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Proteus vulgaris로부터 N4 파아지에 대해 내성을 갖게 하는 유전자의 분리
채건상 전북대학교 유전공학연구소 1988 遺傳工學硏究所報 Vol.1 No.1
대장균에 감염하는 파아지 중의 하나인 N4가 대장균에 감염하지 못하도록 해주는 rtn(resistant to N4)유전자를 Proteus vulgaris로부터 대장균에 분리하였다. 이 rtn 유전자를 갖고 있는 재조합 플라스미드인 pRMG101을 갖고 있는 대장균은 전부 N4의 감염을 저해하였으나, 다른 파아지인 T4, T7, Ø80, lambda가 감염하는 데에는 아무 영향을 주지 못하였다. 이 유전자의 전체 염기 서열을 밝혀본 결과, promoter 부분과 두 개의 단백질을 만들 수 있는 open reading frame(rtn A와 rtn B)이 있다는 것을 알아내었는데 이 rtn 유전자의 promoter는 대장균내에서도 자신의 기능을 발휘하는 것이 확산되었다.
rtn(resistant to N4) 유전자의 정체 : 새로운 기능의 유전자 a set of Novel Genes with a new Function
채건상 全北大學校 基礎科學硏究所 1988 基礎科學 Vol.11 No.1
Proteus vulgaris로부터 분리된 rtn (resistant to N4)유전자를 갖고 있는 대장균에 N4는 감염하지 못하였으나 lambda, Φ80, T4, T7등의 다른 파아지는 감염할 수 있었다. rtn유전자를 갖고 있는 재조합 플라스미드 pRMG101은 PvuⅠ과 PvuⅡ 제한효소에 의해 완전히 절단되었다. 또한 이 재조합 플라스미드를 갖고 있는 대장균을 키워 제 2형의 제한-변형효소의 활성을 찾아보았으나 그런 활성은 나타나지 않았다. 이러한 결과들은 rtn 유전자가 지금까지 알려진 제 2형의 제한-변형효소의 유전자는 아니라는 것을 보여준다. 뿐만아니라 제 1형 제한-변형효소의 특성과 rtn 유전자와 비교한 결과와 rtn 유전자를 갖고 있는 대장균을 N4의 DNA만으로 형질전환시켰을 때 정상적인 N4 파아지가 나올 수 있음을 확인한 결과로 미루어 rtn 유전자가 대장균에의 N4 파아지 감염을 저해하는 기작은 P.vulgaris의 제한-변형효소에 의한 것 또는 세포내에서 일어나는 것은 아니고 세포밖에서 N4가 감염하는 과정을 저해하는 것으로 생각된다.
Bacteriophage N4의 receptor에 대한 연구
채건상,김선정,김창수,유욱준 한국미생물학회 1987 미생물학회지 Vol.25 No.1
The evidences that Lam B protein of E. coli is used as a receptor for infections of bacteriophage N4 as well as bacteriophage lambda were obtained from the following experimental results. First, all of the isolated lambda resistant dlones possessing foreign DNA fragments in the plasmids were also resistant to bacteriophage N4, but not to bacteriophage $\phi$ 80, T4 and T7. Second, when the plasmid DNA was treated with various restriction enzymes and ligated to delete the total or a portion of the foreign DNA fragments, the deleted plasmids lost the resistant activities to lambda and N4, simultaneously. Third, after amplification of Lam B protein about 200 times by inducing the protein using maltose as a sole carbon source, the host E. coli became sensitive to both lambda and N4.
Aspergillus nidulans 에 있어서 무성분화의 억제조건과 이를 이용한 유성분화결손 돌연변이주의 대량분리
이영훈,채건상,한동민,장광엽,한유정,장승환 한국균학회 1990 韓國菌學會誌 Vol.18 No.4
In order to find an useful condition under which the mutants defective in sexual development could be isolated, the effects of several cultural conditions on the developments of Aspergillus nidulans were examined. Among several conditions found to restrict the asexual sporulation but enhance the sexual process, the interference of aeration by sealing the plates with sealing film was the most useful one for the purpose of mutant isolation. Sealing at any time before 20 hours from inoculation prevented both sexual and asexual process. When the seal was removed after 24 hours, however, the mycelia developed only to sexual organs. Using this properity, the early morphogenic process of sexual development could be easily observed and a number of mutants that showed some defects in the process could be isolated. The mutants were divided into 3 groups, NSD (never in sexual development), BSD (block in sexual development) and ASD (abnormal in sexual development). NSD mutants never produced either the Hu¨lle cells or cleistothecia and some produced the asexual organs even when the aeration was restricted. BSD mutants were blocked in the process of Hu¨lle cell, cleistothecia, crozier, asci or ascospore formation. ASD mutants had defects in the amount of cleistothecia, time of cleistothecial maturation or color of ascospores.
REGULATION OF M1 RNA GENE EXPRESSION IN E. COLI
Jeon, E.S,Chae, K.S.,Lee, Y.,Park, C.-U. 全北大學校 基礎科學硏究所 1991 基礎科學 Vol.14 No.1
M1 RNA의 상위 염기배열이 M1 RNA 촉진제로 부터의 갈락토키나제 합성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 GalK 발현 벡타에 클론된 E. coli M1 RNA 유전자의 촉진제 영역을 조사하였다. M1 RNA 유전자가 효율적으로 발현되기 위해서는 -40 에서 -60 까지의 염기배열이 필요하지만 -60 위의 염기배열음 중요한 역할을 하지 않았다. 또한 C5 단백질이 클론된 M1 RNA 유전자에서 부터의 M1 RNA 합성을 감소시킨다는 결과를 얻었다. 이는 M1 RNA 합성에 억제시스템이 존재한다는 것을 시사한다. The promoter region of the E. coli M1 RNA gene cloned into the GalK expresstion vector was analyzed to examine whether upstream sequences affected the level of galactokinase from M1 RNA promoter. Although the sequences between -40 and -60 were required for the efficient expression of the M1 RNA gene, the upstream sequences of -60 showed no significant effects on the expression. We also show that functional C5 protein decreased M1 RNA synthesis from the cloned M1 RNA gene, which implies the presence of repression system in M1 RNA synthesis.
A new restriction endonuclease from xanthomonas citri
황영,채건상,장원희,김기태,유욱준,Whang, Y.,Chae, K. S.,Jang, W. H.,Kim, K. T.,Yoo, O. J. The Microbiological Society of Korea 1986 미생물학회지 Vol.24 No.4
The isolation and charateriation of a type II restriction endonuclease from Xanthomonas citri IFO 3835 were described. This enzyme (Xci I endonuclease) is an isoschizomer of Sal I endonuclease recognizing 5'-GTCGAC-3' and cleaving at the site indicated by the arrow. Unlike Sal I endonuclease, Xci I endonuclease requries a NaCl concentration of 50mM for its maximum activity.
대장균 rnpA 돌연변이를 보완작용할 수 있는 Brevibacterium albidum 염색체 부위의 특성
이영미,채건상,박충웅,이영훈 ( Young Mi Lee,Keon Sang Chae,Chung Ung Park,Young Hoon Lee ) 생화학분자생물학회 1990 BMB Reports Vol.23 No.4
The chromosomal region containing the gene capable of complementing the E. coli rnpA mutation was obtained from genomic DNA of Brevibacterium albidum. The selection procedure was based on the formation of an enzymatically functional hybrid RNase P enzyme by heterologous gene products in E. coli. Unlike the E. coli rnpB gene, the B. albidum DNA region on a multicopy plasmid did not complement the E. coli rnpB mutation. The deletion analysis indicates that the rnpA-complementing activity resides in the 2.75 kb region.
Lee, Young Mi,Chae, Keon Sang,Park, Chung-Ung,Lee, Younghoon 全北大學校 基礎科學硏究所 1991 基礎科學 Vol.14 No.2
Brevibacterium albidum의 게놈 DNA로부터 대장균의 rnpA 돌연변이를 보완작용할 수 있는 유전자를 포함하고 있는 염색체 부위를 얻었다. 이 때 사용된 선택방법은 대장균에서 이종의 유전자산물로부터 효소활성이 있는 잡종 RNase P 효소를 형성한다는데 기초를 두고 있다. 이 B. albidum DNA 부위는 대장균의 rnpB 유전자와 달리 세포내에서 많은 수로 존재하는 플라스미드 상에 있을 때 대장균의 rnpB 돌연변이를 보완작용할 수 없었다. DNA 결실 분석결과 rnpA 돌연변이를 보완작용하는 활성이 2.75kb DNA 영역에 존재한다는 것을 밝혔다. The chromosomal region containing the gene capabel of complementing the E. coli rnpA mutation was obtained from genomic DNA of Brevibacterium albidum. The selection procedure was based on the formation of an enzymatically functional hybrid RNase P enzyme by heterologous gene products in E. coli. Unlike the E. coli rnpB gene, the B. albidum DNA region on a multicopy plasmid did not complement the E. coli rnpBmutation. The deletion analysis indicates that the rnpA-complementing activity resides in the 2.75 kb region.