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허봉희,방병호,윤치영 최신의학사 1986 最新醫學 Vol.29 No.1
α-amylase에 대한 강력한 저해물질을 생산하는 방사균 BY-445를 토양으로부터 분리하였으며 이 균이 생산하는 배양액을 Amberlite IRA 420 column, Silica gel column chromatography 및 Sephadex G-50 column을 이용하여 조정제하였다. 이때 수율은 21.4%였으며 비활성도는 6배 증가하였다. 그리고 저해제의 α-amylase 100㎍에 대해 2배의 농도인 200㎍에서 저해활성이 거의 95%로 최고에 달하였다. 본 저해물질의 활성에 미치는 금속이온의 영향으로 Co^(2+), Hg^(2+), Pb^(2+), 및 Cu^(2+)등에 의해 상대활성이 각각 13, 30, 37 및 72%로 각각 나타났다. 또한 본 저해물질은 열에 대한 안정성이 커서 100℃에서 120분간의 열처리를 하여도 그 활성은 거의 잔존하였으며 또한 전 pH 범위(pH2.0~12.0) 에서도 아주 안정하였다. 본 저해물질의 여러가지 생화학적 반응을 검토한 결과Anthrone, Molisch, Phenol-sulfuric acid반응에서는 양성을 띠었으며, Ninhydrin, Biuret, Benedict 등의 반응에서는 음성으로 나타났으며, 각종 carbohydrases에 대한 본 저해물질의 활성을 검토한 결과 사람 침 α-amylase와 Bacillus subtilis,porcine pancreas, Asp.niger의 glucoamylase등의 α-amylase에 대한 저해율이 각각 87%와 81,79,63%로 나타났으며, Aspergillus속의 cellulase와 Saccharomyces cerevisiae의 invertase에 대한 저해는 나타나지 않았다. A strain of Actinomycetes BY -445 isolated from soil was able to produce a biological active substance that has a strong inhibitory activity against hydrolysis by α-amylase. Extracellular inhibitory substance (inhibitor) from the culture broth of Actinomycetes BY -445 was purified to partial homogeneity by procedures including Amberlite IRA 420 colurrm, Silica gel column, and Sephadex G-50 column chromatography. The partial purifying procedures resulted in 6-fold purification with the overall yield of 21.4% and the velocity of the inhibitor was reached at maximum in inhibitor concentration of 200㎍ against a-amylase enzyme concentration of 100㎍. In effect of metal salt, Co^(2+), Hg^(2+), Pb^(2+) and Cu^(2+), the relative inhibitory activity were shown about 13, 30, 37 and 72%, respectively and the inhibitor was also appeared to be relatively thermostable, and no appreciable inactivation was observed after incubation at 100℃ for 2 hour. The substance was stable in pH range from 2.0 to 12.0 at 37℃. The biochemical reaction of the substance was positive to Anthrone, Molisch and Phenol-sulfuric acid, but negative to Ninhydrin, Biuret and Benedict. A strong inhibitory activity against hydrolysis by a-amylase of human saliva, Bacillus subtilis, and porcine pancreas and glucoamylase of Aspergillus niger was shown 87, 81, 79 and 63%, respectively. but it did not inhibit cellulase of Aspergillus sp. and invertase of Saccaromyces cerevisiae.
허봉희 서울保健大學 1985 論文集 Vol.5 No.1
우리나라 特産植物인 "산꿩의 다리"의 지하경을 methanol로 抽出하고, 이 抽出物을 減庄濃縮하여 Citric acid에 녹이고 이것을 NH_(4)OH로 pH9-10으로 한 後 ether Chloroform 可溶部와 水溶層으로 나누고 水溶尸 을 取하여 Reineckate鹽으로 만든 後 四級 alkaloid鹽을 沈澱시켜 (約I04g) 50% acetone水溶液에 녹이고 濾過해서 不溶性物質을 除去했다. 濾液을 陰ion 交換樹脂에 통과시켜 鹽化物을 얻었다. 鹽化物을 증발 乾固해서 賠褐色物質을 約 27g을 얻었다. 이것을 뜨거운 methanol에 녹여 不溶性物質을 除去하고 減庄濃縮한 殘溜 約 24.3g을 얻어 이 物質을 여러 spectrum 시험을 通해 그 化學구조를 究明한 結果 四級 alkaloid인 magnoflorine Chloride임을 同定하였다. Three kinds of alkaloids were isolated from the roots of Thalictrum tuberiferum Maximowicz which is one of the plants indigenous to our country. These alkaloids belong to aphorpline alkaloid. Among them a brownish crystalline substance showed mp 250-252°C, C_(20)H_(24)O_(4)^(+) Cl^(-) of molecular formula was identified to he magnoflorine Chloride through the UV, IR, NMR, and mass spectrum. Further study on the bioactivity of previous alkaloid must be followed. And continual identification of another alkaloids must be followed too.
Thalictrum tuberiferum Maximimowicz의 4급염기성 물질에 관한 연구
이인란(Ihn Rhan Lee),허봉희(Bong Hee Her),한선애(Sun Ae Han),안혜원(Hye Won Ahn) 한국생약학회 1985 생약학회지 Vol.16 No.1
Thalictrum tuberiferum Max.의 수성 Ex.에서 4급염기성 물질인 magnoflorine (C<sub>20</sub>H<sub>24</sub>N0₄, 갈색비결정성, mp. 250∼252℃)과 화합물 B(등색결정, mp. 266∼268℃)를 단리하였고, 화합물 B는 지금까지의 발표보고된 Thalictrum속 식물의 4급염기성물질과는 다른 새로운 물질로 사료되어 보고하고져 한다.