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대장균의 Rtn 표현형에 있어서 rtn A와 rtn B 유전자의 필요성
지해선,박충웅,채건상 전북대학교 유전공학연구소 1989 遺傳工學硏究所報 Vol.2 No.1
The rtn(resistant to N4) opreon of Proteus vulgaris, which endowed E. coli with resistance to the infection of coliphage N4, seems to be one transcriptional unit composed of a promoter and two open reading frames(ORF, rtn A and rtn B). In order to know the role of each rtn ORF on making E. coli resistant to N4 and whether the promoter is functional in E. coli, rtn A, rtn B, or the entire operon was subcloned into pUC19 pUC18 in both orientations. E. coli subclone having only rtn A rtn B was not resistant to N4 infection regardless of its orientation and induction of expression from lac promoter, which lacated in the upstream of rtn A and rtn B in each subclone. But E. coli with the entire rtn operon in both orirntation was resistant to N4. These results suggest that the two ORFs are required for the resistance of E. coli to N4 and that the promoter of rtn operon of P. vulgaris is functional in E. coli.
Proteus vulgaris로부터 N4 파아지에 대해 내성을 갖게 하는 유전자의 분리
채건상 전북대학교 유전공학연구소 1988 遺傳工學硏究所報 Vol.1 No.1
대장균에 감염하는 파아지 중의 하나인 N4가 대장균에 감염하지 못하도록 해주는 rtn(resistant to N4)유전자를 Proteus vulgaris로부터 대장균에 분리하였다. 이 rtn 유전자를 갖고 있는 재조합 플라스미드인 pRMG101을 갖고 있는 대장균은 전부 N4의 감염을 저해하였으나, 다른 파아지인 T4, T7, Ø80, lambda가 감염하는 데에는 아무 영향을 주지 못하였다. 이 유전자의 전체 염기 서열을 밝혀본 결과, promoter 부분과 두 개의 단백질을 만들 수 있는 open reading frame(rtn A와 rtn B)이 있다는 것을 알아내었는데 이 rtn 유전자의 promoter는 대장균내에서도 자신의 기능을 발휘하는 것이 확산되었다.
양문식 전북대학교 유전공학연구소 1989 遺傳工學硏究所報 Vol.2 No.1
식물을 주식으로 사용하는 국가에서는 식물의 영양적 가치를 향상시키는 일은 매우 중요한 일이다. 최근에 개발된 식물의 transformation과 식물조직배양의 기법은 우리가 원하는 유전자를 식물에 도입하는 일을 가능하게 했다. 본 연구에서는 화학적으로 합성한 292bp에 해당하는 유전자를 고구마(Ipomoea batatas L.)에 도입하여 고구마의 영양적 가치를 높이려 시도하였다. 이 합성 유전자는 필수아미노산을 80%까지 함유하는 단백질을 만들어 낼 수 있다. 본 유전자는 Agrobacterium-based vector system을 이용하여 고구마에 도입한 후 식물조직배양을 이용하여 고구마를 regeneration 시킨 다음 regenetation된 고구마로부터 Southern blot analysis를 이용하여 본 유전자가 식물의 nuclear genome으로 안정하게 도입된 것을 확인 하였다.
선택표지를 사용하지 않는 용이한 유전자 cloning방법
장광엽 전북대학교 유전공학연구소 1988 遺傳工學硏究所報 Vol.1 No.1
제한효소로 자른 DNA 조각을 vector의 선택표지 내가 아닌 다른 자리에 삽입하고자 할 때, 삽입된 vector를 쉽게 얻을 수 있는 방법을 기술하였다. 기술된 방법으로 효모의 세포주기 조절유전자 CDC73을 함유하고 있는 HindⅢ 조각을 vector YCp50와 pHSS8의 HindⅢ자리에 삽입시켜 만족할 만한 결과를 얻었다. The cloning procedure in which DNA fragment inserted into the outer region of seletive marker in vectors was explained in this article. A DNA fragment containing the gene CDC73 which had been cut by the restriction endonuclease HindⅢ was cloned into the vectors YCp50 and pHSS8 by the explained procedure.
Free Radicals의 특성과 생체내에서 그 방어 Systems
엄태붕 전북대학교 유전공학연구소 1990 遺傳工學硏究所報 Vol.3 No.1
지금까지 in vivo 와 in vitro에 생길 수 있는 Radical반응의 종류와 그것에 대한 방어 System을 고찰하여 보았다. 생명체는 그 생체 기능을 유지하기 위하여 끊임없이 Radicals을 생성해야하며 생성된 Radicals을 즉시 제거해야만 하는 운명을 가지고 있다. 즉 생명체는 이들 사이의 정교한 균형을 유지하여야만 생존한다 할 수 있다. 인간의 몸은 기계와 같은 것이므로 이러한 균형을 깨드릴 수 있는 조건에 자주 노출되게 되면 DNA의 복제로부터 단백질 합성에 이르는 단계까지 누적되는 손상을 가져오리라 생각된다. 비록 노화는 여러 가설이 있지만 Radicals의 의해 점진적인 DNA와 단백질의 손상(Mutation이나 화학적 수식)을 수반하는 증세라고 표현하는 것도 무리가 아닐 것이다. 어떻게 보면 세포 수명은 이미 유전자 수준에서 결정 효율성의 차이로 설명할 수 있지 않을까? 즉 이러한 차이가 Species간의 세포 수명을 결정하지 않나 생각이 든다.
李炳基,殷鍾旋,高正愛,韓光洙 전북대학교 유전공학연구소 1988 遺傳工學硏究所報 Vol.1 No.1
This study was carried out to investigate the optimal conditions for producing somatic cell hybrids of vegetables. The conditions investigated are enzyme concentrations and duration of treatment for isolation of protoplast, concentration of PEG 4000 for fusion of isolated protoplasts, and viability of isolated protoplasts and fused protoplasts. The results obtained are as follows: 1. The size of onion protoplasts which are isolated from white mesophyll tissue is 52.6μm. The size of welsh onion and nanking shallot protoplasts is almost uniform (about 45μm) but the size of tomato and potato protoplasts isolated from callus tissue is various(21 to 86μm). 2. The optimal conc. of enzyme for isolation of protoplasts in the mesophyll tissue of radish, chinese cabbage, welsh onionm, and nanking ahallot are 0.5% macerozyme and 1.0% cellulase. While the onion is 0.5% macerozyme and 1.5% cellulase. 3. The optimal duration of enzyme treatment for produced intact protoplasts were 4hr in chinese cabbage, 5hr in radish, 3hr in welsh onion, and 2hr in nanking shallot and onion respectively. 4. Isolated protoplasts from mesophyll tissus were fused easily and produced the hetero-karyon with 25-35% PEG 4000 in inter-or intraspecies, while protoplasts of tomato and potato derived from cell were not fused easily. 5. The isolated protoplasts were viable until 1-2 days duration of culture, after 3-4 days they were died. The fused protoplasts regenerate cell wall in 1-2 days, while cell division and morphological changes were not observed.
Production and characterization of monoclonal antibodies against Clostricium botulinum type B toxin
Park, Moon-Kook,Jung, Hyun-Ho,Chung, Gook-Hyun 전북대학교 유전공학연구소 1989 遺傳工學硏究所報 Vol.2 No.1
Clostridium botulinum type B toxin was purified by sequential steps of colunm chromatography with DEAE-Sephadex, Sephadex G-200, Sephacryl S-300, and DEAE-Sephadex. Monoclonal antibodies against type B toxin were prepared by fusion of myeloma cells SP2/O-Ag14, with spleen cells from the BALB/c mice immunized by type B toxoid. Growing hybridoma cells were screened by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and two cell lines, B2 and B3, wre cloned by limiting dilution The two monoclonal antibodies reacted with heavy chain of the toxin and B3 highly neutralized the toxin.