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- 저자 : 윤병대(Byung-Dae Yun) (검색결과 5 건)
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${\beta}-Galactosidase$ 생산 유산균 선별 및 특성 조사
이영기,최수산나,박용일,박찬선,윤병대,황윤식,김희식,Lee, Young-Ki,Choi, Susanna,Park, Young-Il,Park, Chan-Sun,Yoon, Byung-Dae,Hwang, Yun-Sik,Kim, Hee-Sik 한국미생물학회 2006 미생물학회지 Vol.42 No.3
[ ${\beta}-Galactosidase$ ] (lactase)를 생산하는 유산균을 선별하고 그들이 생산하는 ${\beta}-galactosidase$의 특성을 조사하였다. X-gal이 포함된 MRS배지에서 푸른색을 나타내는 약 100여개의 콜로니를 김치로부터 분리하였다. 그들 중 ET-1과 LA-12 두 균주를 최종 선별하였으며, 16S rDNa 염기서열 분석을 통해 각 각 Lactobacillus fermentum과 L. acidophilus와 상동성이 높은 Lactobacillus 속으로 동정되었다. 선별된 두 균주는 높은 ${\beta}-galactosidase$ activeity와 우수한 생존력을 나타내었으며, 이들이 생산하는 ${\beta}-galactosidase$의 최적 활성조건을 조사한 결과, 반응온도 $55^{\circ}C$에서 가장 높은 활성을 나타내었으며, 반응 pH의 경우 ET-1은 pH 5.5에서 최고 활성을 나타내었고, LA-12는 pH7.0에서 가장 높은 활성을 보였다. 선별 유산균 ET-1과 LA-12는 위액과 담즙산액에 대해 우수한 내성을 나타내었다. 두 개의 선별 균주는 인공위액에 3시간 배양 후 초기 생균수와 비교하여 생균수 변화가 거의 없었고, 담즙산액으로 사용한 0.3% oxgall에서 24시간 반응 후에도 1 log cycle 정도 감소된 $10^8CFU/ml$의 생균수를 유지하였다. 이러한 결과를 바탕으로 유산균 ET-1과 LA-12는 유제품 산업에 이용 가능성이 크다고 판단된다. This study was carried out to select the lactic acid bacteria producing ${\beta}-galactosidase$ (lactase) and investigate the properties of the ${\beta}-galactosidase$. About 100 strains of lactic acid bacteria showing blue colony on the MRS agar medium containing X-gal were isolated from several kinds of Kimchi. Among them, 2 strains were selected as potential ${\beta}-galactosidase$ producers. The selected strains, ET-1 and LA-12, were identified as Lactobacillus fermentum and L. acidophilus, respectively by the analysis of 16S rDNA sequences. They showed relatively high ${\beta}-galactosidase$ activity and cellular viability. Their ${\beta}-galactosidase$ showed the highest activity at $55^{\circ}C$. And the optimum pHs of the enzymes produced by ET-1 and LA-12 were pH 5.5 and pH 7.0, respectively. They were also highly resistant to artificial gastric juice and bile. Two selected strains showed little change of viable cell number for 3 hr incubation in artificial gastric juice, and maintained the viable cell number at $10^8CFU/ml$ for 24 hr in 0.3% oxgall after incubation for 2 hours in artificial gastric juice. Based on these results, ET-1 and LA-12 are expected to be applied in dairy industry.
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인삼 뿌리썩음병 발병에 미치는 토양전염성병원균과 토양환경요인
신지훈(Ji-Hoon Shin),윤병대(Byung-Dae Yun),김혜진(Hye-Jin Kim),김시주(Si-Ju, Kim),정덕영(Doug-Young Chung) 한국토양비료학회 2012 한국토양비료학회지 Vol.45 No.3
Disease is the major problem in ginseng cultivation from seed stratification, soil preparation prior to planting, right through to drying of the roots. There are many soil-borne disease pathogen in rhizosphere soil environment, furthermore occurrence of diseases by a diverse group of fungi and related organisms are closely related to various soil condition. Observable symptoms for soil-borne diseases include wilting, leaf death and leaf fall, death of branches and limbs and in severe cases death of the whole plant. The fungus Cylindrocarpon destructans is the cause of root rot characterized by a decay of the true root system in many ginseng production areas in Korea. Some pathogens are generally confined to the juvenile roots whilst others are capable of attacking older parts of the root system. However, the relation between the soil environmental characteristics and ginseng root rot by soil-borne disease pathogen is not clearly identified in ginseng field. In this paper, we reviewed soil-borne plant pathogen causing root rot disease of ginseng with respect to soil environment.
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Xanthomonas sp. YL-37의 Alkaline Protease 유전자의 클로닝
이대희,김수경,이승철,윤병대,황용일 한국산업미생물학회 1995 한국미생물·생명공학회지 Vol.23 No.2
생분해성의 세제를 개발하기 위해 alkaline protease 생산성 균주인 Xanthomonas sp. YL-37에서 분리한 염색체 DNA와 plasmid pUC9를 이용하여 대장균에서의 gene bank를 작성하여, 배지상에서 alkaline protease 생산성 균주를 분리하였다. Agarose gel 전기영동과 제한효소지도로부터 약 2.7 kb의 alkaline protease 구조유전자가 포함된 DNA 단편이 pUC9 내에 클로닝된 것을 확인하였다. 배양상등액을 이용한 SDS-PAGE 상에서의 activity staining assay 결과로 alkaline protease가 세포외로 분비됨을 확인하였으며 분자량은 약 64 kDa으로 추정되었다. 생산된 alkaline protease 활성은 20℃, 30℃, 40℃ 에서 차이를 보이지 않았다. 이들 결과로부터 클로닝된 plasmid를 함유하는 대장균에서 생산된 alkaline protease는 Xanthomonas sp. YL-37의 alkaline protease와 같음을 알 수 있었다. For the purpose of developing a new biodegradable detergent, we have isolated a gene encoding wide-range temperature applicable alkaline protease from Xanthomonas sp. YL-37 (Lee et al., 1994, Kor. J. Appl. Microbio. Biotechnol.) An alkaline protease gene was isolated from the gene bank that was prepared from the chromosomal DNA of Xanthomonas sp. YL-37. From the results of agarose gel electrophoresis and a restriction enzyme mapping, a 2.7 kb DNA fragment containing the alkaline protease gene was inserted in the plasmid pUC9. Extracellular activity of a clone having alkaline protease gene was detected on SDS-polyacrylamide gel with activity staining assay. The molecular weight of alkaline protease was determined to be about 64 kDa from 11% SDS-PAGE analysis. Alkaline protease activity, produced from E. coli which harboring the plasmid, showed no difference at reaction temperature 20, 30 and 40℃, respectively. This result showed that alkaline protease produced from E. coli harboring the plasmid was apparently the same as that of Xanthomonas sp.YL-37.
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방선균 분리주 No. 2007-18이 생산하는 Protein Kinase C 저해물질, MT-2007
안종석,박문수,안순철,박찬선,오원근,윤병대,이현선,민태익 한국산업미생물학회 1993 한국미생물·생명공학회지 Vol.21 No.1
미생물 대사산물로부터 phorbol ester에 의해 유도되는 K562 세포 표면의 소포형성 및 Protein kinase C(PKC)에 대한 저해제를 탐색하여 방선균 분리주 No. 2007-18로부터 용매추출 및 크로마토그래피의 기법을 이용하여 MT-2007을 분리하였다. MT-2007는 503.9 μM의 농도에서 phorbol 12,13-dibutylate에 의해 유도된 K562 세포표면의 bleb 형성을 완전히 저해하였고, PKC 효소의 IC_50값은 31.4 μM이었다. MT-2007의 구조는 물리·화학적 성질과 UV, IR, MS, ^1H-NMR에 의해서 lasalocid A sodium salt로 동정하였다. During the screening of inhibitors against protein kinase C(PKC) and the bleb formation of K562 cell induced by phorbol ester from microbial secondary metabolites, MT-2007 was purified by solvent extraction, and chromatographic techniques from Actinomycetes isolate No. 2007-18. It showed completely suppression of bleb formation of K562 cell surface induced by phorbol 12,13-dibutylate at the concentration of 503.9 μM and IC_50 on PKC was 31.4 μM. Its structure was postulated as lasalocid A sodium salt by physico-chemical properties and UV, IR, MS, ^1H-NMR.
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