단순균형전좌 46,XY, t(13p;17p) 태아의 산전진단 1 예

김세광(SK Kim),김인규(IK Kim),김미순(MS Kim),이명선(MS Lee) 대한산부인과학회 1989 Obstetrics & Gynecology Science Vol.32 No.11

분만력이 매우 불량하였던 산모에서 단순균형전좌 46,XY, t(13p;17p) 보인자임을 확인한 후 적절한 유전상담을 시행하였다. 양수천자에 의해 태아에서도 동일한 단순균형전좌가 잇음을 산전진단하엿으며 임신 40주에 정상 표현형의 영아를 분만시켰기에 간단히 문헌고찰과 함께 보고하는 바이다. A 27-year-old woman wa referred for genetic counseling because she had experinced three miscarriages and one live-born multiple anomalous baby. We karyotyped both partners. The mother was found to be a carrier of a simple balanced translocation . the formal karyotpye wa 46,XY, t(13p;17p) . Amniocentesis was performed at the 17th week of gestation . The fetus also was found to be a carrier of the identical translocation . A phenotypically normal male infant was delivery at the 40th week of gestation.

임산부 말초혈액에서 중합효소연쇄반은 ( PCR ) 을 이용한 태아의 성염색체 분석과 이의 산전유전 진단응용

송찬호(CH Song),양영호(YH Yang),김인규(IK Kim),김동욱(DW Kim),김미순(MS Kim),유향숙(HS Yoo),이미화(MH Lee) 대한산부인과학회 1995 Obstetrics & Gynecology Science Vol.38 No.3

산전유전검사를 받을 임산부 22예를 대상으로 이들의 말초혈액을 채취하여 Y chromosome-specific ZFY gene DNA sequence와 Y chromosome 단완의 DYS 14 locus에 위치한 Y-specific sequence를 nested polymerase chain reaction assay법으로 증폭하여 산전 태아 성(fetal sex)판정을 시도하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. ZFY 유전자의 primer인 Z1, Z2 및 Z3, Z4를 이용한 중합효소연쇄반응 결과, 여아 및 남아를 임신한 전예에서 양성띠가 나타나 비특이성을 보였다. 2. Y-chromosome DYS 14 locus의 sequence primer인 Y1.5, Y1.6 및 Y1.7, Y1.8 primer를 이용한 중합효소연쇄반응 결과, sensitivity는 76.9%, specificity는 55.5%였으며, positive 및 negative predictive value는 각각 71.4%와 62.5%였다. 이를 임신주수별로 분석하여 보면 임신 초기, 중기 및 말기의 positive predictive value는 각각 66.6%, 66.6%와 80%로, negative predictive value는 각각 50%, 50% 및 100%로 나타났으며, 임신 9-16주에는 여아를 임신한 임산부 중 남성 특이의 band가 나타나는 경우가 6예중 3예, 남아를 임신한 임산부 중 남성특이의 band가 나타나지 않는 경우가 7예중 3예로 낮은 신회도를 보였으나 임신 18-40주에는 남아인 경우 1예를 제외하고는 남성 특이 band가 나타났으며, 여아인 경우는 모든 예에서 198 base pair의 남성 특이 band가 나타나지 않았다. 저자들은 본 연구에서 모체 말초혈액에서 중합효소연쇄반응(PCR)을 이용한 태아의 성판정은 임신후기에는 가능하나 임신초기에 있어서는 그 신뢰도가 낮은 것으로 생각 된다. 따라서, 임신 초기 모체혈액내에 있는 태아세포만을 선별적으로 구별할 수 있는 방법을 이용하여 Y1.5, Y1.6 및 Y1.7, Y1.8 primer를 이용 PCR을 하면 정확한 태아의 성판정이 가능할 것으로 사료된다. 본 연구는 연세대학교 의과대학 교수연구비에 의해서 이루어짐 (1994년도). Objectives : Detection of Y-chromosome specific gene in the maternal circulation has clinical importance because of its potential usefulness in determining fetal sex in mothers with severe X-linked disorders such as classic hemophilia A and Duchenne`s muscular dystrophy. Numerous attempts have been made to identify Y specific gene in bloods of mothers bearing male fetuses, however, the results have been controversial. Therefore, we have investigated the use of a nested polymerase chain reaction assay for the detection of a fetal specific Y-chromosome sequence. Methods : Y chromosome specific ZFY gene DNA sequence(using Z1, Z2 and Z3, Z4 primers) and Y chromosome sequence in DYS 14 locus (using Y1.5, Y1.6 and Y1.7, Y1.8 primers) have been identified by an in vitro enzymatic deoxyribonucleic acid amplification method in peripheral blood specimens of 22 pregnant women with gestational ages of 9 to 40 weeks. Results : All women bearing male or female baby were positive for the ZFY gene. Thirteen fetuses were confirmed as males by amniocentesis or chorionic villi sampling, and 10 of these were positive for the Y chromosome specific sequence in DYS 14 locus using Y1.5, Y1.6 and Y1.7, Y1.8 primers(sensitivity 76.9%), however, 4 of the 9 cases diagnosed as females were also positive(specificity 55.5%). Positive and negative predictive values were 71.4% and 62.5%. In terms of the gestational age, positive predictive values of 66.6%, 66.6% and 80% were obtained for the first, second and third trimesters, respectively. The corresponding negative predictive values are 50%, 50%, and 100%, respectively. Conclusion : Fetal sex determination by PCR employing maternal peripheral blood is usually possible in late pregnancy. It is less reliable in early pregnancy. It appears that using a method separating fetal cells from maternal blood and then by running PCR on these cells with Y1.5, Y1.6 and Y1.7, Y1.8 primers could make a fairly accurate fetal sex determination.

FISH (Fluorescence in situ hybridization) 을 이용한 신속한 산전 염색체 이수성 (Aneuploidies) 진단

김진영,양영호,김인규,김미순,최은경 대한산부인과학회 1998 Obstetrics & Gynecology Science Vol.41 No.5

저자들은 산전 염색체검사에 있어서 FISH법의 임상적 유용성을 검증하고자 융모막 융모세포 및 양수세포, 제대혈 검사를 통해 얻은 태아 혈액세포를 이용하여 4개의 서로 다른 소식자를 적용, 세포분열 간기 및 중기의 태아 세포에서 염색체 이수성 검사를 실시해 본 결과 총 15예 전체에서 전통적인 세포 염색체 핵형 검사와 일치하는 고무적인 결과를 얻었으며 비록 이번 연구 결과가 증례수가 적어 그 유용성을 검증하기 위해서는 대규모의 전향성 연구가 필요할 것으로 보이나 앞으로 FISH법은 태아 염색체 이수성의 산전 진단에 있어서 신속하고 효과적인 보조적 수단으로 각광받을 것으로 보인다. Introduction: The traditional cytogenetic analysis requires relatively long cell culture time, intensive labour and trained personnel. But in clinical situations, the prenatal diagnosis of genetic disease and incidental finding of abnormal ultrasonographic finding need urgent decisions on future management. So we need more rapid and precise diagnostic tools of prenatal genetic counselling. The fluorescence in situ hybridization (FISH) has been studied for detecting chromosomal aneuploidies because this method can get rapid results of cytogenetic studies. Objectives: To evaluate the clinical utility of prenatal diagnosis of chromosomal aneuploidies by using FISH. Materials and methods: chorionic villi (n=6), amniotic fluid (n=7), fetal blood (n=2) were obtained from 15 pregnancies undergoing fetal karyotyping at 9 to 30 weeks of gestation for prenatal genetic counselling.Karyotyping was performed by both traditional cytogenetics and FISH, using commertially available kits. After the procedures, the results of FISH were compared with the results of traditional cytogenetic studies. Results: In a blind series of 15 samples all, including one case of trisomy 21, one case of trisomy 18 and one case of monosomy X, were correctly identified. Conclusions: FISH is a rapid and effective methods for detection of chromosomal aneuploidies in prenatal diagnosis and yields possible clue of fetal genetic diagnosis with pregnant maternal peripheral blood.

반복자연유산의 세포유전학적 연구

양영호,김세광,이창훈,김미순 대한산부인과학회 1990 Obstetrics & Gynecology Science Vol.33 No.4

본 연구는 1981년 7월부터 1987년 6월까지 6년간 연세대학교부속 유전학검사실에 의뢰된 3회이상의 반복자연유산을 주소로 하는 52쌍의 부부를 대상으로 하여 말초혈액의 임파구에 대한 염색체 분석을 시행하여 염색체 이상의 유형 및 빈도를 조사산출한 결과 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 염색체 이상 빈도는 총 52쌍 중 8예(부자 4예, 모친 4예)로서 15.4%를 나타내었다. 2. 8예 중 2예(3.8%)에서 tandem translocation이 모두 여성에서 발견되었다. 3. 부염색체이상은 1예의 inversion을 포함하여 14ps^+, 15ps^+, long Y 등의 6예가 발견되어 11.1%의 빈도를 나타냈다. 4. 발견된 염색체 이상 8예 중 6예가 3회유산경험쌍에서 나타났다. 이상의 결과로 보아 습관성반복유산을 호소하는 환자에게서 부부의 염색체 분석을 시행하는 것이 바람직하며, 또한 이들 부부의 경우 태아 손실의 6~16%가 부친 염색체의 이상으로 오기 때문에 장차의 임신에 대하여 산전 세포 유전학적 검사를 하는 것이 좋다고 하겠다. Karyotyping of peripheral blood lymphocytes was made of 52 couples with apparently normal phenotypes having a history of habitual abortion who had visited Yonsei University Medical Center from July 1982 to June 1987 in order to evaluate, if any, the frequency and types of chromosome abnormality. The overall incidence of chromosome abnormality was 15.4 percent (8 in 52). Tandem translocation was detected in the two, who were all females. There were six other abnormalities (11.1 percent) including one case each of inversion, 14ps^+, 15ps^+, and long Y. Sixty-two percent of the detected chromosomal abnormalities were from the couples with a history of habitual abortion, suggesting a positive correlation between chromosomal abnormality and the number of spontaneous abortion. Our findings support than karyotyping is worthwhile in couples presenting with a history of recurrent abortion.

산전 태아 수활액낭종 체액을 이용한 새로운 신속염색체 검사법

송찬호,양영호,조재성,김미순,민혜원 대한산부인과학회 1994 Obstetrics & Gynecology Science Vol.37 No.11

본 연구는 산전초음파로 임신 18주, 22주, 32주에 각각 진단된 수활액 낭종 3례를 대상으로 각각 낭종천자로 체액을 흡입 채취하여 새로 개발한 변형된 말초혈액 염색체 분석방법으로 처리하여 국내에서 최초로 96시간내 신속하고 정확한 염색체 결과를 얻을 수 있었다. 따라서, 임신중기 및 말기의 세포 유전학적 검사로서 비교적 쉽게 접근이 가능한 체액을 이용하여 태앙 핵형 분석을 함으로써, 기존의 염색체 검사를 대치할 수 있으며 태아 치료 및 분만방법 등 산과적 치료의 지표로 이용될 수 있을 것으로 사료된다. The Structural malfomation detected by antenatal ultrasonography at any gestational age warrants chromosomal analysis by various techniques. The traditional methods of amniocentesis, cordocentesis or placental biopsy have several disadvantages such as delayed rsults, technical difficulties and accessibility especially, during the second or third trimester. In certain circumstances such as cystic hygroma, hydrothorax or fetal ascites, fetal body fluid can be used as alternative cell sources for cytogenetic assessment. In this study 3 cases of fetal malformation were evaluated using fetal body fluid obtained from cystocentesis, for determination of fetal karyotype. Two of 3 cases showed 45,X and 46,XX/45,X. The cytogenic analysis from body fluid aspiration provides rapid and accurate results within 96 hours. As an alternative to traditional techniques, this method may be of great value when cordocentesis and placental biopsy would be technichally difficult or when time requirment for amniotic fluid cell culture is burden to patient management. This report suggests that fetal karyotyping from fetal body fluid may provide rapid cytogenetic diagnosis and gruidline to obstetric management in selected patients.

융모막 융모샘플링 : 첫 510 예의 임상적 분석

송찬호,양영호,김세광,박용원,조재성,김미순,정미정 대한산부인과학회 1993 Obstetrics & Gynecology Science Vol.36 No.7

1. 샘플링의 적응증은 모성연령 증가(advanced maternal age)가 전체의 31.2%로 가장 많았으며, 염색체이상의 아이를 분만한 기왕력이 26.1%, 그밖의 선천성 기형아를 분만한 기왕력이 19.4% 등의 순서였다. 2. 융모막 융모샘플링의 성공률은 총 510예중 496예로 97.3%로 나타났다. 3. 임신주수는 7-12주에 시행하였으며, 이중 9-10주가 56.3%로 가장 많았고, 11-12주가 38.0%,7-8주 가 5.7%였다. 4. 융모막 융모샘플링 횟수는 1회가 62.4%, 2회가 28.6%, 3회가 7.5%, 4회가 1.6%였다. 5. 재취된 융모의 양은 0-4mg이 14예, 5-10mg이 186예,11-20mg이 190예, 21-30mg이 88예, 31-40mg이 23예, 41-50mg이 9예있었다. 6. 한 개의 side당 metaphase수는 5-10mg이 10.4개, 11-20mg이 16.9개, 21-30mg이 18.0개, 31-40mg, 20.4개, 41-50mg이 20.5개로 채취된 융모의 양이 많을수록 metaphase 수도 다소 증가하였으나 융모의 양은 많아도 형태가 불완전 했던 2예에서 metaphase수가 적었고, 5mg미만의 적은 양으로도 양질의 충분한 metaphase를 얻은 등의 예외가 발견되기도 하였다. 7. 염색체 이상은 11예로서 2.2%였다. 8. 샘플링 후의 자연유산율은 총 510예중 14예로 2.7%였다. 이상의 연구결과를 종합하면, 임신초기 융모막 융모샘플링에 의한 산전 유전 검사방법은 비교적 안 전하고 진단에 신뢰성이 있으므로 현재 양수천자에 대치되어 사용되고 있으며 한국에서 점차 정착되어가고 있음을 알 수 있다. We report here our initial experience with 510 cases of Chorionic Villus Sampling(CVS)for first-trimester diagnosis of fetal genetic disorders at the YUMC in Kores. Five hundred and ten ongoing pregnant women underwent chorionic villus sampling(494 cases with transcervical and 16 cases with transabdominal)between 7-12gestational weeks. Advabcde maternal age was the most common indication for CVS(31.2%). The success rate of CVS was 97.3%. Majority of cases(91.0%)required one or two aspirations. The cytogenetic analysis routinely used was the direct overnight and long-term culture methods. Abnormal karyotype in 11 cases(2.2%)were found. Fetal loss rate was 2.7%. To date,375 of the women have been delivered and all infants are doing well and the remaining95 pregnancies are continuing uneventfully. There was no fetal anomaly related to CVS. We concluded that chorionic villus sampling is an acceptably safe and reliable procedure and its use has become standardized in Korea, in place of amniocentesis, for prenatal genetic diagnosis.