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        배양조건이 Bacillus subtilis 융합주의 ${\gamma}-Glutamyltranspeptidase{\;}({\gamma}-GTP)$ 활성에 미치는 영향

        김관필,김성호,정낙현 한국식품영양과학회 2001 한국식품영양과학회지 Vol.30 No.3

        Bacillus subtilis 돌연변이주 중 ${\gamma}-GTP$활성이 높은 SM-2와 SM-10을 융합시켜 획득한 융합주 중 ${\gamma}-GTP$활성이 높은 융합주 FG-21의 배양적 특성을 조사하였다. 융합주 FG-21에 의한 ${\gamma}-GTP$의 생산은 1% glycerol, 1% peptone, 0.1% citric acid, 5 mM $K_2HPO_4$, 1 mM $FeCl_3$, 1 mM $MgCl_2$, 1 mM $NH_4Cl$, pH 7.0의 배지에 의해 $37^{\circ}C$에서 36시간 배양했을 때 621 U/mL으로 최대한 활성을 보였다. 융합주 FG-21이 생산한 biopolymer A가 단백질함량이 38.4%이고 B. subtilis K-1이 생산하는 biopolymer B의 단백질함량은 19.3%로 융합주 FG-21이 생산하는 Biopolymer A보다 함량이 낮았다. 융합주 FG-21의 biopolymer가 모균주의 biopolymer B보다 단백질함량이 높은 것은 상대적으로 높은 ${\gamma}-GTP$활성이 높아서 생성된 PGA가 levan보다 함량이 많기 때문인 것으로 사료된다. 총당함량은 biopolymer A가 58.5%, biopolymer B가 76.5%로 나타났다. 융합주 FG-21과 모균주가 생산하는 biopolymer의 단백질함량과 총당함량비는 융합주 FG-21이 생성한 biopolymer는 38 : 59. 모균주가 생산한 biopolymer B는 19 : 78의 비율이었고 HPLC 분석에 의한 biopolymer A와 B의 fructose함량은 각각 537.7 mg/g biopolymer, 764.4 mg/g biopolymer으로 나타났다. Biopolymer A와 B의 glutamic acid함량은 각각 163.7 mg/g, 94.3 mg/g이었다. Biopolymer A와 B의 fructose와 glutamic acid의 함량비는 각각 78 : 22, 89 : 11의 비로 함유되어 있었다. 따라서 융합주에 의해 생산된 biopolymer는 모균주보다 구성상태가 변화된 biopolymer를 생산한 것으로 판단되어 fusion과 같은 균주개량을 통하여 물질의 구성적, 물질적 변화된 biopolymer를 생산할 수 있을 것이라 사료된다. A fusant FG-21 was selected on the basis of higher ${\gamma}-GTP$ activity following fusion process between SM-2 and SM-10 of Bacillus subtilis mutants. ${\gamma}-GTP$ activity of the mutant FG-21 was increased up to 612 U/mL when grown for 36 hr at $37^{\circ}C$ in culture media containing 1% glycerol 1% glycerol, 1% peptone, 0.1% citric acid, 5 mM $K_2HPO_4$, 1 mM $FeCl_3$, 1 mM $MgCl_2$, 1 mM $NH_4Cl$, pH 7.0. In fusnat FG-21, the ratio of protein to total sugar contents for biopolymer A was 38 to 59. for biopolymer B from parental strains it was 19 to 78. Fructose contents determined by HPLC were $573.7\;\mu\textrm{g}/mg\;and\;764.4\;\mu\textrm{g}/mg$ for biopolymer A and B, respectively. And glutamic acid content were $163.7\;\mu\textrm{g}/mg\;and\;94.6\;\mu\textrm{g}/mg$ for biopolymer A and B, respectively. In fusant FG-21, the ratio of fructose to glutamic acid contents for biopolymer A was 78 to 22. For biopolymer B from parental strains it was 89 to 11.

      • SCOPUSKCI등재

        배양조건이 Bacillus subtilis 융합주의 γ - Glutamyltranspeptidase(γ - GTP) 활성에 미치는 영향

        김관필(Kwan-Pil Kim),김성호(Seong-Ho Kim),정낙현(Nack-Hyun Cheong) 한국식품영양과학회 2001 한국식품영양과학회지 Vol.30 No.3

        Bacillus subtilis 돌연변이주 중 γ-GTP활성이 높은 SM-2와 SM-10을 융합시켜 획득한 융합주 중 γ-GTP활성이 높은 융합주 FG-21의 배양적 특성을 조사하였다. 융합주 FG-21에 의한 γ-GTP의 생산은 1% glycerol, 1% peptone, 0.1% citric acid, 5 mM K₂HPO₄, 1 mM FeCl₃, 1 mM MgCl₂, 1 mM NH₄Cl, pH 7.0의 배지에 의해 37℃에서 36시간 배양했을 때 621 U/mL으로 최대의 활성을 보였다. 융합주 FG-21이 생산한 biopolymer A가 단백질함량이 38.4%이고 B. subtilis K-1이 생산하는 biopolymer B의 단백질함량은 19.3%로 융합주 FG-21이 생산하는 biopolymer A보다 함량이 낮았다. 융합주 FG-21의 biopolymer가 모균주의 biopolymer B보다 단백질함량이 높은 것은 상대적으로 높은 γ-GTP활성이 높아서 생성된 PGA가 levan보다 함량이 많기 때문인 것으로 사료된다. 총당함량은 biopolymer A가 58.5%, biopolymer B가 76.5%로 나타났다. 융합주 FG-21과 모균주가 생산하는 biopolymer의 단백질함량과 총당함량비는 융합주 FG-21이 생산한 biopolymer A는 38 : 59, 모균주가 생산한 biopolymer B는 19 : 78의 비율이었고 HPLC분석에 의한 biopolymer A와 B의 fructose함량은 각각 573.7 mg/g biopolymer, 764.4 mg/g biopolymer으로 나타났다. Biopolymer A와 B의 glutamic acid함량은 각각 163.7 mg/g, 94.3 mg/g이었다. Biopolymer A와 B의 fructose와 glutamic acid의 함량비는 각각 78 : 22, 89 : 11의 비로 함유되어 있었다. 따라서 융합주에 의해 생산된 biopolymer는 모균주보다 구성상태가 변화된 biopolymer를 생산한 것으로 판단되어 fusion과 같은 균주개량을 통하여 물질의 구성적, 물질적 특성이 변화된 biopolymer를 생산할 수 있을 것이라 사료된다. A fusant FG-21 was selected on the basis of higher γ-GTP activity following fusion process between SM-2 and SM-10 of Bacillus subtilis mutants. γ-GTP activity of the mutant FG-21 was increased up to 612 U/mL when grown for 36 hr at 37℃ in culture media containing 1% glycerol, 1% peptone, 0.1% citric acid, 5 mM K₂HPO₄, 1 mM FeCl₃, 1 mM MgCl₂, 1 mM NH₄Cl, pH 7.0. In fusant FG-21, the ratio of protein to total sugar contents for biopolymer A was 38 to 59. For biopolymer B from parental strains it was 19 to 78. Fructose contents determined by HPLC were 573.7 μg/mg and 764.4 μg/mg for biopolymer A and B, respectively. And glutamic acid contents were 163.7 μg/g and 94.6 μg/g for biopolymer A and B, respectively. In fusant FG-21, the ratio of fructose to glutamic acid contents for biopolymer A was 78 to 22. For biopolymer B from parental strains it was 89 to 11.

      • KCI등재

        토양으로부터 Protease 생산 세균의 분리 및 특성

        김관필(Kwan-Phil Kim),김남형(Nam-Hyung Kim),이창호(Chang-Ho Rhee),우철주(Cheol-Joo Woo),배동호(Dong-Ho Bae) 한국식품영양과학회 2002 한국식품영양과학회지 Vol.31 No.5

        공업적으로 광범위하게 이용되고 있는 protease 중 중성 영역에서 최적의 활성을 갖는 중성 protease에 대한 연구의 일환으로, 토양으로부터 protease의 생성능이 우수한 10여 균주를 순수 분리하였으며, 이들 중에서 protease의 활성이 가장 우수한 PANH765를 최종 선별하였다. 이 균주의 형태학적, 배양학적, 생리학적 및 생화학적 특성을 조사하여 Bergey의 세균 분류서의 색인에 따라 체계적으로 분류한 결과, Bacillus subtilis 또는 그 유연균으로 동정되어 분리균을 Bacillus subtilis PA-NH765로 동정하였다. B. subtilis PANH-765 균주에 의한 protease의 최적 배지 조성은 2.0% glucose, 1.0% yeast extract, 0.2% ammonium nitrate, 0.02% ferrous sulfate 및 0.02% dipotassium hydrogen phosphate이었으며, 최적 생산 조건은 배양온도 30℃, pH 7.0, 진탕 속도 150 rpm이었다. 이 조건에서 초기 균체량을 5%(w/v)접종하여 배양하였을 때 시간에 따른 효소의 최대 활성은 배양 36시간일 때 6.34 U이었다. In order to develope a new protease applicable to industries, a bacterium which produces a remarkable amount of extracellular protease were isolated from soil. About 10 bacterial strains producing protease were isolated from samples of soil, and strain PANH765 showed the highest activity of protease production among them. The strain was identified as Bacillus subtilis according to the Bergey's Manual of Systematic Bacteriology based on its morphological, cultural and physiological characteristics. B. subtilis PANH765 showed the maximal production of protease in the medium containing 2.0% glucose, 1.0% yeast extract, 0.2% ammonium nitrate, 0.02% ferrous sulfate and 0.02% dipotassium hydrogen phosphate. Under the optimal condition with temperature of 30℃, initial pH of 7.0 and shaking speed of 150 rpm, the protease production reached a maximum level with 36 hr cultivation (6.34 U).

      • SCOPUSKCI등재
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        Bacillus megaterium SFO41에 의한 Cholesterol Oxidase의 생산 및 최적 배양 조건

        김관필(Kwan-Pil Kim),이창호(Chang-Ho Rhee),우철주(Cheol-Joo Woo),박희동(Heui-Dong Park) 한국식품영양과학회 2001 한국식품영양과학회지 Vol.30 No.3

        우리나라 전통 발효식품(침채류 및 젓갈류)으로부터 cholesterol oxidase 생산성이 있는 균주를 분리하고 이들 분리된 균주들로부터 여러 단계의 균주 선별시험을 통하여 cholesterol oxidase 생산성이 우수한 미생물을 선별하여 그 특성을 조사하였다. Cholesterol oxidase의 생산성이 가장 우수한 SFO41의 형태학적, 배양학적 및 생리학적 특성을 조사하여 Bergey's Mannual of Systematic Bacteriology의 분류기준에 따라 동정한 결과 Bacillus megaterium 또는 그 유연균으로 동정되어 분리균을 Bacillus megaterium SFO41로 명명하였다. Cholesterol oxidase의 생산 조건을 검토한 결과 최적 배지 조성은 2.0% glucose, 0.5% yeast extract, 0.03% MgSO₄ㆍ7H₂O, 0.02% K₂HPO₄, 0.2% NH₄NO₃, 0.2% cholesterol로 판명되었으며, 배양 조건은 30℃, 초기 pH 7.0, 진탕 속도는 150 rpm에서 24시간 배양 시 효소 생성이 가장 우수하였다(2.37 U). A novel strain of SFO41 producing a large amount of cholesterol oxidase as an extracellular enzyme isolated from Korean salt fermented foods. The strain was identified as Bacillus megaterium based on morphological, cultural and physiological characteristics. Experiments were carried out to optimize the condition of cholesterol oxidase production using B. megaterium SFO41. B. megaterium SFO41 was shown to give the maximum yield of cholesterol oxidase in the medium containing 2.0% glucose, 0.5% yeast extract, 0.03% MgSO₄ㆍ7H₂O, 0.02% K₂HPO₄, 0.2% NH₄NO₃ and 0.2% cholesterol. The optimum culture conditions, temperature, initial pH and agitation speed were 30℃, 7.0 and 150 rpm, respectively. The enzyme production reached a maximum level at 24 hr of cultivation (2.37 U).

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        도라지 분말을 첨가한 쿠키의 품질 특성

        정은자,김관필,방병호,Jeong, Eun-Ja,Kim, Kwan-Pil,Bang, Byung-Ho 한국식품영양학회 2013 韓國食品營養學會誌 Vol.26 No.4

        본 연구는 여러 가지 기능성과 생리활성을 가지고 있는 도라지를 활용하고자 도라지 분말을 0%, 1%, 3%, 5% 첨가하여 도라지 쿠키를 제조한 후 그 품질 특성을 측정하였다. 도라지 분말의 첨가량이 증가할수록 쿠키의 수분 함량과 pH가 낮아졌다. 쿠키의 색도는 도라지 분말의 첨가량이 많아질수록 명도(L)는 감소했으며, 적색도(a)와 황색도(b)는 증가하였다(p<0.001, p<0.01). 쿠키의 퍼짐성 지수는 도라지 분말의 첨가량이 많아질수록 높아졌으나, 도라지 분말의 첨가량과 쿠키의 퍼짐성 간에는 통계적으로 유의한 차이를 나타내지 않았다. 도라지 쿠키의 경도는 첨가량의 증가와 함께 낮아지는 것으로 나타났다. 도라지 쿠키의 관능적 특성은 1% 첨가군이 색과 맛, 조직감, 전체적인 기호도가 가장 높았으며, 풍미는 무첨가군이 가장 높았고, 도라지 분말 첨가량이 증가할수록 낮았다(p<0.001). This study investigated the quality characteristics of cookies containing Platycodon grandiflorum powder, which is well known for its various functions and biological activity. Cookie samples were prepared by adding the Platycodon grandiflorum powder at different levels of 0%, 1%, 3% and 5%. In this study, moisture, pH, color, spread factor, hardness and sensory evaluation of cookies were examined. The results showed that the pH and moisture of cookies were decreased when more amount of Platycodon grandiflorum powder was added. Regarding the color of cookies, the L value was decreased when more amount of Platycodon grandiflorum powder was added, where as the a value and b value were increased (p<0.001, p<0.01). The spread factor of cookies generally increased as more amount of Platycodon grandiflorum powder was added, but it was not statistically significant. The hardness of the cookies decreased as more amount of Platycodon grandiflorum powder was added. Cookies containing 1% of Platycodon grandiflorum powder showed the highest scores for overall acceptability, color, taste and texture. Regarding the flavor of cookies, the control showed the highest score, and the score decreased as more amount of Platycodon grandiflorum powder was added.

      • KCI등재

        쑥 분말 첨가량에 따른 쿠키의 품질 평가

        방병호,김관필,이문수,정은자,Bang, Byung-Ho,Kim, Kwan-Pil,Rhee, Moon-Soo,Jeong, Eun-Ja 한국식품영양학회 2014 韓國食品營養學會誌 Vol.27 No.3

        This study investigated the quality characteristics of cookies containing mugwort powder, which is well known for its various functions and biological activity. Cookie samples were made by adding the mugwort powder at different levels of 0%, 1%, 3% and 5%. In this study, moisture, pH, color, spread factor, hardness, antioxidant activity and sensory evaluation of cookies were examined. The pH and moisture were increased when increasing levels of mugwort powder were used. The L, a and b color values were significantly (p<0.001) decreased when increasing levels of mugwort powder were used. The spread factor of the cookies was significantly (p<0.01) decreased when increasing levels of mugwort powder were used.. The hardness and DPPH radical scavenging activity of cookies were significantly (p<0.001) increased when increasing levels of mugwort powder were used. Cookies containing 3% of mugwort powder showed the highest taste and texture scores. The scores for Flavor and color decreased when more mugwort powder was added.

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