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스테인리스 스틸 쿠폰과 고밀도 폴리에틸렌 쿠폰 표면에서의 Salmonella Typhimurium 바이오필름 형성
박샛별 ( Saetbyeol Park ),유진영 ( Jinyoung Yoo ),김기영 ( Giyoung Kim ) 한국농업기계학회 2018 한국농업기계학회 학술발표논문집 Vol.23 No.2
본 연구는 식중독 발생 원인균인 Salmonella Typhimurium (S. typhimurium)에 의해 형성되는 바이오필름을 조사하기 위하여 수행되었다. 바이오필름은 스테인리스 스틸과 고밀도 폴리에틸렌(High-Density Polyethylene, HDPE) 쿠폰을 tryptic soy broth 배지에 담가 7일간 37°C에서 배양하며 재질에 따른 쿠폰 표면의 바이오필름 형성 정도를 측정하였다. 또한 형성된 바이오필름의 효율적인 회수 방법을 조사하기 위해 바이오필름 탈리과정에서 glassbeads (GBs) 첨가한 후 강하게 교반하는 방법으로 쿠폰 표면에 부착된 세균을 회수하였고, 이를 일반세균수 시험법으로 회수된 균수와 비교하였다. HDPE 쿠폰과 스테인리스 스틸 쿠폰의 부착균수는 각각 4.56±0.13 log CFU/㎠와 4.68±1.01 log CFU/㎠이었고, 재질에 따른 S. typhimurium의 부착 정도에는 유의적 차이가 없었다(p>0.05). HDPE 쿠폰의 GBs 첨가군과 비첨가군의 바이오필름 부착균수는 각각 4.46±0.37 log CFU/㎠와 4.65±0.88 log CFU/㎠이었고, 스테인리스 스틸 쿠폰의 GBs 첨가군과 비첨가군의 바이오필름 부착 균수는 각각 5.40±0.34 log CFU/㎠와 4.17±0.51 log CFU/㎠였다. HDPE 쿠폰의 경우 회수과정에서 GBs 첨가군/비첨가군 간의 부착 균수의 유의적 차이가 없었으나(p>0.05), 스테인리스 스틸 쿠폰의 경우 GBs 첨가군과 비첨가군 간 유의한 차이가 있었으며(p<0.05), 바이오필름 탈리 과정에서 GBs 첨가가 회수 효율을 높인 것으로 판단된다. 바이오필름의 경우 유사한 life cycle을 거쳐 형성되므로, 본 연구는 병원성 세균의 바이오필름과 관련하여 스테인리스 스틸이나 HDPE를 기반으로 한 신선 편이 가공 시설 및 기구의 안전성 연구의 기초 자료가 될 수 있다.
박샛별 ( Saetbyeol Park ),모창연 ( Changyeun Mo ),김기영 ( Giyoung Kim ),임종국 ( Jongguk Lim ),유진영 ( Jinyoung Yoo ) 한국농업기계학회 2017 한국농업기계학회 학술발표논문집 Vol.22 No.2
건강과 삶의 질 향상에 대한 요구가 증가함에 따라 소비자의 농식품 구매 기준이 과거 질이나 양, 가격에서 품질, 맛, 안전성 등으로 변화하고 있다. 식품업계는 농식품 안전성에 대한 소비자 신뢰와 요구 증대를 위해 안전관리시스템을 마련해 시행하고 있다. 농약, 중금속, 곰팡이, 잔류성 유기오염물질 등의 유해물질로부터 안전한 먹거리를 원하는 소비자로 인해 GAP (농산물 우수관리제도) 또는 친환경 인증을 받은 농산물의 수요가 증가하는 추세이다. 병원성 미생물은 농산물의 안전성을 위협하는 대표적인 생물학적 위해요소로써 식품 표면이나 도마, 조리기구 등에 잔류할 경우 직·간접적으로 식중독 발병의 원인이 된다. 따라서 본 연구에서는 병원성 미생물을 신속하게 검출할 수 있는 장치를 개발하기 위해 병원성 미생물 검출에 적합한 형광 스펙트럼 조건을 구명하고자 하였다. 병원성 미생물의 형광 발현 정도는 마이크로 플레이드 리더기를 사용하였고, 여기광을 250~450 nm 파장영역에서 변경시키면서 400~800 nm 영역에서 형광 발현 스펙트럼을 측정하였다. 그 결과, 대장균과 살모넬라균은 520 nm 부근에서 형광 피크가 발생하여 대조구과 구별이 되었다. 이러한 형광 분광 특성은 농산물 안정성 검사를 위한 신속장치 개발을 위한 기초 자료로 활용 가능할 것으로 판단된다.
스테인리스 스틸과 고밀도 폴리에틸렌 쿠폰 표면에서의 E. coli O157:H7 바이오필름 형성
유진영 ( Jinyoung Yoo ),박샛별 ( Saetbyeol Park ),김기영 ( Giyoung Kim ) 한국농업기계학회 2018 한국농업기계학회 학술발표논문집 Vol.23 No.2
대장균(Escherichia coli)은 그람 음성 간균으로 온혈동물의 창자에서 많이 볼 수 있다. 대부분의 대장균 변종들은 해롭지 않지만, E. coli O157:H7은 사람에게 심각한 식중독을 일으키며, 식품에 오염된 경우 대규모 리콜의 원인이 된다. 바이오필름은 미생물이 세포외중합체(Extracellular Polymeric Substance, EPS)의 매트릭스에 내장되어 있는 응집체이며, EPS는 점액질로 세포의 DNA, 단백질과 다당류의 중합체 결합물이다. 바이오필름에는 세균, 곰팡이, 효모, 원생동물 등과 같은 다양한 미생물이 존재하며 바이오필름을 형성한 미생물은 식품, 기기 및 조리 도구 등에 부착하여 교차 오염을 통해 식재료 및 조리된 식품에 잔존하게 되어 결과적으로 식중독을 유발할 수 있다. 본 연구는 식품 및 농산물 가공시설의 안전성 유해요소인 바이오필름을 신속하게 검출하기 위한 장치개발의 기초연구로서, 스테인리스 스틸과 고밀도 폴리에틸렌(High-Density Polyethylene, HDPE) 쿠폰 표면에서 E. coli O157:H7의 바이오필름 형성 특성을 조사하기 위해 수행되었다. 스테인리스 스틸과 HDPE 쿠폰을 각각 Tryptic Soy Broth (TSB) 배지에 투입하고 E.coli O157:H7을 접종· 배양하여 바이오필름을 형성시켰다. 배양된 쿠폰은 세척· 건조 후 Phosphate buffered saline (PBS)에 바이오필름을 탈리· 회수· 평판배양 해서 균수를 측정하는 것으로 바이오필름 형성 특성을 분석하였다. 바이오필름 회수방법은 glass beads와 함께 고속 교반하여 회수하는 방법과 고속 교반만으로 회수하는 방법을 사용하였다. Glass beads를 사용하여 바이오필름을 회수한 경우 스테인리스 스틸 쿠폰의 부착 균수는 4.39 log cfu/㎠이고, HDPE 쿠폰의 부착 균수는 3.10 log cfu/㎠로 두 재질의 쿠폰에서 바이오필름 형성능의 확연한 차이를 보였다. 향후 더 다양한 재질의 쿠폰에서 대장균의 바이오필름 형성 평가와 바이오필름 회수 방법에 관한 연구를 진행할 계획이다.
뉴트라비딘 검출용 간이 진단키트의 성능향상을 위한 기본 플랫폼 선정
최선미(Sunmi Choi),김기영(Giyoung Kim),엄애선(Aeson Om),문지혜(Jihea Moon),박샛별(Saetbyeol Park),이상대(Sangdae Lee),김혁주(Hyuk Joo Kim) 충남대학교 농업과학연구소 2012 농업과학연구 Vol.39 No.4
This study was performed to optimize the basic platform of a lateral flow immunoassay. Improvement of the limit of detection (LOD) was evaluated according to the width of a nitrocellulose membrane with varying concentrations of analyte. The analyte, neutravidin was detected based on the avidin-biotin interaction. The antibody-Au nanoparticle conjugation was mostly stabled in a PBS buffer of pH 7.3. The optimal widths of a nitrocellulose membrane were 4 and 6 ㎜ considering the sample flow rate and signal strength of the test line on the membrane. The LOD of neutravidin was 0.001 ㎎/ml in the optimum conditions.
Fast Protein Liquid Chromatography를 이용한 황색포도상구균 장독소 B 분리
조아영 ( A Young Cho ),김기영 ( Giyoung Kim ),임종국 ( Jongguk Lim ),모창연 ( Changyeun Mo ),문지혜 ( Ji Hea Moon ),박샛별 ( Saetbyeol Park ),박수희 ( Su Hee Park ),엄애선 ( Aeson Om ) 한국산업식품공학회 2015 산업 식품공학 Vol.19 No.2
The aim of this study is to develop a method to separate and purify the Staphylococcal enterotoxin B (SEB). The method was based on fast protein liquid chromatography (FPLC) along with gel filtration (GF) after cation exchange chromatography (CIEX) treatment. Various columns such as CM sepharose HP, Cellufine C-500, WorkBeads 40S for CIEX, and GF on Sephacryl S-100 for GF were compared in terms of separation efficiency. Consequently, Work- Beads 40S along with Sephacryl S-100 produced best separation performance. Separated SEB with developed method was verified with ELISA assay. Purified SEB with the method can be used to manufacture rapid detection kit or antibodies.