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흑두로 제조한 청국에서 분리된 Bacillus subtillus BB-1으로 부터 혈전용해효소 유전자 크로닝 및 특성규명
이영훈,이성호,전주미,김홍출,조용운,박기훈,최영주,갈상완,Lee Young-Hoon,Lee Sung-Ho,Jeon Ju-Mi,Kim Hong-Chul,Cho Yong-Un,Park Ki-Hoon,Choi Young-Ju,Gal Sang-Wan 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.4
흑두로 제조한 청국으로부터 혈전용해력이 우수한 균을 선발하여 동정하였으며, 그를 Bacillus subtilis BB-1로 명명하였다. 이 균은 혈전용해효소 isozyme을 적어도 5개이상 생성하는 균주로 확인되었다. 이 균으로부터 크로모좀을 분리하여 shot gun법으로 혈전용해효소 유전자를 크로닝하였으며, 이 유전자를 BSF-1이라 명명하였다. 이 유전자는 714개의 아미노산을 암호화하고 있으며 기존에 밝혀진 혈전용해효소 유전자와 상동성은 검출되지 않은 새로운 혈전용해효소 유전자였다. 혈전용해효소활성 최적 pH 및 온도는 5.0과 $35^{\circ}C$였다. 기질특이성은 적혈구 배지 또는 skim milk, gelatin등에 전혀 분해활성이 없었다. 이는 혈전만을 특이적으로 분해하는 기질특이성을 보였으며, 혈전분해효소로서의 이용가능성이 충분한 것으로 판단된다. A bacterium producing five fibrinolytic isozymes was isolated from black bean chung kuk. The bacterium was identified as Bacillus subtilis BB-1 by 16s rDNA sequence homology search. A gene out of five fibrinolytic genes in the Bacillus subtilis BB-1 was cloned by shot-gun method. A Cla I DNA fragment of B. subtilis BB-1 chromosome was cloned in to pBluescript II SK(-) and showed the fibrinolytic activity to bacterial cells. The Cla I DNA fragment was sequenced and the sequences did not show homology with gene for protease or fibrinolytic enzyme genes in other organisms. The Cla I DNA fragment was reduced to 2,142 bp by activity-guided PCR cloning method. The optimum pH and temperature of the enzyme were 5.0 and $35^{\circ}C$, respectively. Substrate specificity of the fibrinolytic enzyme was detected in skim milk, casein, gelatin and blood agar plates. The activity of the enzyme was not detected with these substrates. Taken together, this enzyme is a new fibrinolytic enzyme and may be used to prevent thrombosis and arteriosclerosis.
응급구급대원에서 뇌졸중 조기증상 인지 및 환자평가 향상을 위한 교육 필요성
이정미(Jeong-Mi Lee),이장열(Jang-Yeol Lee),박성빈(Seong-Bin Park),이영훈(Young-Hoon Lee),오경재(Gyung-Jae Oh) 한국농촌의학 지역보건학회 2013 농촌의학·지역보건 Vol.38 No.2
이 연구는 응급구급대원들을 대상으로 뇌졸중과 관련된 교육에 대한 특성 및 뇌졸중 조기증상 인지수준을 파악함으로써 이와 관련된 교육프로그램운영의 필요성과 방향을 제시하고자 수행하였다. 연구 대상자는 전라북도 전체 응급구급대원 298명이었으며 설문조사는 직접면접법을 통해 이뤄졌다. 조사기간은 2011년 4월 1일-30일까지 1개월 동안 이루어졌다. 연구결과 뇌졸중 관련 교육 이수율은 63.2%로 나타났으며 주로 소방학교(63.1%)를 통해 이수하고 있었다. 그러나 대상자들의 뇌졸중 관련 교육 실시 요구도(85.0%)는 상대적으로 높게 나타났다. 뇌졸중 조기증상에 대한 전반적인 조기인지 수준 및 뇌졸중 환자 상태평가 점수는 여자에서, 30대 미만, 소방사에서, 구급업무를 직접 담당자에서, 응급구조사에서 뇌졸중 환자 상태평가 수준이 높게 나타났다. 뇌졸중 환자 발생 시 우선적 조치사항으로는 전문치료가 가능한 최근접 병원으로의 환자 이송이 82.8%로 나타났다. 뇌졸중 조기증상에 대한 인지수준, 환자 상태평가, 환자처치에 대한 적절성은 뇌졸중 관련 교육 이수자에서 비이수자보다 높게 나타났다. 응급구급대원은 뇌졸중 조기증상에 대한 조기인지 수준이 증가할수록 뇌졸중 환자 처치에 대한 자신감, 처치 만족도, 처치 적절성이 향상되는 것으로 나타났다. 결론적으로 응급구급대원들을 대상으로 하는 뇌졸중 관련 교육 프로그램 개발 및 운영이 필요하다. 교육 프로그램 개발 및 운영 시에는 기존교육프로그램에 대한 심층분석을 통해 대상자들의 특성을 고려한 교육내용과 적절한 교육과정을 확보함으로써 교육 대상자들의 요구도를 충족시키고, 교육 이수율을 높여 궁극적으로는 응급구급대원들의 실질적인 역량 강화를 이룰 수 있도록 해야겠다. Objectives: The purpose of this study was to reconsider the necessity of stroke-related educational programs by investigating early symptoms of stroke that emergency medical technicians (EMTs) may experience. Methods: An interview survey was carried out, targeting all EMTs 298 people who were working at 119 fire safety centers and local units in Jeollabuk-do province, from April 1 to 30, 2011. An interviewer administered questionnaire was used to obtain data on ETMs" demographic characteristics, educational level on stroke, and awareness level about early symptoms of stroke and treatment-related characteristics of stroke patients. Results: The results showed that 63.2% of those surveyed had completed the required educational programs on stroke during the past year. The level of awareness about early symptoms of stroke and assessment of stroke patients" condition was relatively high for women, those who were 30 years under, low position people, emergency service practitioners, emergency medical technicians, and people who have completed education, respectively. It was also turned out that 82.8% of those surveyed took stroke patients to the nearest hospitals first so that they could receive appropriate treatment. The level of awareness about early symptoms of stroke and assessment of stroke patients" condition in people who have completed education were higher than non-complete. The level of awareness about early symptoms of stroke was positively correlated with confidence, satisfaction and appropriateness in treatment of stroke patients. Conclusions: These results strongly suggest that it is necessary to operate specialized educational programs to enhance EMTs" appropriate awareness of the early symptoms of stroke and assessment of stroke patient"s condition.
Escherichia coli M1 RNA 유전자의 전사 종결
이영미,이영훈,박충웅,Lee, Young-Mi,Lee, Young-Hoon,Park, Chung-Ung 생화학분자생물학회 1989 한국생화학회지 Vol.22 No.3
Escherichia coli RNase P의 RNA 성분인 M1 RNA를 코드하는 유전자에 연속적으로 존재하는 종결제 T1, T2, T3의 효율을 측정하였다. 이를 위하여 M1 RNA 유전자의 3'-부분에 있는 염기배열을 차례로 결실시키고, 결실된 염기배열을 갖는 M1 RNA 유전자를 Gal K 발현 벡타인 pKO100에 클로닝하여 갈락토키나제 활성도를 측정하였다. 주된 종결반응은 첫번째 종결제인 T1에서 94%의 효율로 일어났으며, 세 개의 종결제가 모두 존재할 때는 거의 100% 효율로 종결되었다. 또한 이러한 종결제를 통과하여 전사된 RNA가 가지는 ORF (open reading frame)들에서 만들어 질 수 있는 폴리펩티드에 대해서도 검토하였다. The deletion experiment at the 3´flanking sequences of the gene for M1 RNA, the RNA component of Echerichia coli ribonuclease P, was carried out to estimate the efficiency of tandem terminators, T1, T2, and T3. The serially deleted sequences of the M1 RNA gene were cloned into GalK expression vector pK0100 and relative galactokinase activities were measured. The major termination occurred at the first terminator, T1, and three terminators all together functioned with almost 100% efficiency. Biosynthesis of the polypeptides encoded by readthrough transcripts from the terminators was also discussed.
Escherichia coli M1 RNA 유전자의 전사 종결
이영미,이영훈,박충웅 ( Young Mi Lee,Young Hoon Lee,Chung Ung Park ) 생화학분자생물학회 1989 BMB Reports Vol.22 No.3
The deletion experiment at the 3` flanking sequences of the gene for M1 RNA, the RNA component of Escherichia coli ribonuclease P, was carried out to estimate the efficiency of tandem terminators, T1, T2, and T3. The serially deleted sequences of the M1 RNA gene were cloned into GalK expression vector pK0100 and relative galactokinase activities were measured. The major termination occurred at the first terminator, T1, and three terminators all together functioned with almost 100% efficiency. Biosynthesis of the polypeptides encoded by readthrough transcripts from the terminators was also discussed.