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        지황의 캘러스 배양에 의한 기내 대량증식

        박충헌,성낙술,백기엽,이철희 한국식물생명공학회 1998 식물생명공학회지 Vol.25 No.3

        지황(Rehmannia glutinosa)의 캘러스배양을 통한 기내 대량증식을 위하여 엽조직으로부터 캘러스 형성에 미치는 생장조절물질의 영향을 조사한 결과 MS배지에 0.5 mg/L NAA와 2.0 mg/L BA 첨가배지에서 캘러스 형성율 100%, 식물체 분화율 31%로 가장 높았으며, 2.4-D와 zeatin 첨가배지에서는 캘러스 형성율은 95% 이상 높았으나 기관분화가 전혀 이루어지지 않았다. 재분화 식물체로부터 다수의 신초 유기에 적합한 배지로는 MS배지에 0.2mg/L NAA와 0.5 mg/L BA를 첨가한 배지에서 3.4개와 2.8개로 양호하였다. 다수의 신초 증식을 위하여 1.0 g/L활성탄을 첨가한 배지에서 가장 많은 3.8개의 신초가 분화되었으나 2.0 g/L 첨가배지에서는 2.4개로 감소된 반면, 초장과 엽수는 증가하여 개체생육은 양호함을 알 수 있었다. Chinese foxglove (Rehmannia glutinosa) is receiving much attention as one of the principal medicinal crops and the crude drug damand expands rapidly.This study was conducted to obtain the basic breeding information of Chinese foxglove. Effects of supplemental plant growth regulators were investigated on leaf tissue for proliferation. 100% callus formation, 31% plantlet regeneration and 6% root differentiation were obtained by adding 0.5 mg/L NAA and 2.0 mg/L BA. 2,4-D and Zeatin treatment also resulted in 95% increase in callus formation, but shoot was not formed. During the subculture, callus propagation rate recorded 15.4% with 0.2 mg/L NAA and 1.0 mg/L BA and plant regeneration improved on MS medium supplemented with 0.2 mg/L NAA and 0.5 mg/L kinetin. The number of shoot formed ranged from 1.7 on WPM medium to 3.4 on MS medium with 0.1 mg/L NAA and 0.5 mg/L BA. Supplementation of 1.0 g/L activated charcoal improved the In vitro plant growth.

      • KCI우수등재

        산수유(山茱萸)(Cornus officinalisis)의 기내증식(器內增殖)에 관한 연구(硏究) I. 액아배양(腋芽培養)에 의한 Callus 유기(誘起), Shoot 증식(增殖) 및 뿌리 분화(分化)

        박충헌,성낙술,이승택,윤규복,손서규,Park, Chung-Heon,Seong, Nak-Sul,Lee, Seung-Tack,Youn, Kyu-Bok,Son, Su-Gyu 한국약용작물학회 1993 韓國藥用作物學會誌 Vol.1 No.1

        약용으로 널리 이용되는 산수유(Cornus officinalisis)의 기내육종을 위한 기초 연구로 액아배양을 통한 기내 대량증식 가성을 검토한 결과, 1) 액아 배양에 적합한 배지로는 MS 배지와 DKW 배지가 77%의 신초형성율을 보여 가장 양호하였고 WPM과 GD배지는 다소 저조하였다. 2) 얻어진 기내 Shoot의 증식에는 DKW가 6.8개의 신초를 형성하고 신초장이 4.5cm, 엽수도 10.8개로 가장 우수하였고 B5 > GD > MS >WPM의 순이었다. 3) Shoot 증식에 적합한 sucrose의 농도는 MS배지의 경우 3%가 좋았으며, 농도가 높아질수록 신초의 기내 생육에 제한적이었으며, 활성탄의 영향으로는 배지내 농도가 $2\;g\;/\;{\ell}$ 까지 증가할 수록 개체의 생육이 양호한 경향이었다. 4) MS배지의 경우 무기염류의 농도는 2MS에 비하여 1/4MS까지 낮아질수록 기내 생육에 적합하였다. 5) Shoot증식을 위하여 BA $0.5mg\;/\;{\ell}$에 auxin을 종류별로 혼합 첨가한 결과 2,4-D 첨가구의 경우 Callus의 생장이 가장 왕성하였으나 Shoot 증식에는 극히 제한적이었고, IAA와 IBA 처리는 Callus가 전혀 유기되지 않는 반면 multiple shoot가 형성되었으며, NAA에서는 Callus형성과 Shoot증식 이 모두 이루어졌다. 6) 신초의 기내 발근유도 시험에서는 MS매지에 NAA $0.5mg\;/\;{\ell}\;와\;BA\;0.5mg\;/\;{\ell}$를 첨가한 처리에서 신초로부터 정상근이 분화 되었으나 5% 비율로 낮았다. Present experiment were attempted to examine in vitro multiplication throughbud culture of Cornus officinalis. Bud derived shoot formation was established successfully on Murashige and Skoog's medium supplemented with $0.5mg\;/\;{\ell}$ BAP(N-benzyl amino purine). The shoot proliferation increased on the Driver Kuniyuki Walnut medium containing $0.5mg\;/\;{\ell}$ NAA(Napthalene acetic acid) and $0.5mg\;/\;{\ell}$ BAP. Addition of 2,4-D(2,4-Dichlorophenoxy acetic acid) to the media produced excessive callus inducton. IAA(Indole-3-acetic acid) and IBA (Indole-3-bu-tyric acid) enhanced multple shooting, and NAA showed callus induction and multiple shooting. Shoot growth was enhanced supplemented with 3% sucrose, $2g\;/\;{\ell}$ activated charcoal, and 1 / 4MS in organic salts. However, root formation of proliferated shoots was low about 5%

      • KCI우수등재

        산수유(山茱萸)(Cornus officinalisis)의 기내증식(器內增殖)에 관한 연구(硏究) 1 : 액아배양(腋芽培養)에 의한 Callus 유기(誘起), Shoot 증식(增殖) 및 뿌리 분화(分化)

        박충헌,성낙술,이승택,윤규복,손서규 한국약용작물학회 1993 韓國藥用作物學會誌 Vol.1 No.1

        약용으로 널리 이용되는 산수유(Cornus officinalisis)의 기내육종을 위한 기초 연구로 액아배양을 통한 기내 대량증식 가성을 검토한 결과, 1) 액아 배양에 적합한 배지로는 MS 배지와 DKW 배지가 77%의 신초형성율을 보여 가장 양호하였고 WPM과 GD배지는 다소 저조하였다. 2) 얻어진 기내 Shoot의 증식에는 DKW가 6.8개의 신초를 형성하고 신초장이 4.5cm, 엽수도 10.8개로 가장 우수하였고 B5 〉 GD 〉 MS 〉WPM의 순이었다. 3) Shoot 증식에 적합한 sucrose의 농도는 MS배지의 경우 3%가 좋았으며, 농도가 높아질수록 신초의 기내 생육에 제한적이었으며, 활성탄의 영향으로는 배지내 농도가 2 g / l 까지 증가할 수록 개체의 생육이 양호한 경향이었다. 4) MS배지의 경우 무기염류의 농도는 2MS에 비하여 1/4MS까지 낮아질수록 기내 생육에 적합하였다. 5) Shoot증식을 위하여 BA 0.5mg / l에 auxin을 종류별로 혼합 첨가한 결과 2,4-D 첨가구의 경우 Callus의 생장이 가장 왕성하였으나 Shoot 증식에는 극히 제한적이었고, IAA와 IBA 처리는 Callus가 전혀 유기되지 않는 반면 multiple shoot가 형성되었으며, NAA에서는 Callus형성과 Shoot증식 이 모두 이루어졌다. 6) 신초의 기내 발근유도 시험에서는 MS매지에 NAA 0.5mg / l 와 BA 0.5mg / l를 첨가한 처리에서 신초로부터 정상근이 분화 되었으나 5% 비율로 낮았다.

      • KCI등재후보
      • KCI등재

        지황 조직배양주의 수량성과 성분함량 특성

        박충헌,성낙술,김선규,백기엽 한국식물생명공학회 1999 식물생명공학회지 Vol.26 No.3

        지황 (Rehmannia glutinosa) 우량종묘 생산을 위하여 조직배양에 의해 생산된 종묘의 포장수량성을 평가하고 지표성분인 Catalpol과 유리당 함량 특성을 비교한 결과는 다음과 같다. 조직배양주의 종근저장성은 재래종에 비하여 약간 양호한 경향이었다. 또한 근장, 근경 등의 뿌리생육이 왕성하여 조직배양주의 수량성은 서천재래종 384kg/10 a에 비하여 1년차 묘는 112%, 2년차 묘는 246%까지 증수되는 결과를 보였다. 성분함량 특성비교에서는 총당함량이 서천재래 1.86%에 비하여 조직배양 1, 2년차 묘는 각각 1.21, 1.10%를 보였고, 지표성분인 Catalpol도 서천재래 0.46%에 비하여 조직배양 1, 2년차묘는 0.4%로 약간 감소되는 경향이었다. 이상의 결과에서 지황 조직배양주의 수량성은 재래종에 비하여 증수되는 특성을 보였다. 그러나 유리당과 Catalpol 함량은 약간 감소되는 경향이었는데 모본식물과 큰 차이를 보이지는 않았다. Chinese foxglove(Rehmannia glutinosa) is receiving much attention as one of the principal medicinal crops and the crud drug. This study was conducted to obtain the basic breeding information of Chinese foxglove derived from tissue culture. To compare plant characteristics between local variety and tissue cultured seedlings, plant growth and root yield has been investigated. In addition, catalpol and free sugar contents were also analized. The ability for the storage of root stock originated from tissue culture seedlings were better than that of local variety. The growth and root yield of in vitro propagated plants were superior to those of conventionally propagated plants. Root yield of 1-year-old and 2-year-old seedlings investigated 112% and 246% respectively than Seacheon local shows 384 kg/10 a. Although there were no significant different between tissue culture seedlings and conventionally propagated one, slight decline of component contents in tissue culture plants were still existed. Investigated sugar content among Seocheon local, 1-year-old tissue culture seedlings, and 2-year-old tissue culture seedlings were 1.86%, 1.21%, and 1.10% respectively. Catalpol content as one of standard materials indicates 0.46% in Seocheon local and 0.40% in tissue cultured ones.

      • KCI등재후보
      • KCI우수등재SCOPUS

        당귀 배양 소포자의 Flow Cytometric 특성

        박충헌,성낙술,유홍섭,피터포울 한국약용작물학회 1997 한국약용작물학회지 Vol.5 No.3

        당귀 반수체 육성의 기초차료를 얻고자 배양 소포자의 활력과 특성을 Flow cytometry로 관찰한 바 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 소포자 활력은 발육 시기에 따라 차이를 보여 배양 4일경에 4분자기 12.8%, 1핵성소포자기 49.3%, 2핵성소포자기 42.3% 및 성숙화분은 56.4%였다. 그리고 배양 20일 경에 는 소포자의 활력이 감소하여 배양중 배지개선과 계대배양이 요구됨을 알 수 있었다. 2. 발육시기에 따라 소포자 구조 peak가 다르게 조사되어 4 분자기는 원형을 보이다가 1~2핵성 소포자 부터 성속 화 분은 장타원형의 발달하는 특성을 띠었다. 3. 배양 소포자 중 살아서 생존한 소포자는 FDA 염색에 녹색 형광을 DAPI 염색에 청색형광을 발하여 활력이 있음을 알 수 있었다. To characterize active cells during microspore culture of Angelica gigas, flow cytometric and epifluorescent techniques were applied. The knowledge obtained from these types of studies will give us insight into early stage in plant development and may lead to the application of microspore-derived from haploid plants for breeding in recalcitrant species. Viability of cultured microspore differed depending on the developmental stages. Frequencies of active cells from tetrad, uni-nucleate, bi-nucleate and matured pollen were 12.8, 49.3, 42.3 and 31.7%, respectively. Alive microspores have luminescent the green fluorescence stained with FDA and blue fluorescence stained with DAPI.

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