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      • α-Galactosidase 에 의한 Bifidobacteria 균수 측정에 관한 연구

        강국희,이시경,백운화,민해기 成均館大學校 科學技術硏究所 1992 論文集 Vol.43 No.2

        This method using the synthesis substrate of 5-bromo-4-chloro-3 indolyl-galactoside (X-a -Gal) was examined for the differential enumeration of Bifidobacteria and lactic acid producing bacteria. Bifidobacteria possess a high level of a-galactosidase activity. Bifidobacterium longum KCTC 3215 exhibited the highest a- galactosidase specific activity (8.57 units/mg protein). Determination of a -galactosidase activity using the PNPG procedure showed that Lactobacillus, Streptococcus, Pediococcus, and Leuconostoc strain had lower a-galactosidase activity as compared to Bifidobacteria. The X-a- Gal based medium is useful to identify Bifidobacteria among lactic acid producing bacteria since the enzyme action of a-galactosidase hydrolysis X-a-Gal substrate and releases indol which impacts a blue color to Bifidobacterial colonies on agar plates. All strains of Bifidobacteria appeared blue colonies on MRS agar medium supplemented with 100 uM X- a - Gal while colonies of other lactic acid producing bacteria appeared white or light blue.

      • Comparison of Eleven Cultivars of Barley(Hordeum vulgare L.)for SOD Activity of Seeds and Seedlings

        Pek, Un-Hwa,Lee, Kyeong-Hee,Lim, Ung-Kyu 서울대학교 농과대학 농업개발연구소 1993 서울대농학연구지 Vol.18 No.2

        Water soaked seeds and leaves of seedling of 11 barley cultivars were assayed for superoxide dismutase(EC1, 15. 1. 1. ; SOD) activity in an attempt to increase the yield of SOD. Activity of the SOD was assayed photochemically using methionine, riboflavin and p-nitro blue tetrazolium(NBT). Crude preparation of the enzyme was used to compare the 11 cultivars at the two growth stages for the yield of SOD. Under the assay condition interferences by peroxidase and other impurities were insignificant. Cultivars of Barley are different in the yield of SOD and specific activity ; the minimum yield was that of seeds of DURUBORI(178 units/g fresh weight), the maximum was that of shoots of 10-day-old seedlings of OLBORI(1512 units/g fresh weight). And the specific SOD activity of 10-day-old seedlings of SACHEON NO. 6 was the highest of all the other culivars assayed.

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        고농도 알콜발효효모 Saccharomyces cerevisiae D1의 분리 및 특성

        양지영,박경호,백운화,유주현 한국산업미생물학회 1990 한국미생물·생명공학회지 Vol.18 No.5

        토양으로부터 분리한 효모는 내당성, 내알콜성이 있으며 알콜발효능이 우수한 균주를 분리하여 Saccharomyces cerevisiae로 동정하였다. 이 균의 특성을 살펴본 결과 당농도가 60% 배지에서도 생육이 가능한 내당성의 특징과 15%(v/v) 이상의 에탄올이 함유된 배지에서는 생육할 수 없고 15%(v/v) 에탄올에 2일 침적 후 알콜에 의한 알콜발효능의 저해율은 39.1% 저해받았으며 8.0%의 생존률을 나타내는 내알콜성특징과 2.0mM의 구리가 함유된 배지에서도 생육할 수 있는 내구리성의 특성을 갖고 있었다. 또한 분리균주의 알콜발효특성을 조사한 결과 배지 초기 pH는 4.5, 배양온도는 30℃, 초기 당농도는 30%일 때가 좋았으며 30% 당농도의 배는 다른 특성을 갖는 미생물인지를 알아보기 위하여 구리에 대한 내성을 조사하였다. ◁표 삽입▷(원문을 참조하세요) 배지 중 구리농도를 변화시켜 미생물 성장을 측정한 결과는 Table 4와 같았다. 일반적으로 효모의 구리에 대한 내성을 갖는 구리농도는 0.5mM 이하로 알려져 있으며(19) 분리균을 제외한 모든 효모들이 0.2mM의 농도에서 생육이 저해되었다. 그러나 분리균의 경우 2.0mM의 농도에서도 생육을 나타내는 것으로 관찰되었으며 다른 효모에 비교하여 구리에 대한 내성이 높은 효모임을 알 수 있었다. A high-alcohol producing yeast strain had sugar and alcohol tolerance was isolated from soil and identified as Saccharomyces cerevisiae D1 according to the Lodder's yeast taxonomic studies. On investigation of the characteristics of the strain, it could grow in 60% glucose, within 15% ethanol and in the YPD medium containing 2.0 mM copper. It had 39.1% the inhibition rate of fermentation efficiency and 8% viability after 2 days in the YPD medium containing 15% ethanol. Its optimum initial pH, gowth temperature, initial glucose concentration for the production of alcohol showed pH 4.5, 30℃ and 30%, respectively. Saccharomyces cerevisiae D1 produced 14.0%(w/v) alcohol when incubated at 30℃ with orbital shaking 150 rpm for 72h in a medium(pH 4.5) containing 30%(w/v) glucose.

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        하이드록시프로필화 옥수수 전분의 이화학적 특성

        육철,백운화,박관화,Yook, Cheol,Pek, Un-Hua,Park, Kwan-Hwa 한국식품과학회 1991 한국식품과학회지 Vol.23 No.2

        옥수수 전분을 propylene oxide와 반응시켜 치환도가 $0.031{\sim}0.147$되는 hydroxypropyl 옥수수 전분을 제조하여 물리화학적 특성을 규명하였다. Hydroxypropylation에 의하여 팽윤력, 용해도 및 물결합 능력이 증가하고 생전분의 효소 분해력이 높아졌으며 요오드 흡착강도가 낮아졌다. 아울러 hydroxypropylation에 의하여 전분의 결정화도도 감소되었다. 한편, 옥수수 전분을 hydroxypropylation시켰을 때 분자량 $1.34{\times}10^7$ 이상의 큰 분자는 감소하였고 $1.34{\times}10^7{\sim}1.18{\times}10^5$의 전분 분자는 증가하였다. Hydroxypropylation에 의하여 옥수수 전분 입자의 형태에는 별 변화가 없었으나 입자크기는 평균입경이 $13.9\;{\mu}m$에서 $16.0\;{\mu}m$로 증가하였다. Hydroxypropylated starches were prepared by reaction of corn starch with propylene oxide and their physicochemical properties were compared with those of the native starch. Swelling power, solubility and water binding capacity increased with the increase of hydroxypropylation. The hydroxypropylation of corn starch significantly reduced the extent of digestion and iodine absorption. Starch molecules larger than $1.34{\times}10^7{\sim}$ decreased whereas molecules ranging from $1.34{\times}10^7{\sim}1.18{\times}10^5$ increased by hydroxypropylation. Granule size increased by hydroxypropylation but this did not significantly affect the granule surface appearance by SEM. The hydroxypropylation improved the solubility and water binding capacity of corn starch.

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        Klebsiella pneumoniae NFB-320이 생산하는 Pullulanase를 이용한 전분당화

        권재민,박경호,백운화,배동훈,유주현 한국산업미생물학회 1994 한국미생물·생명공학회지 Vol.22 No.5

        본 연구실에서 토양으로부터 분리한 질소고정균인 Klebsiella pneumoniae NFB-320이 생산하는 효소인 pullulanase를 glucoamylase와 함께 이용한 전분류의 당화에 대하여 연구하였다. Pullulanase 조효소액의 최적활성 pH와 온도는 각각 pH6.0, 60℃이었고, pH 안정성과 열안정성은 pH5.0-6.5, 40℃까지 안정하였다. 당화효소인 glucoamylase의 최적활성 pH와 온도는 각각 pH 6.0, 60℃이었고, pH 안정성과 열안정성은 pH 4.O~6.5, 40℃ 까지 안정성이 유지되었다. 가용성 전분의 당화에 pullulanase와 glucoamylase를 함께 이용했을 때 당화효소만을 사용한 경우보다 3.2% 정도 당화 수율이 증가하였고, pullulan의 당화에 두 효소를 함께 사용하므로서 pullulanase만을 이용한 경우에 비해 18배의 환원당을 얻었다. In order to convert starch to the fermentative sugar, the effect of pullulanase on the saccharification of starch and pullulanase was investigated. The optimum pH and temperature for the enzyme activity of the glucoamylase and the crude pullulanase from Klebsiella pneumoniae NFB-320 were shown to be identical as pH 6.0 and 60℃, respectively. The crude pullulanase was stable between pH 5.0∼6.5, and up to 40℃, whereas the glucoamylase was stable between pH 4.0∼6.5, and up to 40℃. When pullulanase and glucoamylase were engaged together in the sacchrification of starch, saccharification yield was increased by 3.2% than the yield obtained by glucoamylase, alone. And the two enzymes produced sugar from pullulan 18 times much higher than the single use of pullulanase.

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        혐기성 소화의 후처리로서 분리막의 여과특성 연구

        추광호,이정학,백운화,고의찬,김상원,고종호 ( Kwang Ho Choo,Chung Hak Lee,Un Hwa Pek,Ui Chan Koh,Sang Won Kim,Jong Ho Koh ) 한국공업화학회 1992 공업화학 Vol.3 No.4

        혐기성 소화액의 한외여과에 의한 후처리에서 분리막의 재질에 따른 여과특성을 연구하였다. 상이한 분리막의 여과특성을 정량적으로 평가하기 위해 저항 모델을 이용하였다. 소화액에 대한 플럭스의 양태는 초기의 물에 대한 분리막의 투과도에 무관하게 나타났다. 플루오로 폴리머 막의 경우에 유속의 증가에 따라 큰 플럭스의 향상을 보였는데 이것은 다른 분리막에 비해 막표면에 형성된 케이크층의 부착성이 약해 쉽게 제거될 수 있음을 시사해준다. 장시간 운전에서 플럭스의 감소는 오염층 저항의 중가에서 뿐만아니라 분극층 저항의 증가에서도 기인되었는데, 이와같은 계속적인 분극층 저항의 증가는 미생물의 분해 및 성장에 따른 케이크층 내의 성상변화를 반영할 수 있다. 막표면이 친수성인 셀룰로오즈 막은 소수성인 폴리술폰 막에 비해 낮은 막오염도를 보여주었다. 감압을 통해 플럭스를 5-10 L/m^2/h회복시킬 수 있었다. 세척 단계에서 여과저항을 평가함으로써 15분의 단시간내에 세척이 완료됨을 알 수 있었다. Filtration characteristics according to membrane materials were studied in the ultrafiltration of anaerobic digestion broth as a post treatment method. A series of resistances for different membranes were quantitatively assessed on the basis of the resistance-in-series model. Flux behavior observed with the digestion broth was irrelevant to initial water permeabilities of each membrane. The fluoro polymer membrane showed the most significant improvement of flux with increase of cross-flow velocity, which suggests that the cake layer formed on this membrane is more weakly attached to the membrane surface than those on the other membranes. Flux reduction during longtime running was attribused to the polarization layer resistance(R_p) as well as the fouling layer resistance(R_f). Continuous increase of R_p may reflect the variation in the characteristics of cake layers, which could result from size, shape, and structure changes due to lysis and growth of biomass. Hydrophilic cellulosic membrane had a much lower fouling tendency than hydrophobic polysulfone membrane. The depressurization method induced a small increase in flux of 5-10 L/m^2/h. During washing and cleaning, filtrability of each membrane was rapidly recovered within 15 minutes until a stationary value was reached.

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        고핵산 함유 Saccharomyces cerevisiae 균주를 이용한 정미성 효모 추출물의 제조

        김재식,김진욱,심원,김정완,박관화,백운화,Kim, Jae-Sik,Kim, Jin-Wook,Shim, Won,Kim, Jung-Wan,Park, Kwan-Hwa,Pek, Un-Hua 한국식품과학회 1999 한국식품과학회지 Vol.31 No.2

        핵산 함량이 높은 변이주 Saccharomyces cerevisiae B24를 산업적으로 활용하기 위해 배양 후 자기소화 혹은 효소 분해법으로 효모 추출물을 제조하였다. 배양액의 균체 농도를 10% (w/w)로 하고 pH 5.0, $50^{\circ}C$에서 서서히 교반하면서 48시간 자기소화시켰을 때 세포 내용물이 효모 추출물로 이전되는 수율은 65% 정도였으나 리보핵산은 정미력이 없는 다른 성분으로 분해되어 정미성 핵산성분인 5'-IMP나 5'-GMP가 거의 검출되지 않았다. 반면 $90^{\circ}C$ 이상의 온도로 B24 배양액 1 L를 열처리하여 핵산 분해 효소를 불활성화시키고 세포벽을 변성시킨 다음 ${\beta}-1,3-glucanase$, phosphodiesterase, adenylic deaminase, protease 등을 순차적으로 작용시켜 정미성 5'-IMP와 5'-GMP가 총 3.2% 함유된 효모 추출물(고형분 함량 70%) 84 g을 얻을 수 있었고 이 때 추출물 수득율은 고형분 기준으로 85% 이었다. 반면 모균주인 S. cerevisiae ATCC 7754를 효소적으로 분해할 때 정미성 5'-IMP와 5'-GMP가 총 2.2% 함유된 효모 추출물(고형분 함량 70%)을 77 g밖에 얻지 못하였다. Yeast extracts were prepared using either autolysis or enzymatic digestion methods for industrial application of the Saccharomyces cerevisiae B24 strain developed previously to have high RNA content. Extraction ratio of yeast extract from yeast cell reached 65% when autolysis of yeast slurry having 10% solid content was induced at $50^{\circ}C$ and pH 5.0 by agitating with 100 rpm. However, neither 5'-IMP nor 5'-GMP was detected from the autolyzate. In another attempt to prepare a yeast extract S. cerevisiae B24 culture was treated at $90^{\circ}C$ and then treated by various enzymes including ${\beta}-1,3-glucanase$, phosphodiesterase (nuclease P1), adenylic deaminase, and a protease. The yeast extract prepared by the enzymatic digestion method contained 3.2g of 5'-IMP and 5'-GMP/100g dry yeast extract.

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