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      • SCOPUSKCI등재

        새로운 Baculovirus 전이벡터를 이용한 Escherichia coli ${\beta}$-galactosidase 유전자의 발현

        우수동,김우진,김혜성,진병래,강석권,Woo, Soo-Dong,Kim, Woo-Jin,Kim, Hye-Seong,Jin, Byung-Rae,Kang, Seok-Kwon 한국미생물 · 생명공학회 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.1

        To investigate the expression efficiency of new transfer vector of Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus (BmNPV), Escherichia coli lacZ gene was inserted into new transfer vector pBmKSK1, under the control of polyhedrin promoter and expressed in BmN-4 cells and larvae of silkworm, Bombyx mori. The recombinant virus containing lacZ gene was isolated from BmN-4 cells coinfected with transfer vectro pBmKSK1-LacZ and wild type BmNPV genome, and analysed by Southern blotting. The expression of ${\beta}$-galactosidase was characterized by SDS-PAGE, Western blotting and ${\beta}$-galactosidase activity assay. The results showed that the level of expression in silkworm larvae was higher than that of BmN-4 cells.

      • SCOPUSKCI등재
      • KCI등재

        두 가지 곤충 세포주에 대한 배양 및 바이러스 증식을 위한 최적 FBS 농도 결정

        이재경,구현나,우수동,Lee, Jae-Kyung,Koo, Hyun-Na,Woo, Soo-Dong 한국응용곤충학회 2007 한국응용곤충학회지 Vol.46 No.2

        곤충 세포주 Sf21과 Bm5 세포주에 대해 세포 배양과 바이러스의 증식을 위한 최적 FBS 의 농도를 결정하기 위하여 다양한 FBS 농도에서 세포 및 바이러스의 증식 곡선을 비교하였다. 세포의 생존율, 증식속도, 증식량 그리고 FBS 함량을 모두 고려할 때 Sf21 에 대해서는 7%가, Bm5에 대해서는 5% FBS 가 최적 농도로 결정되었다. 바이러스의 증식은 감염 후 5일째에 두 세포주 모두 모든 FBS 농도에서 유사한 증식량을 보였으나, 감염 후 2 일과 3일에 있어서는 Sf21 은 각각 10%와 3%가 Bm5 에 대해서는 양일 모두 5% FBS 농도에서 가장 증식량이 높았다. 이러한 결과는 목적에 따라 세포 및 바이러스 증식을 위한 적정 FBS 농도의 결정이 필요함을 제시하는 것이다. To determine the optimal concentration of fetal bovine serum (FBS) on the growth of insect cells and the multiplicity of viruses, the growth of cells (Sf21 and Bm5) and viruses were examined on the various concentrations of FBS. In view of the viability, growth speed, proliferation of cells and the amount of FBS, the most proper concentration for the cell culture were 7% and 5% for Sf21 and Bm5, respectively. The multiplicity of viruses at the various concentrations of FBS was similar in both cell lines at 5 days post-infection (p.i.). However, it differed significantly at 2 and 3 days p.i. The proper concentration of FBS were 10% and 3% for Sf21 at 2 and 3 days p.i., respectively, and 5% for Bm5 at both 2 and 3 days p.i. These results suggested that the optimal concentration of FBS should be determined according to the used cell lines and viruses for their optimum production.

      • KCI등재

        한국에서 분리된 파밤나방 핵다각체병 바이러스의 전체 유전체 분석

        최재방,김현수,우수동,Jae Bang, Choi,Hyun-Soo, Kim,Soo-Dong, Woo 한국응용곤충학회 2022 한국응용곤충학회지 Vol.61 No.3

        The morphology and whole genome sequence of Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus K1 (SeNPV-K1) isolated in Korea were analyzed for the use as an eco-friendly control source against S. exigua. The polyhedra of SeNPV-K1 was amorphous with a size of 0.6-1.8 ㎛, and there was no external difference with the previously reported SeNPV. As a result of analyzing the nucleotide sequence of the whole genome, it was composed of 135,756 bp, which is 145 bp more than that of the previously reported SeNPV. The G+CG+C content was 44% and there were 6 homologous repeated sequences, so there was no significant difference from the previous report. As a result of ORF analysis, SeNPV-K1 had 137, two fewer than those previously reported, and 4 ORFs present only in SeNPV-K1 were confirmed. These 4 ORFs are non-essential genes and were not considered to have a significant influence on the characteristics of the SeNPV. The genome vista analysis showed that the overall sequence similarity between SeNPV-K1 and the previously reported SeNPV was very high. The whole genome of SeNPV-K1 analyzed for the first time in Korea was found to be similar to the previously reported SeNPV, but it was confirmed that it was a novel resource in Korea with different isolate.

      • KCI등재

        액체배지에서 눈꽃동충하초균(Paecilomyces tenuipes)의 계대증식에 따른 증식 특성

        오정미,이재경,구현나,우수동,Oh, Jeong-Mi,Lee, Jae-Kyung,Koo, Hyun-Na,Woo, Soo-Dong 한국응용곤충학회 2008 한국응용곤충학회지 Vol.47 No.2

        눈꽃동충하초균(Paecilomyces tenuipes)의 균사 및 포자 형성에 영향을 미치는 계대증식에서의 특성을 알아보기 위하여, 액체배지로써는 누에 유충분말이 함유된 SL배지와 일반적인 PD배지를 이용하였고, 고체배지로는 누에 번데기 분말을 넣은 현미배지상에서, 세대증식이 이루어진 각 균주에 대해서 조사하였다. 그 결과, 액체 배지에서의 포자 생산량은 세대에 따라 큰 차이를 보였으나, 현미배지에서의 포자 생성율은 세대간에 큰 차이를 보이지 않음으로써, 액체배지에서 계대증식이 고체배지에서의 포자생산량에는 큰 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 또한 현미배지에 대한 최적 포자 접종량은 각각 $1{\times}10^{10}$ conidia/ml, $1{\times}10^6$ conidia/ml, $1{\times}10^6$ conidia/ml의 농도로 접종하였을 경우 농도에 따른 생산량에 차이가 나타나지 않아서 $1{\times}10^6$ conidia/ml만으로도 충분한 것으로 나타났다. The growth characteristics of Paecilomyces tenuipes according to the passage in the two kind of liquid media were investigated by comparing the mycelium and conidium formation degrees. The potato dextrose broth medium and the silkworm larvae medium containing the silkworm powder were used as the liquid media, and the potato dextrose agar medium and the brown rice medium containing the powder of silkworm pupa were used as the solid media. The conidium formation degree in liquid media differed by the passages but that in solid media was not. This suggested that the passage in liquid media did not affect significantly the conidium formation in solid media. When the brown rice media were inoculated with the concentration of $1{\times}10^{10}$ conidia/ml, $1{\times}10^8$ conidia/ml and $1{\times}10^6$ conidia/ml, respectively, the conidium formation degrees were similar. This indicated that the optimal inoculation concentration of conidium to the brown rice media is $1{\times}10^6$ conidia/ml.

      • KCI등재

        파밤나방의 미생물적 방제를 위한 병원성 곰팡이 Nomuraea rileyi의 특성 및 병원성 검정

        이원,신태영,고승현,최재방,배성민,우수동,Lee, Won Woo,Shin, Tae Young,Ko, Seung Hyun,Choi, Jae Bang,Bae, Sung Min,Woo, Soo Dong 한국미생물학회 2012 미생물학회지 Vol.48 No.4

        파밤나방(Spodoptera exigua)은 유기합성 농약을 이용한 화학 살충제 외에 뚜렷한 방제방법이 알려져 있지 않으나, 그에 대한 저항성과 더불어 식물을 가해하는 방법에 있어 그들만의 독특한 숙주 가해습성으로 인해 난방제 해충으로 알려져 있다. 화학살충제에 대한 저항성의 해결을 위하여 곤충병원성 바이러스 및 세균을 이용한 살충제가 개발되어 있으나, 이들 역시 파밤나방 유충이 줄기 속으로 들어가는 가해습성으로 인하여 효과적이지 못한 실정이다. 그러므로 본 연구에서는 그들의 가해습성과 저항성을 극복할 수 있는 새로운 방제원으로써, 체벽과의 일시적인 접촉을 통해 살충성을 발휘할 수 있는 파밤나방에 대한 병원성 곰팡이를 분리하고 그 특성 및 살충성을 조사하였다. 파밤나방 병원성 곰팡이는 파밤나방 누대사육 중 곰팡이병 증상을 보이며 이병된 사충으로부터 분리하였으며, 분리 곰팡이는 배지에서의 증식상 및 현미경적 관찰을 통한 형태학적 동정과 더불어 ITS, ${\beta}$-tublin 및 EF1-${\alpha}$ 부분의 염기서열 분석을 통해 Nomuraea rileyi로 최종 동정하고 N. rileyi SDSe로 명명하였다. 분리 균주의 파밤나방에 대한 살충력 검정은 $1{\times}10^4-10^8conidia/ml$까지의 다양한 포자현탁액에 파밤나방 3령 유충을 침지하는 조건으로 수행한 결과, 20-54%의 살충률을 나타냈으며 포자현탁액의 농도가 증가할수록 살충력도 증가하는 양상을 나타냈다. 본 연구결과 분리된 N. rileyi 균주가 비록 높은 살충력을 보이지 않았으나, 파밤나방이 난방제 해충임을 감안할 때 다른 방제방법과 함께 종합적 해충 방제 방법에 있어 효과적인 방제수단의 일환이 될 수 있을 것으로 기대된다. To date, chemical control remains the most common way to reduce beet armyworm (Spodoptera exigua) populations. However, this insect has become more tolerant or resistant to many chemical insecticides and the insect larvae usually hide inside hollow, tube-like leaves of host plant so they were difficult to kill by spraying insecticides. The use of viral and bacterial insecticide to solve these problems has not been successful because of their novel feeding habit. To overcome these problems, in this study, the biological characteristics and virulence of an entomopathogenic fungus isolated from the cadaver of larvae beet armyworm were investigated. Isolated entomopathogenic fungus was identified as Nomeraea rileyi (Farlow) Samson by morphological examinations and genetic identification using sequences of the ITS, ${\beta}$-tubulin gene and EF1-${\alpha}$ regions. This fungus was named as N. rileyi SDSe. Virulence tests against 3rd larvae of beet armyworm were conducted with various conidial suspensions from $1{\times}10^4$ to $10^8$ conidia/ml of N. rileyi SDSe in laboratory conditions. Mortality rate of beet armyworm showed from 20 to 54% and the virulence increased with increasing conidial concentrations. Although N. rileyi SDSe showed low mortality rate against beet armyworm, it is expected that N. rileyi SDSe will be used effectively in the integrated pest management programs against the beet armyworm.

      • SCOPUSKCI등재
      • KCI등재

        온실가루이 병원성 곰팡이의 특성 및 살충제 개발을 위한 평가

        윤휘건,신태영,유미라,이원,고승현,배성민,최재방,우수동,Yoon, Hwi Gun,Shin, Tae Young,Yu, Mi Ra,Lee, Won Woo,Ko, Seung Hyun,Bae, Sung Min,Choi, Jae Bang,Woo, Soo Dong 한국미생물학회 2013 미생물학회지 Vol.49 No.1

        온실가루이(Trialeurodes vaporariorum)는 온실에서의 경제적 주요 해충으로, 직접적으로는 작물을 흡즙 가해하여 영양분고갈로 작물을 고사시키고 간접적으로는 많은 식물바이러스를 매개한다. 이러한 온실가루이를 방제하기 위해 최근에 다양한 합성 농약을 사용하고 있지만, 농약의 오남용으로 인해 온실가루이 개체의 저항성이 높아지고 환경오염을 초래하는 문제가 있다. 그리하여 본 연구에서는 이러한 문제를 극복하고자 온실가루이 사충으로부터 분리된 곤충병원성 곰팡이의 생물학적 특성과 살충성을 조사하였다. 분리된 곤충병원성 곰팡이는 형태학적 조사와 ITS, ${\beta}$-tubulin, EF1-${\alpha}$ 영역의 염기서열을 이용한 분자생물학적 동정을 통하여 Isaria fumosorosea로 동정하였고, I. fumosorosea SDTv로 명명하였다. 그리고 I. fumosorosea SDTv의 온실가루이 약충에 대한 살충력과 포자의 고온, UV-B 안정성, 저온발아력에 대하여 조사 하였다. 살충력 검정은 실험실 조건에서 온실가루이 약충에 대하여 다양한 포자 농도($1{\times}10^5$ - $10^8$ conidia/ml)로 접종한 결과, 7일차에서 84-100%의 살충력을 보였으며 포자 농도가 증가할수록 살충력도 증가하는 양상을 나타내었다. 분리 균주의 포자는 $35^{\circ}C$에서 그리고 0.1 $J/cm^2$ UV-B 조사에 대하여 비교적 안정적이었으며, $4^{\circ}C$ 조건에서 8일차부터 발아하였다. 또한, I. fumosorosea SDTv의 배지에 따른 chitinases와 proteases의 생산 활성을 비교한 결과 배지에 따라 다른 효소 생산 양상을 보였다. 이상의 결과로 온실가루이에 대하여 높은 살충력을 보인 I. fumosorosea SDTv는 온실가루이에 대한 종합적 해충 방제 방법에 있어 효과적인 방제수단의 일환이 될 수 있을 것으로 기대된다. The greenhouse whitefly, Trialeurodes vaporariorum, is an economically important pest for greenhouse crops because they cause direct damage by feeding on plant nutrients and indirect damage as transmits many virus vectors. It has recently become a serious problem because of the continuous use of insecticide resulting in resistance among greenhouse whitefly population. To overcome these problems, in this study, the biological characteristics and virulence of an entomopathogenic fungus isolated from the cadaver of nymph greenhouse whitefly were investigated. Isolated fungus was identified as Isaria fumosorosea by morphological examinations and genetic identification using sequences of the ITS, ${\beta}$-tubulin, and EF1-${\alpha}$ regions. This fungus was named as I. fumosorosea SDTv and tested for the virulence against nymphs T. vaporariorum and the cold activity, the thermotolerance and the stability of UV-B irradiation on conidia. Mortality rate of greenhouse whitefly showed from 84 to 100% and the virulence increased with increasing conidial concentrations, $1{\times}10^5$ to $10^8$ conidia/ml. Conidia were stable at $35^{\circ}C$, 0.1 $J/cm^2$ of UV irradiation and germinated after 8 days at $4^{\circ}C$. Additionally, the activities of chitinases and proteases produced by I. fumosorosea SDTv were varied according to the medium. In conclusion, I. fumosorosea SDTv which showed high mortality rate against greenhouse whitefly will be used effectively in the integrated pest management programs against the greenhouse whitefly.

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