Experimental Infection for the Neutralization of White Spot Syndrome Virus(WSSV) in Wild Captured Sand Shrimp, Crangon affinis

Soo-Jung Gong(공수정),Yeong Jin Kim(김영진),Mi Ran Choi(최미란),Sung-Koo Kim(김성구) 한국생명과학회 2010 생명과학회지 Vol.20 No.9

흰반점바이러스(WSSV)는 새우양식산업에 막대한 경제적 손실을 일으키는 가장 치명적인 바이러스성 질병 원인체 중 하나이다. 본 연구는 인위적인 실험모델로서 WSSV에 대한 자주새우(Crangon affinis)의 감수성을 확인하고자 실험을 수행하였다. WSSV가 희석된 수조 내에서 침지법으로 감염된 새우는 감염 후 7일째에 100% 누적폐사율을 보여 자주새우가 WSSV에 대해 매우 높은 감수성을 갖고 있음을 확인하였다. 또한 재조합단백질인 rVP466에 대한 항혈청의 중화효과를 확인하기 위해 항혈청과 반응시킨 바이러스액(1×10⁴ 배로 희석된 WSSV)을 이용하여 침지법으로 자주새우에 대해 공격실험(challenge test)을 수행하였다. 실험 결과, WSSV로 challenge한 감염대조구(positive control)의 새우들은 감염 후 5일째에 100% 폐사하였으며, WSSV와 rVP466 항혈청을 1:0.01, 1:0.1, 1:1로 혼합한 액으로 challenge한 새우들은 감염 후 14일째에 각각 100%, 68.8%, 68.8%의 누적폐사율을 보였다. 따라서 본 연구 결과는 연안서식종인 자주새우가 양식장으로부터 배출된 WSSV에 의해 자연상태에서 감염될 수 있는 가능성과 함께 항혈청에 대한 중화효과를 나타냄으로써 겨울철 저수온기에 WSSV 감염을 위한 대체 실험생물로서의 유용성을 확인하였다. White spot syndrome virus (WSSV) is one of the most virulent viral agents threatening the penaeid shrimp culture industry. This study was carried out to evaluate the susceptibility of the sand shrimp, Crangon affinis, to WSSV as an alternative experimental model. WSSV caused 100% mortality in C. affinis within 7 days after experimental infection by immersion. Based on challenge studies, it was confirmed that C. affinis could be a potential host in WSSV transmission. Also, the neutralization of WSSV was carried out using an antiserum raised against recombinant envelop protein rVP466 to evaluate the WSSV infection mechanism. A constant amount of WSSV (at 1x10⁴ diluted stocks) was incubated with various amounts of antiserum and then mixed to 20 l reservoir for the immersion challenge of C. affinis for neutralization. At 5 days post challenge, the shrimp in the positive control immersed in the immersion reservoir containing WSSV stock showed 100% mortality. The shrimps challenged with the 3 different mixtures of WSSV and rVP466 antiserum (1:0.1, 1:0.5 and 1:1) showed 100%, 68.8% and 68.8% mortality at 14 days post challenge, respectively. These results indicated that the antiserum raised against rVP466 could block WSSV infection in C. affinis. Therefore, this study confirmed that C. affinis can be naturally infected by WSSV as another potential host and that C. affinis can be used as an alternative experimental animal instead of penaeid shrimps.

Production of the Antiserum against Recombinant Envelop Protein, rVP466 for the Neutralization of White Spot Syndrome Virus (WSSV)

Soo-Jung Gong(공수정),Yeong Jin Kim(김영진),Mi Ran Choi(최미란),Sung-Koo Kim(김성구) 한국생명과학회 2010 생명과학회지 Vol.20 No.10

본 연구는 WSSV의 재조합단백질 rVP466에 대하여 생산된 항혈청을 사용하여 WSSV에 대한 neutralization (중화) 효과를 확인하고자 수행하였다. 먼저 재조합단백질 rVP466의 생산을 위해 WSSV의 구성단백질 VP466을 암호화하는 유전자인 VP466을 포함하는 재조합 플라스미드 pCold-VP466을 제작한 다음 이것을 발현용 숙주인 E. coli RIPL에서 발현하였다. 발현된 rVP466에 대한 항혈청은 토끼를 사용하여 생산하였으며, 항원 rVP466에 대한 특이면역반응은 Western blot을 통해 확인하였다. WSSV에 대한 항혈청의 중화효과를 확인하기 위해 항혈청과 반응시킨 바이러스액(1×10⁴ 배로 희석된 WSSV)을 이용하여 실험용 새우(Penaeus chinensis)에게 주사 감염을 통해 공격실험(challenge test)을 수행하였다. 실험 결과, WSSV로 공격실험한 감염대조구(positive control)의 새우들은 감염 후 17일째에 100% 누적폐사율을 보였으며, preimmune serum과 WSSV의 혼합액을 challenge한 preimmune control의 새우들은 감염 후 25일째에 83%의 누적폐사율을 보였다. WSSV와 rVP466 항혈청을 1:0.01, 1:0.1, 1:1로 혼합한 액으로 challenge한 새우들은 감염 후 25일째에 각각 73%, 53%, 46%의 누적폐사율을 보였다. 이상의 결과를 통해 WSSV가 rVP466 항혈청에 의해 농도의존적으로 neutralization됨을 확인하였으며, 이는 WSSV 감염과정에 VP466이 관여함을 나타내는 것이다. This study was carried out to evaluate neutralization effects against WSSV using antiserum produced from recombinant envelop protein, rVP466 of WSSV. The VP466 gene of WSSV was cloned into pCold I expression vector and rVP466 was expressed in E. coli RIPL. The antiserum against rVP466 was produced in white rabbits (New Zealand white rabbit). The specific immunoreactivity to the antigen, rVP466, was confirmed by Western blot. The constant amounts of WSSV at 1×10⁴ diluted stocks were mixed with various antiserum concentrations and then injected to the muscle of shrimp, Penaeus chinensis, for the neutralization challenge. The shrimps challenged with WSSV as a positive control and those with the mixture of WSSV and preimmune serum as a preimmune control showed 100% cumulative mortality at 17 days post challenge and 83% at 25 days post challenge, respectively. The shrimps challenged with 3 different mixtures of WSSV and rVP466 antiserum at ratios of 1:0.01, 1:0.1 and 1:1 showed 73%, 53% and 46% cumulative mortalities at 25 days post challenge, respectively. These results indicated that WSSV could be neutralized by the rVP466 antiserum. These results suggest that envelop protein VP466 is involved in the initial step of WSSV infection in shrimp.

In vitro Synthesis of Ribonucleic Acids by T7 RNA Polymerase That was Fast Purified with a Modified Procedure

김기선,최우형,공수정,전숭종,김재현,오상택,김동은,Kim Ki-Sun,Choi Woo-Hyung,Gong Soo-Jung,Jeon Sung-Jong,Kim Jae Hyun,Oh Sangtaek,Kim Dong-Eun Korean Society of Life Science 2005 생명과학회지 Vol.15 No.5

세포 내에서 매우 적은 양으로 존재하는 RNA 전사체와 기능적으로 동일하거나 비슷한 RNA를 RNA 중합효소를 써서 in vitro에서 생화학적으로 의미 있는 양 만큼을 합성할 수 있다. T7 RNA중합효소를 발현하는 재조합 유전자를 지닌 대장균주 BL21/pAR1219로부터 순수한 T7 RNA중합효소를 손쉽게 얻는 방법을 본 논문에서 소개한다. 황산암모늄 분획화와 sephadex SP 컬럼 크로마토그래피법으로써 여타의 방법과 비교하여 더 간단하고 빠르게, 그리고 경제적으로 T7 RNA 중합효소를 분리할 수 있었다. 정제된 T7 RNA중합효소를 이용하여 보통의 화학적 합성법으로 불가능한 긴 길이(1.54 kb)의 RNA전사체를 합성 하였다. 한편,정제된 T7 RNA중합효소에 의해 생성된 망치머리 리보자임은 표적 RNA를 in vitro에서 절단함으로써, 생성된 RNA가 생화학적 기능성을 유지한다는 것을 입증하였다 따라서 본 연구에서 소개되는 절차들은 다양한 길이의 RNA를 목적에 따라 간단하고 경제적으로 합성하는데 유용하게 이용될 수 있다. Biochemical amounts of RNA molecules can be synthesized in vitro, which is functionally equivalent or similar to those transcripts normally existing at extremely low levels in vivo. In this study we described a method for efficient preparation of pure T7 RNA polymerase from Escherichia coli strain BL21/pAR1219. The procedure, which used ammonium sulfate fractionation and preparative column chromatography on sephadex SP, was shown to be simple, rapid, and cost effective in comparison with other methods reported previously, Using the purified T7 RNA polymerase we were able to synthesize very long RNA transcript of 1.54 kb length, which is not feasible by conventional chemical synthesis. RNA molecule that was also synthesized by the purified T7 RNA polymerase, such as hammerhead ribozyme, retained its biochemical activity by cleaving the target RNA successfully in vitro. Thus, the procedure shown in this study can be useful to synthesize any length of RNA molecules in vitro in a simple and cost effective way for a variety of purposes.

증례 : 만성중성구성백혈병 치료 중 발생한 직장암 1예

김세영 ( Se Young Kim ),공수정 ( Soo Jung Gong ),박대림 ( Dae Rim Park ),박지영 ( Ji Young Park ),이은영 ( Eun Young Lee ),채정돈 ( Jeong Don Chae ),양진혁 ( Jin Hyuk Yang ) 대한내과학회 2007 대한내과학회지 Vol.72 No.1S

국소병변없이 거대한 종격동 종괴로만 재발된 자궁경부암

이준석 ( Jun Seok Lee ),공수정 ( Soo Jung Gong ),주종은 ( Jong Eun Joo ),이정애 ( Jung Ae Lee ),김정선 ( Jeong Seon Kim ),안영수 ( Young Soo Ahn ) 대한결핵 및 호흡기학회 2006 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.60 No.6

Uterine cervical cancer is the 5th most common malignancy in Korean women. With the development of new diagnostic and therapeutic modalities, earlier stage cancers are being diagnosed with longer survival rates being anticipated. Accordingly, recurrent cancers are being encountered more often in clinical practice. Most recurrent uterine cervical cancer patients, have intra-pelvic lesions and adjacent lymph node involvement, while a distant metastasis alone is extremely rare. A mediastinal recurrence of uterine cervical cancer is not common with most manifesting as small lymph node enlargements. We report a case of a 46-year-old woman with recurrent uterine cervical cancer presenting only as a huge mediastinal mass without a local recurrence. (Tuberc Respir Dis 2006; 60: 684-689)

유방 침범을 동반한 원발성 자궁경부림프종 1예

김내유 ( Nae Yu Kim ),조인성 ( In Sung Cho ),공수정 ( Soo Jung Gong ),이미란 ( Mee Ran Lee ),박미자 ( Mee Ja Park ),임춘화 ( Chun Hwa Ihm ),이정애 ( Jung Ae Lee ) 대한내과학회 2008 대한내과학회지 Vol.74 No.4

자궁경부에서 발생하는 악성 림프종은 그 발생이 매우 드물고 질도말검사 등으로 진단이 어려우므로 진단이 늦어져 적절한 치료시기를 놓칠 수 있다. 질출혈, 골반동통 등의 자궁병변을 의심할 수 있는 증상을 보일때 림프종의 가능성을 염두에 두고 조직검사를 통한 조직학적, 면역학적인 확진이 필요하고, 이차 병소의 침범을 확인하기 위하여 양전자 방사 단층 촬영 등을 통한 정확한 병기 결정이 필수적이라 생각한다. 저자들은 성교 후 비정상 질출혈을 주소로 내원한 32세 여자 환자에서 유방 침범을 동반한 미만성 대세포형의 원발성 자궁경부림프종 1예를 경험하였기에 문헌고찰과 함께 보고하는 바이다. Primary lymphoma arising from the uterine cervix has been rarely encountered, and breast involvement is rare because of the relative paucity of lymphoid tissue in the breast. A 32-year-old woman with a primary malignant lymphoma of the uterine cervix and breast involvement is reported. The patient presented with post-coital vaginal bleeding, and punch biopsy of the cervix revealed the diffuse large B cell type of malignant lymphoma. PET-scan was done for staging, and abnormal FDP uptakes were detected in a uterine cervical mass and breast nodule. Ultrasonography-guided needle biopsy was done for the breast mass, and 2 biopsied nodules revealed fibroadenoma and diffuse large B cell lymphoma. The patient (Ann Arbor stage IV) was treated with 6 cycles of combination chemotherapy with CHOP plus rituximab. The patient went into complete remission. Thereafter, 4500cGy pelvic irradiation was done for adjuvant therapy.(Korean J Med 74:435-440, 2008)

철결핍성 빈혈과 동반되어 낮은 평균적혈구용적을 보인 비타민 B_l2 결핍성 빈혈 1례

이성배,김정희,황인후,김영훈,공수정,손향은 大韓血液學會 1998 大韓血液學會誌 Vol.33 No.3