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        흰쥐 가슴샘상피세포 아형의 미세구조학적 특성

        김봉선(Bong-Seon Kim),이경희(Kyeong-Hee Lee),이희우(Hee-Woo Lee),김재봉(Jae-Bong Kim),김성일(Sung-Il Kim),윤 식(Sik Yoon) 대한해부학회 2003 Anatomy & Cell Biology Vol.36 No.4

        Thymic epithelial cells constitute a major component of the thymic microenvironment. The thymus is involved in the regulation of the proliferation, maturation and differentiation of thymocytes. There is some controversy about the classification of thymic epithelial cell types. Traditionally, thymic epithelial cells have been divided into cortical and medullary epithelial cell types. In general, the thymic epithelium can be broadly subdivided into subcapsular, cortical and medullary epithelial cells, and Hassall’s corpuscles by immunocytochemical methods. Although a few studies were performed on the ultrastructural characteristics of the different types of thymic epithelial cells, there is still some controversy about the classification of thymic epithelial cell subsets. Thus, the present study was performed to investigate the ultrastructural features of thymic epithelial cell subsets in adult male Sprague-Dawley rats, which are the most commonly used species of rat for biological researches, using transmission electron microscopy to shed more light on the heterogeneity of thymic epithelial cells. On the basis of ultrastructural features, we could identify and classify eight subsets of epithelial cells in normal rat thymus. In particular, this study provided a clear and easy way to identify the type 3 epithelial cells by their characteristic ‘perinuclear arrangement pattern of relatively short bundles of tonofilaments’. This is an important finding since the type 3 epithelial cells has been considered to be the most difficult type to identify among various thymic epithelial cell types. The results of the present ultrastructural study of thymic epithelial cells provided more insight into the heterogeneity of thymic epithelial cells, and can contribute to the understanding of roles played by different types of thymic epithelial cells. 가슴샘상피세포는 가슴샘세포의 증식, 성숙 및 분화에 관여하는 가슴샘미세환경의 가장 주된 구성요소이다. 이전에는 가슴샘상피세포를 겉질상피세포 및 속질상피세포로 크게 두 종류로 구분하였으나, 현재에는 일반적으로 면역세포화학적 방법을 이용하여 피막밑상피세포, 겉질상피세포, 속질상피세포 및 가슴샘소체의 네 종류로 분류하는 방법을 널리 사용하 고 있다. 비록 전자현미경을 이용하여 이를 더 세부적으로 분류하고자 하는 여러 시도가 있어왔지만, 아직 이들 각 아형에 대한 자세한 미세구조학적 특성 및 이러한 특성에 따른 세부적인 분류방법이 체계적으로 정립되어 있지 않은 실정이다. 본 연구는 투과전자현미경을 이용하여 Sprague-Dawley계 성체 웅성 흰쥐 가슴샘상피세포의 미세구조학적 특성을 자세히 관찰하고 이러한 미세구조학적 특성에 따라 가슴샘상피세포를 세분하고자 시도되었다. 본 연구결과 미세구조학적 특징에 따라 흰쥐 가슴샘상피세포를 8가지 아형으로 세분할 수 있었다. 제1형은 피막밑/사이 막옆/혈관주위에 위치하였으며, 제2형은 가슴샘겉질에 널리 분포하며 전자밀도가 매우 낮은 핵을 가지고 있었다. 제3형도 대부분 가슴샘겉질에 분포하고 있었으며, 제2형과 제4형 사이의 중간 정도의 미세구조학적 특성을 지니고 있었다. 제4형 은 주로 가슴샘겉질에 분포하고 있었으나 가끔 가슴샘속질에도 분포하였으며 세포질과 핵이 모두 높은 전자밀도를 가지 는 것이 특징적인 소견이었다. 제5~8형은 모두 가슴샘속질에 분포하였다. 제5형은 다소 미분화된 세포의 형태학적 특징 을 지녔고, 제6형은 다른 종류의 가슴샘상피세포보다 크기가 매우 컸으며 대부분 세포질내에 포도송이 모양의 액포집합 체를 포함하고 있었다. 제7형은 세포질 돌기가 매우 잘 발달하였으며 세포질돌기내에는 매우 잘 발달된 당김미세섬유를 함유하고 있는 것이 매우 특징적인 소견이었다. 제8형은 가슴샘소체를 형성하고 있는 가슴샘상피세포이었다. Sprague-Dawley계 흰쥐는 일반적으로 가장 널리 사용되고 있는 실험동물이기 때문에 본 연구의 결과는 향후 흰쥐 가 슴샘의 미세구조학적 연구에 중요한 참고자료가 될 뿐만 아니라, 나아가 흰쥐 가슴샘을 실험대상으로 하는 여러 형태학적 혹은 기능적 연구에도 중요한 기초자료를 제공해 줄 수 있을 것이다.

      • KCI등재

        특허풀 관여도와 글로벌 시장에 대한 주의도가 기술성과에 미치는 영향

        김봉선(Bongsun Kim),김나미(Nami Kim),김언수(Eonsoo Kim) 한국전략경영학회 2015 전략경영연구 Vol.18 No.3

        기술표준화를 위한 전략적 제휴의 형태인 표준화 컨소시엄(consortium standard) 형성에 대한 관심이 증대되고 있는 가운데 이러한 표준화 컨소시엄의 독특한 형태로 특허풀(patent pool)이 있다. 기업들이 공동의 목표를 위해 협력할 때, 추후 창출되는 공동의 이익과 개별 이익이 일치하지 않으며 이러한 차이는 기업의 관여 정도에 따라 달라질 수 있다. 본 논문에서는 주의기반 관점(attention-based view)을 바탕으로 특허풀 결성 및 운영에 대한 기업의 관여도와 글로벌 시장에 대한 주의도가 표준특허의 기술적 성과에 어떠한 영향을 미치는지에 대하여 연구한다. 이를 위해 DVD 특허풀에 속한 680개의 표준특허들을 분석하였다. 이와 더불어 글로벌 시장에 대한 주의도와 특허풀에 대한 관여도가 어떤 상호작용을 통해 기술적 성과에 영향을 미치는지도 분석하였다. 본 연구의 실증 분석 결과, 특허풀결성 및 운영에 대한 기업의 관여도가 높을수록 그리고 글로벌 시장에 대한 주의도가 높을수록 기술적 성과가 높게 나타났다. 또한, 글로벌 시장에 대한 주의도가 높은 경우, 특허풀 결성 및 운영에 대한 기업의 관여도가 기술적 성과에 미치는 영향이 약화되는 것으로 나타났다. 본 연구를 통해 제휴에 있어 관여도의 효과는 기업의 특허전략에 따라 달라질 수 있다는 시사점을 얻을 수 있었다. Strategic alliance is one of the avenues for standard-setting strategies. The interest in the coalition formation for a consortium standard is on the rise. Patent pool is a special type of these standardsetting consortia. Even when firms cooperate for a common goal, the participants" common benefit and private benefit do not always coincide. And, such discrepancy can vary depending upon the involvement of individual firms. The current paper investigates the impact of firms" involvement in the formation and operation of a patent pool as well as the attention to global market on the innovation performance of patents. We analyze 680 patents belonging to DVD 3C and 6C patent pools. We also test the interaction effect between the involvement and the market scope on the performance. The empirical results show that higher level of involvement and the attention to global market lead to higher innovative performance. We also find that the higher attention to global market of a patent mitigates the impact of involvement on the performance. These results indicate that the positive influence of higher involvement in a patent pool can be offset by the costs incurred to increase the attention to global market of a patent.

      • KCI등재후보

        흰쥐 가슴샘 재생과정에서 CD70의 발현 특성

        김성민(Sung-Min Kim),김미나(Mi-Na Kim),이희우(Hee-Woo Lee),김봉선(Bong-Seon Kim),김재봉(Jae-Bong Kim),윤 식(Sik Yoon) 대한해부학회 2006 Anatomy & Cell Biology Vol.39 No.6

        CD70은 TNF superfamily에 속하는 제2형 막당단백질로써 주로 큰포식세포, 활성화된 T 세포 그리고 B 세포에서 발현된다. CD70은 T 및 B 세포와 NK 세포에서 주로 발현되는 TNF receptor superfamily에 속하는 CD27과 결합함으로써 면역반응 동안에 림프구의 증식, 분화, 성숙 그리고 이동을 조절한다. 본 연구에서는 흰쥐에 cyclophosphamide (CY)를 투여하여 가슴샘의 급성 퇴축을 유발시킨 후, 가슴샘 재생과정 동안에 면역조직화학, 이중면역형광조직화학 및 역전사 중합효소 연쇄반응법을 이용하여 CD70의 발현 특성을 관찰하였다. 역전사 중합효소 연쇄반응 분석 결과, 가슴샘속질수지상세포주, DC2.4 세포주 및 RAW264.7 세포주에서 CD70의 발현을 확인하였다. 면역조직화학염색 결과, 정상 및 재생중의 흰쥐 가슴샘에서는 CD70이 큰 포식세포에서 발현되었고, 이들은 주로 가슴샘겉질에 분포하였을 뿐만 아니라 가슴샘 재생과정 동안 CD70 양성반응 세포들의 수와 크기가 현저하게 증가하였다. 또한 재생중의 가슴샘으로부터 분리한 가슴샘세포와 가슴샘 바탕질세포에서 CD70 mRNA 발현이 정상 대조군에 비해 증가하는 것을 확인하였다. 따라서 본 연구의 결과는 가슴샘 재생과정 동안 CD70이 그 수용체인 CD27을 통해 가슴샘 재생에 중요한 역할을 수행할 것이라는 사실을 시사해준다 The thymus is the central lymphoid organ for development of bone marrow-derived precursor cells into mature T-cells. The thymic stroma provides the specialized microenvironment for the proliferation, differentiation, and maturation of the immature T-cells, thymocytes. The CD27 is a tumor necrosis factor (TNF) receptor family member whose expression is limited to cells of the lymphoid lineage. CD70, the ligand of CD27, is a TNF related trans-membrane protein induced upon activation on T and B cells, dendritic cells and macrophages. CD70/CD27 interaction plays a key role in T dependent B cell responses and is responsible for plasma cell differentiation. This study was performed to investigate the expression of CD70 during regeneration following acute involution induced by cyclophosphamide (CY) in the rat thymus using RT-PCR analysis and single and double immunohistochemistry. The results from RT-PCR analysis showed that CD70 is expressed in mouse thymic medullary interdigitating (IDC)-like cells (MDC), DC2.4 and Raw264.7 but not expressed in the mouse thymic epithelial cells (subcapsular/cortex epithelial cells, cortical epithelial cells and medullary epithelial cells). Interestingly, upregulation of CD70 expression was observed in the thymic stromal cells and thymocytes isolated from rat thymus during thymus regeneration. Furthermore, immunohistochemistry demonstrated that CD70 was mainly expressed in the ED1 positive macrophages predominantly in the thymic cortex both in the normal thymus and during thymus regeneration. In line with the data obtained by biochemical analysis, CD70 immunoreactive macrophages is increased both in number and in size during thymus regeneration. Thus, the results of the present study suggest that CD70 expressed on the thymic macrophages could play a role in the development of new T cells to replace T cells damaged by cyclophosphamide treatment during thymus regeneration.

      • KCI등재후보

        파킨슨병 모델 동물에서 GDNF 아데노바이러스 벡터를 이용한 유전자치료

        성기한(Ki-Han Sung),윤인규(In-Gyu Yoon),정현실(Hyun-Sil Jung),김을선(Eul-Seon Kim),김현주(Hyun-Joo Kim),김양호(Yang-Ho Kim),윤 식(Sik Yoon),김봉선(Bong-Seon Kim),김재봉(Jae-Bong Kim),백선용(Sun-Yong Baek) 대한해부학회 2002 Anatomy & Cell Biology Vol.35 No.6

        6-OHDA를 이용하여 실험적으로 유발한 파킨슨병 모델 동물을 대상으로 유전자 치료 목적으로 GDNF 유전자를 포함 하는 아데노바이러스 벡터(Ad-GDNF)를 주사하여 행동 변화와 줄무늬체와 흑색질의 tyrosine hydroxylase (TH) 면역반응양성의 도파민성 세포의 형태학적 변화를 연구하였다. 성숙한 수컷 Sprague-Dawley계 흰쥐의 줄무늬체에 6-OHDA를 주사하고, 1주 후에 apomorphine에 의한 회전 운동 양상 을 측정하여 분당 7회 이상 회전하는 동물은 파킨슨병 모델 동물에 해당하는 것으로 하였다. 이들 동물의 줄무늬체에 Ad-GDNF를 주사하고 1주 후에 apomorphine에 의한 행동 양상을 다시 측정하고, 이어서 심장 관류고정을 실시하여 형태 학적 변화를 관찰하였다. Ad-GDNF 대신에 LacZ 유전자를 포함하는 아데노바이러스 벡터(Ad-LacZ)를 주사한 것을 대조 군으로 이용하였다. 1. 파킨슨병 모델 동물의 줄무늬체에 Ad-GDNF를 주사한 동물에서 apomorphine에 의한 회전 운동 수가 유의하게 감소 하였다. 그러나 Ad-LacZ를 주사한 대조군에서는 회전 운동 수의 변화를 관찰할 수 없었다. 2. 회전 운동 수가 감소한 동물의 줄무늬체에 존재하는 TH 면역반응 양성의 축삭 종말은 대조군의 75% 수준으로 Ad- LacZ를 주사한 37%에 비하여 현저히 증가하여 TH 면역반응 양성 축삭종말의 퇴행성 변화가 방지되었다. 3. 흑색질의 TH 면역반응 양성 신경세포의 수는 Ad-GDNF를 주사한 군에서는 대조군의 82% 수준으로 Ad-LacZ를 주사한 군의 60% 수준에 비하여 유의하게 증가되어 있어서 6-OHDA에 의한 신경세포의 사멸이 방지되는 것을 알 수 있었다. 이상의 결과로 미루어 파킨슨병 모델 흰쥐의 줄무늬체에 Ad-GDNF를 한차례 주사하여 1주 후에 줄무늬체와 흑색질의 도파민성 세포의 사멸이 방지되는 것을 확인하였다. A recombinant adenoviral vector encoding human GDNF gene (Ad-GDNF) was developed to investigate the effect of GDNF gene in 6-OHDA-induced Parkinson’s disease rat. The changes of rotatory behavior and density of THimmunoreactive axon terminals and number of cell bodies were observed by the GDNF expression. Adult male Sprague-Dawley rats were used. Parkinson’s disease (PD) rat models were prepared by the injection of 6-OHDA into the striatum. After 1 week, the animals showing apomorphine-induced rotatory behavior above 7 turns/ min were defined as PD rat model. Ad-GDNF was injected into the striatum of animal model and tested the apomorphine- induced rotatory behavior at 1 week after injection. These animals were perfused with Zamboni fixative to investigate the morphological changes after rotatory behavior test. Instead of Ad-GDNF, Ad-LacZ injected PD rats were used as a control. The following results are obtained: 1. The apomorphine-induced rotational behavior was significantly reduced by the treatment of PD rat by the injection of Ad-GDNF. The Ad-LacZ injected PD rat showed no change in rotatory behavior. 2. The density of TH-ir axon terminals in the striatum was significantly increased by the Ad-GDNF injection (75% of normal side), but there was no change in the density by the Ad-LacZ injection (37% of normal side) compared to 6-OHDA lesioned striatum. This means the Ad-GDNF injection prevented the degenerative change of TH-ir axon terminals in the stritum of the PD rat. 3. The number of TH-ir cell body was significantly recovered by the Ad-GDNF (82% of normal side), but there was not recovered by the Ad-LacZ injection (60% of normal side) compared to 6-OHDA lesion. This means the retrogradely transported Ad-GDNF induced the TH expression in the dopaminergic neurons of the substantia nigra. Gene therapy with Ad-GDNF prevented the degeneration of dopaminergic neurons and axon terminals in the 6- OHDA-induced PD rat.

      • KCI등재

        특허기술의 특성과 가치의 관계

        김봉선(Bongsun Kim),김언수(Eonsoo Kim) 한국전략경영학회 2014 전략경영연구 Vol.17 No.3

        특허 등 지적 재산의 확보와 활용은 경쟁우위를 위한 기업의 경영 전략 및 기술혁신 전략과 깊은 관련을 가지고 있다. 기존 연구에서 특허는 ‘가치 확보(value capture)’ 또는 ‘가치 점유(value appropriation)’를 위하여 모방을 방어하는 기제(isolating mechanism)로만 언급되고 있으며, 특허를 통한 재무적인 수익을 극대화 시키는 특허전략에 대한 연구가 미흡한 실정이다. 본 연구에서는 특허풀을 통하여 실현되는 기술 가치를 극대화하는데 영향을 미치는 요인들을 분석하고자 한다. 이러한 요인들 중 특허기술의 특성에 초점을 맞추어 특허기술의 특성이 특허풀에서의 로열티 증대에 미치는 영향을 분석한다. 본 연구의 실증분석 결과는 특허기술이 기존기술을 토대로 점진적인 발전을 이룬 경우이거나, 특허기술이 적용되는 시장의 범위가 넓을수록 높은 로열티 성과를 나타내었다. 그러나 과학지식과의 연계와 기술수명주기는 로열티 성과와 유의한 관계를 나타내지 않았다. 본 연구는 학문적인 차원에서 혁신의 초기단계에 있는 특허 특성과 상품화 이후 혁신의 사후적인 가치와의 관계를 실증 분석함으로써 혁신의 가치평가와 관련된 기존 연구의 영역을 확장하고 발전을 도모하였다. 또한, 전략경영 연구에서 특허풀을 조명하고, 특허풀을 통한 가치확보를 극대화 하는 특허전략에 초점을 두어 연구하였다. 실무적 시사점으로는 첫째, 특허 개발 단계에서 선행특허에 대한 탐색과 관련 기술을 발전시키는데 연구자의 관심을 유발하도록 해야 하며, 특허 기술 관리에 있어서 시장의 범위를 파악하고 확장하는데 노력을 기울여야 할 것이다. 둘째, 치열한 경쟁 상황 하에서 기업들은 특허 출원에 대한 양적인 접근 보다는 질적인 접근의 중요성을 반영한 특허 전략을 펼쳐야 할 것이다. 이를 위한 한 가지 방안으로 본 연구에서와 같이 특허풀에 대하여 더 많은 관심을 기울일 필요성이 존재 하고 이를 통한 수익 증대 방안에 더 많은 관심을 가질 필요가 있다는 것이다. Acquisition and utilization of intellectual properties such as patents are an important element of firm strategy and technology strategy. In extant research, patents are considered mostly as an isolating mechanism which leads to value capture or value appropriation. However, there is lack of research on patent strategies to increase the financial performance of patents. The current study investigates the factors leading to patent value maximization through a patent pool. In particular, we focus on the characteristics of patents and their influence on the royalty income in a patent pool. The empirical results show that higher royalty is related with patents which offer incremental progress from the existing technology and patents with broader scope of application. On the other hand, linkage to scientific knowledge and technology life cycle are not significantly related to royalty performance. In an academic sense, the current study contributes to expand the current research on measuring the value of innovation by empirically testing the relationship between patent characteristics and its commercial value. Further, we highlight the patent pool as an important phenomenon in strategic management and the value maximizing patent strategies. We also suggest several practical implications. Firms should induce the scientists" attention to the search of prior patents, so that they can advance related technologies and expand the market scope. In addition, under fierce competition, firms need to manage patent strategies focusing on qualitative rather than quantitative approach. Patent pools may provide a context where firms can increase the financial performance of patents.

      • KCI등재

        지식 탐색, 흡수능력과 혁신의 속도

        김봉선(Bongsun Kim),김언수(Eonsoo Kim) 한국전략경영학회 2009 전략경영연구 Vol.12 No.1

        환경의 불확실성이 높아질수록 기업의 경쟁력을 위한 성장동력으로서 기술혁신의 중요성은 더욱 강조되고 있다. 기술혁신의 성과를 향상하기 위하여 조직의 지식을 관리하고 조직학습 과정을 이해하는 것은 전략경영에 있어서 중요한 주제로 다루어지고 있다. 그렇다면, 기술혁신을 위한 새로운 지식은 어디서 오는 것인가? 조직의 내부에서 오는가, 아니면 외부에서 오는가? 내부와 외부의 지식을 탐색하고 활용하는 기업은 어떤 조직역량을 보유하고 있어야 하며, 이러한 탐색활동이 기술혁신에는 어떤 영향을 미치는가? 본 논문에서는 기술혁신과 가장 중요한 연관성을 갖는 조직역량으로 흡수능력을 제시하고, 기술혁신과 흡수능력의 교호적인 관계를 조명함으로써, 기존 연구에서 다루고 있지 않는 인과관계를 제안한다. 즉, 탐색활동이 흡수능력의 향상에 어떠한 영향을 미치는지에 대한 개념적인 모델을 제시하는데, 흡수능력을 매개변수로 하여 탐색활동이 기술혁신 결과에 어떠한 영향을 미치는지 그 과정을 대상으로 하는 모델을 구축하였다. 본 연구가 제안하는 개념적인 모델에 의하면 기술혁신을 위한 기업의 탐색 활동 중 내부경계 탐색(internal boundary-spanning)은 흡수능력 유형 중 잠재 흡수능력(potential absorptive capacity)을 향상하게 되고 이것은 연구개발 과정에서 연구(research) 단계의 속도에 긍정적인 영향을 미치게 된다. 대조적으로, 외부경계 탐색(external boundary-spanning)은 실현 흡수능력(realized absorptive capacity)을 향상시키고 이것은 개발(development) 단계의 속도를 향상시킨다는 결론을 도출하였다. In response to ever increasing environmental uncertainty, technological innovation becomes an important subject of strategic management field. Where does new knowledge for innovation come from? Does it come from inside or outside an organization? What kind of organizational capability is required in order to search for and leverage internal and/or external knowledge? How do different search activities influence the performance of technological innovation? This study suggests a conceptual model establishing the recursive relationship between technological innovation and absorptive capacity. More specifically, the model investigates the process of the knowledge search behavior getting translated into the technological innovation performance in terms of R&D speed, with absorptive capacity as a mediating variable. We argue that internal boundary-spanning activity promotes the potential absorptive capacity which, in turn, enhances the speed of research stage of an R&D process. External boundary-spanning, on the other hand, accelerates the speed of development stage of an R&D process, through the realized absorptive capacity. Furthermore, we suggest that both types of absorptive capacity co-evolve with the other having a positive influence on the innovation performance.

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        증례 : 내분비-대사 ; 항정신병 약제 치료 중 동반된 프로락틴 분비 뇌하수체 거대선종 치료 1예

        김봉선 ( Bong Sun Kim ),김주성 ( Joo Sung Kim ),류형규 ( Hyong Kyu Ryu ),박진웅 ( Jin Woong Park ),현선아 ( Sun A Hyun ),강제욱 ( Je Wook Kang ),최용준 ( Yong Jun Choi ) 대한내과학회 2015 대한내과학회지 Vol.88 No.1

        이전의 연구에서 정신병증과 고프로락틴혈증이 동시에진단되어 bromocriptine으로 고프로락틴혈증을 조절한 증례가 보고된 바 있으나, 정신병증과 프로락틴 분비 뇌하수체거대선종이 동반된 환자에서 두 질환을 약물적인 치료만으로 안정적으로 치료한 증례는 많지 않다. 본 증례에서는 정신분열증으로 항정신병 약제로 장기간 치료를 받던 환자에게 발생한 프로락틴 분비 뇌하수체 거대선종을 진단하여 상반된 치료 기전을 가진 도파민 길항제와 작용제를 동시에처방하여 치료했다. 그 결과 혈청 프로락틴 수치 및 뇌하수체 선종의 크기는 감소하고 정신분열증이 악화되지 않는 등성공적으로 치료되어 문헌고찰과 함께 보고하는 바이다. Antipsychotics are the drug of choice for patients with schizophrenia, but they can induce hyperprolactinemia and growth of pituitaryadenomas by blocking dopamine 2 receptors in the pituitary gland. In contrast, the medical treatment for a prolactinoma is adopamine agonist. Therefore, managing a patient concurrently diagnosed with a prolactinoma and psychosis is challenging. We describea patient with schizophrenia who was diagnosed with a prolactinoma. We changed his neuroleptic to quetiapine and prescribedbromocriptine for the prolactinoma. As a result, the patient was successfully treated with a dopamine agonist and antipsychoticwithout psychotic exacerbation. Our case suggests that dopamine agonists can be administrated to patients with schizophreniaand a prolactinoma without adversely affecting their psychopathological status.

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        ARPE-19 세포에서 산화적 스트레스에 대한 갈색거저리 추출물의 항산화 효과

        김봉선(Bong Sun Kim),최라영(Ra-Yeong Choi),반유진(Eu-Jin Ban),이준하(Joon Ha Lee),김인우(In-Woo Kim),서민철(Minchul Seo) 한국생명과학회 2022 생명과학회지 Vol.32 No.11

        황반 변성은 현대 사회에서 발병율이 급격히 증가한 질환 중 하나이다. 황반 변성의 대표적인 원인은 노화로 인한 산화 스트레스로 널리 알려져 있고 최근 노령화로 인해 발병 연령은 40대부터 급격하게 증가하고 있다. 따라서 본 연구에서는 TMH를 이용해 산화적 스트레스에 대한 항산화 효능 및 세포 사멸 억제 연구를 통해 눈 건강 개선 소재를 개발하였다. 먼저 TMH의 인간 망막색소상피세포 사멸 억제 효능 평가를 위해 MTS assay로 세포 생존율을 측정하였다. 망막색소상피세포에서 H₂O₂에 의한 산화적 스트레스로 인해 약 60%의 세포 생존율을 확인 할 수 있었고 TMH에 의해 농도 의존적으로 세포 사멸을 억제됨을 확인할 수 있었다. 또한 LDH release assay를 통해 세포막 보호 효능을 확인 하였으며 세포 내 ROS 측정을 통해 세포 내 활성산소종 조절을 통한 항산화 효능을 확인 할 수 있었다. 마지막으로 세포 생존과 사멸에 관여하는 세포 내 신호 단백질인 MAPKs의 인산화 조절, 항산화 효소인 HO-1 발현 조절, 세포 사멸 관여 단백질인 Bax/Bcl-2의 발현 그리고 cleaved caspase-3 단백질 분석을 통해 TMH의 산화 스트레스에 대한 항산화 그리고 세포 사멸 억제 경로를 확인 하였다. 위와 같은 결과 도출을 통해 TMH의 눈 건강 기능성 소재로서의 가능성을 확인하였다. Tenebrio molitor larvae is well known as edible insect. Then, although it has been widely studied that Tenebrio molitor larvae has various bioactive functions such as antioxidant, anti-wrinkle, and anticancer. Nevertheless, antioxidant effects of Tenebrio molitor larvae water extract (TMH) has not been well described in Adult Retina Pigment Epithelial cell line (ARPE-19). In this study, we demonstrated that antioxidant effects of TMH against H₂O₂-induced oxidative stress in ARPE-19. Thus, we selected for our studies and performed a series of dose-response assay to determine the working concentration that lead to a consistent and high degree of cytotoxicity, which we defined as the level of H₂O₂ that killed 40% of the ARPE-19 cells. ARPE-19 cells were pre-treated with various concentrations of TMH (0.1 up to 2 mg/ml) before exposure to 300 μM H₂O₂. As we expected, TMH effectively prevented ARPE-19 cells from 300 μM H₂O₂-induced cell death in a dose-dependent manner. Furthermore, TMH inhibited the phosphorylation of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) such as extracellular signal regulated kinase (ERK), c-Jun N-terminal kinase (JNK), and p38. Overall, the inhibitory effects of TMH on H₂O₂-induced apoptosis and oxidative stress were associated with the protection cleaved caspase-3, Bax, Bcl-2, and HO-1. The TMH suppressed H₂O₂-induced cell membrane leakage and oxidative stress in ARPE-19 cells. Thus, these results suggest that the TMH plays an important role in antioxidant effect in ARPE-19.

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