3-D spheroid culture of canine mesenchymal stem cells derived from amniotic fluid

하유나 충남대학교 대학원 2013 국내석사

체내 세포 및 조직은 아주 복잡한 3차원 구조를 상호 작용하면서 성장하고 분화, 발전해 간다. 그러나 대부분의 세포 배양은 2차원으로 된 불침투성의 평평한 평면에서 이루어지고 있다. 2차원 세포 배양 및 모델링이 세포 배양 및 질병의 메커니즘에 중요한 통찰력을 지속적으로 제공해 주고 있으나, 2차원 세포배양은 우리 체내 세포 환경 조건을 제대로 모사하지는 못한다는 한계점을 지니고 있다. 그러나 3차원 세포 배양을 통해 생성된 3D spheroid는 체내 세포 및 조직을 모사하며 생체 내 세포 조직에 가까운 생물학적 환경을 제공한다. 3D spheroid 생성을 위한 여러 가지 방법이 연구 되었다. 그 중 Hanging drop 배양 방법은 전문적인 장비를 필요로 하지 않기 때문에 경제적이며 간단하며 빠른 시간에 spheroid를 생성할 수 있다는 장점을 가지고 있다. 본 실험에서는 인간과 가장 친숙한 동물이며 질병에 대한 임상학적 반응이 비슷한 질병 동물모델인 개의 양수에서 유래한 줄기세포를 이용하여 3차원 Spheroid 세포를 형성하고 spheroid의 형성과정과 세포의 생존능력을 관찰하였으며 3차원 배양세포의 분화능력을 확인하고 2차원 배양세포의 분화능력과 비교하고자 하였다. 개의 양수에서 세포를 분리 한 후 RT-PCR, Immunocytochemistry와 Flow cytometry 분석을 통해 MSCs의 특성을 확인하였다. 이러한 cAFS (Canine Amniotic fluid stem cell)는 기본 배지인 L-DMEM과 20% FBS, Growth factor인 bFGF와 EGF를 첨가하여 20μl의 배양액에 20,000개의 세포로 이루어진 drop을 형성하여 hanging drop 배양 방법을 통해 39˚C, 5% CO2 인큐베이터에서 3일간 배양 후 spheroid를 생성하였다. spheroid 생성의 형태적 변화는 현미경을 통해 관찰하였으며, 생존능력을 확인하기 위해 Flow cytometry를 실시하였다. 또한 지방, 연골, 골아세포 로의 분화를 유도하여 특정 염색방법과 RT-PCR 결과를 통해 3D spheroid의 중간엽 분화 능력을 확인 할 수 있었다. 본 연구의 결과를 바탕으로 3차원 배양방법을 통한 세포들이 중간엽 세포로의 분화능력을 유지하며 2차원 세포 배양을 통한 세포보다 연골세포로 분화하는 능력이 뛰어남을 확인하였다. 이는 연골 손상, 뼈연골형성 장애, 골연골형성이상과 같은 질병에 있어서 재생의학 및 세포이식을 통한 질병 치료의 기초자료로써 매우 중요한 의미를 가질 것으로 기대된다.

색채의 전략적 활용을 위한 기호학적 접근방법에 관한 연구

하유나 이화여자대학교 디자인대학원 2005 국내석사

색채는 다변화하는 환경에 전략적 가치를 부여하는 연구 분야이다. 또한 시공간을 초월하여 인간이 지각하고 사용하는 보편적인 매체이자 문명의 기반이다. 21세기를 맞으면서 색채의 새로운 역할에 대한 인식이 커짐에 따라 색채의 전략적 활용에 대한 중요성이 크게 부각되고 있다. 하지만 색채는 기후, 풍토의 자연적 요인, 사상과 관습, 시장과 산업, 재료와 기술, 제도와 법규, 개인의 경험 등 시대와 사회의 총체적인 요인들의 상호작용에 의해 형성되는 문화적 산물이기 때문에 객관화 되거나 표준화되기 어려운 매체이며 시공간을 달리하면서 상대적인 가치를 갖고 있는 민감한 요소이기도하다. 본 논문은 이와 같은 상황 인식을 바탕으로 ‘색채를 통한 시각적 커뮤니케이션이 어떻게 이루어지는가’를 색채와 기호, 두 분야의 유기적인 조화를 통하여 색채 기호에 대한 체계적 연구를 한다. 즉 논리적으로 설명하거나 정량화하기 어려운 색채를 시각 기호(Visual Sign)로 정의하고 그에 관한 이론적 체계를 연구한다. 본 연구의 목적은 기업적 측면에서 기호학적 학문을 토대로 색채의 전략적 활용 방안을 모색하는데 있다. 이에 본 연구자는 색채의 시각적 커뮤니케이션을 설명하는 데 필요한 이론과 용어를 기호에 관한 학문인 기호학(Semiotics)과 결합하여 설명하고자 한다. 커뮤니케이션을 위한 색채의 활용에서는 논리와 직관, 미학과 감성사이의 균형을 이룰 수 있도록 하느냐의 문제가 가장 중요한 논점이 된다. 이를 기호와의 적용을 통해 색채 기호의 속성에 대하여 알아보고 색채기호의 전략적 활용방안을 모색한다. 색채기호의 속성은 감성적 색채 기호 · 인지적 색채 기호 · 물리적 색채 기호 · 공감각적 색채 기호 · 문화적 색채 기호로 나누어 볼 수 있다. 감성적인 색채 기호는 색채의 미적, 심리적인 영향을 바탕으로 한 내포적인 메시지를 전달하는 기호유형이다. 인지적인 색채 기호는 색채의 지시적인 영향을 바탕으로 한 외시적인 메시지를 전달하는 기호유형이다. 물리적인 색채기호는 실제 접촉에 있어 색채의 촉감의 영향을 바탕으로 한 외시적, 내포적인 메시지를 전달하는 기호유형이다. 공감각적인 색채 기호는 색채의 공감각적인 측면, 즉 미각, 후각, 청각의 영향을 바탕으로 한 외시적, 내포적인 메시지를 전달하는 기호유형이다. 문화적인 색채 기호는 포괄적인 개념으로 문화적 영향을 받는 색채와 기업과 제품에 의해 문화적 상징이 되어 외시적, 내포적인 메시지를 전달하는 기호유형이다. 색채기호의 전략적 활용 방안은 위의 다섯 가지 유형에 의해 공통점을 도출하고 색채 계획에 있어 색채 기호의 전략적 활용방안으로 정체성(Identity) 강화를 위한 색채 기호전략 · 미적인 감성 향상을 위한 색채 기호전략 · 사용성 향상을 위한 색채 기호전략 · 속성 전달을 위한 색채 기호전략을 제안한다. 첫째 아이덴티티(Identity) 강화를 위한 색채 기호전략은 기업과 브랜드, 제품의 정체성 향상을 위한 제안으로 통합적인 역할이 두드러진다. 둘째 감성 전달을 위한 색채 기호전략은 색채의 미적 감성과 이미지에 기반을 둔, 나아가 아이덴티티 강화에 기여하는 색채전략의 제안이다. 셋째 사용성 향상을 위한 색채 기호전략은 제품이나 서비스 등의 인간중심적 사용성 향상을 위한 제안이다. 넷째 속성 전달을 위한 색채 기호전략은 속성표현이 핵심적 가치를 지니는 제품에 적극적으로 활용되어질 수 있는 제안이다. 색채 계획에 있어 색채의 최종적인 결정은 앞으로 선호될 경향이나 유행을 예견할 수 있는 안목과 여러 가지 대안들 중에서 최상의 색채를 선별해내는 고도의 심미적 판단력에 기반을 둔 직관적인 판단에 의존하게 된다. 여기에 본 연구자가 제안한 색채 기호전략은 색채 적용에서 논리와 직관, 미학과 감성사이의 균형을 이루게 해주는 방안이 될 것이다. 또한 색채 적용에 있어 불확실성과 실패율을 최소화하게 해주는 가치기준으로서의 역할을 하게 될 것이다. 본 연구는 각종 자료와 문헌에 의한 조사로 이루어졌다. 색채와 기호와의 접목은 선행된 연구의 부족으로 연구자의 주관적인 해석에 따랐다. 차후 연구에는 보다 포괄적인 유형 연구에 의해 세분화된 색채 기호전략에 대한 제안이 보강되어야 한다. The study of color is the field of study that allows diversification of environment the strategic value. The color is a general medium that human perceives and uses transcending the time and space, and it is also the foundation of civilization. As the 21st century came, recognition of color's new role became bigger and the importance of strategic color use was also noticed. However, the color is the product of culture that is created by the co-relation of natural factors such as weather and climatic conditions, and time and social factors such as idea, custom, market, industry, material, technology, system and law, and experience. As mentioned, the color is the medium that cannot be standardized and looked at objectively, and it also has sensitive elements that have timeless and space-less relative value. Based on these recognitions of circumstances, this report will systematically study semiotics of color and try to answer the question “How does visual communication work through color?” through both the field of color, the field of sign, and the harmony of the both fields.Thus, this study will define the color-that is hard to explain logically or to be quantified-as visual sign and research the theoretical system of it. The purpose of this study is to search, as a corporative view, for a program through systematical and practical use of the color based on the knowledge of semiotics. Therefore, I will explain the theories and terms that are necessary in the explanation of visual communication by combining the semiotics. In the practical use of the color, it is very important to balance between the logic, intuition, aesthetic and emotional feeling. In order to solve this dilemma, finding a property of the color signs through applying with the sign is necessary. The property of the color signs can be divided into emotional color sign, recognitive color sign, physical color sign, synesthetic color sign and cultural color sign.The emotional color sign delivers the connotative messages based on the esthetic and psychological effects of the color. The recognitive color sign delivers the denotative messages based on the effects of the color’s indication. The physical color sign delivers the both connotative and denotative messages through the effects of the sense of touch in actual contact. The synesthetic color sign also delivers the both connotative and denotative messages through the effects of the synesthetic side of the color- the sense of taste, the sense of smell, and the sense of hearing. The cultural color sign delivers both connotative and denotative messages through the color that are effected by the culture itself in comprehensive notion and by the symbols of the corporations and their products. The strategy of the practical use of the color sign is to come up with common features among five types of the color signs. In the planning of the color sign, the strategic color management of identity, the strategic color management of sensitivity, the strategic color management of usability, and the strategic color management of quality are suggested. First of all, the strategic color management of identity is to strengthen the identity of the corporation, brand and product. The comprehensive role of this management stands out. Second, the strategic color management of sensitivity is a suggestion that is not only based on the esthetic sensitivity of the color and images, but it also strengthens the identity. Third, the strategic color management of usability is a suggestion that improves the human focused items like products or service. Fourth, the strategic color management of quality is a suggestion that could improve on the products that has cored value of the expression of quality. In the planning of the color sign, the final decision is relied on either an expert’s eye to foresee the future preference or style, or the intuitive judgment to choose the best fitted color from many alternative ideas. The suggested color sign strategy of this study will help balance between the logic, intuition, esthetics, and sensitivity in the planning of the color sign. Moreover, this study will acts as an assessment tool to minimize the uncertainty and failure in applying the color. This study was created with many different materials and the research of the documents. Combining of the color and the sign is based on the researcher’s subjective opinion because of the lack of previous studies. In the future study, the detailed suggestions on the strategic color management should be added by comprehensive research.

The evaluation of inhibitory mechanism of seaweed extracts on TNF-α/IFN-γ-induced TARC and MDC activation in human keratinocytes : 해조류 추출물에 의한 INF-γ and TNF-α 로 자극된 인간 각질세포에서의 TARC MDC 활성 저해 평가

하유나 인천대학교 일반대학원 2021 국내박사

Marine algae are widely distributed worldwide which are mainly consumed as food in Korea, Japan, and China. Edible marine algae contain a range of components with potential health benefits. In recently, it has been reported for its antioxidant, anticancer, anti-inflammatory, antihypertensive, and tissuehealing properties. In this study, extracts from two species of red algae (Pyropia yezoensis extracts (PYE) and Polyopes affinis extracts (PAA and PAB)), a brown alga (Sargassum thunbergii extracts (STE)), and a green algav(Ulva compressa extracts (UCE)) were chosen as representative natural materials to evaluate their anti-atopic dermatitis (AD) effects. AD is a one of most common chronic inflammatory skin disease that is characterized by Th2-skewed abnormal immune response. And also, thymus and activation-regulated chemokine (TARC/CCL17) and macrophage-derived chemokine (MDC/CCL22) are considered as important potential biomarkers because they are produced in keratinocytes and overexpressed in AD. However, in vitro immunologic impacts and mechanisms of these five marine algae extracts on AD remain unknown. Therefore, aim of this study was to define whether and how these four extracts affect the expression of TARC and MDC, the Th2-type chemokines which are correlated with the disease severity in AD skin, in HaCaT keratinocytes. To verify the impacts of these extracts on TARC and MDC expression in HaCaT cells and their potential mechanisms, we adopted a cell viability assay, RT-PCR, Real-time PCR, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), Western blotting analysis, and immunofluorescence assay. The possible active components of the extracts showing anti-AD efficacy were qualitatively and quantitatively analyzed using high-performance liquid chromatography (HPLC). In PYE results, PYE was exhibited an inhibitory effect on TARC and MDC production by inhibiting the activation of NF-κB. In addition, two cartenoid components, astaxanthin and xanthophyll, were detected in PYE, and these were investigated to play a bioactive role in PYE. And also, in IFN-γ/TNF-α- induced HaCaT cells, astaxanthin and xanthophyll were inhibited by MAPKs and NF-κB/IκB-α signaling pathways similar to PYE. This suggests that astaxanthin and xanthophyll are the main anti -inflammatory components in PYE. In PAB results, PAB significantly inhibited the protein and mRNA expression of TARC and MDC in IFN-γ/TNF-α-induced HaCaT cells. In addition, the expression of inflammation-related genes such as TNFRSF9, CCL8, ICAM1, IL36G, APOL3, APOL2, CXCL9, and HLA-DRB1 was downregulated by PAB. In addition, PAB was affected the MAPKs/STAT1 pathway in HaCaT cells induced by TNF-α + IFN-γ, and it suppressed TARC and MDC expression by blocking NF-κB from translocating into the nucleus. And also, a mechanism mediating the anti-AD effect was elucidated, and phloroglucinol was revealed as a bioactive substance. In STE results, STE inhibited the MAPKs/STAT1 pathway in HaCaT cells induced by TNF-α / IFN-γ, and it inhibited TARC and MDC production by blocking NF-κB from translocating to the nucleus. In order to clarify the anti-AD effect of STE, it is suggested that not only an additional component analysis, but also an animal experiment or an effect evaluation using 3D skin cells and clinical experiment need to be performed. In UCE results, UCE was not significantly inhibited TARC and MDC expression in IFN-γ-/TNF-α- induced HaCaT cells. Since this extract did not have anti-AD effect, additional experiments such as pathway verification and component analysis were not performed. In conclusion, PYE, PAB, and STE suppressed IFN-γ-/TNF-α-induced expression of TARC and MDC by inhibiting the activation of MAPKs/IкB/NF-кB signaling due to its each candidate substance effects. In contrast, UCE was not shown to inhibit TARC and MDC. Thus, the investigation of the anti-AD effect of marine algal extracts is advantageous as it can provide the basis and information for the identification of other useful ingredients from other algae, as well as promote the use of natural substances. 해조류는 세계적으로 널리 분포하며 주로 한국, 일본, 중국에서는 식용으로 소비된다. 식용 해조류에는 잠재적인 건강상의 이점을 가진 다양한 성분이 포함되어 있다. 최근에는 해조류의 항산화 항 암, 항 염증, 항 고혈압, 및 조직치료 등의 효과가 보고되고 있다. 본 연구에서는 홍조류의 Pyropia yezoensis (방사무늬 김 추출물-PYE) 과 Polyopes affinis (참까막살 추출물-PAA, PAB), 갈조류의 Sargassum thunbergii (지충이 추출물-STE), 녹조류의 Ulva compressa (납작파래 추출물- UCE)이 항 아토피 피부염(AD) 효과를 평가하기 위해 대표적인 천연 후보 물질로 선택되었다. AD 는 가장 흔한 만성 염증성 피부 질환 중 하나로, Th2-skeweed 왜곡된 면역 반응이 주요 특징으로 밝혀져 있다. 그러나 아토피 피부염에 대한 이러한 네 가지 추출물들의 체외 면역학적 영향과 메커니즘은 여전히 정확하게 밝혀져 있지 않다. 또한 흉선과 활성화 조절 케모카인(TARC/CCL17)과 대식세포 유도 케모카인(MDC/CCL22)은 각질세포에서 생성되고 AD 에서 과다 표현되기 때문에 AD 의 중요한 잠재적 바이오마커로 간주된다. 따라서, 본 연구의 목적은 이 네 가지 추출물들이 인간유래각질세포인 HaCaT 세포에서 AD 피부의 질병 심각도와 상관관계가 있는 흉선유래 활성화 조절 케모카인 (TARC)과 대식세포 유래 케모카인 (MDC)의 발현에 영향을 미치는지 여부와 그 방법을 정의하는 것이다. 따라서 본 연구에서는 이러한 추출물들이 HaCaT 세포의 TARC 및 MDC 발현에 미치는 영향을 검증하기 위하여 세포 생존력 분석, 실시간 연쇄중합효소반응, 효소 연계 면역 흡수제 분석 (ELISA), 웨스턴 블로팅 분석, 면역 형광 분석 등이 수행되었다. 항 AD 효능을 나타내는 추출물의 활성 성분은 고성능 액체 크로마토그래피를 사용하여 정성적, 정량적으로 분석되었다. PYE 결과에서는, PYE 는 NF-кB 의 활성화를 억제함으로써 TARC 및 MDC 생산에 대한 억제 효과를 나타냈다. 또한 두 개의 카로테노이드 화합물이 PYE 에서 관찰되었는데, 이는 아스타잔틴과 크산토필로 처리된 PYE 에서 바이오활성을 보이는 역할을 하는 것으로 밝혀졌다. IFN-α/TNF-α 싸이토 카인으로 자극받은 HaCaT 세포에서의 MAPKs/IкB/NF-кB 신호 경로는 아스타잔틴과 크산토필로 처리된 세포에서 PYE 와 유사하게 억제된 것으로 발견되었다. 이것은 아스타잔틴과 크산토필이 PYE 의 주요 항 염증 성분이라는 것을 암시했다. PAB 결과에서는, PAB 는 interferon-gamma (IFN-γ)/ tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) 로 유도된 HaCaT 세포에서 TARC 와 MDC 의 단백질과 mRNA 발현을 현저하게 억제하였다. 또한, TNFRSF9, CCL8, ICAM1, IL36G, AOL3, AOL2, CXCL9, HLA-DRB1 등 염증 관련 유전자의 발현이 PAB 에 의해 억제되었다. 또한, PAB 는 IFN-α/TNF-α 에 의해 유도된 HaCaT 세포의 MAPKs/STAT1 경로에 영향을 미쳤으며, NF-αB 가 핵으로 전이되는 것을 차단하여 TARC 와 MDC 발현을 억제하였다. 또한, 항 AD 효과를 매개하는 효과적인 경로가 확인되었고, 플로로글루시놀이 생물 활성 물질로 밝혀졌다. STE 결과에서는, STE 는 TNF-α + IFN-α에 의해 유도된 HaCaT 세포의 MAPKs/STAT1 경로를 억제하였으며, NF-αB 가 핵으로 전이되는 것을 차단하여 TARC 와 MDC 생성을 억제하였다. STE 의 항 AD 효과를 명확히 하기 위해서는 추가 성분 분석뿐만 아니라 동물 실험을 대체할 수 있는 효력 평가 및 임상 실험도 3D 피부 세포를 사용하여 수행할 필요가 있다. UCE 결과에서는, UCE 는 IFN-α- 및 TNF-α- 유도 HaCaT 세포에서 TARC 와 MDC 발현을 유의하게 억제하지 않았다. 이 추출물은 항 AD 효과가 없었기 때문에 유효한 경로 검증 및 성분 분석과 같은 추가 실험은 수행되지 않았다. 결론적으로 PYE, PAB, STE 는 각각의 후보물질 효과로 인해 MAPKs/IкB/NF-кB 신호 활성화를 억제하여 TARC 와 MDC 의 IFN-α- 및 TNF-α- 로 유도된 발현을 억제하였다. 대조적으로, UCE 는 TARC 와 MDC 를 억제하는 것으로 나타나지 않았다. 따라서, 본 연구를 통하여 해조류 추출물의 항-AD 효과에 대한 연구는 본문에 쓰인 네 종의 해조류 이외에 다른 해조류에서의 유용한 성분을 식별하는 기초를 자료로 사용될 수 있을 뿐 아니라, 천연 물질을 활용 가능성을 촉진시킬 수 있을 것으로 기대된다.

모바일 인스턴트 메신저를 활용한 교사-부모 의사소통 현황과 인식

하유나 덕성여자대학교 일반대학원 2014 국내석사

본 연구의 목적은 교사의 교사-부모 간 모바일 인스턴트 메신저에 대한 현황과 인식을 살펴봄으로써 교사-부모 간 효과적인 의사소통 방안을 모색하는데 기초자료로 제공하고자 한다. 본 연구에서 설정된 구체적인 문제는 다음과 같다. 1. 모바일 인스턴트 메신저를 활용한 교사-부모 의사소통 현황은 어떠한가? 2. 모바일 인스턴트 메신저를 활용한 교사-부모 의사소통에 대한 교사의 인식은 어떠한가? 본 연구는 서울특별시와 경기도 지역 유아교육기관(유치원, 어린이집)에 소속된 교사 340명 중 모바일 인스턴트 메신저를 활용한 교사 164명만을 대상으로 하였다. 연구도구는 선행연구들을 참고하여 연구자가 연구목적에 맞게 수정․보완하여 사용하였다. 모바일 인스턴트 메신저를 활용한 교사-부모 의사소통 현황과 인식을 알아보기 위하여 2013년 10월 4일부터 25일까지 우편, 이메일을 이용하여 설문조사를 하였다. 수집된 설문자료의 분석을 위하여 연구문제에 따라 기술통계, 검증, Fisher의 정확 검증, 일원변량분석(One-Way ANOVA) 및 사후검증 Scheff'e을 실시하였다. 이에 주요 결과를 요약하면 다음과 같다. 첫째, 모바일 인스턴트 메신저를 활용한 교사-부모 의사소통 현황에 있어 유아교육현장에서 절반의 교사들이 모바일 인스턴트 메신저를 사용하였다. 대부분이 카카오톡을 사용하고 있었고 주 5회 이상 의사소통을 한다는 응답이 가장 많았다. 주로 등․하원 시간 전/후나 정규 수업 시간 후에 부모와 메신저로 의사소통하고 있었으며, 주고받는 정보로 유아의 결석이 가장 높게 나타났다. 교사들은 모바일 인스턴트 메신저를 활용한 의사소통에서 급작스런 상황 시 신속하고 용이한 연락을 장점으로, 사생활이 보호되지 않는다는 점을 단점으로 보았다. 유아교사들의 배경변인에 따른 모바일 인스턴트 메신저를 활용한 부모와의 의사소통 빈도와 효과는 유의미한 차이를 보이지 않았으나 모바일 인스턴트 메신저를 활용하는 시간과 불편한 점에 있어서는 유의미한 차이를 보였다. 따라서 모바일 인스턴트 메신저를 활용한 교사-부모 의사소통은 사전의 명확한 지침을 마련해 교사-부모 간 상호합의가 이루어져야 하며, 이에 대한 부모교육이 시행되어야 할 것이다. 둘째, 모바일 인스턴트 메신저를 활용한 교사-부모 의사소통에 대한 교사의 인식에 있어, 교사들은 모바일 인스턴트 메신저 사용 시 부모와 교사 간 상호합의가 전제 되어야 한다는 점을 가장 중요하게 여겼으며, 부모가 보내는 잦은 모바일 인스턴트 메신저에 매우 부담을 느꼈다. 유아교사들의 배경변인에 따른 모바일 인스턴트 메신저를 활용한 교사-부모 의사소통에 대한 인식에서는 기술적 측면, 기능적 측면 문항에서 유의미한 차이를 보였다. 따라서 교사의 모바일 인스턴트 메신저에 대한 인식을 높일 수 있도록 모바일 인스턴트 메신저에 관한 교사 연수가 이루어져야하고, 유아교육현장에 맞는 모바일 인스턴트 메신저 개발이 필요할 것이다. 이상의 결과에 따른 시사점은 다음과 같다. 첫째, 모바일 인스턴트 메신저 활용을 위해서는 유아교사들의 배경변인에 따른 특성과 요구를 고려한 지원책이 마련되어야 한다. 둘째, 모바일 인스턴트 메신저의 실행을 위하여 학부모의 인식 개선을 위한 부모교육 및 홍보가 필요할 것이다. 셋째, 모바일 인스턴트 메신저의 현황에 대한 교사의 어려움과 지원 요구를 고려하여 유아교육현장에 맞는 모바일 인스턴트 메신저 개발이 마련되어야 한다. 넷째, 교사들이 모바일 인스턴트 메신저를 편리하게 사용할 수 있도록 물적, 인적 지원 등 기관 내 여건 조성이 이루어져야 한다. It is the purpose of the study to provide basic materials for seeking the effective communicating methods between teachers and parents through investigating the present condition of utilizing mobile instant messengers between them and their understanding of them. The concrete themes are as followings; 1. What is the present condition of their communication utilizing mobile instant messengers? 2. What is teachers' understanding of their communication with children's parents utilizing mobile instant messengers? A total of 164 teachers among 340 teachers who work at nursery education institutions(kindergartens and nursery homes) in Seoul and Gyeonggido took part in the study, who are now utilizing mobile instant messengers. And the tools used for the study were adapted according to the purpose on the basis of the previous studies. In order to find out the realities, a survey was conducted with mail and e-mail from Oct. 4th to 25th, 2013. For the analysis of the collected data, the following ways were used in accordance with each theme: Technical Statistic Analysis, Test, Fisher's Exact Test, One-Way ANOVA, and Scheffe Test as a post test. The results are as followings; First, half of teachers who work at the nursery education field utilizes mobile instant messengers with regard to communicating with parents, and most of them said that they make use of Kakao Talk, more than five times a week. They usually communicate with parents before children's departure to schools or after their departure to home, or after the regular classes through the messengers; And the main informations they communicate are related to the children's absence. Teachers pointed out that it is the merit of mobile instant messengers that they can easily cope with an emergent situation, but it is demerit of them that their private lives are not protected. The communication frequency and effect according to the teachers' background variables do not show any significant difference, but there are significant difference in terms of the hour spent on utilizing the messengers and its inconvenient factors. Therefore, it is necessary to make a definite guideline for the communication through the messengers with parents; It should be done on the basis of the consent between teachers and parents, and the teaching programme for parents concerned it should be conducted. Second, it is found out that teachers considered it most important that when they utilize the mobile instant messengers the mutual consent between them should come first, and they feel burdensome owing to the frequent mobile messages from parents. There are significant differences in both technical and functional factors in terms of the understanding of their communication utilizing the mobile instant messengers. Therefore, teaching of teachers about the mobile instant messengers is necessary for making their understanding of it higher, and it is also necessary for developing the mobile instant messengers suitable for the nursery education field. From the above results, we can consider the following respects; First, in order to use the mobile instant messengers there should be supporting measures in consideration of teachers' characteristics and demands according to their background variables. Second, for the activating of the mobile instant messengers, teaching of parents and public relations are necessary to improve their thinking way about it. Third, the mobile instant messengers suitable for the field of nursery education should be developed, considering teachers' difficult and their demands. Fourth, the proper conditions should be created within the institutions for teachers to comfortably utilize the mobile instant messengers.

Optimization of Quantum Dot Embedded Silica Nanoparticle for Immunoassay

하유나 건국대학교 대학원 2019 국내석사

The quantum dot (QD) embedded silica nanoparticle (NP) was optimized in chapters 1 and 2. In chapter 3, we applied both QDs and optimized particles to immunoassay for PSA (prostate specific antigen) detection. In chapter 1, we developed synthesis method of silica coated quantum dot-densely-embedded silica nanoparticle (Si@D-QD@Si NP) as brighter optical nanomaterial by increasing the number of QDs on silica NP. Si@D-QD@Si NPs exhibited narrow size distribution and high signal reproducibility. Red, green and blue Si@D-QD@Si NPs were successfully fabricated and showed their optical properties. The differentness between red Si@D-QD@Si NP and silica coated QD-embedded silica NP (Si@QD@Si NP) was presence of 2.4 times increased number of QDs in Si@D-QD@Si NP. The quantum yield of Si@D-QD@Si NPs was slightly higher than Si@QD@Si NPs (≤ 3.1 %). The prepared red Si@D-QD@Si NP showed approximately 26.6 % higher fluorescence intensity compared with the Si@QD@Si NP. And, green Si@D-QD@Si NP and blue Si@D-QD@Si NP exhibited 36.2 % and 39.3 % higher brightness than those of Si@QD@Si NPs. This result implied that the particles can be used for more sensitive detection. In chapter 2, we prepared silica coated QDs embedded the silica NP without ligand exchange step based on hydrophobic interaction between oleic acid on QDs with TMPS (trimethoxy(2-phenylethyl) silane) (Si@QD@(T)Si NP). We confirmed the shape of particles by TEM, and Si@QD@(T)Si NPwere well synthesized without aggregation. When we compared Si@D-QD@Si NP and Si@QD@(T)Si NP which has approximately similar amount of QDs, Si@D-QD@Si NP showed higher value at both fluorescence intensity and quantum yield. Thermal stability test was conducted between two particles at 80 °C. The Si@QD@(T)Si NP was more rapidly decreased their fluorescence intensity than the Si@D-QD@Si NP. Although, the Si@D-QD@Si NP was more optimum condition than Si@QD@(T)Si NP, direct silica coating of hydrophobic QDs embedded silica NP can be considered as novel coating method. In chapter 3, using optimized hybrid particles, we applied that to PSA detection. To use the fluorescent particles at immunoassay, particles were conjugated with detection antibody. We confirmed that antibodies were well conjugated on the particles by measure the zeta potential. In addition, quantum yield of antibody conjugated QDs were not significantly decreased compared to bare particles. Then, immunoassay was conducted to obtain the limit of detection. We detected PSA to 1.5 ng mL-1, which is approximately 800 times sensitive than QDs. The optimized hybrid particles with remarkably bright fluorescence will be applied for diverse fields based on infinite possibilities. 1 장과 2 장에서 양자점을 내포하는 실리카 나노입자의 최적화에 대하여 나타낸다. 3 장에서는 양자점과 최적화된 입자를 사용하여 PSA (prostate specific antigen, 전립선 특이항원)검출을 위한 면역 분석을 실시하였다. 1 장에서는, 실리카 나노입자에 내포되는 양자점의 수를 늘림으로써, 양자점이 밀집하게 도입된 현저하게 밝은 실리카 나노입자 (Si@D-QD@Si NP)라는 밝은 광학 나노입자를 개발했다. 이 입자는 좁은 크기 분포와 높은 신호 재현성을 보인다. 빨간, 초록, 그리고 파란색의 양자점을 사용하여 만든 각각의 입자는 성공적으로 만들어졌으며, 광학 특성을 보인다. 양자점이 밀집하게 도입된 실리카 나노입자는 양자점이 도입된 실리카 나노입자 (Si@QD@Si NP)보다 2.4 배 많은 수의 양자점을 함유하고 있으며, 양자 효율 역시 약간 높았다 (≤ 3.1 %). 더욱이, 빨간 양자점이 밀집하게 도입된 실리카 나노입자는 빨간 양자점이 도입된 실리카 나노입자보다 26.6 % 밝은 형광 세기를 보인다. 또한, 초록과 파란 양자점이 밀집하게 도입된 실리카 나노입자는 각각 36.2 %, 39.3 % 밝은 형광 세기를 보인다. 이러한 결과는 이 입자가 더 민감한 진단에 쓰일 수 있다는 것을 암시한다. 2 장에서는, 실리카에 양자점을 내포하는 단계에서의 리간드 교환과 TMPS (trimethoxy(2-phenylethyl) silane)의 사용으로 코팅하는 단계에서의 소수성 상호작용에 의한 친수성 실리카와 소수성 양자점의 혼성체 (Si@QD@(T)Si NP)를 만들었다. 입자의 모양은 TEM으로 확인하였고, 입자는 뭉침 없이 잘 합성되었다. 양자점을 내포하는 실리카 나노입자의 최적화를 위하여 1 장에서 만든 입자와의 형광 세기와 양자 효율을 비교하였다. 양자점이 밀집하게 도입된 실리카 나노입자는 형광 세기와 양자 효율 모두 2 장에서 만든 입자보다 높은 값을 가진다. 더욱이, 두 입자의 열 안정성이 80 °C에서 검사되었다. 소수성 상호작용에 의해 만들어진 혼성체는 시간이 지남에 따라 형광 세기가 더 빠른 속도로 감소하였다. 따라서, 양자점이 밀집하게 도입된 실리카 나노입자가 다른 입자들보다 더 최적화된 조건이다. 3 장에서는, 양자점과 최적화된 혼성체 입자를 사용하여 PSA 검출에 적용하였다. 면역 분석에 형광 입자를 사용하기 위해, 입자를 검출 항체와 접합하였다. 제타 전위 측정을 통하여 항체가 입자에 잘 도입되었음을 확인하였다. 게다가, 항체가 도입된 입자는 그냥 입자와 비교하여 양자 효율 감소가 매우 적었다. 이후, 검출 한계를 얻기 위해 면역 분석을 실시하였다. PSA의 검출 한계는 1.5 ng mL-1 였다. 이 결과는 양자점을 사용한 결과보다 약 800 배 더 민감한 결과이다. 현저하게 밝은 형광을 보이는 최적화된 혼성체는 다양한 분야에 적용될 것이다.

생체 내 리포터를 활용한 초파리 트랜스포존 전위현상에 관한 연구

하유나 강원대학교 대학원 2023 국내석사

트랜스포존은 genome 상의 다른 위치에 삽입될 수 있는 DNA 염기서열이다. 트랜스포존이 genome 상의 새로운 위치로 삽입되는 이벤트를 전위라 한다. 이동성을 갖는 트랜스포존은 동·식물 유전체의 상당 부분을 차지하고 있는데 인간 유전체의 약 45 %, maize 유전체의 약 85 %, 초파리 유전체의 약 20 %를 구성한다고 보고되었다. 트랜스포존은 전위 현상에서 발생하는 유전적 변이 등은 숙주의 유전적 다양성에 기여한다. 트랜스포존 전위 현상은 숙주의 적응도와 상관없이 일어나기 때문에, 개체는 트랜스포존을 전사 및 전사 후 수준에서 PIWI 상호 작용 RNA(piRNA)로 대표되는 짧은 비암호화 RNA를 통한 조절 기전을 발전시켜 왔으며, 이는 해면체부터 인간에 이르기까지 진화적으로 잘 보존되어 있다. 흥미롭게도, 선행 연구 결과 트랜스포존 mRNA가 활성화된 상태라 할지라도 발달 중인 nurse cell 유전체로 삽입되지 않는다고 알려져 있다. 이는 전위 수준에서 트랜스포존 활성을 제한하는 새로운 기전이 존재함을 시사하지만 관련 연구는 미미하다. 본 연구는 전위 수준에서 트랜스포존 활성을 제한하는 신규 매커니즘에 관련된 인자를 동정하기 위해 유전학적 스크리닝을 수행하였다. 인자 동정에 앞서 내인성 gypsy 트랜스포존 생명 주기를 모방하고 생체 내에서 전위 현상을 추적 가능한 리포터를 가진 형질 전환 초파리를 제작하여 실험을 진행하였다. 첫째, 제작한 초파리를 사용하여 초파리의 발달 과정동안 전위 현상을 관찰하였다. 초파리의 3령 애벌레의 fat body와 salivary gland 및 성체의 gut cell을 관찰한 결과, 리포터 양성 세포(fat body의 경우 마리 당 평균 1-2개, gut의 경우 마리 당 평균 10-11개, 500마리에 해당하는 salivary gland에서 한 개의 양성 세포)를 관찰할 수 있었고 이를 통해 초파리의 발달 과정 동안 전위 현상이 매우 드물게 일어난다는 것을 확인하였다. 둘째, 전위 매커니즘 관련 인자를 규명하기 위해 제작한 리포터와 miRNA 라인들을 사용하여 genome wide한 유전학적 스크리닝을 설계하였다. 130개의 miRNA 라인에서 애벌레 fat body의 리포터 발현을 분석하였고, 하나의 후보 유전자(CG12701)를 확인하였다. 그러나, 전위 현상을 보이는 세포의 수가 만 개의 cell 당 1-1.5개로 나타난 점을 토대로 시스템의 민감도를 증대하고자 스크리닝 전략을 수정하였다. 분석에 대한 민감도를 높이기 위해, 현재 분석 시스템에 전사 수준에서 트랜스포존을 활성화시키는 조건을 추가하였고 그 결과 1차 스크리닝보다 더 높은 숫자의 리포터 양성 세포가 관찰되었다. 본 연구를 시작으로 전위 수준에서 트랜스포존를 억제하는 요인을 탐색하기 위한 유전학적 스크리닝을 통해 트랜스포존 조절의 새로운 측면을 열 수 있게 해줄 것이다. A transposon is a sequence of DNA that can be inserted into another location on a genome. An event in which the transposon is inserted into a new location on the genome is called a transposition. Transposons constitute a significant portion of the animal and plant genome, accounting for about 45% of the human genome, about 85% of the maize genome, and about 20% of the fruit fly genome. It contributes to the diversity of host phenotypes by inducing genetic variation of the genome during the process of new transposon translocation to the genome. Hosts use unique molecular systems such as PIWI-interacting RNA (piRNA) to regulate transposons at transcriptional and post-transcriptional levels during the life cycle (transcription, translation and transposition) of transposons. However, it is unclear whether other phases exist to limit transposon transposition activity. Previous studies have shown that transposon mRNA is not transsposed to developing nurse cell's genome even when activated at the transcriptional level. Based on this, we could hypothesize that there exists a new mechanism that limits transposon activity at the level of transpososition. Previous studies have focused on transposon activity at the transcriptome level, but this study was focused on actual transposition activity, so reporter was used to directly track transposition events in vivo. First, we studied the transposition phenomena during development using reporter. Using gypsy transposon reporter, reporter-positive cells were observed in the fat bodies and salivary glands of three-instar larvae and gut cells of adults during the development of Drosophila. This suggests that transpositions occur very rarely during the development of Drosophila. Genome wide screening was designed using transposon reporter and miRNA lines to identify tansposition mechanisms. Since one miRNA regulates a number of genes, it is possible to identify a gene regulated by intersection in miRNA lines showing hit as a candidate gene. A reporter was used to analyze the transposition of 3rd instar larval fat bodies in 130 miRNA Drosophila lines and to find a single gene candidate (CG12701). To increase the sensitivity to the analysis, the following screening was designed by adding a condition to activate the transposon at the transcription level to the current analysis system. We expect that miRNA screening at the mutant background, which activates somatic transposons at the transcriptional level, will identify the following factors of the transposition mechanism. In summary, screening to explore factors that inhibit transposons at the transpositon level will allow us to open up new aspects of transposon regulation.

Petromurin C induces protective autophagy and apoptosis in FLT3-ITD-positive AML : synergy with gilteritinib

하유나 서울대학교 대학원 2020 국내석사

Treatment of acute myeloid leukemia (AML) remains inefficient due to drug resistance and relapse, particularly in patients with FMS-like tyrosine kinase 3 (FLT3)-internal tandem duplication (ITD). Marine-derived natural products have recently been used for drug development against AML. We show here that petromurin C, isolated from the culture extract of the marine-derived fungus Aspergillus candidus KUFA0062, which was isolated from the marine sponge Epipolasis sp., induces early autophagy followed by apoptotic cell death via activation of the intrinsic cell death pathway concomitant with mitochondrial stress and downregulation of Mcl-1 in FLT3-ITD mutated MV4-11 cells. Moreover, petromurin C synergized with the clinically-used FLT3 inhibitor gilteritinib at sub-toxic concentrations. Altogether our results suggest that petromurin C could act as an anti-leukemic agent alone or in combination with gilteritinib. 급성 골수성 백혈병 (AML)의 치료는 특히 FMS-like typrosine kinase 3 (FLT3)-Internal Tandem Duplication (ITD) 환자에게는 약물 내성과 재발로 인해 비효율적이다. 그래서 새로운 대안치료제로 해양 유래 천연 물질이 AML에 대한 약물 개발에 사용되고 있다. 본 연구는 해양 스폰지 Epipolasis sp.에서 분리된 Aspergillus candidus에서 추출한 petromurin C에 관한 것이다. Petromurin C는 FLT3-ITD 돌연변이 세포주인 MV4-11에서 초기에는 autophagy를 유발하고 이후에는 미토콘드리아 스트레스와 Mcl-1의 downregulation을 통해 intrinsic 세포 사멸 경로를 활성화하여 apoptotic 세포 사멸을 유도하였음을 보여준다. 또한 petromurin C는 임상적으로 사용되는 FLT3 억제제인 gilteritinib과 sub-toxic 농도에서 상승 작용을 보였다. 우리의 결과는 petromurin C가 항 백혈병 치료제로서 단독으로 또는 gilteritinib과의 병용요법으로 함께 작용할 수 있음을 제안하였다.

한·중 형사증거법에 관한 비교법적 연구 : 증거능력과 증명력을 중심으로

하유 경상대학교 대학원 2016 국내박사

Both China and korea are sited in East Asia, there is a long history between the two countries and they have a lot of similarities in respect of culture and customs. Law is the expression of life, life style can directly affect legal contents and forms. The similarities between the two countries in tradition, culture, habits and so on lay the foundation for the two countries to learn from each other in legal systems. There is no independent evidence law system in China, the relevant provisions about the criminal evidence act are centralized in the Criminal procedure law whose modification took place in 2012 and ‘Two Evidence Rules’ whose proclaimed in 2010. As a department law, the Criminal procedure law shall be based on the Constitution. When there is any significant change with the Constitution, the Criminal procedure law shall be correspondingly adjusted, even if there is no significant change with the Constitution, the Criminal procedure law shall also, under the guidance of principles in the Constitutions, conform to social development demands and carry out necessary self-improvements. In fact, in the 2004 Amendment to the Constitution, the concepts about state respects and human rights guarantee have been incorporated into the Constitution, yet this constitutional provision was not timely specified to basic principles and specific provisions in the Criminal procedure law. Oppositely, either from the principles and the establishment of basic system or from the specific norms which are guarantees for the realization of the basic principle and system, there is a certain distance between Chinese Law of Criminal Procedure and the concept in the Constitution about human rights protection, this should be further improved. Meanwhile, for the reality of Chinese economy continuous development and demand for legal reform, there are still many shortcomings and regrets in legal system construction, which are embodied as follows in the law of criminal evidence: for there is no uniform national evidence legislation in China and the national criminal evidence rules are insufficient, reflected in form, the major embodiment it that there is no completeness at all. For example, no strict illegal evidence exclusion rules are specified, as a result, the problem caused by torture, forced confessions and getting evidence by violence can not be solved; no hearsay evidence rules are specified yet such evidence are widely applied in judicial practice, meanwhile, there are still many deficiencies in accused protection. Secondly, there are also substantial defects, such as the testimony of witness, China is a state of ‘ceremonies’ which respects family very much, yet in Chinese legislation, witness have no testify immunity between relatives. Corresponding to the serious deficiency of national criminal evidence rules, in the process of implementing the Criminal procedure law, various criminal judicial branches throughout China have established various local criminal evidence rules, although some advanced western rules have been introduced into Chinese local criminal evidence rules, it is still doubtful about whether it can be really implemented in the country. Aristotle once said that ruling by law needs the good laws to be universally followed. However, from daily media and practice, it can be seen that there is still a long way to go to truly implement the above mentioned criminal evidence rules. In 2007, focusing on the protection of the rights of the accused, the Criminal procedure law of South Korea was significantly amended, meanwhile, the involved criminal evidence was also amended. Overall, the amendment highlights the concept of human rights protection, focuses on the harmonization between laws and ethics, an approach of partial modification and scaled adjustment was adopted. Undoubtedly, this has positive significance for the improvement of Chinese criminal legislation, specifically, the illegal evidence excludes the integrity of rules establishment, increases the standard of proof for excluding reasonable doubts, establishes the system of counsel presence during interrogation and video system, fairly complete regulations about the exemption when refuse to testify was also set up, the establishment and amendment of these systems highlights the concept of human rights protection and ethical legal protection, this has important implications for China in future improvements involving criminal evidence system. During the construction of criminal evidence legal system, both China and Korea shall reflect the universality of the legal system, meanwhile, the construction of the criminal evidence legal system shall be combined with the national conditions, in other words, the construction of this system shall not only embody the national values orientation and local characteristics, but also to look forward to the future and recognize the things in respective national traditions which is able to present the future However, no country in the world can live independently by only itself, various legal systems in the world can not be simply judged as good or bad absolutely, the only most important point is that the criminal legal system shall comply with the national and social conditions, therefore, when a country sticks to its own characteristics, it should also learn from others. For such reasons, in the construction of separate criminal evidence system, both China and Korea shall think about which criminal evidence systems are the common civilization results of human beings and how to combine with their own national conditions when such civilization results are introduced. Of course, as we all known, progress of laws and improvements of legal system are determined by not only the objective social conditions and demands but also the developments of legal research and education. All in all, social development demand, legal research, legal education and other several links are mutually related, promoted and affected. Presently, comparative literature about studying on the criminal evidence systems of China and Korea is still in a state of blank, this article still seems a bit shallow, yet I still hope it can attract valuable opinions and promote more scholars to bring better works.

공감적 금연 교육프로그램이 대학생의 흡연감소에 미치는 효과에 관한 연구

하유 동아대학교 교육대학원 2006 국내석사

본 연구는 흡연 남녀 대학생들을 대상으로 공감이론을 적용하여 개발한 공감적 금연 프로그램을 실시하여 흡연 남녀 대학생들의 흡연 감소에 미치는 효과를 알아봄으로써 대학생들의 흡연행동을 개선하는데 연구의 목적을 두었다. 연구대상은 부산광역시 사상구에 소재하는 S대학교 남녀 대학생을 20명을 실험집단 및 통제집단 각각 20명을 대상으로 하였다. 본 연구에 사용된 금연 프로그램의 내용은 현재 중, 고등학교에서 사용하고 있는 보편적인 프로그램으로 남녀 대학생들에게 적용하기 위해 연구자 본인이 약간의 수정을 거쳐 교정한 것을 사용하였다. 프로그램의 처치는 실험집단에만 주 1회씩 매회 50분씩 실시하였고 실험시간은 총 12주가 소요되었으며 프로그램을 실시하기 사전․사후에 실험․통제 집단에 금연프로그램이 남녀 대학생들에게 미치는 효과를 알아보기 위해 다음과 같이 분석하였다. 가설 1. 공감적 금연교육을 받은 실험집단은 비교집단보다 흡연에 관한 지식수준 점수가 의미 있게 높을 것이다. 가설 2. 공감적 금연교육을 받은 실험집단은 비교집단보다 흡연에 관한 태도 점수가 의미 있게 높을 것이다. 가설 3. 공감적 금연교육을 받은 실험집단은 비교집단보다 금연행동 지속기간 점수가 의미있게 높을 것이다. 이에 대한 연구의 결과는 다음과 같다. 첫째, 공감적 금연프로그램을 실시한 실험집단이 통제집단에 비해 흡연에 대한 부정적인 태도가 정하게 나타났다. 둘째, 공감적 금연프로그램을 실시한 실험집단이 통제집단에 비해 흡연에 대해 부정적인 태도를 보이는 것으로 나타났다. 셋째, 공감적 금연프로그램을 실시한 실험집단들이 통제집단에 비해 금연행동의 지속기간이 길게 나타났다. 이상의 연구결과로 보아 남녀 대학생에 대한 금연프로그램의 사용으로 인해 금연지속효과가 있다고 볼 수 있다.

플립러닝 중국어 문법 수업 교수·학습 설계 및 적용 연구 : 학원(사교육)을 중심으로

하유리 숭실대학교 대학원 2022 국내석사

본 연구는 저자가 소속돼 있는 학원(사교육)에서 서울 소재 외국어 고등학교 영어과(영중과), 중국어과(중영과) 학생들 43명을 대상으로 총 7회에 거쳐 실험을 진행하였다. 플립러닝 중국어 문법 수업에서 성별, 학년, 전공, 내신 성적, 어학연수 경험, 학습기간, HSK등급에 따른 수업 내용, 방식, 결과 만족도와 수업 환경에 대한 만족도 차이를 검정하고 플립러닝 중국어 문법 수업의 내용, 방식, 결과 만족도와 수업 환경 만족도를 알아보고 사교육에서의 플립러닝 프로그램 개발에 필요한 기초 정보를 제공하는 것을 목적으로 하였다. 본 연구의 자료 수집은 1학년은 2021년 12월 4일부터 5일까지, 3학년은 2022년 2 월 12일부터 13일까지 이루어 졌다. 통계프로그램은 SPSS 18을 사용하였다. 위와 같은 절차를 거쳐 얻은 연구 결과는 다음과 같다. 학습자의 성별, 학년, 전공, 내신 성적, 어학연수 경험, 학습기간에 따른 학습 내용, 방식, 결과 만족도 조사 결과, 모든 변수에서 유의미한 차이를 보이지 않았으나 학년에서의 학습 결과 만족도에서 1학년 평균값 3.958, 3학년 4.485으로 3학년이 1학년보다 학습결과 만족도 면에서 높게 나타났다. 학습결과 만족도 영역에서 유의미한 차이를 보인 이유는 누적문제 형식의 문제풀이를 추가적으로 도입했기 때문일 것이라고 판단된다. 수업환경 만족도와 수업 내용, 방식, 결과 만족도 설문지는 5단 리커트 척도로 구성하였으며, 김평식(2016)의 설문지를 참고하여 작성하였다. 설문지는 학생이 직접 표시할 수 있도록 하였고, 문항은 ‘매우 그렇다’ 5점, ‘그렇다’ 4점, ‘보통이다’ 3점, ‘그렇지 않다’ 2점, ‘전혀 그렇지 않다’ 1점으로 계산하였다. 그 결과 수업환경 만족도는 4.129점, 학습내용 만족도는 3.937점, 학습방식 만족도는 4.558점, 학습결과 만족도는 4.092점으로, 학습방식 만족도가 가장 높았으며, 다음으로는 수업환경, 학습결과, 학습내용 순이다. 전체 만족도는 4.196점로 학습자가 플립러닝 중국어 문법 수업에 대체적으로 만족했다고 답했다. 또한 수업 환경과 각 만족도에 따른 상관관계를 알아보고자 상관관계분석을 실시하였는데 모든 변수 간의 관계에서 유의미한 정(+)의 상관관계가 있다고 나타났다. 즉 환경이 좋아짐에 따라 만족도도 올라간다고 할 수 있다. 이러한 연구 결과를 바탕으로 플립 러닝 중국어 문법 수업에 대한 시사점은 다음과 같다. 첫째, 더 많은 데이터를 확보하여 요인분석을 진행해볼 필요가 있다. 본 논문은 저자가 소속 돼있는 학원(사교육)의 학습자를 대상으로 실험을 하였다. 그렇기 때문에 많은 데이터를 확보하는데 한계가 있었다. 요인 분석이 유의미하기 위해서는 최소한 120~150개 이상의 데이터가 필요하다. 실험 기간과 대상자를 늘려 요인 분석을 통해 한층 더 광범위한 연구가 필요하다. 둘째, 플립러닝 문법 수업에서 다양한 수업 방식을 확대하여 효과를 연구할 필요가 있다. 본 논문에서는 플립러닝 수업에 앞서 학습자에게 설문을 통하여 학습 방식을 채택하였다. 강의식 수업에 개인 수준별 학습을 진행했기 때문에 수업이 능동적일순 있으나 활기있는 수업은 기대하기 어려웠다. 협력 토론 학습, 수준별 토론학습, 개별 발표학습 등 다양한 방식을 시도하여 다채롭고 활기있는 플립러닝 수업을 구현할 필요가 있다. 셋째, 다른 실험 대상을 선정하여 연구할 필요가 있다. 저자는 외국어 고등학생을 대상으로 실험을 진행했다. 외국어 고등학교에서는 중국어를 전공 수준으로 학습하기 때문에 일반 고등학교 학생과 동일하게 적용하기에는 한계가 있으며, 대학생이나 성인 학습자를 대상으로 적용하여 효과를 비교해 볼 필요가 있다. 넷째, 플립러닝 수업 적용결과 학습자의 중국어 수준 향상과 목표 달성이 여부를 알아볼 필요가 있다. This study was done on 43 high school students from Seoul who majors in English (English-Chinese) and Chinese (Chinese-English) over 7 different studies at the private education center, where the author belong. The purpose was to provide basic information to develop flipped-learning Chinese grammar class in private education centers and to learn the difference in satisfaction depending on the class content, method, result satisfaction, and the class environment regading gender, grade, major, grades in school, language training experience, learning period, HSK grade, and flipped-learning Chinese grammar class. Data from this study was collected from December 4th to 5th of year 2021 from the 1st grade students, and from February 12th to 13th of the year 2022 from the 3rd grade students. The statistical program used was SPSS 18. The research results obtained through the procedure avobe are as follows. The results did not show significant difference in different variables such as the learner's gender, grade, major, school grades, language training experience, learning content, method, and result satisfaction survey according to learning period, but the average of the responses from first graders was 3.958 points while it was 4.485 points for the third graders, which means that third grader were more satisfied with the learning results than the first graders. The questionnaire for satisfaction with class environment, class content, method, and result satisfaction was designed in five-stage accordingly to the Likert scale, and referred to the Kim Pyeong-sik' questionnaire (2016). The questionnaire was designed so that each student can directly mark on it, and the questions were answered in point-system, where 5 points meant "strongly agree", 4 points for "agree", 3 points for "neutral", 2 points for "disagree", and 1 point for "strongly disagree". As the result, the satisfaction level of the class environment scored 4.129 points, learning content score was 3.937 points, and the learning method score was 4.558 points; the satisfaction level of the learning method was the highest, followed by the class environment, learning result, and the learning content. The overall satisfaction was 4.196 points, and the learners answered that they were generally satisfied with the flipped-learning Chinese grammar classes. Additionally, a correlation analysis was conducted to find out about the correlation between the class environment and each student's satisfaction, and it was found that there was a significant positive (+) correlation in the relationship between all variables. In other words, it can be said that satisfaction increases as the class environment improves.