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Expression, Purification and NMR Studies on MC4R-TM2 Mutant
오대석,이원태,윤지혜 한국자기공명학회 2012 Journal of the Korean Magnetic Resonance Society Vol.16 No.1
Melanocortin-4 receptor (MC4R) subtype is associated with obese humans. Especially, in a patient with severe early-onset obesity, novel heterozygous mutation in the MC4R gene was detected, resulting in an exchange of aspartic acid to asparagine in 90th amino acid residue located in the predicted second trans-membrane domain (TM2). Mutations in the melanocortin-4 receptor (MC4R) gene are the most frequent monogenic causes of severe obesity which have been described as heterozygous with loss of function. In order to compare structure difference between MC4R wild type (MC4R-TM2-wt) and mutant (MC4R-TM2-D90N), we designed both MC4R-TM2-wt and MC4R-TM2- D90N construct in pET 21b vector. In this study, we optimized high-yield purification procedure for recombinant TM2-D90N.Eluted recombinant protein was resolubilized under urea condition for thrombin cleavage reaction and we conducted the high-performance liquid chromatography (HPLC) with reverse phase column under 1% acetonitrile, 0.01% TFA buffer solution. The molecular size of purified target peptide was confirmed by Tricine-SDS page analysis. To characterize MC4R-TM2-D90N, we have performed 15N-isotope labeling of peptide using M9 media and purified labeled target peptide for hetero-nuclear NMR spectroscopy.
동일한 혈관 내에 발생한 이식형 약제 주입기 카테터의 위치이상
오대석,김영재,김명훈,조광래,임세훈,이정한,이근무,정순호,신치만 仁濟大學校 白病院 2010 仁濟醫學 Vol.31 No.-
저자들은 56세 여성 환자의 왼쪽 쇄골 하 정맥에 시행한 이식형 약제주입기 카테터의 삽입 후 발생한 비정상 위치에 대한 증례를 보고하고자 한다. 카테터의 끝은 환자의 늘 어진 가슴, 체위, 신체의 움직임, 카테터의 유동성 등의 영향으로 천자된 정맥 내에서 견인되고 뒤쪽으로 이동하였다. 환자는 어떠한 증상도 호소하지 않았지만 비정상 위치의 카테터는 심각한 합병증을 유발할 수 있기 때문에 제거되었다. 따라서 시술자는 약제주입기 삽입 전에 환자의 신체 상태와 단순 흉부 촬영상을 확인하고 카테터의 비정상 위치가 발생할 수 있는 위험 징후를 알아차려야 하겠다.