의한 증식억제가 높게 측정되었다. 이러한 결과는 Con A와 PHA의 이자세포 증식 기능이 lipid A의 전처리에 의해 활성화된 대식세포의 직접적인 접촉 작용으로 억제된 것으로 생각된다. 본 연구의 결과를 바탕으로 억제에 관여하는 대식세포 표면분자를 밝히는 것이 사람의 장티푸스 연구에 도움이 되리라 생각된다. Infection with virulent or attenuated Salmonella typhimuriumhas known to induce reduction in proliferative responses of spleen cells. We investigated a role of lipid A from S. typhimurium, a B cell mitogen, on proliferation of spleen cells by T cell mitogens such as concanavaline A and phytohemagglutinin under in vitro and ex vivo conditions. Lipid A alone induced proliferation of spleen cells in vitroin a dose-dependent manner. However, subsequent treatment of concanavaline A or phytohemagglutin in after lipid A treatment induced proliferation suppression of murine spleen cells in vitro and ex vivo. Removal of macrophages from spleen cells, which were obtained from a lipid A-injected mouse, restored proliferation by concanavaline A and phytohemagglutinin, indicating that macrophages appeared to play a role in lipid A-induced suppression. Secreted molecules from macrophages did not accounted for the suppression because suppressive effect was not achieved when the supernatant from macrophage-containing spleen cell culture was conditoned to macrophage-depleted spleen cell culture. Co-culture of spleen cells from lipid A-treated and - untreated mice showed proliferation suppression as increasing cell numbers of lipid A-treated mouse. These data suggested that the cell-to-cell contact of macrophage with splenic lymphocyte cells is responsible for immune responses against lipid A, which is applicable to the case of human S. typhi infection.

      • KCI등재

        Construction, Expression, and Purification of N-Terminal Variants of Lumazine Protein from Photobacterium leiognathi

        강경숙,김소영,최지선,김영두,로버트 포쿠,남기석,이찬용,Kang, Kyoung-Suk,Kim, So-Young,Choi, Ji-Sun,Kim, Young-Doo,Pokoo, Robert,Nam, Ki-Seok,Lee, Chan Yong The Microbiological Society of Korea 2013 미생물학회지 Vol.49 No.2

        루마진 단백질은 발광 세균인 Photobacterium 종에서 추출된 형광성 단백질이다. 형광성을 지닌 최소 크기의 Photobacterium leiognathi 야생형 아미노-말단 도메인 루마진 단백질(N-terminal domain of lumazine protein 118 wt)과 여러 영역에 tryptophan을 생성시킨 돌연변이 단백질들(N-LumP 118 V41W, S48W, T50W, D64W, A66W)을 코드하는 유전자들을 위치 지정 돌연변이(Site Directed Mutagenesis)와 중합효소 연쇄 반응(Polymerase Chain Reaction)을 통해 제조하였다. 위의 유전자들이 포함된 재조합 플라스미드를 대장균에 형질 전환시켜 과발현시키는 최적의 조건을 찾았으며, 발현된 야생형 및 돌연변이 아미노-말단 영역 루마진 단백질을 6X-His tag system을 이용하여 정제 하였다. 흡광 및 형광 분광광도계를 이용한 실험 결과 이들 단백질들은 리간드인 6,7-dimethyl-8-ribityllumazine과 결합하여 형광성을 보유함을 보였다. 따라서 이들은 형광성을 지니게 되는 최소 크기의 루마진 단백질일 뿐만 아니라 형광성을 지닌 아미노산인 tryptophan이 여러 위치에 유일하게 존재함으로써 배향성 및 거리 등의 단백질의 구조 및 결합에 관한 심도 있는 연구에 탐침자로써 유용하게 활용 될 수 있을 것이다. Lumazine protein is a fluorescent protein isolated from the bioluminescent bacteria of Photobacterium species. To generate minimal size of lumazine protein with possessing fluorescent characteristic, the gene coding for the wild type N-terminal domain of lumazine protein (N-LumP 118) containing amino acids up to 118 from Photobacterium leiognathi was produced. In addition, the genes coding for the variant proteins of N-LumP 118, replaced with one tryptophan amino acid (N-LumP 118 V41W, S48W, T50W, D64W, and A66W), were also constructed by Polymerase Chain Reaction and Site Directed Mutagenesis. These proteins were expressed in Escherichia coli by transformation with recombinant plasmids and purified by 6X-His tagging system. Spectroscopic studies have show that the purified proteins are capable of binding to the fluorescent ligand 6,7-dimethyl-8-ribityllumazine, resulted in showing of fluorescent characteristic with the minimal size of protein. From these studies, the mutant proteins containing single tryptophan amino acid residue, possessing its own intrinsic flouophore character at the different position, will be able to the use as a probe for further studies to deduce their three dimensional structure and the binding modes.

      • KCI등재
      • KCI등재
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        어머니와 지적장애자녀간의 부적강화의 덫에 대한 특수교육교사들의 인식

        강경숙 ( Kyung Sook Kang ),김은주 ( Eun Jew Kim ),김영준 ( Young Jun Kim ) 한국지적장애교육학회(구-한국정신지체아교육학회) 2012 지적장애연구 Vol.14 No.2

        부모와 지적장애자녀가 가정환경에서 형성하는 부적강화의 덫은 지적장애자녀의 학교생활에 대한 실패를 초래하여, 교사는 지적장애학생을 교육하는데 있어서 많은 갈등과 어려움을 보이게 된다. 특히, 교사는 이러한 부모의 부적강화의 덫에 대해 비판적, 회의적으로 대응함으로서 해결을 시도하는 한계를 보일 수 있으며, 바람직한 가정과 학교의 협력에 기반을 둔 행동중재로 대처할 수 있는 동기가 저하되기 쉽다. 교사는 이와 같은 측면을 경계하여 부모의 부적강화의 덫에 대한 자기 인식을 점검하고, 그 결과를 부모상담을 통하여 부모와 상호 합의 및 공감대를 형성할 수 있는 전문성이 요구된다. 따라서 본 연구는 가족지원서비스 측면에서 필수적으로 중재되어야 할 어머니와 지적장애자녀간의 부적강화의 덫에 대한 교사들의 인식을 알아보는데 그 목적을 두었다. 이를 위해 본 연구는 특수학교 중등부에서 지적장애학생을 가르친 경험이 많은 담임교사 세 명을 선정하여 이들에게 반 구조화된 심층면담을 적용하였다. 연구결과로써 특수학교 중등부 교사들의 어머니와 지적장애자녀간의 부적강화의 덫에 대한 인식을 다섯 가지의 영역(부적강화의 덫에 따른 교사와 지적장애학생의 수업 상호작용 영향 등)에 따라서 자세하게 제시하였다. 또한 본 연구의 결과는 가족지원서비스 측면에서 다섯 가지의 연구문제별로 논의되었으며, 후속연구의 제언 및 제한점도 아울러 제시하였다. As negative reinforcement trap between parents and children with intellectual disabilities in home environment causes failure in school life of children with intellectual disabilities, teachers have a lot of conflicts and difficulties in educating children with intellectual disabilities. By responding critically and skeptically to such issues, teachers may limit the efforts to settle the problem as well as lower their motives to cope with the issue based on a desirable cooperation between family and school. Considering the above side, teachers need specialty to check their recognition about mother` negative reinforcement trap and to form mutual consent and sympathy with parents through consulting with them on the basis of the results of the recognition. Therefore, the purpose of the study was to examine teachers` recognition about negative reinforcement trap between mother and children with intellectual disabilities to have to be necessarily intervened in the side of family support service. To be so, The study selected three class teachers who had ever taught students with intellectual disabilities at special middle schools for a long time and applied semi-structured in-depth interview to them. The results of the study were as follows. The study closely suggested recognition of teachers of special middle schools about negative reinforcement trap between mother and children with intellectual disabilities by five scopes. In addition, the study discussed the recognition by five research issues in the side of family support service and suggested a proposal and limits on succeeding researches.

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      • KCI등재

        지적장애 자녀를 둔 어머니의 자녀양육 경험을 통해 본 부적강화의 덫

        강경숙 ( Kyung Sook Kang ),김영준 ( Young Jun Kim ) 한국교육인류학회 2012 교육인류학연구 Vol.15 No.2

        지적장애학생의 행동문제는 심리사회적 관점에 있어서 가족요인과 밀접한 상호 관계성을 가지며, 이에 지적장애학생과 부모는 가정환경에서 행동문제를 바람직하지 못한 방향으로 관리하는 부적강화의 덫을 경험하게 된다. 본 연구는 이를 알아보기 위한 기초 연구로, 지적장애학생의 어머니 한 명을 대상으로 참여관찰과 심층면담을 통하여 자료들을 수집하고 분석하였다. 그 결과로 먼저 지적장애학생의 어머니는 가정환경에서 고집 및 집착행동 등과 같은 지적장애자녀의 행동문제에 대해 기본적으로 수용하는 반응행동 등을 빈번히 보여 부적강화의 덫을 더욱 악화시키고 있는 것으로 나타났다. 또한 지적장애학생의 어머니는 이러한 양육 패턴으로 인해 계속 경험하는 어려움으로부터, 결과적으로 부적강화의 덫에 대한 가정환경의 기능을 학교의 교사가 대신 중재 관리해줘야 한다는 입장을 보였다. 이와 함께 가정환경에서 부적강화의 덫을 최소화하기 위해 지적장애자녀의 행동문제에 대하여 수용적일 수밖에 없다는 등의 인식을 나타냈다. 가족지원서비스 관점에서 이러한 결과에 대한 논의를 제시하였으며, 이와 관련된 후속연구의 제언, 본 연구의 제한점 등도 함께 제시하였다. 본 연구의 결과는 지적장애학생의 행동관리 측면에서 가족지원서비스프로그램을 구성하고 실행하는데 필요한 기초 자료로 활용될 수 있을 것이다. Behavioral problems of students with intellectual disabilities have closely interconnected with family factors from the psycho-social perspective. Accordingly, students with intellectual disabilities and their parents experience a negative reinforcement trap, in which behavioral problems lead into an undesirable way in the home environment. As a basic study on the given topic, data for analysis were collected from a mother of a student with intellectual disabilities through participant observation and in-depth interview. As one of the results, the mother of a student with intellectual disabilities worsened the negative reinforcement trap by showing response behaviors frequently, which are acceptances of behavioral problems including stubbornness, obsession, etc. by the child with intellectual disabilities in the home environment. Additionally, due to the continuous difficulties caused by her patterns of bringing up the child, the mother opined that teachers should intervene between her and her child and conduct intervention management about the function of the home environment toward the negative reinforcement trap. The mother also perceived that she must show acceptance on the behavioral problems of her child in order to minimize the negative reinforcement trap. Such results were discussed from the perspective of family support service, with suggestions on proposals for follow-up studies and limitations of this study. The results of this study can be utilized as preliminary data for configuring and executing family support service programs in behavioral management of students with intellectual disabilities.

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