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시호(Bupleurum falcatum L.)의 캘러스로부터 부정근 분화에 미치는 2,4-Dichlorophenoxyacetic Acid의 영향과 분화의 해부학적 고찰
배형화,조덕이,김성길,소웅영,성낙선 한국식물생명공학회 1994 식물생명공학회지 Vol.21 No.1
Calli were induced from leaf explants of B.falcatum, and selected cell clumps of the calli (900-1, 000${\mu}{\textrm}{m}$) were cultured on MS medium supplemented with 0.1, 0.5, 1.0 or 2.0 mg/L 2, 4-D for 7 days, respectively: The clumps were subsequently transferred onto MS basal medium and subcultured for four weeks. In order to investigate the effect of 2, 4-D pretreatment, the selected clumps were cultured on MS medium supplemented with 0.1 mg/L 2, 4-D for 24, 48, 72, 96, 120 or 144 hours and then transferred to liquid MS basal medium, wherein they were cultured for 4 weeks. Histological observation showed that root initial cells were developed from cells on the surface of clumps or from cells in the inner region. Clumps on the basal medium produced mot within 5 days of culture. The rate of prutruding time was inversely proportional to the concentration of 2, 4-D. The number of adventitious roots per clump preheated with 0.1 mg/L 2, 4-D was an average of 5.2, which was the highest level. On MS medium as control, the clumps formed 3.3 adventitious roots each. As tile concentration of 2, 4-D increased, the number of adventitious roots were declined accordingly: The number of adventitious roots as the period of pretreatment increased upto 120 h. 시호의 어린 잎 절편으로부터 캘러스의 유도는 0.1 mg/L 2,4-D가 첨가된 MS배지에서 가장 우수하였다. 유도된 캘러스는 균일한 크기의 세포괴만을 선발하여 MS배지에 0, 0.1 mg/L, 0.5, 1.0, 2.0 mgh의 2,4-D를 첨가하여 7일간 배양한 다음, 세포괴를 부정근 유도를 위해 2,4-D가 제거된 MS배지에 계대배양하여 부정근의 형성과정 및 근원기 형성에 미치는 효과를 관찰하였다. 그 결과 부정근 형성은 0.1 mg/L 2,4-D를 처리후 호르몬 무처리의 배지에 옮겨주었을 때 세포괴당 평균 부정근수 5.2개로 가장 우수하였고 농도가 증가할수록 감소하는 경향을 보였다. 신장된 부정근의 길이에 있어서는 각 처리구별로 14-16 mm로 농도차에 따른 차이를 보이지 않았다. 처리시간에 따른 부정근의 형성에서는 수록 세포괴당 부정근의 수가 증가하였으며 120시간에 이르러서 최대치를 보였다. 이 결과 부정근 발생에 있어 적정농도의 2,4-D는 부정근 시원세포기 및 근원기 발생기에 민감한 영향을 미치며 근원기가 캘러스 표면밖으로 돌출되는 시기에는 저해적인 것으로 생각된다. 조직학적 기원에 있어서는 특정한 조직의 기원이 아닌 캘러스 표면 세포 및 내부세포로부터 최초 여러개의 시원세포가 형성되어, 캘러스 표면쪽으로 왕성한 반원형의 분열조직을 형성한 다음에 신장 되었다.
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趙弼衡,成樂宣,裵馨華,蘇雄永,趙德以 全北大學校 基礎科學硏究所 1991 基礎科學 Vol.14 No.2
The study for the quantitative analysis of saikosaponin of Bupleurum falcatum root produced by tissue culture was attempted. The optimal concentration of 2, 4-D was 0.1㎎/l for inducing the callus. The induction and growth of the adventitious root from the callus was obtained in the suspension culture containing MS basal medium supplemented with no plant growth regulators. The results of the quantitative analysis of saikosaponins by high performance liquid chromatography (HPLC) showed that the content of saikosaponin a and c was high in the one-year-old root from somatic embryos and that of saikosaponin d was remarkably high in three-months-old adventitious root from callus.
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조직 배양을 통하여 생산된 시호근으로부터 Saikosaponin 의 정량분석
조필형,성락선,배형화,소웅영,조덕이 한국생약학회 1990 생약학회지 Vol.21 No.3
본 연구는 시호의 조직 배양에 의한 대량 증식과 그 대사 산물의 정량분석 및 그 산물의 대량 생산을 위하여 시도되었다. 시호의 잎 배양으로부터 칼루스를 얻고 체세포배를 유도해서 증식시키는데 필요한 2,4-D의 적정농도는 각각 0.1㎎/ℓ및 8㎎/ℓ였다. 부정근의 유도 및 생장에는 호르몬 무처리한 MS배지에 증식시킨 후 현탁 배지에서 배양했을 때 잘 되었다. 체세포배 유래 1년근의 생중략 및 건중량은 증자 유래 1년근 및 2년근 보다 높게 나타났다. HPLC에 의한 saikosaponin의 정량분석 결과, 체세포배 유래 1년근의 경우 saikosaponin a와 c의 함량이 높게 나타났으며 saikosaponin d의 경우는 기내배양 부정근에서 현저히 높게 나타났다.
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조필형(Pil Hyung Jo),성낙선(Rack Seon Seong),배형화(Hyung Hwa Bae),소웅영(Woong Young Soh),조덕이(Duck Yee Cho) 한국생약학회 1990 생약학회지 Vol.21 No.3
The study for the quantitative analysis of saikosaponin of Bupleurum falcatum root produced by tissue culture was attempted. The optimal concentration of 2, 4-D was 0.1 ㎎/ℓ for inducing the callus. The induction and growth of the adventitious root from the callus was obtained in the suspension culture containing MS basal medium supplemented with no plant growth regulators. The results of the quantitative analysis of saikosaponins by high performance liquid chromatography (HPLC) showed that the content of saikosaponin a and c was high in the one-year-old root from somatic embryos and that of saikosaponin d was remarkably high in three-months-old adventitious root from callus.
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