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C-반응 단백이 혈관 평활근세포의 증식 및 VEGF 발현에 미치는 영향
강덕희 ( Kang Deog Hui ),유은선 ( Yu Eun Seon ),김명관 ( Kim Myeong Gwan ) 대한신장학회 2003 Kidney Research and Clinical Practice Vol.22 No.5
배 경 : 신부전증 환자에서 전신 염증 반응 (systemic inflammatory reaction, SIR)은 심혈관계 질환의 발생과 환자의 예후를 결정짓는 중요한 인자이다. 최근 C-반응단백 (C-reactive protein, CRP) 자체가 혈관 내피세포의 기능과 혈판 수축 등을 일으키고 염증 반응을 유도하여 직접적으로 동맥경화중의 발생에 관여한다는 연구 결과가 보고되면서 CRP의 심혈관계 질환 발생에 관한 직접적인 역할에 관한 관심이 증가되고 있다. Vascular endotheliai growth factor (VEGF)는 혈관내피세포의 생존에 필수적인 성장인자이지만 철관 평활근세포에서의 발현은 동맥 경화증의 발생 및 혈관벽으로의 염증세포의 침윤 등을 유도한다. 이에 연구자들은 CRP가 동맥경화증 발생의 핵심 소견인 혈관 평활근세포의 증식 및 VEGF 발현에 미치는 영향과 그 기전을 조사하여 CRP 자체가 심혈관계 질환의 발생에 미치는 영향에 관하여 알아보고자 하였다. 방 법 : Human recombinant CRP가 일차 배양한 혈관 평활근세포 (human vascular smooth muscle cell, HVSMC)의 증식에 미치는 영향과 VEGF mRNA 및 protein 발현을 측정하였다. 또한 CRP가 mitogen activated protein kinase (MAPK) 활성에 미치는 영향을 phosphorylated p38과 ERK1/2의 발현을 조사하고 이러한 MAPK의 억제제가 CRF에 의해 유도된 HVSMC의 증식 및 VEGF 발현에 미치는 영향을 연구하였다. 결 과 : CRP (0.5-50 ㎍/mL)는 HVSMC의 용량 및 시간 의존적인 증식을 유도하였다. CRP는 VEGF mRNA을 6시간부터 증가시켜 24시간에 최고 반응을 유발하였고 단백질은 24시간에서 48시간 사이에 의의 있게 증가시켰다. CRP는 HVSMC에서 자극 5분 후부터 p33과 ERK1/2의 활성 증가를 유도 15분에 최고로 증가되는 소견을 보였다. CRP에 의해 유도된 HVSMC의 증식과 VEGF의 발현은 MAPK 억제제인 SB203580 (10 μM)와 PD98050 (50 μM)의 전처치로 억제되었다. 결 론 : CRP는 HVSMC의 증식과 VEGF의 발현을 MAPK 의존적 경로에 의해 유도하였다. 이는 CRP`가 SIR의 지표일 뿐 아니라 직접적으로 염증 반응의 유도와 동맥경화증의 발생에 간여함을 시사하는 것이다. 따라서, 여러 가지 원인에 의해 CRP가 증가되어 있는 환자에서 각각의 원인에 대한 적극적인 치료와 함께 CRP의 추적 검사로 치료의 기간 및 정도를 결정하는 것은 중요할 것으로 생각된다. Background : Systemic inflammatory reaction (SIR) plays a critical role in the development of cardiovascular disease (CVD). Recent studies have demonstrated that elevated level of C-reactive protein (CRP) is one of the most important risk factor for CVD. CRP is not only a marker of the presence of inflammatory reaction, but also directly participates in the development of endothelial dysfunction and atherosclerosis. Cell proliferation and VEGF expression in vascular smooth muscle wall have been reported as key findings of atherosclerosis. Methods: To investigate the causal effect of CRP on the development of atherosclerosis, we stimulated human vascular smooth muscle cells (HVSMC) with recombinant human CRP (0.5 to 50 pg/mL) and examined the effect on cell proliferation (by kthymidine uptake and Cell Counter). VEGF mRNA and protein expression were also evaluated by RTPCR and ELISA. To investigate the potential intracellular signaling pathway in CRP-induced changes in HVSMC, we assessed the activation of mitogen activated protein kinase (MAPK), p38 and ERK1/2 by CRP by Western blotting. Results: CRP induced a dose- and a time-dependent increase in k-thymidine uptake and cell number of HVSMC. CRP also up-regulated the expressions of VEGF mRNA and protein which peaked at 24 hours and 48 hours after exposure. respectively. Stimulation of HVSMC with CRP induced the phosphorylation of MAPK, p38 and ERK1/2 which started at 5 minutes and peaked at 15 minutes after exposure. Pretreament of specific inhibitors of p38 and ERK1/2, SB203580 (10 pM) and PD98010 (50 pM) abolished CRP-induced proliferation and VEGF expression of HVSMCs. Conclusion: To the best of our knowledge, this is the first report to show CRP itself induced VEGF expression in HVSMC associated with cell proliferation, which suggested that CRP may actively participate in the development of atherosclerosis viadifferent mechanisms. Clinical implication of these findings with potential therapy targeting increased CRP itself need to be carefully evaluated in order to decrease the cardiovascular morbidity and better outcome of renal failure patients.
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일반연제 발표 : 만성 신부전 환자에서 Proinflammatory Cytokine으로서의 Angiotensin 2의 의의
김미연 ( Kim Mi Yeon ),박정은 ( Park Jeong Eun ),이영숙 ( Lee Yeong Sug ),김승정 ( Kim Seung Jeong ),최규복 ( Choe Gyu Bog ),윤견일 ( Yun Gyeon Il ),강덕희 ( Kang Deog Hui ),유은선 ( Yu Eun Seon ),김명관 ( Kim Myeong Gwan ) 대한신장학회 2003 춘계학술대회 초록집 Vol.22 No.1
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