브랜드 티파니(Tiffany & Co.)주얼리에 나타난 아르누보 양식의 특성 연구

남화경(Hwa Kyung Nam) 한국디자인문화학회 2010 한국디자인문화학회지 Vol.16 No.4

본 논문은 오랜 전통을 이어 온 주얼리 브랜드 티파니사(Tiffany & Co.)의 주얼리에 나타난 아르누보 양식의 조형적·개념적 특성을 분석하고자 하였다. 작은 선물용품점에서 출발한 티파니사는 19세기부터 현대에 이르기까지 세계의 주얼리 역사의 중심이 되어왔으며, 기업이 가지는 경제적 가치만큼이나 큰 문화적 가치를 가진 브랜드로 자리매김 되어왔다. 따라서 본 연구에서는 세계적 주얼리 브랜드로 오랜 역사와 전통을 이어 내려오고 있는 티파니사의 역사와 아르누보 양식 주얼리의 특성을 보여주는 티파니사의 주얼리 작품들의 특성을 조사하였다. 또한 현대에 이르기까지 티파니사에서 어떠한 방식으로 아르누보의 양식을 형태적인 측면에서뿐만 아니라 개념적인 면에서 계승·발전시켜오고 있는지를 파악하였다. 이를 위해 우선 아르누보 양식의 특성을 조사하였고 티파니사의 설립과 발전양상, 그리고 당시의 시대적 배경을 파악하고, 티파니사의 주얼리 속에 나타난 아르누보 양식의 조형적·개념적 성향을 연구하였다. 또한 아르누보의 개념을 지속해오면서 다양한 디자인을 개발하고 있는 현재의 티파니사가 추구하는 주얼리 디자인의 성향을 조사함으로써 현대의 주얼리 브랜드의 역할에 대해 제고해 보고자 하였다. 이를 위해 티파니사에서 발행한 각종 홍보물과 서적 및 전시자료, 그리고 주얼리의 역사를 다룬 주얼리 관련서적, 인터넷 사이트, 논문 등을 참고 하였다. 이 논문을 통해 국내 주얼리 디자인 연구개발의 중요성을 강조함과 동시에, 주얼리 브랜드의 문화적 가치향상의 필요성을 제고하고자 한다. This thesis is to analyze the formative characteristics of art nouveau style appeared in the jewelry of Tiffany & Co., which is a worldwide jewelry brand with a long tradition. Thus, this study examined the characteristics of art nouveau style at first, while grasping the foundation of Tiffany & Co. and its development aspects and historical background and, finally, investigating the formative tendency of art nouveau appearing in the jewelry of Tiffany & Co. Starting from a small gift shop, Tiffany & Co. has been the historical center of the world`s jewelry from the 19th century to the present time and become a worldwide brand having a cultural value as high as the economic value the company has. Therefore, this study attempted to grasp the characteristics of jewelry works produced by Tiffany & Co., which shows the history of Tiffany & Co. and the formative characteristics of art nouveau-styled jewelry. In addition, by using those new findings, this study also attempted to help the progress of various future designs.

복합재료(Mixed-media)의 활용과 현대장신구의 전개

남화경(Nam, Hwakyung) 한국디자인지식학회 2013 디자인지식저널 Vol.26 No.-

20세기 복합재료와 복합미디어(mixed-media)의 활용은 현대 미술 분야에 매우 큰 도약과 표현 영역의 확대를 가져왔다. 본 논문에서는 현대장신구의 다양한 전개 양상 중 하나인 오브제성과 복합재료의 활용양상을 정리하고, 이를 통해 장신구 작가들의 보다 자유로운 표현양식과 새로운 재료에 대한 다양한 시도와 탐구를 돕고자 한다. 이를 위해 먼저 오브제 개념의 등장이 현대 미술사에 미친 영향을 공예 분야를 중심으로 살펴보고 다음으로 현대 공예의 전개과정에서 나타난 복합재료의 활용에 대해 구체적으로 파악한다. 이러한 논의를 기초로 현대 장신구에서 나타나고 있는 경향, 즉 오브제와 복합재료의 활용을 통해 장신구가 더 이상 몸을 치장하는 단순한 장식품이 아니라 작가들의 예술적 감성을 보다 효과적으로 표현하는 순수조형물로 확장되고 있음을 보여주고자 한다. 입체파 화가들에 의한 콜라주(collage)기법이 그 시초가 된 오브제 미술은 창작된 오브제를 서로 조합함으로써 복합재료를 활용하는 아상블라쥬(assemblage)미술로 전개되면서 현대 미술의 영역을 변화시켰다. 공예분야에도 실용적 기능이 축소된 조형적 표현으로서의 오브제 공예가 등장함으로써 공예계에 큰 영향을 미쳤으며, 여러 종류의 매체를 서로 혼합시킨 매체 즉 재료와 또 다른 재료의 복합개념을 어떤 매체에 의해 단일 개념으로 변조시키는 복합재료(Mixed-media)의 활용으로 이어졌다. 장신구 분야 또한 오브제의 등장과 복합재료의 활용이 가져다 준 변화를 통해 재료의 제한이나 기존의 전통적 제작방식을 벗어나 완성된 장신구들이 다양한 작가들에 의해 시도 되면서 현대장신구의 영역이 더욱 확대되어 나가고 있다. This study aims at analyzing the tendency of object craft and application of mixed-media shown in the contemporary jewelry art. For this purpose, we need to find out how the concept of object influenced modern art history, focusing on the craft art. Next, we figure out the one of the outstanding features during the development of modern craft art-the application of mixed-media technique. Based on this perspective, a new trend has appeared in the jewelry art, that is, tendency of object craft and application of mixed-media. It means that jewelry are not just ornaments which can adorn human body but fine sculptures which express more effectively the artistic sensibility of the artists. The Object art was originated from a Collage-technique which was created by the cubists in modern art. It has been developed into the assemblage art. The tendency of modern art also had influenced the craft art, so that so called "Object-Craft Art" had appeared. In this tendency it has necessarily resulted in the appearance of mixed media or a complex concept, which started from mixing the diverse media or materials, and finally it has been changed into a single concept by the modulation of some media. This historical change in craft art has influenced also the jewelry art, a realm of craft art. Beyond the traditional material limits or making method the possibility of expression in modern jewelry art has been expanded by many experiments and artistic achievements.

아르누보 장신구의 조형적 특성 연구

남화경(Hwa Kyung Nam),송수경(Su Kyung Song) 한국디자인문화학회 2009 한국디자인문화학회지 Vol.15 No.3

산업혁명 이후 근대에서 현대로 접어들면서 인간 사회가 겪은 변화의 양상은 과거 어느 시기보다 역동적인 것이었다. 그러한 시대를 바탕으로 이전 사회의 역사적, 전통적 예술양식으로부터의 차별과 새로운 모티브를 배경으로 유럽에서 발전한 예술양식이 아르누보(Art Nouveau)이다. 아르누보는 유기적 형태의 모티브를 장식미술로 적용하였으며, 기존의 전통양식을 과감히 탈피하고 작품에서 재료의 재화적 가치가 아닌 디자인 자체의 예술적 가치와 창의성을 추구함으로써 현대 디자인의 시초가 되었다고 평가된다. 더불어 미술을 모든 생활에 실용화 하였다는 점에서 아르누보가 가지는 역사적 의미는 매우 크다. 본 연구에서는 아르누보 양식의 고찰과 아르누보 장신구의 조형적 특성을 살펴보기 위해 선행적으로 관계문헌과 논문 등을 통해 자료를 수집조사 하였다. 먼저 전반적인 아르누보 양식의 역사적 관점에서의 이론적 배경과 특징을 살펴보았고, 다음으로 아르누보 장신구의 대표적 작가와 작품을 중심으로 살펴본 다음, 마지막으로 아르누보 장신구의 조형적 특성을 연구하였다. 과학기술의 도래와 기계화의 역기능으로 인해 21세기에도 `자연주의`는 중요한 화두가 되고 있다. 따라서 아르누보 양식과 아르누보 장신구의 연구를 통해 현대장신구의 발전방향을 모색해보는 기회를 가져보았다. The desire to be embellished reflects the situation of a society and the time, so each appears to have unique and distinctive style. with the transition from the modern time to the present time after the industrial revolution, the changes that human society experienced were more dynamic than any other times in the past. The art style that has developed in Europe with the differentiation from the historical and traditional art style of the previous society and with a new motive based on such situation of the time is Art Nouveau. Art Nouveau was applied to decoration art using motives in organic forms. It has been evaluated to have boldly gotten out of the traditional styles and become the beginning of modern design by seeking for artistic values and creativity of design itself instead of monetary value of materials. in addition, it has a historical significance in making the practical use of fine arts in every aspect of life. In this study, data were collected and reviewed from relevant literature and articles to preliminarily review the style of Art Nouveau and the formative characteristics of Art Nouveau ornaments. First, the theoretical background and characteristics were reviewed from the historical aspect of Art Nouveau style, and then the characteristics of Art Nouveau style ornaments were reviewed. Lastly, the formative characteristics of Art Nouveau ornaments were investigated based on the representative artists for Art Nouveau ornaments and their works. Because of the advent of science technology and the negative functions of mechanization, `naturalism` still emerges as an important topic to us living in the 21st century. Due to the influence of naturalism and romanticism, the recent advent of Art Nouveau ornaments based on `naturalism` provides a chance to re-evaluate Art Nouveau. This study also provided an opportunity to seek for the development direction of Art Nouveau style ornaments for the future.

합금 개발을 활용한 주얼리 재료와 표면착색 연구

남화경(Nam, Wha Kyung) 한국디자인문화학회 2015 한국디자인문화학회지 Vol.21 No.3

인류는 오래 전부터 여러 가지 방식으로 장식의 욕구를 표출함으로써 주얼리의 역사를 만들어왔다. 주얼리 제작에 가장 많이 사용되어 온 귀금속 재료들은 빛나는 아름다운 광택과 희소성 그리고 공기나 물에 안정적인 물리적⋅화학적 특성으로 인해 많은 사랑을 받아왔다. 그러나 금이나 은은 그 색상이 제한적이고 희소성으로 인해 높은 가격대를 형성하여 주얼리산업 발전의 저해요인이 되고 있다. 본 연구는 기존에 상용되는 주얼리 재료의 한계를 초월하여 다양한 재료와 형태, 기법 등을 통해 경제적 효율성을 높이고 표현영역을 확대하고자 함에 목적을 둔다. 이를 위해 주얼리에 주로 사용되는 금속의 특성에 대해 알아보았으며 현대주얼리 시장의 어려움을 극복할 수 있는 재료 및 표면 기법연구에 주안점을 두었다. 특히 금⋅은⋅동의 합금과 표면처리 기법 중 착색에 의한 표면마감과 변화를 시도 하는 것으로 범위를 한정하였다. 연구내용으로는 금속재료와 표면마감에 관한 전문서적과 선행 연구들을 참고하였으며 귀금속시장의 동향을 파악하기 위한 관련 기사 등을 참고 하였으며 주요 주얼리 재료인 금과 은에 적동을 합금하고 각각의 금속 합금 비율을 점층적으로 달리함으로써 색상의 변화를 유도하였다. 또한 동에 적용되어 화려한 색감을 내는 일본 전통착색기법인 녹청착색을 통해 더욱 다양한 색감과 질감을 낼 수 있는 가능성을 모색 하였으며 착색의 효과를 극대화 하고자 촉매제가 되는 첨가물을 넣어 색상의 변화를 유도하였다. 그리고 연구 결과물인 합금속과 착색을 활용하여 절상감(切象嵌 marrige of metal) 기법으로 주얼리를 제작하였다. 합금을 통해 고가의 금속인 금과 은의 순도를 조절하여 재료의 가격적 측면을 고려한 금속 재료 연구 및 표면착색 연구가 제품개발로 이어져 침체된 주얼리 시장과 연구 분야에 활력을 주고 주얼리 산업의 활성화에 도움이 되기를 기대한다. The human beings have made a history of jewelry through creation of various expressions to their desire on the decoration since a long time ago. The materials which have been mostly used in manufacturing of jewelry are loved by jewelers, due to the beautiful gloss and their scarcity. In addition, they have characteristics that well harmonized with air or water in perspective of physical and chemical. However, the limited color and scarcity of gold or silver makes the price and cost as a high level, and this seems to provide negative cause to the growth of jewelry industry. This research is aiming to contribute on enhancement of economic efficiency and development of design opportunity for the production of jewelry, together with overcoming to inherent limitation of existing jewelry materials. Alloy method can adjust to purity of gold or silver with making the lower price of material. Especially, the scope of this research is limited in alloy and surface treatment technique trying to change color by patination among alloy gold or silver with copper. For this, there are many books about materials and articles about jewelry market which are useful for reference. Gold and silver, main jewelry materials, were alloyed, respectively, with copper. Then, gradual adjustment of ratio for each material led to change of its color. In further, the research tries to find the probability on making various sense of color and texture for jewelry through performing of patination technique, which was developed in Japan as a traditional coloring technique and applied to copper. Moreover, to maximize coloring effect, ingredient added on patination, this leads to making various colors. As the result of research, jewelry was produced by marriage of metal, alloy and coloring. Since alloy method can adjust to purity of gold or silver with making the lower price of material, it will be linked to diversified research on metal material and coloring of the surface with creation of various opportunities on product development. Therefore, this research would be expected to contribute on vitalization of jewelry industry and recovering of the depressed market.

Cryopreservation of Bovine IVM/IVF/IVC Blastocysts by Vitrification

남화경,김은영,이금실,윤산현,박세필,임진호,Nam, H.K.,Kim, E.Y.,Lee, K.S.,Yoon, S.H.,Park, S.P.,Lim, J.H. The Korean Society for Reproductive Medicine 1999 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.26 No.2

본 연구는 체외생산된 소 배반포기배를 발달 단계 및 배양일에 따라 구별하여 초자화 동결 및 융해하였을 때, 그 발달능을 유지하는지 확인하고자 실시하였다. 체외수정 후 8일간 배양된 배반포기 배는 20% ethylene glycol에 3분 동안 평형시키고, EFS40 (40% ethylene glycol, 18% ficoll, 0.3M sucrose 그리고 10% FBS가 함유된 mDPBS) 동결액에 30초 동안 노출한 후, 액체질소에 침지하여 초자화 동결되었다. 체외 생존 여부는 응해 24시간 및 48시간에 재팽창 및 탈출 또는 완전탈출로써 평가하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1) 체외수정 후 8일간 배 양하였을 때, 난할된 배의 배반포기 배로의 발달율은 41.0%였다 (초기 ; 7.6%, 팽창; 22.9%, 탈출; 4.6%, 완전탈출; 5.9%). 2) 배반포기배를 동결액에 노출 또는 초자화 동결하였을 때, 초자화 동결된 배반포기배의 재팽창율 (73.3%)은 대조군 및 동결액에 노출된 경우 (100, 97.0%)보다 낮았다 (p<0.05). 그러나 융해 48시간 후 탈출 또는 완전탈출 배반포기배 형성율은 초자화 동결된 경우 (66.7, 46.7%)와 노출된 경우 (66.7, 39.4%)는 유의한 차이를 나타내지 않았으나, 대조군(100, 100%)과는 차이를 보였다 (p<0.01). 그러나, 완전탈출까지 발달한 배반포기배의 총 세포수를 조사하였을 때, 각 처리군간의 유의한 차이는 없었다. 3) 배반포기배의 발달 단계에 따른 체외 생존율을 비교하였을 때, 재팽창율은 실험군간에 유의한 차이를 보이지 않았다 $(64.5{\sim}75.6%)$. 그러나 융해 48시간 후, 탈출 또는 완전탈출로써 평가된 초기 배반포기배의 발달율 (25.8, 9.7%)은 팽창 (69.7, 39.4%)및 탈출 배반포기배 (53.3, 43.3%)의 발달율보다 낮게 나타났다 (p<0.05). 4) 또한, 배양 7, 8 그리고 9일의 팽창 배반포기배를 초자화 동결하였을 때, 8일 및 9일간 배양된 배반포기배의 재팽창율은 7일간 배양된 경우보다 낮게 나타났다 (7일; 93.9%, 8일; 75.8%, 9일; 87.5%) (p<0.05). 그러나 완전탈출 배반포기배로의 발달율에서는 처리군간에 유의한 차이를 보이지 않았다 (7일; 36.4%, 8일; 36.4%, 9일; 31.3%). 이러한 결과는 EFS40을 이용한 2단계 초자화 동결 방법이 체외생산 된 팽창 및 탈출 배반포기배의 동결에 유용하게 이용될 수 있음을 시사한다. The objective of this study was to examine the effect of developmental stage and embryo age of in vitro produced bovine blastocysts after vitrification and thawing. In vitro cultured day 8 blastocysts after IVF were equilibrated 20% ethylene glycol (EG) for 3 min. and were vitrified using EFS40, which is consisted of 40% EG, 18% ficoll, 0.3M sucrose and 10% FBS added in mDPBS for 30 sec. before being plunged into $LN_2$. Also, survival in vitro was assessed by re-expansion and hatching or hatched at 24 hand 48 h postwarming, respectively. The results obtained in these experiments were summarized as follows; 1) When the embryos were cultured for 8 day after IVF, 41.0% of the cleaved embryos developed to the blastocysts (early; 7.6%, expanded; 22.9%, hatching; 4.6% and hatched; 5.9%). 2) When the embryos were exposed or vitrified to the freezing solution, the re-expansion of vitrified embryos (73.3%) was significantly lower than that of control and exposed embryos (100, 97.0%) (p<0.05). But the formation rate of hatching or hatched blastocysts of vitrified embryos (66.7, 46.7%) at 48h after thawing was similar to that of exposed embryos (66.7, 39.4%) but not control (100, 100%) (p<0.01). However, in the total cell numbers of those developed hatched blastocysts, there were not significantly different among the treatment groups. 3) When the embryo survival rates by different developmental stage were examined, the re-expansion was not different among the groups $(64.5{\sim}75.6%)$. After warming 48 h, the hatching and hatched formation of early blastocysts (25.8, 9.7%) was significantly lower than those of expanded (69.7, 39.4%) and hatching blastocysts (53.3, 43.3%) (p<0.05). 4) In addition, when the expanded blastocysts at day 7, 8 and 9 were vitrified, the re-expansion of day 8 and 9 embryos was significantly lower than that of day 7 (day 7; 93.9%, day 8; 75.8% and day 9; 87.5%) (p<0.05). However, the rates of development to hatched blastocysts were no difference among the groups (day 7; 36.4%, day 8; 36.4% and day 9; 31.3%). These results suggested that in vitro produced expanded or hatching blastocysts can be efficiently cryopreserved by the two-step vitrification method using EFS40.

Establishment of In Vitro 3-Dimensional Culture System of Mouse Endometrial Cells;I. Cytohistological Study on Mouse Endometrium

남화경,김은영,이금실,박세영,박은미,권중균,윤산현,박세필,임진호,Nam, Hwa-Kyung,Kim, Eun-Young,Lee, Keum-Sil,Park, Sae-Young,Park, Eun-Mi,Kwon, Jung-Kyun,Yoon, San-Hyun,Park, Se-Pil,Lim, Jin-Ho The Korean Society for Reproductive Medicine 2000 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.27 No.1

연구배경: 본 연구는 마우스의 자궁에 있어 착상시 일어나는 자궁내막의 변화를 미세구조적 측면에서 관찰하고, 이러한 기초 자료를 바탕으로 마우스 자궁내막세포를 이용한 3차원적 체외 배양시스템을 확립하는데 있다. 실험동물은 임신이 유도된 $6{\sim}8$ 주령의 ICR을 이용하였다. 연구재료 및 방법: 생검 조직은 hCG 접종 후 D1과 D5에 자궁 전체를 적출하여 획득하였다. 채취된 조직은 2.5% glutaradehyde와 1% osmium tetroxide를 이용하여 고정시킨 후, 탈수, 포매 및 절편 과정을 거쳐 염색시키고, 광학현미경, 투과전자현미경을 이용하여 관찰하였으며, 주사전자현미경을 이용한 관찰을 위한 표본은 고정된 조직을 탈수, 건조 및 코팅 과정을 거쳐 획득하였다. 결과: 1) 광학현미경상에서, 후기 분비기인 D5의 생검 조직은 초기 분비기인 D1의 조직에 비해 결합조직의 증가에 따른 기질층의 확장이 두드러졌으며, 이와 함께 자궁내막선과 혈관이 크게 발달되어 있었다. 2) 투과전자현미경상에서, 마우스 자궁내막의 미세구조는 단충원주형의 표면상피세포층, 기저층 및 기질층의 3층을 이루고 있었다. 또한, D5에서는 미세융모, 소포체, 골지체, 지질, 글리코겐 및 분비 과립 그리고 기저층의 표면적이 크게 확장되어 있었다. 3) 주사전자현미경상에서, 분비기가 진행될수록 마우스 표면상피세포의 주름의 정도와 미세융모의 분포가 크게 증가함을 알 수 있었으며, 특히 마우스의 착상시기인 D5에서는 자궁 수용성의 표지자인 자궁돌기의 출현이 두드러졌다. 마우스의 자궁돌기는 자궁내벽을 따라 불규칙적으로 좁은 지역에 분포하고 있었으며, 동일표본 내에서도 서로 다른 발달 단계를 보여주고 있었다. 결론: 마우스 자궁내막의 형태학적 변화에 관한 이러한 관찰 결과는 마우스의 자궁내막이 발정주기 중 특히 착상직전의 시기에 커다란 형태학적 변화를 경험함을 보여주었다. This study was designed to identify the ultrastructural changes of mouse endometrium during peri-implantation period and obtain the fundamental information for the establishment of 3-dimensional culture system of mouse endometrial cells in vitro. The used female ICR mice ($6{\sim}8$ wks) were conducted on pregnant. The biopsies were obtained from whole uterus at cycle day 1 (D1) and day 5 (D5) after hCG injection and mating. The biopsies materials were fixed 2.5% glutaraldehyde and 1% osmium tetroxide. Subsequently, for observation using light and transmission electron microscopy (LM and TEM), they were dehydrated and embedded in Epon and the embedded biopsies were sectioned and stained. For scanning electron microscopy (SEM), the fixed specimens were dehydrated, dried and coated with gold. 1) For LM, the biopsied materials at D5 (late secretory phase) were appeared the extended stromal layer by increased connective tissues and the fully developed endometrial glands and vessels compared with D1 (early secretory phase). 2) For TEM, the mouse endometrium was consisted of 3-layers, a simple polarized columnar epithelial cells, basement membrane and stromal cells. At D5, the distribution of microvilli, endoplasmic reticulum, Golgi body, lipid and glycogen deposits, secretory granules and surface area of basement membrane were increased. 3) For SEM, the degree of folding and microvilli of surface of mouse epithelial cells was became more and more according to the process of secretory phase, and at D5, implantation time of mouse, the appearance of pinopodes as a specific marker of uterine receptivity was found. The uterine pinopodes of mouse were found in narrow sites at the luminal surface, irregularity and appeared the different stages in the same sample. Therefore, these results indicated that the mouse endometrium was experienced dramatic morphological changes during peri-implantation period.

동결-융해된 인간 배반포기 배 유래의 배아 간(幹) 세포 배양

김은영,남화경,이금실,박세영,박은미,윤지연,허영태,조현정,박세필,정길생,임진호,Kim, Eun-Young,Nam, Hwa-Kyung,Lee, Keum-Sil,Park, Sae-Young,Park, Eun-Mi,Yoon, Ji-Yeon,Heo, Young-Tae,Cho, Hyun-Jung,Park, Se-Pill,Chung, Kil-Saeng,Lim, Jin 대한생식의학회 2001 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.28 No.1

Objective: This study was to establish the human embryonic stem (ES) cells derived from frozen-thawed blastocyst stage embryo that were destined to be discarded after five years in routine human IVF-ET program. Methods: Frozen-thawed and survived human blastocysts were treated by immunosurgery, and recovered ICM cells were cultured onto STO feeder cell layer and ICM colony was subcultured by mechanical dissociation into clumps. To identify ES cell, alkaline phosphatase staining and expression of Oct4 in replated ICM colonies were examined. Also, to examine the possibility of ES cell differentiation, retinoic acid (RA), basic fibroblast growth factor (b-FGF), nerve growth factor (NGF) were added in culture medium. In addition, to classify the specific cell type, differentiated cells were stained by indirect immunocytochemistry. Results: One ICM colony recovered from frozen-thawed six blastocysts was subcultured, continuously replated during 40 passage culture duration without differentiation. Subcultured colonies were strong positively stained by alkaline phophatase. When the expression of Oct4 in cultured ES colony was examined, Oct4b type is more clearly indicated than Oct4a one although there was not detected in embryoid body or differentiated cells. In differentiated cardiomyocytes from ES colony, cells were beaten regularly (60 times/min). In differentiated neural cells from ES colony, neurofilament (NF) 200 kDa protein, microtubule associated protein (MAP) 2 and ${\beta}$-tubulin of specific marker in neurons, glial fibrillary acidic protein (GFAP) of specific marker in astrocytes and galactocelebrocide (GalC) of specific marker in oligodendrocytes were confirmed by indirect immunocytochemistry. Also, muscle cells were detected by indirect immunocytochemistry. In addition, ES colonies can be successfully cryopreserved. Conclusion: This study suggested that establishment of human ES cells can be successfully derived from frozen-thawed blastocysts that were destined to be discarded, and obtained specific cell types (cardiomyocytes, neurons and muscle cells) through the in vitro differentiation procedures of ES cells.

Cryopreservation of Human Multi-Pronuclear (PN) Zygote by Ultra-Rapid Freezing

김은영,이봉경,남화경,이금실,윤산현,박세필,정길생,임진호,Kim, E.Y.,Yi, B.K.,Nam, H.K.,Lee, K.S.,Yoon, S.H.,Park, S.P.,Chung, K.S.,Lim, J.H. The Korean Society for Reproductive Medicine 1998 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.25 No.2

본 연구는 인간 전핵기 수정란의 동결시 election microscope grid론 사용하는 초급속 동결방법이 유용하는지 여부를 조사하고자 실시하였다. 본 실험에서는 인간 IVF 시술시 생성되는 다-전핵기 (>2PN) 수정란을 정상 2PN 수정란 대신 사용하였으며, 또한 이들은 3PN과 $\geq4PN$ 수정란으로 나누어 전핵의 수에 따른 냉해와 융해 후 체외 배발달율을 조사하였다. 동해제는 30% ethylene glycol, 18% ficoll, 0.5 M sucrose와 10% FBS 등이 D-PBS에 첨가되어 제작된 EFS30을 사용하였다. 본 연구에서 얻어진 결과는 다음과 같다. 초급속동결-융해 후, 인간 다-전핵기 수정란의 생존율은 85.5%였다. 대조군과 동결군의 난할율을 진핵의 수에 따가 니누어 비교하였을 때, 각 군간에는 유의한 차이를 나타내지 않았다 (3PN; 81.3%와 85.4%, $\geq4PN$; 90.0%와 95.7%). 또한, 융해 후 체외발달율을 조사하였던바, $\geq4PN$수정란에서는 동결군 (4.5%)의 체외발달이 대조군 (44.4%)보다 유의하게 낮게 나타났던 반면, 3PN 수정란에서는 동결군 (22.0%)의 결과가 대조군 (38.5%)에 비해 유의한 차이를 나타내지 않았다. (p<0.05). 따라서 인간 다-전핵기 수정란은 EM grid와 EFS30 동결액을 이용한 초급속 동결로 배발달을 유도할 수 있다는 것을 알 수 있었다. The objective of this study was to test whether the developmental capacity of human multi-pronuclear (PN) zygotes after ultra-rapid freezing using EM grid can be maintained. For this experiment, multi-PN zygotes which produced in human IVF program were used as an alternatives of normal 2PN zygotes, and they were separated into 3PN or $\geq4PN$ zygotes to compare their in vitro development and cryoinjury according to PN number. As freezing solution, EFS30 which consisted of 30% ethylene glycol, 18% bcoll, 0.5 M sucrose and 10% FBS added D-PBS was used. The result obtained in this experiment was summarized as follows; When the multi..PN zygotes were ultrarapidly frozen and thawed, the high mean percentages (85.5%) were survived. Also when the cleavage rates between control and freezing group were compared with PN number, there were not significantly different in each group (3PN; 81.3% & 85.4% and $\geq4PN$; 90.0% & 95.7%). When the in vitro development rates after thawing were examined, freezing 3PN group (22.0%) was not differed to control 3PN group (38.5%), although the development result of freezing $\geq4PN$ group (45%) was significantly lower than that of control $\geq4PN$ group (44.4%) (p<0.05). These results demonstrate that developmental capacity of human zygote can be obtained by ultra-rapid freezing method using EM grid and EFS30.

Optimization of In Vitro Culture System of Mouse Preantral Follicles

박은미,김은영,남화경,이금실,박세영,윤지연,허영태,조현정,박세필,임진호,Park, Eun-Mi,Kim, Eun-Young,Nam, Hwa-Kyung,Lee, Keum-Sil,Park, Sae-Young,Yoon, Ji-Yeon,Heo, Young-Tae,Cho, Hyun-Jung,Park, Se-Pill,Loo, Jin-Ho The Korean Society for Reproductive Medicine 2001 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.28 No.2

연구목적: 본 연구는 생쥐 preantral follicles의 체외 배양 조건을 확립하고 이를 기초로 높은 체외 발달률 그리고 산자 생산률을 얻고자 하였다. 연구재료 및 방법 : Preantral follicles의 oocyte-granulosa cell complexes (OGCs)는 생후 12일된 FI ($C57BL{\times}CBA$)으로부터 난소를 적출하여 효소를 이용한 방법을 통해 획득하였다. 회수된 complexes는 10일 또는 12일 동안 체외 성장을 위해 Transwell-COL membrane insert로 옮겨졌고 5% FBS, 100 mIU/ml FSH, 100 mIU/ml hMC가 첨가된 ${\alpha}MEM$에서 배양되었다. 체외 성숙을 위해 1.5 IU/ml hCG가 첨가된 ${\alpha}MEM$에서 18 hrs 배양을 실시하였다. 그 후 M16에서 수정능력이 획득된 정자와 수정을 하여 4 hrs, 7 hts, 9 hrs 후에 10% FBS가 첨가된 modified M16 배양액에서 4일간 배양하거나 또는 bovine cumulus cell과 co-culture를 실시하였다. 그리고 형태적으로 정상적인 22개의 상실배와 포배를 2마리의 위임신 대리모 (ICR)의 자궁에 이식하여 산자 생산을 유도하였다. 결과: 1) OGCs 크기가 mouse preantral follicles의 핵 및 세포질 성숙에 미치는 영향을 조사하였을 때 $120{\sim}150{\mu}m$의 preantral follicles (MII: 33.0%, 난할률: 36.7%, 상실배 이상; 20.9%)은 핵 및 세포질 성숙에 있어서 $70{\sim}110{\mu}m$ (MII: 12.2%, 난할률: 10.2%, 상실배 이상: 4.8%)보다 더 높았다(p<0.001). 2)체외 성장기간의 연장이 mouse preantral follicles의 핵 및 세포질 성숙에 미치는 영향을 조사하였을 때 10일 (난할률: 38.2%)은 12일 (난할률: 20.0%)보다 난할률에서만 더 높았다 (p<0.01). 3) 체외 수정 시간의 연장이 mouse preantral follicle의 세포질 성숙에 미치는 영향을 조사하였을 때 9 hrs (난할룰 31.5%, 상실배 이상: 14.3%)은 4 hrs (난할률: 17.5%, 상실배 이상: 4.8%), 7 hrs (난할률: 20.4%, 상실배 이상: 6.1%) 보다 세포질성숙에 있어서 유의하게 높은 발달률을 나타냈다 (p<0.01). 4) 공배양이 mouse preantral follicle의 세포질성숙에 미치는 영향을 조사하였을 때 공배양 (상실배 이상: 17.4%)을 실시했을 때와 M16 (상실배 이상17.4%)에서 배양되었을 때는 차이가 없었다. 5)preantral follicle의 크기 ($120{\sim}150{\mu}m$), 체외 성장기간 (10일), 체외 수정 기간 (9시간), 배양 환경 (단지 medium만 존재)의 적절한 결과들을 종합하여 수행하였을 때 MII 성숙률, 난할률, 상실배 이상의 발달률은 30.2%, 39.3%, 22.5%이었고 총 22개의 상실배 및 포배를 2마리의 대리모에 이식했을 때 1마리가 임신했고 1마리의 산자를 생산했다. 결론: 따라서, 본 실험은 preantral follicle을 이용한 체외 배양 시스템이 생쥐 oocyte를 공급하는 또 다른 방법으로 효과적으로 이용될 수 있다는 것을 시사한다.

The Cytoskeletal and Chromosomal Constitution in Vitrified Mouse Oocyte

이봉경,김은영,남화경,이금실,윤산현,박세필,임진호,Yi, B.K.,Kim, E.Y.,Nam, H.K.,Lee, K.S.,Yoon, S.H.,Park, S.P.,Lim, J.H. The Korean Society for Reproductive Medicine 1998 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.25 No.3

본 연구는 동해방지제인 EFS35를 이용한 생쥐 미수정란의 초자화동결이 cytoskeleton과 염색체에 미치는 영향을 indirect immunocytochemistry와 염색체 분석으로 확인하고자 실시하였다. 생쥐 미수정란은 M2 배양액에 35% ethylene glycol, 18% ficoll, 0.3 M sucrose와 10% FBS가 함유된 EFS35를 이용하여 초자화동결되었다. 본 연구에서 얻어진 결과는 다음과 같다 초자화동결된 미수정란의 융해후 생존율은 89.3%로써 노출군 (97.7%)과 차이가 없었다. 초자화동결이 미수정란의 microtubule과 microfilament에 미치는 영향을 조사하였던 바, 동결군 (95.5, 100%)의 microtubule과 microfilament의 정상적인 형성율은 대조군 (97.5, 100%) 또는 노출군 (92.3, 100%)의 결과와 비교하였을때 차이가 나타나지 않았다. 또한, 체외수정 후 동결 군에서 정상적인 염색체수를 가진 난자의 비율도 73.5%로써, 대조군 (79.5%)과 노출군 (78.7%)의 결과와 차이가 없었던 바, 생쥐 미수정란을 EFS35에 노출하고 동결하는 것이 미수정란의 cytoskeleton과 염색체 성상변화에 영향을 미치지 않는다는 것을 알 수 있었다. 따라서, 본 연구에서 사용된 동해방지제인 EFS35를 이응한 초자화동결법은 생쥐 미수정란의 동결에 적합하다는 것을 시사한다고 하겠다. The objective of this study was to confirm whether the vitrification method using EFS35 has detrimental effect for cytoskeleton and chromosome constitution of the mouse oocytes by indirect immunocytochemistry and chromosome analysis. Mouse oocytes were vitrified using EFS35 which consisted of 35% ethylene glycol, 18% ficoll, 0.3 M sucrose and 10% FBS in M2 medium. The results obtained in this experiment were summarized as follows: When the survival rates after being exposed or vitrified in EFS35 were examined, there were not different between two groups (97.7 and 89.3%). Also, when the microtubule morphology and microfilament distribution in vitrified oocytes were examined, normal percentage of two cytoskeleton in vitrified group (95.5 and 100%) was not different from that in control (97.5 and 100%) and exposed group (92.3 and 100%). In addition, the rate of oocytes containing a normal chromosome number in vitrified group (73.5%) after IVF was not different from that in control (79.5%) and exposed group (78.7%). These results indicated that the cytoskeletal morphology and chromosome constitution of mouse oocytes were not affected by cryoprotectant (EFS35) or freezing apd that vitrification methods using EFS35 was suitable for cryopreservation of mouse oocytes.