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        자궁경부암 유전자 치료를 위한 p53 종양 억제 유전자를 포함한 아데노 연관 바이러스벡터 (AAVCMVp53)의 제조

        김용욱 ( Kim Yong Ug ),서민제 ( Seo Min Je ),배수미 ( Bae Su Mi ),전진근 ( Jeon Jin Geun ),김태형 ( Kim Tae Hyeong ),진태영 ( Jin Tae Yeong ),이석우 ( Lee Seog U ),김용완 ( Kim Yong Wan ),김종국 ( Kim Jong Gug ),이준모 ( Lee Jun M 대한산부인과학회 2004 Obstetrics & Gynecology Science Vol.47 No.4

        목적: 재조합 아데노 연관 바이러스 rAAVCMVp53를 생산하기 위해서 3가지 플라스미드 pAAVp53, pAAVLacZ 벡터 플라스미드, packaging 플라스미드, helper 플라스미드를 사용하여 cotransfection 방법을 통해 아데노바이러스 오염이 없는 순수 rAAVCMVp53을 생산하고자 하였다. 연구 방법: 벡터 플라스미드 (pAAVp53, pAAVLacZ), AAV를 암호한 부분에 2개의 p5 promoter를 가지는 플라스미드 Objective: To eliminate the potential problem of adenovirus contamination during recombinant adeno-associated virus (rAAV) vector production, we investigated new rAAV production method by a triple transfection of vector plasmid, packaging plasmid, and ade

      • 한우 암소 도축 시 임신과 번식장애 및 질환에 따른 육질등급 분석

        소병선 ( Byeung Seon So ),김종국 ( Jong Gug Kim ) 전북대학교 농업과학기술연구소 2021 농업생명과학연구 Vol.52 No.1

        본 연구에서는 도축장에 출하하는 한우 암소에서 임신한 소의 빈도와 번식장애 및 질환 발생이 도체율과 육질등급 출현율 또는 출하 시기에 미치는 영향을 분석하기 위하여 수행하였다. 이 연구 결과를 효과적으로 활용함으로써 소 사육 농가 및 축산관계자에게 적절하게 정보를 제공하여 암소의 번식관리를 효율적으로 수행하여 농가소득 증가에 기여하는 자료를 제공 하고자 실시하였다. 충남에 소재한 B 도축장으로 2020년 1월부터 2020년 9월까지 출하한 한우 암소 3,390두를 대상으로 임신하지 않은 암소와 송아지를 임신한 임신우, 번식장애 또는 질환이 있는 암소를 비교하여 도축 후 도체율과 육질등급 출현율 또는 출하 개월령에 미치는 영향을 분석하였다. 이를 위해서 임신우에서 태반을 포함하는 태아의 무게와 도체율을 조사하였고, 난산 및 사산으로 인한 이상축과 질탈에서 육질등급의 분포, 자궁축농증과 프리마틴에서 출하 개월령의 분포를 파악하였다. 연구 결과 임신우의 태아 무게에 따라서 도체율의 분포에서 유의한 차이가 있었다 (p=0.007). 난산이나 사산이 발생한 암소의 경우에는 육질등급의 분포가 정상인 암소보다 낮았으며(p<0.001), 질탈의 경우에는 육질등급의 분포에 유의적인 차이가 없었다. 자궁축농증을 가진 암소와 프리마틴인 암소들의 출하개월령의 분포는 정상인 암소보다 유의적으로 빨랐다(p<0.001). 이 연구결과는 현재 상황에서 정상적인 비임신 암소와 임신한 한우 암소, 그리고 번식장애 및 질환을 가진 이상축에서 도축시 도체율과 육질등급의 분포 등에서 실제적인 차이가 발생하는 것을 제시하며, 경제적 손실을 줄이기 위해 철저한 번식관리가 필요함을 보여주고 있다. This study was conducted to determine the effects of pregnancy, reproductive disorder, and disease on the carcass rate, meat quality or age of slaughter. To utilize the data of the study fully, it was intended to be useful for the cattle farm and industry. So that the farmers can benefit from this information. Thus, it is beneficial to reproductive management and it may increase the income of the farm. The data were collected from 3,390 Hanwoo cows at the B slaughter house located in the Chungnam province. Cows were either non-pregnant, pregnant, or had reproductive disorder, or disease. In the pregnant cows, the weight of fetus including placenta were measured and the carcass rate was calculated. Cows with calving difficulty and stillbirth, and prolapse, the distribution of the meat grade was compared. Cows with vaginal prolapse and Freemartin, the distribution of the age of slaughter was determined. As a result, pregnant cows had statistically significant changes in their distribution of the carcass rates according to the fetus weight (p=0.007). Cows with calving difficulty and stillbirth, the distribution of the meat grade was lower (p<0.001), while cows with prolapse had no differences in the distribution of the meat grade. Age of slaughter in the cows with pyometra or Freemartin, was earlier than the normal, non-pregnant cows (p<0.001). In conclusion, this study demonstrates the differences in the distribution of carcass rate or meat grade between normal, non-pregnant cows and the cows that were pregnant or cows with reproductive disorder and disease. In order to reduce the economic losses, the reproductive management of cows needs to be thorough.

      • 한국 재래돼지, 중국 메산돈, 유럽돼지간의 OGT 유전자 길이 다형성 연구

        남윤석 ( Yoon Seok Nam ),김두완 ( Doo Wan Kim ),김명직 ( Myoung Jik Kim ),조규호 ( Kyu Ho Cho ),김종국 ( Jong Gug Kim ) 한국동물자원과학회(구 한국축산학회) 2015 축산기술과 산업 Vol.6 No.2

        한국 재래돼지는 일반적으로 약 2000년 전 중국 북부지방을 거쳐 한반도로 유래 되었다고 생각된다. 재래돼지는 그 수가 급격히 감소하여, 1980년대에는 멸종의 위기에 처하기도 하였다 복원을 위한 노력으로 재래돼지는 2008년에 품 종으로 등록되었다. 돼지에서 품종특이적 마커를 추가로 발견하기 위하여 O-linked N-acetylglucosarnine transferase (00η 유전자의 변이를 연구하였다. OGT 유전자는 X 크로모좀에 위하고 있으며, OOT는 표적 단백질에 0-1 inked-β -N-acetylglucosamine을 추가히는데 촉매 역할을 수행하는 효소이다.OGT 유전자의 20번 Lntron에서 돼지의 품종간 에 길이의 다형성 (length polymorphism)이 확인되었다 Duroc, Landrace, Yorkshire 품종(BB 유전자형)에서는 재래 돼지나 중국 메산돈(AA 유전자형)에 비해 20번 IIIπon 이 281-bp 더 길었다 유럽종 돼지에서 281-bp의 insertion이 일어난 것으로 사료된다. 추가 분석결과 재래돼지는 OGT 유전자의 AA, AB, BB 유전자형을 포함하여, 이 좌위가 고 정되지 않은 것으로 판단된다 재래돼지의 OGT 유전자형을 확인한 후에 유럽종과의 교잡종을 생산하면, 자손들의 OGT 유전자형에 따라서 X 크로모좀이 어느 품종에서 기원하는지를 확인하는데 도움이 될 것으로 사료된다.

      • KCI등재

        인유두종 바이러스의 발암성 단백질의 발현을 저해하는 Trans Attack 항암성 유전자 백신의 개발

        이희중 ( Lee Hui Jung ),이성아 ( Lee Seong A ),김현정 ( Kim Hyeon Jeong ),김재훈 ( Kim Jae Hun ),유영옥 ( Yu Yeong Og ),이진옥 ( Lee Jin Og ),김용완 ( Kim Yong Wan ),안웅식 ( An Ung Sig ),김종국 ( Kim Jong Gug ),이준모 ( Lee Jun M 대한산부인과학회 2004 Obstetrics & Gynecology Science Vol.47 No.2

        목적 : 자궁경부암을 일으키는 것으로 알려진 인유두종 바이러스의 종양단백질 E6을 직접 저해하기 위하여 아데노 연관바이러스 (adeno-associated virus; AAV)의 Rep78유전자를 이용, E6의 작용을 차단함으로써 자궁경부암 세포성장의 억제에 이용하고자 하였다. 연구 방법 : 아데노 연관바이러스에서 유래된 Rep78유전자를 클로닝하여 pcDNA3.1/V5/His-Topo/Rep78벡터를 제작, 이를 자궁경부암 세포주에 이입시켰다. Rep78 유전자 이입 후 인유두종 바이러스에 의한 종양단백질 E6 mRNA의 발현을 보았으며 자궁경부암 세포성장 억제를 측정하였다. 결과 : CaSki, SiHa 세포주에서 Rep78 벡터에 의한 이입율은 30-60% 이었으며, 이입 24시간 후 제일 높은 발현이 나타났다. Rep78의 발현 후 세포 성장억제 실험 결과 자궁경부암 CaSki와 HeLa에서는 4일째에 세포성장을 억제하는 것을 보였으나, 그 외의 자궁경부암 세포주에서는 뚜렷한 차이를 보이지 않았다. 결론 : Rep78에 의한 세포내의 높은 이입율과 발현에도 불구하고 자궁경부암 세포주의 성장저해 효과는 나타나지 않았다. 아데노 연관바이러스를 이용한 자궁경부암의 치료에 있어서 Rep78의 발현을 오랜 시간 동안 지속시키는 전략이 필요하다. Objective : Adeno-associated virus Rep 78 protein is known to inhibit the promoter site of several onco-genes and viral gene, including the human papillomavirus type 16 E6 transforming genes. In this study, we investigated AAV Rep 78 mediated inhibition of HPV 16 E6 promotor activity. Methods : pcDNA3.1/V5/His-topo vector, cloned by AAV mediated Rep 78, is transfected into cervical cancer cell line (Caski). After that, we confirmed HPV 16 derived E6 expression and cell growth inhibition. Results : Transfection rate of Rep78 GFP-vector, approximately from 30 to 60 per-cent, is highly expressed at first day. But E6 expression is lower at this day. The growth of CaSki and HeLa cervical cancer cell lines was inhibited by Rep78 (p<0.05). But, the other cervical cancer cells lines was inhibited by Rep78 (p<0.05). But, the other cervical cancer cells were unaffected by Rep78 transfection. Conclusion : In spite of the high Rep78 transfection efficiency and expression rate, we could not show the cervical cancer cell growth inhibition. In our data, long term expression of Rep78 strategy is needed for cervical carcinoma gene therapy using adeno-associated virus vector.

      • KCI등재

        유전 및 육종 : MC1R 유전자의 유전자형과 칡소의 모색 발현 및 비경색 분포에 관한 연구

        박재희 ( Jae Hee Park ),이해이 ( Hae Lee Lee ),김용수 ( Yong Su Kim ),김종국 ( Jong Gug Kim ) 한국동물자원과학회(구 한국축산학회) 2012 한국축산학회지 Vol.54 No.4

        본 연구는 PCR-RFLP 기법으로 칡소의 모색 발현에 관련된 MC1R 유전자형을 분석하고, 칡소 유전자형에 따른 모색 발현 양상을 가계와 교배조합을 통하여 연구함으로써 칡소에서 호반모의 발현 비율을 증가시키는 번식 체계를 확립하고자 수행하였다. 전라북도축산위생연구소에서 사육중인 칡소 중에서 부계 또는 모계를 알고 있는 가계가 형성된 칡소로부터 혈액 또는 정자에서 genomic DNA를 추출한 후 MC1R 유전자를 증폭하였다. 증폭된 PCR product를 MspI 제한효소로 절단하고 전기영동한 후 칡소 개체별 유전자형을 확인하였고, 이 외에도 칡소의 모색 양상과 비경의 흑색침착 정도에 따른 모색 발현 비율을 조사하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 칡소의 모색 발현 양상은 전신호반모가 61.67%로 가장 높았고 흑모는 5.00%로 가장 낮았으며 황모는 16.67%, 부분(약반신)과 부분(일부) 호반모는 각각 8.33%로 같은 분포 양상을 보였다. 칡소의 비경 침착 양상은 3단계와 4단계가 비슷한 비율로 높았고, 다음이 2단계, 5단계, 1단계의 순이었다. 칡소의 비경에 따른 모색 발현 양상은 비경 침착이 3단계와 4단계인 칡소에서는 전신호반모의 비율이 다른 모색 보다 높았고, 비경 침착이 1단계인 칡소는 그 중에서 황모가 80.00%(4/5)로 나타났으며, 비경 침착이 5 단계인 칡소에서는 다른 단계에서 발현되지 않았던 흑모의 비율이 37.50%를 나타냈다. 칡소에는 E+E+, E+e, ee 유전자형과 한우에는 ee, E+e 유전자형이 존재하였다. 칡소 MC1R 유전자형은 E+e 이 65.00%로 가장 높았고 E+E+은 33.33%이었고 ee도 1두로 1.67%이었다. 유전자형에 따른 모색 발현 양상을 보면, E+E+과 E+e에서는 전신 호반모의 비율이 가장 높게 나타났고 ee는 황모를 나타냈다. 칡소의 가계 분석을 통한 모색 발현 양상을 조사한 결과, 부(Sire)의 유전자형이 E+e 이고 모(Dam)의 유전자형이 E+E+ 이면서 부모의 모색이 모두 전신호반모일 경우 자손의 모색은 100.00% 전신호반모였고, 부(Sire)의 유전자형이 E+E+ 이고 모(Dam)의 유전자형이 E+e 이면서 부모의 모색이 모두 전신호반모일 경우도 자손에서 모색의 44.44%가 호반모의 비율을 보여 두 가지의 교배조합의 경우가 자손의 전신호반모 비율을 높이는 최적의 교배 조합으로 보여진다. 이 연구의 결과를 이용하여 칡소로 판정받을 수 있는 가장 중요한 요소인 호반모의 발현비율을 증가시키는 번식 체계를 칡소 사육농가에 제시할 수 있을 것으로 사료된다. The objectives of this study were to investigate MC1R genotype, coat color, and muzzle phenotype variationsin the Korean native brindle cattle(KNBC) maintaining family lines and to establish the mating system for increased brindle coat color appearance. KNBC with genotype and phenotype records were selected as experimental animals. The relationship between melanocortin 1 receptor(MC1R) genotypes, verified by PCR-RFLP, and brindle coat color appearance was determined. Fragments of the MC1R gene amplified by PCR were digested with MspI and RFLP was determined. KNBC had E+E+, E+e, and ee genotypes. The E+e genotype was most common with 65%, compared to E+E+(33.33%), or ee(1.67%). When the sire had E+e genotype and the dam had E+E+ genotype, and both of them had the whole body-brindle coat color, all of their offspring(4/4) had whole body-brindle coat color. When the sire had E+E+ genotype and the dam had E+e genotype, and both had whole body-brindle coat color, 44.44%(4/9) of the offspring had whole body-brindle coat color. The mating between the sires and dams with these two genotypes with whole body-brindle coat color may have the highest whole body-brindle coat color appearance in their offspring. Muzzle grades 3 or 4 were more common than other muzzle grades. This is the first report indicating the segregation of MC1R genotypes and the inheritance of coat color through family lines in KNBC. The mating system proposed from this study may increase the possibility of brindle coat color appearance in KNBC.

      • KCI등재

        개 parthenote in vitro culture시 EDTA 첨가에 의한 발달율 향상

        정해윤,노진구,이휘철,위하연,옥선아,우제석,허태영,임기순,김종국,이승훈,Jeong, Haeyun,Zhao, Minghui,No, Jin-Gu,Ullah, Imran,Lee, Whi-Cheul,Wi, Hayeon,Ock, Sun A,Hur, Tai-young,Woo, Jae-Seok,Im, Gi-sun,Kim, Jong-Gug,Lee, Seunghoon 한국수정란이식학회 2018 한국동물생명공학회지 Vol.33 No.3

        Somatic cell nuclear transfer (SCNT) is a useful biotechnological tool for animal cloning. Until now, SCNT has been inefficient, especially in dog. It is believed that an embryo developmental block in SCNT embryos is cause of low production efficiency. However, no studies have been performed on canines for embryo developmental block. In this study, we attempted to evaluate the beneficial role of EDTA in canine parthenogenic (PA) embryos development to overcome embryo developmental block. The PA embryos were divided into 0.01 mM EDTA treated and non-treated groups. Embryo developmental efficiency was measured by activating chemically parthenote. After EDTA induction, PA embryos were evaluated for embryonic development, Reactive Oxygen Species (ROS) activity, mitochondrial integrity, ATP production and genomic activation. The EDTA treated PA embryos showed significantly higher survival rate and improved cavity formation compared to non-treated. Furthermore, cytoplasmic ROS level was mitigated and mitochondrial membrane potential was found significantly higher in EDTA treated group followed by higher ATP production. Moreover, major embryonic genomic activation specific markers/factors were also elevated in EDTA treated group. Conclusively, we elucidated that EDTA showed substantially positive effect to overcome embryo developmental block in canine.

      • KCI등재

        난소암 세포주에서 녹차 추출물의 항암 작용

        허승원 ( Heo Seung Won ),배수미 ( Bae Su Mi ),한찬희 ( Han Chan Hui ),최지향 ( Choe Ji Hyang ),김종국 ( Kim Jong Gug ),박은경 ( Park Eun Gyeong ),노덕영 ( No Deog Yeong ),이준모 ( Lee Jun Mo ),남궁성은 ( Nam Gung Seong Eun ),안웅식 대한산부인과학회 2004 Obstetrics & Gynecology Science Vol.47 No.4

        목적: 세계적으로 가장 널리 소비되고 있는 기호식품 중 하나인 녹차는 항당뇨, 항고혈압 및 항암효과가 뛰어난 것으로 알려져 있다. 본 연구는 녹차의 구성성분인 epigallocatechin-3-gallate (EGCG)가 난소암 세포주들에서 세포 성장 억제 효과, 세포주기 변화 및 세포사멸 효과를 확인하고, 세포주기 관련 유전자와 단백질의 발현 변화를 조사하여 항암 효과를 확인하고자 하였다. 연구 방법: 난소암 세포주들에서 EGCG에 의한 항암효과를 확 Objective: A constituent of green tea, (-)-epigallocatechin-3-gallate (EGCG), has been known to possess anti-diabetes, anti-hypertension and anti-cancer properties. In this study, we investigated the anticancer effects of EGCG on human ovarian cancer cell

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