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      • KCI등재

        강활(Ostericum koreanum Kitagawa)의 잎절편체 배양으로 부터 발생된 여러가지 형태의 체세포배를 통한 식물체 재생

        조덕이,소웅영 한국식물생명공학회 1998 식물생명공학회지 Vol. No.

        This study was carried out in order to establish plant regeneration via somatic embryogenesis from leaf explant of Ostericum koreanum Kitagawa and to elucidate the effects of NAA and cytokinins (kinetin, BA) on the abnormalities of somatic embryo and the relationship between thecotyledon numberand germinability. Calli were formed on leaf explants cultured on MS agar medium supplemented with various concentrations (0, 0.1, 0.5, 1, 2 mg/L) of NAA and cytokinins. The calli were white, watery and soft, became browning during cultures. Somatic embryos were formed from pale yellowish calli derived browning calli. High frequency somatic embryos were observed on MS medium containing 1 mg/L NAA and 0.1 mg/L BA after 60 days of culture. The mature somatic embryos germinated into plantlets without subculture after 2 weeks. The frequency of normal somatic embryo with two cotyledons was 39.8%. On the other hand, cotyledonary abnormalities of somatic embryos were observed at considerable frequency: 33.6% of somatic embryo with one cotyledon, 15.3% cotyledons with three, 8.2% four cotyledons and 3.1% jar shaped cotyledon. Germination frequency of somatic embryos with two cotyledons was 97.4%, and that of the embryos with abnormal cotyledon was almost similar to that of embryos with two cotyledons, except jar shaped somatic embryos (33.3%). 강활(Ostericum koreanum Kitagawa)의 잎절편배양으로부터 체세포배 형성을 통한 식물체 재생, 체세포배의 이상자엽에 관한 NAA와 싸이토카이닌(kinetin, BA)의 영향 및 체세포배의 자엽수와 발아와의 관계을 밝히기 위하여 본 연구를 시도하였다. 배발생능캘러스는 여러 가지 농도의(0, 0.1, 0.5, 1, 2mg/L) NAA와 싸이토카이닌(kinetin, BA)이 첨가된 MS배지에서 배양된 캘러스는 희고 물기가 많고 부드러웠으며 배양중에 갈변하면서 연노랑색의 배발생능 캘러스로 되었으며 이로부터로 체세포배가 형성되었다. 1mg/L NAA+0.1mg/L BA가 첨가된 MS 배지상에서 계대배양 없이 60일간 배양하여 고빈도 체세포배를 얻을 수 있었다. 성숙한 체세포배는 계대배양없이 동일 배지상에서 2주후 발아하여 소식물체로 되었다. 성숙한 체세포배는 2개 자엽을 갖는 정상적인 자엽배가 39.8%이었고, 주발모양, 1개, 3개 및 4개자엽배 등은 3.1% 33.6%, 15.3% 및 8.2%이었다. 정상적인 2개 자엽 체세포배의 발아율은 97.4% 이었고 주방모양의 자엽을 갖는 체세포배를 제외하고(33.3%) 비정상 자엽배에서도 정상자엽체세포배의 발아율과 거의 비슷하였다.

      • KCI등재

        시호(Bupleurum falcatum L) 잎절편으로부터 형성된 체세포배 발생의 형태학적 관찰

        조덕이,소웅영 한국식물생명공학회 1995 식물생명공학회지 Vol.22 No.5

        시호(Bupleurum falcatum L.)의 잎절편으로부터 체세포배형성을 통한 식물체 재생과 체세포배 발생의 이상을 일으키는 2,4-D의 영향에 대하여 또한 체세포배의 자엽수와 발아와의 관계에 대하여 기술하였다. 배발생능 캘러스는 1mg/L 2,4-D가 첨가된 MS 고형기본배지에서 배양된 캘러스로부터 선발하였다. 2,4-D 첨가 MS 기본배지에서 6주간 배양후 3주간 2,4-D가 제거된 배지에서 배양하여 체세포배 발생과 비정상적인 체세포배의 자엽발생을 관찰하였다. 이상자엽의 빈도는 정상인 2개 자엽에서 65% 인데 비하여 1개의 자엽에서 7%, 3개의 자엽을 갖는 체세포배에서는 25%, 4개 자엽에서는 5%, 5개 자엽에서 2% 및 나팔형 자엽배는 3% 이었다. 2개의 정상적인 자엽을 갖는 체세포배의 발아율이 80%인 것에 비하여 1, 3 4, 5개의 자엽을 갖는 체세포배에서는 25%, 58%, 38% 및 20%로 발아율이 낮았다. 그러나 나팔형의 비정상 체세포배는 전혀 발아되지 않았다. 다자엽배의 구조는 체세포배의 뿌리 또는 배축에서 원통상전형성층을 나타내었지만 자엽절에서는 자엽수와 동일한수의 전형성층속으로 분포되었다. 체세포배의 자엽수 변이는 전형성층의 수와 밀접한 관계가 있다. This study describes plant regeneration from leaf explant of Bupleurum falcatum through somatic embryogenesis, and the effect of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid on somatic embryo abnormalities. The relationship between the cotyledon number of somatic embryo and its germinability is also described. Embryogenic calli were selected from calli formed on explants cultured on MS solid basal medium supplemented with 1 mg/L 2,4-D. Cotyledonary abnormalities were observed in somatic embryos which were developed from calli cultured on MS medium with 1 mg/L 2,4-D for 6-week and then subcultured on 2,4-D free MS medium for 3 weeks. The frequency of abnormalities was as follows: 7% of somatic embryos had one cotyledon, 65% of them had two cotyledons, 25% three cotyledons, 5% four cotyledons, 2% five cotyledons, and 3% trumpet-like cotyledons. The two cotyledon somatic embryos were germinated at a frequency of 80%. However the germination frequency of one cotyledon embryo and multicotyledonary embryo was lower than that of the two cotyledon somatic embryo. All of trumper-like somatic embryos did not germinate. Histological observations of multicotyledon embryo showed circular procambium in the root but pocambial strands in the cotyledonary node or upper hypocotyl. The number of the strands was equal to the cotyledon number.

      • 시호(Bupleurum falcatum L.) 잎절편체로 부터 부정아 형성을 통한 식물체 재생

        조덕이,이은경 우석대학교 자원개발연구소 1997 자원개발연구소논문집 Vol.2 No.-

        This study was carried out plant regeneration via adventitious bud formation from leaf explant of Bupleurum falcatum L. Leaf explants were cultured on MS medium supplemented with various concentrations (0,0.1,0.5,1,3,5 mg/L) of 2,4-D and BA in combination or soley treatment. After 6 weeks 2,4-D medium and pale green callus was induced with 0.1 mg/L 2,4 D+ 0.1mg/L BA. Adventitious bud was transferred onto half strungth Ms basal medium for 3 weeks of culture, adventitious roots formed and then plantlets were produced. The treatment of high concentration (2,3,5 mg/L) of BA, callus occurred necrosis.

      • KCI등재

        당근(Daucus carota L.)의 현탁배양을 통한 체세포배 발생에 미치는 카드뮴의 영향

        조덕이,신은경,소웅영 한국식물생명공학회 2000 식물생명공학회지 Vol.27 No.3

        This study was carried out to elucidate the effect of cadmium on somatic embryogenesis and plant regeneration from cultured cells of Daucus carota L. Embryogenic calli were induced from cotyledon explants of carrot seedlings cultured on MS solid medium supplemente with 1 mg/L 2,4-D Embryogenic cells proliferated on medium supplemented with 1 mg/L 2,4-D were also cultured in liquid MS medium containing various concentrations (50, 100, 200, 500, 1000 $\mu$M) of cadmium for one week and then transferred to MS basal medium. Somatic embryogenesis occurred in suspension culture treated with 50 $\mu$M and 100 $\mu$M cadmium or untreated with cadmium. When cadmium was treated in suspension culture, production of two and four cotyledonary somatic embryos was reduced, but that of three cotyledonary somatic embryo was increased. Two cotyledonary embryos showed higher regeneration frequency than abnormal somatic embryo with one, three and four cotyledon. Regardless of cotyledonary variation, germination frequency of somatic embryos treated with cadmium was decreased in compared with that of embryos in basal medium. 당근 유식물체의 자엽을 절편으로 유도된 배형성능 세포를 여러가지 농도의 카드뮴 (0, 50. 100, 200. 500, 1000 $\mu$M)이 첨가된 MS 액체배지에 배양한 다음 MS 기본배지에 옮겨서 체세포배 발생을 유도했고 한편 카드뮴 처리구와 카드뮴이 처리되지 않은 대조구에서 체세포배를 얻었다. 현탁배양에서 정상적인 2개의 자엽을 갖는 체세포배 발생은 카드뮴 첨가 배지에서 감소하였으나 비정상적인 3개의 자엽을 갖는 체세포배가 많이 관찰되었다. 또한 비정상적인 1개, 3개 및 4개의 자엽을 갖는 체세포배보다 정상적인 2개의 자엽을 갖는 체세포배의 식물체 재생률이 가장 높았다. 카드뮴 처리구에서 발생된 체세포배의 발아율은 자엽수에 관계없이 대조구에서 발생된 체세포배의 발아율에 비해 감소하였다.

      • 오이(Cucumis sativus L.) 자엽절편으로부터 부정근 형성에 관한 Indole-3-butyric acid 와 6-benzyl adenine의 영향

        조덕이,최인종 우석대학교 자원개발연구소 1996 자원개발연구소논문집 Vol.1 No.-

        본 연구는 오이 자엽절편의 부정근 형성에서 IBA 및 BA의 영향을 알아보기 위하여 해부학적 및 생화학적 연구를 수행하였다. 자엽절편을 MS기본배지, IBA + BA 및 IBA, BA단독배지에서 1개월간 배양하여 Laemmli방법에 의해서 1차원 전기영동을 실시하였다. 0.5 mg/L BA첨가 MS배지에 배양한 자엽의 단백질 함량은 1.474 ㎍/mg.fr.wt.이었으나 3mg/L IBA처리시, 부정근 형성이 일어났고 이때 1.014㎍/mg.fr.wt로서 함량이 감소하였다. 64.7 KD, 58.8 KD, 32.7 KD 및 28.8 KD등의 특이밴드가 합성되었다. 또한 부정근 원기형성은 3mg/L IBA 첨가 MS배지에서 1일간 배양시 유관속 형성층과 사부유조직으로부터 시원세포가 형성되었고 3일간 배양할때 부정근 원기가 형성되어 표피쪽으로 원형의 분열조직을 형성하여 배양 5일 후 근신장을 하였다. This work was carried out to elucidate de novo protein synthesis and anatomical research during the adventitious root formation from cotyledon explant of Cucumis sativus L. One-dimensional SDS-PAGE of a cell fraction was performed as described by Laemmli. Protein contents of cotyledon were increased 1.474 ㎍/mg.fr.wt. for MS media supplemented with 0.5 mg/L BA, while the contents were decreased 1.014 ㎍/mg.fr.wt. during adventitious root formation on MS media containing 3 mg/L IBA media. 64.7 KD, 58.8 KD, 32.7 KD and 28.8 KD were specifically synthesized during adventitious root formation from Cucumis sativus cotyledon culture. The adventitious root initials were originated from vascular cambium and phloem parenchyma tissue on MS media supplemented with 3 mg/L IBA for one day of culture. And then root primordia were made by three day of culture, and also adventitious root elongation toward the cotyledon epidermis after five days of culture.

      • KCI등재

        딸기 (Fragaria ananassa Duch.) 잎 절편체 배양으로부터 부정아 형성을 통한 식물체 재생

        조덕이,소웅영,정원일 한국식물생명공학회 2001 식물생명공학회지 Vol.28 No.3

        딸기의 기내대량번식 체계를 확립하기 위하여 딸기 잎절편체로부터 부정아 형성에 미치는 2,4-D, BAP, 한천, 자당 및 미오이노시톨의 영향에 관하여 실험하였다. 부정아 형성은 MS배지에 0.1 mg/L 2,4-D와 3 mg/L BAP, 0.4% 한천 첨가배지에서 가장 촉진적이었으며, 2,4-D 단독배지에서는 부정아 형성이 유도되지 아니하였다. 0.4% 한천을 첨가한 배지에서 부정아 형성은 1%한천 첨가배지에 비하여 약 3배가 촉진되었으나 투명화 현상이 심하였다. 따라서 딸기 잎 절편을 0.05mg/L 2,4-D, 1 mg/L BAP, 0.8% 한천,30 g/L 자당 및 100mg/L의 미오이노시톨에서 배양하였을 때 건전한 유식물체가 형성되었다. This study was investigated to establish a regeneration system of plant via adventitious bud formation from leaf explant cultures of strawberry (Fragaria ananassa Duch). Effects of plant growth regulators (2,4-D, BAP), agar sucrose and myo-inositol on adventitious bud formation were investigated. When the leaf explants were cultured on MS medium supplemented with 0.1 mg/L 2,4-D and 3 mg/L BAP, the adventitious bud formation was most promoted. The adventitious bud formation was not induced from leaf explants cultured on MS medium containing 2,4-D alone. Adventitious bud formation was enhanced to almost 3 times on medium with low level of agar concentration (0.4%) in comparison with those on the medium with high level of agar (1%), but almost of shoot was vitrificated on the medium. Therefore, the normal adventitious bud formation from leaf explants was most effective on the medium containing 0.05 mg/L 2,4-D,1 mg/L BAP, 0.8% agar, 30 g/L sucrose and 100 mg/L myo-inositol. Thus, the mass propagation of healthy strawberry could be established using leaf explants.

      • KCI등재

        천궁 (Cnidium officinale M.)의 화기절편으로부터 형성된 체세포배의 자엽구조와 발아

        조덕이,이은경,소웅영 한국식물생명공학회 2000 식물생명공학회지 Vol.27 No.2

        천궁 (Cnidium officinale)의 잎, 엽병 및 화기 외식편을 재료로 하여 2,4-D가 첨가된 배지에 배양하였을때 캘러스 형성은 어느 외식편에서나 비슷한 수준으로 유기되었지만 배형성능 캘러스는 화기유래 캘러스에서만 형성되었다. 체세포배발생의 유도는 2mg/L 2,4-D를 첨가한 MS배지에서 잘 일어났으며 2,4-D제거배지에서 계대배양하면 외식편당 78개의 체세포배가 형성되었다. 체세포배의 자엽수에 있어서 변이가 빈번하게 관찰되었으나 배지에 1% 활성탄을 첨가하면 비정상적인 자엽수를 갖는 체세포배의 발생률이 감소되는 효과를 얻을 수 있었다. 자엽기 체세포배는 MS 기본배지에서 저조한 발아율을 보이는 반면에 활성탄 첨가배지에서는 현저한 발아 향상을 보였다. Calli were induced from the explants of infloresence, petiole and leaf blade of Cnidium officinale on MS medium with 2.4-D, while embryogenic callus was induced only from inflorescence explants. Somatic embryos of 78 per explant were formed during subculture of the explants on medium without 2.4-D after culture on medium with 2 mg/L 2.4-D. Cotyledonary variation, cup-shaped cotyledon of 49% and other abnormal cotyledons of 13.5 % was observed on the somatic embryos. However this variation could be overcomed by the addition of activated charcoal onto culture medium. Somatic embryos at cotyledonary stage germinated on MS basal medium but the germination rate was very poor, blow 50 %. Somatic embryos on the medium with activated charcoal showed improved germinaton.

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