Effects of Cyclobuxine D on Carrageenin-induced Pleurisy and Croton Oil-induced Granuloma Pouch in Rats

이종화,박영현,조병헌,김유재,김종배,김정목,김천숙,차영덕,김영석,Lee, Jong-Hwoa,Park, Young-Hyun,Cho, Byung-Heon,Kim, Yu-Jae,Kim, Jong-Bae,Kim, Chung-Mok,Kim, Chun-Sook,Cha, Young-Deog,Kim, Young-Suk The Korean Society of Pharmacology 1987 대한약리학잡지 Vol.23 No.2

Steroidal alkaloid인 cyclobuxine D의 carrageenin으로 유발한 늑막염과 croton oil로 유발한 육아종양에 대한 영향을 관찰하고 그 작용을 aspirin, dexamethasone과 hydrocortisone의 작용과 비교하였다. Carrageenin으로 유발한 늑막염에서 혈장 삼출정도는 pontamine sky blue을 정맥으로 투여하여 20분 동안 늑막염 삼출물로 삼출되어 나오는 양으로 측정하였다. Cyclobuxine D는 용량적으로 삼출물의 양과 20분 동안 삼출되는 pontamine sky blue의 양을 감소시켰다. Cyclooxygenase 억제제인 aspirin과 phospholipase $A_2$를 억제하여 결과적으로 cyclooxygenase와 lipoxygenase의 생성물을 차단하는 dexamethasone은 현저하게 carrageenin으로 나타나는 염증현상을 억제하였다. Cyclobuxine D는 croton oil로 유발한 육아종양에서 종양 부위에 직접 투여하거나 근육내로 투여해도 pouch내 염증물 양과 pouch wall의 무게를 현저하게 억제하였다. Dexamethasone과 hydrocortisone은 육아종양의 형성을 현저히 억제하였으며 , dexamethasone은 근육내로 투여 하였을 때 육아종양 형성을 완전히 억제하였다. 이상의 결과에서 나타난 cyclobuxine D의 항염증 작용은 prostaglandins의 생성억제 또는 polymorphonuclear cell (PMN)의 유주 억제와 밀접한 관련이 있을 것으로 사려된다. Cyclobuxine D, a steroidal alkaloid, was extracted from Buxus microphylla var. koreana Nakai. The effects of cyclobuxine D on carrageenin-induced pleurisy and croton oil-induced granuloma pouch in rats was investigated and compared with those of aspirin, hydrocortisone ana dexamethasone. Intrapleural injection of 2% carrageenin caused the accumulation of exudate. The rate of plasma exudation, measured by the exuded dye amounts for 20 min in the pleural cavity after intravenous injection of pontamine sky blue, showed a peak at 5 hr. Cyclobuxine D (5, 20 and 50 mg/kg, i.p.) suppressed dose-dependently the accumulation of the pleural exudate and the exudation of dye. Among several methods used for screening and evaluation anti-inflammatory agents, granuloma pouch technic introduced by Hans Selye (Hans seyle, 1953) is considered as a simple and reliable method. An air pocket was produced in the subcutaneous tissue of the interscapular region by injection of 1 ml of 1% croton oil as irritant. Inflammatory exudate accumulated in the pouch during the succeding 14 days. Cyclobuxine D (5 and 20 mg/kg) decreased fluid volume in pouch and weight of pouch wall in granulomatous inflammation.

Effects of Cyclobuxine D on the Biosynthesis of Prostaglandins in Vitro, Prostaglandins Production and Leukocyte Migration in Vivo

이종화,박영현,조병헌,김유재,김종배,김정목,김천숙,차영덕,김영석,Lee, Jong-Hwoa,Park, Young-Hyun,Cho, Byung-Heon,Kim, Yu-Jae,Kim, Jong-Bae,Kim, Chung-Mok,Kim, Chun-Sook,Cha, Young-Deog,Kim, Young-Suk The Korean Society of Pharmacology 1987 대한약리학잡지 Vol.23 No.1

Cyclobuxine D was extracted from Buxus microphylla var. koreana Nakai. The effects of cyclobuxine D on the biosynthesis of prostaglandins from arachidonic acid in guinea pig lung, prostaglandin production and leukocyte migration in carrageenin-induced inflammation was investigated. These effects of cyclobuxine D were compared with those of aspirin and dexamethasone. Cyclobuxine D does not inhibit significantly cyclooxygenase in guinea pig lung but reduces prostaglandin concentration and leukocyte migration in inflammatory exudates. These effects of cyclobuxine D differ from that of aspirin which inhibits biosynthesis of prostaglandin in vitro and has a relative small effect on leukocyte migration. Dexamethasone, which does not inhibit cyclooxygenase in vitro, has an effect similar to that of cyclobuxine D on leukocyte migration and prostaglandin production in inflammatory exudates. 본 실험실에서는 회양목(Buxus microphylla var. koreana Nakai)으로 부터 steroid성 alkaloid인 cyclobuxine D를 분리하였고, 그의 여러 약리작용을 검색하고 있다. 본 연구에서는 cyclobuxine D의 guinea pig lung homogenate에서 prostaglandins의 합성에 미치는 영향과 carrageenin으로 유도한 염증에서 prostaglandin의 합성과 백혈구 유주에 대한 영향을 관찰하였다. Cyclobuxine D (up to 100ug/ml)는 guinea pig lung homogenate에 의한 prostaglandins 합성에 대해서는 현저한 영향이 없었으나, 20mg/kg에서 carrageenin으로 유도된 염증에서 prostaglandin의 합성과 백혈구 유주에 대해 현저한 억제작용을 나타낸다. Aspirin은 vivo와 vitro에서 prostaglandin의 합성을 억제하나, 염증 삼출물에서 백혈구 유주에 대해서는 영향이 거의 없다. Dexamethasone은 vitro에서 외인성 arachidcnic acid를 기질로 가했을때는 prostaglandin 합성에 대해 영향이 없었고 carrageenin으로 유도된 염증에서 prostaglandin의 합성과 백혈구 유주를 억제하였다. 이상의 결과로 cyclobuxine D의 항염증작용은 phospholipase $A_2$ activity를 저해하여 항염증 작용을 나타내는 것으로 사료되는 corticosteroid와 유사한 것으로 추정된다.

Effects of Cyclobuxine D on Drug-Induced Contractions of the Isolated Rat Uterine Muscle and Potassium-Activated Calcium Channels in an Intestinal Smooth Muscle

권준택,이종화,박영현,조병현,최규홍,김유재,김종배,김정목,김천숙,차영덕,김영석,Kwon, Jun-Tack,Lee, Jong-Hwoa,Park, Young-Hyun,Cho, Byung-Heon,Choi, Kyu-Hong,Kim, Yu-Jae,Kim, Jong-Bae,Kim, Chung-Mok,Kim, Chun-Sook,Cha, Young-Deog,Kim, Y The Korean Society of Pharmacology 1988 대한약리학잡지 Vol.24 No.1

Buxus microphylla var. koreana Nakai에 존재 하는 steroidal alkaloid인 cyclobuxine D는 흰쥐에 있어 심박동수 감소 작용, 적출 개구리 심장에서 수축력 감소작용, 토끼 적출 장관에서 acetylcholine과 $Ba^{++}$.에 유발되는 수축에 대한 억제작용 등을 나타낸다고 보고되었다. 본 연구에서는 흰쥐 적출 자궁에서 acetylcholine, oxytocin과 $Ba^{++}$에서 의해 나타나는 수축 작용에 대한 cyclobuxine D의 영향을 관찰하였으며, 또 흰쥐 적출장관에서 칼륨에 의해 활성화되는 칼슘채널에 대한 cyclobuxine D의 작용을 관찰하였다. Cyclobuxine D는 흰쥐 적출 자궁에서 acetylcholine, oxytocin과 $Ba^{++}$에 의해 증가되는 peak tension과 duration을 용량적으로 현저히 억제하였다. Cyclobuxine D는 oxytocin보다 acetylcholine에 의해 나타나는 수축작용에 대해 강하게 작용했다. 흰쥐 적출 장관(ileum)을 Ca을 고갈시킨 Tyrode's 용액에 $40{\sim}50$분 담그고 $Na^+$ 대신 $K^+$로 대체시킨 용액에 10분간 담근 후 1.8 mM $CaCl_2$를 가했을 때 이중적인 근육수축작용이 나타난다(Phasic and tonic increase in tension). Cyclobuxine D $(6.2{\times}10^{-5}\;M)$은 이 두 components를 유의하게 억제하였으며 tonic component가 최대치에 도달했을 때 cyclobuxine D $(3.1{\times}10^{-4}\;M)$을 가하면 근육은 긴장도를 빨리 상실했다. 이 결과는 적출 장관에 있어 칼륨에 의해 활성화되는 칼슘 채널이 cyclobuxine D에 의해 차단되고 있음을 나타낸다. 이상의 결과에서 cyclobuxine D의 흰쥐 적출 자궁에 대한 수축 억제 작용은 voltage-dependent calcium channel 차단에 밀접한 관련이 있는 것으로 사려된다. Cyclobuxine D, extracted from Buxus microphylla var. koreana Nakai, is a steroidal alkaloid. Many pharmacological effects of cyclobuxine D were examined in our Lab. Cyclobuxine D showed a significant bradycardic effect in the rat heart and an inhibitory action on acetylcholine and $Ba^{++}-induced$ contraction of the longitudinal muscle isolated from the rabbit jejunum. In this study, we investigated the effect of cyclobuxine D on the contractile response-elicited by acetylcholine, oxytocin and $Ba^{++}$ in rat uterine. In order to analyse the inhibitory action of cyclobuxine D on the smooth muscle, we examined the inhibitory action of cyclobuxine D against the contractile response of the high potassium-depolarized rat ileum to calcium. Concentration-dependent decrease in the peak tension and duration of the acetylcholine, oxytocin and $Ba^{++}-induced$ contraction in the isolated rat uterus was observed when cyclobuxine D was added to the organ bath. The isolated longitudinal muscle from the rat ileum was immersed calcium-depleted potassium-depolarizing solution. Ten minutes after, 1.8 mM $CaCl_2$ was added to muscle bath and elicited a biphasic increase in muscle tension. Cyclobuxine D $(6.2{\times}10^{-5}\;M)$ produced an appreciable inhibition of both components of the mechanical response. In addition, $3.1{\times}10^{-4}\;M$ cyclobuxine D, introduced at a point when the tonic response had reached its maximum level, caused the muscle to exhibit a rapid lose of tension. Based on these experimental results, we propose the possibility that the inhibitory action of cyclobuxine D on the acetylcholine, oxytocin and $Ba^{++}-induced$ contraction in the isolated rat uterus may be due to blocking potassium-activated calcium channels, voltage-sensitive calcium channels.

Cyclobuxine D의 prostaglandin 합성과 백혈구 유주에 미치는 영향

이종화(Jong-Hwoa Lee),박영현(Young-Hyun Park),조병헌(Byung-Heon Cho),김유재(Yu-Jae Kim),김종배(Jong-Bae Kim),김정목(Chung-Mok Kim),김천숙(Chun-Sook Kim),차영덕(Young-Deog Cha),김영석(Young-Suk Kim) 대한약리학회 1987 대한약리학잡지 Vol.23 No.1

본 실험실에서는 회양목(Buxus microphylla var. koreana Nakai)으로 부터 steroid성 alkaloid인 cyclobuxine D를 분리하였고, 그의 여러 약리작용을 검색하고 있다. 본 연구에서는 cyclobuxine D의 guinea pig lung homogenate에서 prostaglandins의 합성에 미치는 영향과 carrageenin으로 유도한 염증에서 prostaglandin의 합성과 백혈구 유주에 대한 영향을 관찰하였다. Cyclobuxine D (up to 100ug/ml)는 guinea pig lung homogenate에 의한 prostaglandins 합성에 대해서는 현저한 영향이 없었으나, 20mg/kg에서 carrageenin으로 유도된 염증에서 prostaglandin의 합성과 백혈구 유주에 대해 현저한 억제작용을 나타낸다. Aspirin은 vivo와 vitro에서 prostaglandin의 합성을 억제하나, 염증 삼출물에서 백혈구 유주에 대해서는 영향이 거의 없다. Dexamethasone은 vitro에서 외인성 arachidcnic acid를 기질로 가했을때는 prostaglandin 합성에 대해 영향이 없었고 carrageenin으로 유도된 염증에서 prostaglandin의 합성과 백혈구 유주를 억제하였다. 이상의 결과로 cyclobuxine D의 항염증작용은 phospholipase A₂ activity를 저해하여 항염증 작용을 나타내는 것으로 사료되는 corticosteroid와 유사한 것으로 추정된다. Cyclobuxine D was extracted from Buxus microphylla var. koreana Nakai. The effects of cyclobuxine D on the biosynthesis of prostaglandins from arachidonic acid in guinea pig lung, prostaglandin production and leukocyte migration in carrageenin-induced inflammation was investigated. These effects of cyclobuxine D were compared with those of aspirin and dexamethasone. Cyclobuxine D does not inhibit significantly cyclooxygenase in guinea pig lung but reduces prostaglandin concentration and leukocyte migration in inflammatory exudates. These effects of cyclobuxine D differ from that of aspirin which inhibits biosynthesis of prostaglandin in vitro and has a relative small effect on leukocyte migration. Dexamethasone, which does not inhibit cyclooxygenase in vitro, has an effect similar to that of cyclobuxine D on leukocyte migration and prostaglandin production in inflammatory exudates.

혈연간 동종 조혈모세포 이식 후 이식편대숙주질환과 함께 발생한 급성 호산구성 폐렴

박환성 ( Hwan Sung Park ),옥태진 ( Tae Jin Ok ),김유재 ( You Jae Kim ),김광운 ( Guang Un Kim ),박소은 ( So Eun Park ),안지현 ( Ji Hyun An ),김윤구 ( Yun Ku Kim ),정재호 ( Jae Ho Jeong ),김수정 ( Su Jeong Kim ),이유미 ( Yu Mi Lee ) 대한결핵 및 호흡기학회 2011 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.71 No.6

Pulmonary complications occur in 40~60% of patients who receive hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) and are a source of substantial morbidity and mortality. Acute eosinophilic pneumonia (AEP) is an uncommon, non-infectious pulmonary complication occurring in HSCT recipients. We now report the case of a 52-year-old man with AEP who was treated with allogenic HSCT due to acute myeloid leukemia. He complained of fever, cough and dyspnea 390 days after allogenic HSCT. He also had skin and hepatic graft versus host disease (GVHD). Hypoxemia, diffuse pulmonary infiltrates on a chest x-ray and eosinophilia in bronchoalveolar lavage fluid were also noted in several tests. His symptoms, pulmonary infiltrates, hepatic dysfunction and skin lesions rapidly improved after treatment with corticosteroid therapy. Our case supports the idea that AEP is a late phase non-infectious pulmonary complication and one of the manifestations of chronic GVHD.

Majarine의 중추신경계에 대한 작용(II) -마우스에 있어서 Majarine의 체온감소에 미치는 dopamine, serotonin 길항제의 작용에 관한 연구-

박영현,이종화,김유재,조병헌,Park, Young-Hyun,Lee, Jong-Hwoa,Kim, Yu-Jae,Cho, Byung-Heon The Korean Society of Pharmacology 1985 대한약리학잡지 Vol.21 No.2

Majarine that was isolated from Berberis Koreasra Palibin (Berberidaceae) is the isoquinoline alkaloid. The effects of dopaminergic and serotonergic antagonists on majarine induced changes in body temperature were studied in the mouse. Intraperitoneal administration of majarine produced dose-dependent hypothermia. At a dose of 0.1 mg/kg, majarine caused a slight increase in body temperature. Majarine-induced hyperthermia was attenuated by the 5-HT antagonist, cyproheptadine However, it caused hyothermia in mice pretreated with the DA antagonist, haloperidol, and hyperthermia in mice pretreated with haloperidol and cyproheptadine in comparision with haloperidol pretreatment. At a dose of 2.0 mg/kg, majarine-induced hypothermia was attenuated by haloperidol and cyproheptadine, respectively. In reserpine pretreated mice, majarine produced dose-dependent hypothermia. At a dose of 0.1 mg/kg, majarine pretreated with haloperidol caused no significant effect in body temperature. At a dose of 2.0 mg/kg, majarine-induced hypothermia was attenuated by haloperidol pretreatment in mice treated with reserpine and ${\alpha}$-methyl-p-tyrosine. These data suppose that both dopaminergic and serotonergic mechanisms in the brain mediate the effects of majarine on body temperature. We propose that majarine directly stimulate DA receptor, which secondarilly activate 5-HT neurons to cause changes in body temperature. 한국특산 매자나무(Berberis Koreana Palibin)의 뿌리에서 분리한 majarine은 isoquinoline 알카로이드로서 본 교실에서는 중추신경계에 대한 약리작용을 검토하고 있다. Majarine을 마우스 복강내로 투여하여 직장온도 변화와 haloperidol, cyproheptadine과 reserpine 등에 대한 약물 상호작용을 관찰하여 다음과 같은 성적을 얻었다. Majarine은 마우스에 있어서 용량의존적으로 현저한 체온감소를 나타내었으나, 0.1 mg/kg투여시 체온증가의 유의성을 보였다. 체온감소는 haloperidol과 cyproheptadine으로 억제되었다. Reserpine처치 마우스에 있어서 ${\alpha}$-methyl-p-tyrosine으로 전처치한 다음 majarine 2.0mg/kg 투여시 체온감소를 나타내었다. 이러한 결과로 보아 majarine의 체온변화는 dopamine과 serotonin수용체에 관련성이 있다고 사려되고, 체온감소는 dopamine수용체에 직접적으로 작용한다고 생각되는 바이다.

Effects of Cyclobuxine D on the Electrocardiogram (ECG) and Heart Rate in Anesthetized Rats and Isolated Frog Heart

이종화,박영현,조병헌,김유재,김종배,김천숙,차영덕,김영석,Lee, Jong-Hwoa,Park, Young-Hyun,Cho, Byung-Heon,Kim, Yu-Jae,Kim, Jong-Bae,Kim, Chun-Sook,Cha, Young-Dong,Kim, Young-Suk The Korean Society of Pharmacology 1986 대한약리학잡지 Vol.22 No.2

본 실험실에서는 민간요법으로 말라리아와 성병등의 치료제로 사용되어온 회양목(Buxus microphylla var. koreana Nakai)에서 steroid성 alkaloid인 cyclobuxine D와 nonalkaloid인 buxuletin을 분리하였다. Buxuletin의 가토에 있어서 이뇨작용에 대해서는 본 실험실에서 보고한바 있으며 cyclobuxine D의 약리작용에 대한 보고는 지금까지 전무한 상태이다. 본 실험에서는 새로운 항부정맥 약물의 밭견의 일환으로 cyclobuxine D의 적출 개구리 심장에 대한 작용과 마취시킨 흰쥐의 ECG와 심박동수에 대한 작용을 관찰하였다. Cyclobuxine D는 적출 개구리 심장에 대해 용량의존적 심근 수축력 감소를 나타냈으며 흰쥐에 있어서 현저한 심박동수 감소를 나타냈다. Cyclobuxine D는 흰쥐의 ECG에 있어서 PR interval과 P ${\alpha}T$ interval을 연장시키며, QRS complex와 PR interval의 심박동수에 대한 보상치인 PRc에 대해서는 고용량에서는 연장시키나 그 작용이 현저하지 않다. 이 결과로 보아 cyclobuxine D는 흰쥐의 ECG에서 A-V conduction과 ventricular depolarization에 주로 관여하는 것으로 사료 되며 이는 기존의 antiarrhythmic drugs과 비교해 볼 때 quinidine sulfate와 유사성이 있다고 추정된다. This study was undertaken to search for a new antiarrhythmic agent in natural plants. Extracts of Buxus microphylla var. koreana Nakai have been used as folk remedies of several diseases, including malaria and venereal disease, but any study on the pharmacological actions of this plant has not yet been carried out and its active ingredients have not been identified. In our laboratory, we isolated buxuletin (nonalkaloid) and cyclobuxine D (steroidal alkaloid) from Buxus microphylla var. koreana Nakai and reported their pharmacological actions: diuretic effects of buxuletin in rabbits and hypotensive effect of cyclobuxine D in rats. In the present study, we investigated the effect of cyclobuxine D on isolated frog heart and heart rate in urethane anesthetized rats. In order to clarify the mechanism of bradycardic effect of cyclobuxine D, we examined the changes of the ECG parameters (PR, QRS and R ${\alpha}$ T interval) produced by intravenous injection of cyclobuxine D in anesthetized rats. Cyclobuxine D depressed the contractile force in isolated frog heart and exerted a dose-dependent bradycardic effect in anesthetized rats. Intracerebroventricular injection of cyclobuxine D caused a fall in blood pressure and an increase in heart rate, but those effects were not significant. Cyclobuxine D prolonged the PR interval and RaT interval (${\alpha}$ Tindicates the apex of T), but was without significant effects on the duration of the QRS complex and PRc in urethane anesthetized rats.

Effect of Cyclobuxine on Oxygen Free Radical Production and Cellular Damage Promoted by Arachidonate in Perfused Rat Hearts

이종화,권준택,조병헌,박종안,김유재,김종배,차영덕,김창호,Lee, Jong-Hwoa,Kwon, Jun-Tack,Cho, Byung-Heon,Park, Jong-An,Kim, Yu-Jae,Kim, Jong-Bae,Cha, Young-Deog,Kim, Chang-Ho The Korean Society of Pharmacology 1992 대한약리학잡지 Vol.28 No.2

흰쥐의 허혈-재관류 적출심장에서 arachidonic acid의 투여에 의해 촉진된 superoxide anion의 생성과 심근손상에 대한 cyclobuxine (스테로이드성 알카로이드)의 영향을 관찰하였다. 적출심장을 Langendorff 관류장치에 현수하고 0.5 ml/min의 저용량으로 45분간 관류한 후 정상관류 (7ml/min)로 복귀시켜 허혈-재관류 심장으로 사용하였다. 재관류 시 arachidonate (0.1과 $1.0\;{\mu}g/ml$)를 투여한 후 superoxide anion의 생성을 관찰하였고, 좌심실 내의 지질 과산화정도는 MDA의 량으로 측정하였으며, 심근손상의 지표로 lactic dehydrogenase (LDH)유리를 측정하였다. 한편 cyclobuxine (1.0과 $10\;{\mu}g/ml$)을 허혈 이전부터 전관류 과정 동안 투여하여 arachidonate에 의해 초래되는 손상에 대한 영향을 관찰하였다. Arachidonic acid는 용량적으로 superoxide anion의 생성을 증가시켰으며 이 작용은 superoxide dismutase (SOD 300 U/ml)와 cyclobuxine에 의해 현저히 억제되었다. Arachidonate를 투여하였을 때 좌심실 내의 malondialdehyde (MDA)의 생성이 현저히 증가되었으며 cyclobuxine은 MDA의 생성을 용량적으로 억제시켰다. 또한 arachidonate는 LDH의 유리를 증가시켰으며 arachidonate에 의한 LDH의 유리 증가는 SOD와 cyclobuxine에 의해 유의하게 억제되었다. 이상의 결과로 흰쥐의 허혈-재관류 심장에서 스테로이드성 알카로이드인 cyclobuxine이 arachidonate에 의한 반응성 산소대사물의 생성과 심근세포손상을 유의하게 억제하는 것으로 관찰되었다. The present study was attempted to investigate the effect of cyclobuxine (a steroidal alkaloid) on generation of reactive oxygen metablite and myocardial damage promoted by an exogenous administeration of arachidonate in ischemic-reperfused hearts. Langendorff preparation of the isolated rat heart was made ischemic condition by reducing the flow rate to 0.5 ml/min for 45 min, and then followed by normal reperfusion (7 ml/min) for 5 min. The generation of superoxide anion was estimated by measuring the SOD-inhibitable ferricytochrome C reduction. The degree of lipid peroxidation in myocardial tissue was estimated from the tissue malondialdehyde (MDA) concentration using thiobarbituric acid method. The myocardial cell damage was observed by measuring LDH released into the coronary effluent. Sodium arachidonate $(0.1\;and\;1.0\;{\mu}g/ml)$ infused during the period of oxygenated reperfusion stimulated superoxide anion production dose-dependently. The rate of arachidonate-induced superoxide anion generation was markedly inhibited by cyclobuxine $(1.0\;and\;10\;{\mu}g/ml)$. The production of malondialdehyde was increased by infusion of arachidonate. This increase was prevented by superoxide dismutase (300 U/ml) and cyclobuxine $(1.0\;and\;10\;{\mu}g/ml)$. The release of LDH was increased by sodium arachidonate was also inhibited by superoxide dismutase and cyclobuxine. In conclusion, the present results suggest that cyclobuxine inhibits the production of reactive oxygen metabolite and myocardial damages which were promoted by an administeration of arachidonate during reperfusion of ischemic hearts.

Effects of Cyclobuxine E on Two Distinct Types of Potassium-Activated Calcium Channels in an Intestinal Smooth Muscle

이종화,권준택,조병헌,최규홍,김유재,김종배,김천숙,차영덕,김영석,Lee, Jong-Hwoa,Kwon, Jun-Tack,Cho, Byung-Heon,Choi, Kyu-Hong,Kim, Yu-Jae,Kim, Jong-Bae,Kim, Chun-Sook,Cha, Young-Deog,Kim, Young-Suk The Korean Society of Pharmacology 1989 대한약리학잡지 Vol.25 No.1

For several years, we investigated the pharmacological action of several substances isolated from Buxus microphylla var koreana Nakai, which had been used as folk remedies of malaria and venereal disease. Cyclobuxine $D(C_{25}H_{42}ON_2)$, a steroidal alkaloid, exerted an antiinflammatory action, hypotensive and bradycardic effects in rats. In the present study, we isolated alkaloid from the acetone-insoluble fraction of the strong bases of this plants. This alkaloid $(C_{25}H_{38}ON_2)$ was identified as a steroidal alkaloid contained a cyclopropane ring by physical and chemical methods. It is a derivative of cyclobuxine D and named cyclobuxine E. We examined the effect of cyclobuxine E on the contractile response induced by acetylcholine and two distinct types of potassium-activated calcium channels in an intestinal smooth muscle of the rat. Cyclobuxine E inhibited significantly the Ach-induced contraction. The isolated longitudinal muscle from the rat duodenum was immersed calcium-depleted potassium depolarizing solution. Ten minutes after, 1.8 mM $CaCl_2$ was added to muscle bath and elicited a biphasic increase in muscle tension. Cyclobuxine E produced an appreciable inhibition of both components of the mechanical response. In addition, Cyclobuxine E introduced at a point when the tonic response had reached its maximum level, caused the muscle to exhibit a rapid loss of tension. Based on these experimental results, we proposed the possibility that the inhibitory action of cyclobuxine E on the isolated rat duodenum may be due to inhibiting the transmembrane fluxes of calcium ion in potassium-activated calcium channels. 본 연구실에는 최근 수년동안 말라리아, 성병등에 민간약으로 사용되어 온 회양목(Buxus microphylla var. koreana Nakai)으로 부터 다수의 물질을 분리하여 그 약리작용을 경색하여왔다. Coumarin의 유도체인 buxuletin은 이뇨 작용이 있음이 인정되었으며, steroid 성 alkaloid인 Cyclobuxine $D(C_{25}H_{42}ON_2)$는 항염증작용, 흰쥐에서 심박동수 감소작용 및 적출 평활근 이완 작용을 나타냈다. 본 연구에서는 회양목에서 Cyclobuxine D의 유도체인 Cyclobuxine $E(C_{24}H_{38}ON_2)$를 분리하여 그 구조를 이화학적인 방법으로 규명하였으며 흰쥐의 십이지장 평활근에서 acetylcholine에 의해 유도되는 수축 작용에 대한 영향과 높은 칼륨 이온에 의해 활성화되는 칼슘 채널에 대한 Cyclobuxine E의 영향을 관찰하였다. Cyclobuxine E는 적출 십이지장 평활근에서 acetylcholine의 수축작용을 현저히 억제하였으며, Calcium-depleted potassium-depolarizing 용액에 담근 후 $CaCl_2$를 가함으로써 나타나는 이중적인 수축작용을 용량적으로 차단하였다. 이상의 십이지장 평활근에 대한 Cyclobuxine E의 작용은 Cyclobuxine E가 칼륨에 의해 활성화되는 칼슘 채널 (아마, voltage-dependent calcium channel)을 통한 칼슘의 세포막 통과를 차단하므로 인해 나타남을 시사한다.

Effects of Cyclobuxine D on the Derangement Induced by Ischemia and Reperfusion in the Isolated Rat Heart

이종화,문창규,권준택,조병헌,김유재,김종배,김창호,차영덕,김영석,Lee, Jong-Hwoa,Moon, Chang-Kyu,Kwon, Jun-Tack,Cho, Byung-Heon,Kim, Yu-Jae,Kim, Jong-Bae,Kim, Chang-Ho,Cha, Young-Deog,Kim, Young-Suk The Korean Society of Pharmacology 1990 대한약리학잡지 Vol.26 No.1

Cyclobuxine D is a steroidal alkaloid, which was extracted from Buxus microphylla var. koreana Nakai. In our previous studies, we clarified several pharmacological actions of cyclobuxine D: an antiinflammatory action, hypotensive and bradycardiac effects, negative inotropic effects on the several smooth muscles and cardiac muscle. The present study was undertaken to elucidate possible mechanisms by protection of myocardial tells from ischemia and reperfusion induced derangement in cardiac function and metabolism by cyclobuxine D. For this purpose, the isolated rat heart was used. Rat hearts were perfused for 60 min under ischemia conditions in the presence and absence of cyclobuxine D and verapamil, and for 30 min under reperfusion conditions. Ischemia produced a marked decline in contractile force, an increase of resting tension, an immediate release of ATP metabolites and an accumulation of calcium in the left ventricle. Cyclobuxine D (100ng/ml) ameliorated the myocardial injury produced by ischemia. 흰쥐로 부터 심장을 적출하여 Langendorff 관류장치에 현수하여 Krebs-Hensleit 영양액으로 분당 12ml속도로 30분간 관류시킨 후 관류 속도를 분당 1ml로 줄여(ischemia)60분간 관류시키면, 적출심장의 수축력이 현저히 감소되었고, resting tension이 현저히 증가되었다. 또 적출심장으로부터 유출되는 관류액의 250nm에서의 UV흡광치는 증가되었으며, 좌심실내의 칼슘의 농도는 대조군보다 상당히 증가되었다. 본 실험에서는 흰쥐에서 항염증작용, 혈압강하 및 서맥 작용, 평활근 및 심장근에서 근이완작용을 나타내는 cyclobuxine D의 ischemia에 의해 유도된 심장손상에 대한 보호효과를 관찰하였다. Cyclobuxine D(100ng/ml)는 ischemia에 의해 유발된 적출심장의 수축력 감소와 resting tension의 증가를 유의하게 억제하였으며, 심장으로부터의 ATP metabolites의 유출과 좌심실내의 칼슘 축적을 억제시켰다. 이상의 결과는 Cyclobuxine D가 ischemia에 의해 유발된 손상으로 부터 심장을 보호할 수 있음을 나타내며, 이는 cyclobuxine D의 심장세포내의 칼슘 유입 억제작용에 기인하는 것으로 사려된다.