Malassezia 효모와 Staphylococcus Aureus에 대한 제삼인산나트륨과 구연산의 탈ㆍ부착 효과와 성장억제 효과

양남웅 ( Nam-woong Yang ),정충현 ( Choong-hyun Jung ),이기완 ( Ki-wan Lee ),장숙진 ( Sook-jin Jang ) 한국환경기술학회 2012 한국환경기술학회지 Vol.13 No.3

이 연구는 제삼인산나트륨(trisodium phosphate, TSP)과 구연산(citric acid, CA) 및 그 병합제의 Malassezia furfur와 Staphylococcus aureus에 대한 탈-부착 (de-adherence) 효과와 성장억제효과를 평가하는데 목적이 있다. 이는 그것들을 건성비강진, 아토피피부염, 지루피부염과 같은 피부염 환자에 대한 보조요법제로 적용할 수 있을지를 결정하기 위한 것이다. M. furfur 에 대한 TSP 와 CA 일수소화물(monohydrate)의 탈-부착 효과와 성장억제 효과를 평가하는데 배지전개법(spreader plates method)을 사용하여 측정하였다. 아토피피부염을 악화시키는 것으로 알려진 S. aureus 에 대한 TSP 와 CA의 정균효과 (bacteriostatic effect)는 UV 분광광도계로 정량적으로 측정하였다. TSP 용액은 M. furfur 에 대해 탈-부착 효과를 나타냈다. 0.8 % TSP 를 함유한 Doubly modified Leeming and Notman (DmLN) 액체배지(pH 8.0)에서 M. furfur 균주들의 성장은 현저히 억제되었다. 다른 액체배지에 비해 0.4% CA를 함유한 brain heart infusion액체배지(pH 6.0)에서 S. aureus 는 27시간까지 뚜렷하게 억제되었다. 이 결과들은 TSP와 CA가 탈-부착 효과와 성장억제효과를 가지므로 건성비강진, 아토피피부염, 지루피부염과 같은 피부염에 보조요법제로 개발할 좋은 후보물질들이 될 수 있다는 것을 나타낸다. The aim of this study was to evaluate the de-adherence effect and growth inhibitory effect of the trisodium phosphate (TSP), citric acid (CA) and the combination of both agents on Malassezia furfur and Staphylococcus aureus to determine applicability of them as supportive care agents for patients with dermatitis such as dandruff, atopic dermatitis, and seborrheic dermatitis. The de-adherence and growth-inhibition effect of TSP and CA monohydrate on M. furfur were measured by spreader plates method. The bacteriostatic effect of TSP and CA on S. aureus, which is well known to exacerbate atopic dermatitis, was measured quantitatively by UV spectrophotometer. The TSP solution showed de-adherent effect on M. furfur. The growth of M. furfur strains were remarkably inhibited in Doubly modified Leeming and Notman (DmLN) broth containing 0.8 % trisodium phosphate (pH 8.0). S. aureus was strikingly inhibited until 27 hours in brain heart infusion broth containing 0.4% CA (pH 6.0), compared to other broths. The results indicate that TSP and CA, having de-adherent and growth inhibitory effect, could be good candidates to develop supportive care agents for dermatitis such as dandruff, atopic dermatitis, and seborrheic dermatitis.

콜레라 장독소 주사부위에서 보이는 국소화된 털성장 촉진현상의 관찰

신성희(Sung-Heui Sin),양남웅(Nam-Woong Yang),임용(Yong Lim) 大韓微生物學會 1995 大韓微生物學會誌 Vol.30 No.1

구강 내 사슬알균 종들에 대한 제3인산나트륨과 구연산의 탈부착 효과

정충현,조형훈,최광주,강승용,양남웅,Jung, Choong-Hyun,Cho, Hyung-Hun,Choi, Gwang-Ju,Kang, Seung-Yong,Yang, Nam-Woong 한국미생물학회 2008 미생물학회지 Vol.44 No.4

Irisodium phosphate 12 hydrate와 citric acid monohydrate의 혼합액은 유리구슬(${\phi}7mm$)에 부착된 Streptococcus mutans (KCTC 3065)와 Streptococcus mitis (KCTC 3556) 및 Streptococcus salivarius (KCTC 3960)에 대하여 강한 항 부각효과를 보였다. 각 사슬알균 종들은 각각 3개의 유리구슬들이 들어있는 BHI 액체배지에서 18시간 흔들 배양되었다. 배양 후, 3개의 짧은 핀들이 부착된 핀셋을 사용하여 유리구슬들을 꺼낸 다음, 유리구슬에 맺힌 균액을 제거하기 위하여 생리식염수로 가볍게 세척하였다. 각 균주당 3개의 유리구슬들을 시약들이 들어있는 시험관에 넣고 vortex mixer로 10분씩 와동(渦動)하였다. 칫솔질과 유사한 효과를 얻기 위해 각 시험관들에 물에 젖지 않는 기름종이 조각들을 40 mg씩 넣었다. 구강 내 사슬알균 종이 아닌 Streptococcus agalactiae는 5분간 와동(渦動)하였다. 각 시험관에서 취한 샘플들을 10배 계단 희석하여 BBH 한천 배지와 혼합하고 배양한 다음, 집락수를 계수하였다. 사슬알균 종 당실험을 3번 반복하였고, 시약에 의해 탈부착된 균수를 평균하여 생리식염수대조군의 평균으로 나누어 그 배수를 탈부착 효과로 계산하였다. treptococcus mutans에 대하여 구연산-제3인산나트륨-식염수혼합액(이하 CTS, pH 6.0)의 탈부착 효과는 생리식염수 대조군에 비해서 평균 12.5배였으며, 제3인산나트륨-식염수 혼합액(이하 TS, pH 8.4)은 평균 7.5배였고, 구연산-식염수 혼합액(이하 CS, pH 4.6)은 6.0배였다. Streptococcus salivarius에 대해서 CTS는 7.2배, TS는 2.6배, CS는 2.8배였다. Streptococcus mitis에 대해서 CTS는 2.4배였고, TS는 3.4배였으나 CS는 0.3배로 탈부착 효과가 없었다. 구강 내 사슬알균 종이 아닌 Streptococcus agalactiae에 대해서 CTS는 0.7배, TS는 0.6배, CS는 0.6배로 3가지 시약에 대하여 탈부착 효과가 전혀 없었다. 이러한 결과들은 충치와 아급성 심내막염의 원인균인 구강 내 Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius 및 Streptococcus mitis가 CTS 혼합물에 의해서 구강으로부터 쉽게 제거될 수 있음을 의미한다. 따라서 이러한 결과를 응용하면 새로운 개념의 치약을 개발할 수 있을 것으로 생각되며, 충치의 예방 및 발치 후 아급성 심내막염의 예방에 도움이 될 것으로 사료된다. Trisodium phosphate 12 hydrate and citric acid monohydrate mixture showed the strong anti-sticking effect on Streptococcus mutans, Streptococcus mitis, and Streptococcus salivarius, which are adhered to glass beads. Each Streptococcus species was shaking-cultured in brain heart infusion broth containing three glass beads. After 18 hr, glass beads were slightly washed into normal saline by three-pin-pointed pincette. Each three glass-beads set was put into reagent -containing tubes, which have 40 mg of bits of weighing paper for gaining brushing effect as similar as brushing one's teeth. The tubes were shaken by vortex mixer for 10 min except non-oral microbe, Streptococcus agalactiae (5 min). The samples were colony-counted by serial agar dilution method. Experiment was repeated three times for each Streptococcus species. The relative ratios of bacterial de-adherence by reagents were calculated in comparison with normal saline control. The de-adherence degree of citric acid-trisodium phosphate-saline mixture (CTS, pH 6.0) against Streptococcus mutans came to an average of 12.5 times compared with normal saline control. Trisodium-saline (TS, pH 8.4) showed the average of 7.5 times, and citric acid-saline (CS, pH 4.6) showed 6.0 times compared to the control group. The bacterial de-adherence degree against Streptococcus salivarius was each 7.2,2.6 and 2.8 times in above reagent sequence in comparison with saline control. CTS and TS showed 2.4 and 3.4 times of anti-sticking effect on Streptococcus mitis respectively, but CS had no anti-sticking effect on this bacterium. CTS, TS and CS showed 0.7, 0.6, and 0.6 times on non-oral microbe, Streptococcus agalactiae, separately compared with saline control. These results show that oral Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, and Streptococcus mitis, which are causative of dental caries or subacute endocarditis, may be easily removed from oral cavity by CTS mixture. It is conceivable that our experimental results will enable the development of a new conceptive toothpaste to prevent dental caries or subacute endocarditis after drawing teeth.

콜레라 장독소 활성에 미치는 환원형 글루타치온의 억제 기전

신성희(Sung-Heui Sin),양남웅(Nam-Woong Yang),임용(Yong Lim) 大韓微生物學會 1995 大韓微生物學會誌 Vol.30 No.1

철 획득기전이 양수내 황색포도상구균 증식에 미치는 영향

신성희 ( Sung Heui Shin ),장정수 ( Jung Soo Chang ),양남웅 ( Nam Woong Yang ),이명희 ( Myung Hee Lee ),양은석 ( Eun Suk Yang ),박상기 ( Sang Kee Park ),임용 ( Yong Lim ) 대한주산의학회 2000 Perinatology Vol.11 No.3

Staphylococcus aureus의 성장에 따른 철이용 양상

신성희(Sung-Heui Shin),이승일(Seung-il Lee),김재수(Jae-Su Kim),주세혁(Sae-Heuk Joo),박종훈(Jong-Hoon Park ),양남웅(Nam-Woong Yang ),임용(Yong Lim) 大韓微生物學會 1998 大韓微生物學會誌 Vol.33 No.5

다목적 배양기의 개발에 필요한 기초연구

양남웅 조선대학교 부설 의학연구소 2002 The Medical Journal of Chosun University Vol.27 No.2

Background and Objectives: An anaerobic chamber or jar for the anaerobic culture costs a great deal in upkeep, and most users are afraid of high-pressure gas tanks attached to a CO2 incubator or an anaerobic chamber. We devised the culture box with an air-bag and tested it to obtain the basic data for devising a multipurpose culture chamber which need not much upkeep expenses. Materials and Methods: For tests, we manufactured polymethyl methacrylate box (280 × 280 × 240 mm, in size and 18.8 L in volume) with a polyvinyl chloride air-bag. The CO2 concentration inside the box was measured by a CO2 analyzer and an aspirating pump set. The O2 concentration was measured by an oxygen indicator inside the box and the dissolved oxygen concentration in the media by the dissolved oxygen meter. Results: 5% CO2 was generated when 2.73 g of sodium bicarbonate and 6.83g of citric acid were mixed with 50 mL tap water inside the box. The absolute anaerobic condition was made within 45 minutes from mixing 3.5 g of sodium borohydride and 50 mL of 1 N acetic acid, and 5% O2 concentration (micro-aerobic condition) was produced within 15 minutes by mixing 20 mL of 1 N acetic acid and 1 g of sodium borohydride. Conclusion: The culture box with an air-bag needs neither CO2 and mixed gas tanks, nor an expensive and disposable anaerobic pack. I think these results could be used for devising a new multipurpose culture chamber.

사람 적혈구 용해액과 마혈청을 첨가한 Columbia agar base에서 Gardnerella vaginalis 임상 분리주의 약제 내성

양남웅,임용,신성희 대한감염학회 2003 감염과 화학요법 Vol.35 No.2

목적 : 국내에서 아직 보고가 없는 G. vaginalis에 대한 항균제 감수성 시험 결과를 얻기 위하여 실험하였다. 방법 : 악취가 나는 질 분비물의 증가를 주소로 내원한 여성 환자들에서 분리한 G. vaginalis 48주와 표준균주 1주(ATCC 14018)에 대하여 한천 희석법에 의한 항균제 감수성 시험을 하였다. 본 연구자들이 새로 고안한 방식으로 제조한 사람 적혈구 용해액을 마 혈청과 함께 columbia agar(1% proteose pepton No. 3함유)에 각 5%씩 첨가하여 한천 희석법의 시험 배지로 사용하였다. 결과 : Clidamycin과 ciprofloxacin의 MIC_(90)은 각각 0.3㎍/mL, 0.6㎍/mL로 감수성이 높았다. 기타 amoxicillin, doxycycline, erythromycin, cefazolin, gentamicin, metronidazole, tinidazole은 비교적 높은 내성을 보였다(NCCLS, U.S.A., 2001). 결론 : 세균성 질증의 치료를 위하여 metronidazole 혹은 tinidazole 단독 투여하기 보다는 clindamycin 또는 ciprofloxacin의 병용효과를 환자들에서 검증할 필요가 있다고 사료된다. 아울러 본 연구자들이 고안한 첨가물인 사람 적혈구 용해액은 G. vaginalis의 항균제 감수성 시험용 한천 희석 배지 및 시험관 희석 배지로 사용할 수 있을 것으로 생각된다. Background : To the best of our knowledge, there has been no any report on the antibiotic susceptibility profile of Gardnerella vagina/is, determined in domestic area by the agar dilution method. Therefore, we studied on 49 strains of G. vagina/is by the agar dilution method. Methods : One standard strain (ATCC 14018) and Forty-eight strains isolated from patients with increased vaginal discharge were included in this study. Columbia agar base containing 1% proteose peptone No. 3 was supplemented with horse serum (5%) and human erythrocyte lysate (5%) which was prepared by a new method, and this medium was used for the antibiotic susceptibility test. Results: The MICs_(90) of clindamycin and ciprofloxacin were 0.3 ㎍/mL and 0.6 ㎍/mL, respectively. Amoxicillin, cefazolin, doxycycline, and erythromycin were hardly effective against most strains of G. vagina/is (NCCLS, U.S.A., 2001). Especially, MICs_(90) of both metronidazole and tinidazole were 80 ㎍/mL under micro-aerobic condition of 5% O₂. Conclusion: For the treatment of Bacterial vaginosis, it is suggested that clindamycin or ciprofloxacin should be combined with vaginal tablet or gel of metronidazole rather than single administration of metrondazole or tinidazole.

콜레라 장독소에 의한 털성장 촉진 현상의 기작에 관한 연구(1)

양남웅,신성희,임용,주세혁,정석진,김재수,박정평,기근홍,장정수 대한화학요법학회 1998 대한화학요법학회지 Vol.16 No.4

배경 : 콜레라 장독소로 vasopermeeability assay를 하던 중에 우연히 발견된 및 성장 촉진 효과를 보다 체계적으로 검증하고 작용 기작에 대하여 알아보기 위하여 실험하였다. 방법 : NZW rabbit, SD rat, F344 rat, ICR mouse, C57BL/6 mouse, Hairless mouse, hamster 각 3마리의 배부 털을 제거하고 콜레라 장독소를 파내 주사(5-10㎍) 또는 1회 도포하여 10일 후에 털 성장의 정도를 육안으로 그리고 micrometer로 관찰 측정하였다. 5㎍의 독소를 피내 주사한 5일 후에 SD rat의 조직을 절취하여 광학 현미경 및 전자현미경적 관찰을 하였다. 결과 : 콜레라 장독소를 피내 투여한 결과 토끼를 비롯해서 생쥐, 쥐, 햄스터에서도 털 성장촉진 현상을 보였으며 hairless mouse에서는 털성장 효과가 없었다. New Zealand White rabbit와 F344 rat의 배부 털을 제거하고 장독소 10㎍/0.1ml PBS을 피부에 도포한 결과, 피내 투여한 것과는 달리 고르지 않게 털의 성장 촉진 현상을 나타냈다. 털의 길이는 대조군에 비해서 현저히 증가하였으나 독소 투여량에 비례하지 않았으며, 털의 두께는 투여량에 비례하여 증가하였다. 털의 멸생도는 실험군과 대조군 사이에 유의한 차이가 없었다. 결론 : 콜레라 장독소는 털 성장 주기가운데 퇴조기와 휴지기에 영향을 미치지 않는 것으로 추정된다. 광학 현미경 및 전자 현미경의 소견에 따르면, 피내 투여된 콜레라 장독소는 모낭세포와 성장기의 모낭을 둘러싸고 있는 모세혈관 내피세포의 활성화를 통해 털 성장을 유도하는 것으로 보인다. 이러한 결과는 콜레라 장독소가 다양한 종류의 탈모증 치료에 사용될 가능성이 있음을 시사한다. Background : Cholera enterotoxin(CT) had the effect of hair growth acceleration in previous rabbit experiment. The aim of this study was to elucidate mechanism of CT action for hair growth acceleration. Methods : CT was administered to NZW rabbit, F344 rat. SD rat, ICR mouse. C57BL/6 mouse and Hairless mouse mtradermally. Hair length and Thickness mere measured by stereoscope and micrometer. Stereomicroscopic and transmit electron microscopic findings mere studied for CT effect. Results : Cholera enterotuxin(CT) has exhibited the accelerated hair growth effect also in rats znd mice as the same Kith rabbits, except with hairless mouse. When pasted on the hair removed skin areas of back mith CT 10 ㎍/0.1ml PBS in F344 strain of rat and New Zealand White rabbit, hair growth was irregular12 accelerated unlike intradermal injection of CT. Hair of experimental group WaS clearly longer than control group but not proportional to doses of toxin. Hair thichess was increased mith proportion to toxm doses. Density degree of hair growth was not meaningly different m the stereoscopic and histological findings between control and experimental group. Conclusion : It is presumed that CT has not activation effect to telogen phase of hair cycle. Judging by light microscopic and transmit election microscopic findings, it is suggested that intraderma1 CT injection may induce acceleration of hair growth through the activation of hair follicular cells and endothelia1 cells of microvasculature surrounding the anagen hair follicles.

Phage 항원성에 미치는 trypsin의 영향

이현국,양남웅,서재홍 朝鮮大學校 附設 醫學硏究所 1992 The Medical Journal of Chosun University Vol.17 No.1

In order to investigate the effect of trypsin(TP) on the phage antigenicity, the Klebsiella phage-host cell system and sheep red blood cells were used, and the results were as follows. The neutralization velocity of Tp-treated phage(Tp phage) by anti-normal phage serum was faster than that of normal phage. And, the neutralization of normal phage by anti-Tp phage serum was remarkably worse than that of Tp phage. The normal phage - neutralizing activity of the anti-normal phage serum absorbed with Tp phage was very weak. However, the anti-Tp phage serum absorbed with normal phage still considerably neutralized the Tp phage. The cold phage hemagglutination(CPH) by normal and Tp phage was most favourable when the reactions are carried out with each phage-correspondig antiserum. The anti-normal phage serum absorbed with Tp phage and the anti-Tp phage serum absorbed with normal phage still formed, with each corresponding phage, the CPH. The neutralization of Tp phage, by anti-normal phage serum, Passed two times through host bacteria and that of Tp phage, by anti-Tp phage serum, Passed three times through host bacteria were similar to the neutralization of normal phage by each antiserum. If the Tp phage is passed two times or three times through host bacteria, the forming capability of CPH by each phage bacame similar, under the anti - normal and anti - Tp phage sera, to that of normal phage. The absorption of Tp phage to host bacteria was a little faster than that of normal phage. If the Tp tretment of phage is done for 48hours at 37℃, the surviving titer was reduced to around 40%.