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        모세관 전기이동법에 의한 생약제제중 베르베린, 계피산 및 글리시리진의 동시 정량

        강성호,정화진,윤형중,정두수,Kang, Seong Ho,Chung, Wha Jin,Yoon, Hyung Jung,Chung, Doo Soo 대한화학회 1997 대한화학회지 Vol.41 No.2

        한국에서 전통적으로 사용되고 있는 생약제제 중 베르베린, 계피산 및 글리시리진의 정량을 위한 간단하고, 정확하고, 재현성 있는 모세관 전기이동법을 개발하였다. 이 성분들의 분리는 25$^{\circ}C$, 20 mM 인산완충액(pH 7.5)에서 실리카 캐필러리($57 cm{\times}75 {\mu}m$ i.d.)를 사용하여 수행하였다. 350 V/cm의 전기장으로 베르베린, 계피산 및 글리시리진의 동시 정량을 13분내에 할 수 있었다. 검정곡선은 베르베린에 대해서는 1~100 ${\mu}g/mL$, 계피산은 0.3~100 ${\mu}g/mL$, 글리시리진은 2.5~100 ${\mu}g/mL$의 농도 범위 안에서 좋은 직선성을 보여 주었다. 이 성분들에 대한 상대 표준편차(n=5)의 범위는 0.96∼2.35%이었다. 베르베린, 계피산 및 글리시리진에 대한 검출한계(S/N=3)는 각각 0.5, 0.1 및 2.0 ${\mu}g/mL$이었다. 이론단수는 181,000(베르베린), 88,000(계피산) 및 169,000(글리시리진)이었다. HPLC에서는 3,100~4,800이었다. A simple, accurate and reproducible capillary electrophoresis(CE) assay has been developed for the determination of berberine, cinnamic acid, and glycyrrhizin which are used in traditional Korean medicinal preparations. Separation of these compounds was performed in 20 mM phosphate buffer(pH 7.5) and acetonitrile(75:25, v/v) using a bare fused silica capillary($57 cm{\times}75 {\mu}m$ i.d.) at 25$^{\circ}C$. With the electric field of 350 V/cm, the time needed for the separation of berberine, cinnamic acid and glycyrrhizin was within 13 min. Calibration curves were linear for 1∼100 ${\mu}g/mL$ berberine, 0.3∼100 ${\mu}g/mL$ cinnamic acid and 2.5∼100 ${\mu}g/mL$ glycyrrhizin. The ranges of relative standard deviations(n=5) for those samples were between 0.96∼2.35%. The limits of detection(S/N=3) for berberine, cinnamic acid and glycyrrhizin were 0.5, 0.1 and 2.0 ${\mu}g/mL$, respectively. The numbers of theoretical plates were 181,000(berberine), 88,000(cinnamic acid) and 169,000(glycyrrhizin), while they were 3,100∼4,800 in HPLC.

      • Fabrication of polymer microlens for cell detection by light scattering

        박세완(Sewan Park),정용원(Yongwon Jeong),김진석(Jinseok Kim),최기환(Kihwan Choi),김현철(Hyeon Cheol Kim),정두수(Doo Soo Chung),전국진(Kukjin Chun) 대한전자공학회 2006 대한전자공학회 학술대회 Vol.2006 No.11

        In laser light scattering detection and laser-induced fluorescence detection, the focusing of the excitation laser beam into a focal point of the channel in a microfluidic chip is important to obtain the largest intensity, and consequently to obtain the light collected to the photodetector with a high efficiency. In this paper, we present a polydimethylsiloxane (PDMS) microfluidic chip consisting of an integrated PDMS microlens for cell detection based on laser light scattering. The PDMS micro lens was fabricated by the photoresist reflow and PDMS replica molding method. This fabrication technique is simple and has a good property in terms of the microlens and a high-dimensional accuracy. The PDMS microlens integrated on the PDMS microfluidic channel was verified to improve the laser light intensity, and consequently signal to noise ratio and sensitivity of laser light scattering detection using red blood cells (RBCs).

      • 진한 염 매트릭스에서 모세관 전기영동으로 음이온 분석물질의 스태킹

        백영숙,김용성,정두수 경남대학교 환경문제연구소 2001 환경연구 Vol.24 No.-

        Conventional sample stacking in capillary electrophoresis requires that anaytes be in a low conductivity matrix. However, the real samples are mostly in high conductivity matrices and incompatible with usual stacking methods. Possibilities of loading the capillary with large volume of dilute anionic analytes in a highly saline sample were investigated. The half of a coated capillary was filled with analytes such as fluorescein sodium salt and fluorescein isothiocyanate isomer I in > 150mM NaCl. When a reverse voltage was applied along the capillary, a baseline separation with efficiency in the order ~ 100,000 was obtained. Several hundred-fold sensitivity enhancements were realized as compared to the normal capillary zone electrophoresis injection. Limits of detection at 500nm were in low nM ranges.

      • Large Volume Sample Stacking 방법과 Head Column Stacking 을 이용한 프로틴과 펩타이드의 시료 농축

        강대천,도길명,김용성,정두수 경남대학교 기초과학연구소 2001 硏究論文集 Vol.15 No.-

        현재 세포 성분 내에서의 단백질들의 기능규명, 새로운 신약의 개발 등은 매우 중요함을 차지하고 있다. 그러나 현재의 분석 기술인 2-D 젤 모세관 전기 영동 장치, 액체 크로마토그래피 그리고 질량 분석기 등의 여러 가지 방법들은 세포 내에서 극 미량의 단백질들을 분석하는데 있어서 충분한 감도를 제공하지 못한다. 이 실험에서는 모세관 전기 영동 장치를 이용한 단백질과 펩타이드의 분석에서 시료의 낮은 농도의 감도를 향상시키기 위하여 시료 농축 방법인 Large Volume Sample Stacking 방법과 Head column stacking 방법을 이용하여 분석을 하였다. α - lactalbumin과 trypsin inhibitor들과 같은 단백질들을 위의 시료 농축 방법을 이용하여 낮은 시료의 농도 0.01 ㎍/㎖까지 농축이 가능하였다. 또한 효소로 처리한 잘려진 단백질들의 절편들도 극 미량의 low femtomole 수준까지 검출이 가능하였다. 그리고 low femtomole 수준의 단백질 절편들을 규명하기 위하여 CE-MS를 사용하였다 The identification proteins in the cell is very important for Proteomics research. However, current analytical techniques such as 2-D gel electrophoresis, 1iquid chromatography and mass spectrometry do not provide enough sensitivity for cell proteins especially for low-abundant proteins. Therefore, protein and peptide concentration method should be developed for the easy operation of current identification technologies. In order to enhance the concentration sensitivity in capillary electrophoresis of proteins deptides, large volume sample stacking using electroosmotic flow pump and LVSEP combined with Head column stacking were applied. Proteins such as α -Lactalbumin and trypsin inhibitor were successfully stacked and their limits of detection were below 0.01㎍/㎖. A large volume of digested protein samples was also stacked and the enhanced sensitivity allowed one to analyze protein digests at low femtomole levels. CE-MS was employed for the identification of protein digests at low femtomole levels.

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