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      • KCI등재후보
      • 한국 전통발효 포도식초에서 분리한 Acetobacter xylinum KI의 Cellulose Synthase의 순수분리

        김춘성,차영주,송규영,김호상,박종필,김근형,김성준 조선대학교 생명과학연구소 1997 생명과학 연구 Vol.5 No.-

        본 실험에서는 cellulose를 생합성하는 Acetobactor xylium Kl에서 cellulose synthase를 분리하여 그 효소적 특성을 조사 하였다. 현재 cellulose synthase를 분리하는데 효과적인 방법으로 Nin과 Brown (11)이 제시한 cellulose entrapment method가 71배의 효소활성을 나타냄으로써 chromatography에 의한 방법이 66배의 효소활성을 나타내는 것과 비교하여 약간의 높은 효율을 나타내었다. 그러나 효소 활성도가 비교적 낮음으로서 계속적인 연구가 필요함을 확인 하였다. 이같은 문제점을 해결하고자 수행한 본 실험에서 얻은 결과는 다음과 같다. 1. Digtonin과 Triton X-100을 이용하여 효소의 활성 회복률을 측정한 결과 각각 59%와 47%를 나타냄으로서 digitonin이 효소를 용해시키는데 더 나은 효과가 있음을 나타내었다. 2. 계면활성제로 Triton X-100을 사용하였고 Con A-sepharose를 이용하여 분획하고 특이적 활성도와 효소활성의 회복률을 측정한 결과 39데의 효율과 8%의 회복율을 나타냈다. 여기서 모은 효소를 gel filtration한 결과 특이적 효소활성은 66배의 효율을 나타내었고 2%의 회복율을 나타내었다. 그리고 cellulose entrapment method에 의해 얻은 효소의 특이성과 회복률을 측정한 결과 71배의 효율과 4 %의 회복율을 나타내었다. 3. 효소 활성도를 측정한 결과 30'E에서 최적의 활성을 나타내었으며, 27℃와 37℃에서는 60%의 활성을 나타내었고 27℃ 이하와 37℃ 이상에서는 감소 하였다. 그리고 cellulose entrapment method에 의해 얻은 효소의 안정성은 4℃에서는 50시간 후까지 효소활성의 변화가 없었으며 20℃에서는 24시간 후 효소의 활성이 거의 없어짐을 보여주었다. 4. Crude factor와 GTP의 영향을 설험한 결과 GTP만 첨가되었을 경우 600 c.p,m의 효소활성을 나타내었으며 crude factor와 GTP가 모두 첨가된 효소 활성은 1,500 c.p.m, 끊인 crude factoγ와 GTP가 첨가된 효소활성은 600 c.p.m으로 나타나 효소활성에 crude factor와 GTP가 모두 증대한 영향을 미침을 확인 하였으며 crude factor는 온도에 민감함을 보여주었다. 5. Cellulose synthase의 효소활성에 Mg^(+2)과 Ca^(+2)이 미치는 영향을 측정한 결과Mg^(+2)만 첨가된 효소반응에서는 750 units를 나타내었고 Mg^(+2)와 Ca^(+2)이 모두 첨가된 반응에서는 770 units, Ca^(+2)만 첨가된 경우는 32 units로 나타남에 따라 Mg^(2+)는 효소의 활성에 절대적인 영향을 미치고 Ca^(+2)는 거의 영향을 미치지 않는다는 것을 알 수 있었다. 6. Cellulose synthase를 전기영동한 결과 83 KDa, 93 KDa, 101 KDa과 110KDa의 4개의 subunit로 구성되어 있음을 알수 있었다. 또한 trypsin으로 처리한 membrane fraction으로부터 얻은 단백질을 전기영동한 결과 83 KDa의 band만 남는 것으로 보아 83 KDa이 cellulose 생합성에 관여하는 중요한 단백질임을 알 수 있었다. One type of cellulose producing Acetobacter was isolated from Korea grape vinegar, and desingnated as Acetobacter xylinum KI. Cellulose synthase was extracted with Triton X-100 treatment and digitonin from washed membranes of Acetobacter xylinum KI, respectively. The activity recovery of Triton X-100 treatment and digitonin treatment were 47%, 59%, respectively. The recovery of enzyme activity was not good, and the protein composition of the purified preparation was similar to that directly purified by the cellulose entrapment method. The purification in the chromatography step was 66-fold, and entrapment step was 71-fold. The optimum temperature for enzyme activity was 30℃. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis of the purified cellulose synthase showed four bands - 83 Kda, 93 Kda, 103 Kda, and 110 Kda. Retention on Concanavalin A-sepharose column suggests that the cellulose synthase is a glycoprotein. After the addition of trypsin, the purified enzyme still maintained its activity. However only the 83 Kda polypeptide remained in the gel while other polypeptides were degraded. These results strongly suggest that the 83 Kda polypeptide is an essential component of the cellulose synthase.

      • KCI등재
      • VFC type A/D Converter에 관한 연구

        김춘성,이종각 대한전자공학회 1978 전자공학회지 Vol.15 No.6

        종래의 VFC type A/D Converter에서는 출력주파수가 수 100KHz까지는 linearity가 좋았으나 출역주파수가 높아 질수록 linearity error가 증가하였기 때문에 본 연구에서는 출력주파수 영역을 수 MHz까지 넓히기 위해서 tunnel diode voltage controlled oscillator를 사용하였고 입력전압과 출력주파수 사이에 linearity를 개선하기 위하여 negative feedback 회로를 사용하였다. 실험 결과에 의하면 제안된 VFC type A/D converter의 linearity는 최고 출력주파수 3.7MHz까지 0.209%이었다. In previous VFC type A/D converter high linearity charateristics knave been achieved to several hundred kHz, and in the converter with maximum output frequency of several MHz, the conversion linearity is poor in upper frequency range. In this paper the problem of the extension of the output frequency to MHz range is studied in the following two view points: First, a tunnel diode VCO is used to increase the output frequency range to several MHz. Second, the linearity between the input voltage and the frequency of the output pulse is accomplished by using negative pulse feedback circuit. From the experimental results, it was followed that the linearity of the proposed converter was about 0.209 percent at the frequency of 3.7MHz.

      • KCI등재후보

        국내 노인전문병원 병동부 공용공간의 이용 행태에 관한 연구 : 데이룸 및 복도를 중심으로

        김춘성,김상복,양내원 한국의료복지시설학회 2007 의료·복지 건축 Vol.13 No.4

        Korea is entered to the aging society with 21C. Also it is forecast we will enter in aging society quickly. for S years there are some growth in facility at least 2∼3 times but our society needs more. But this quantitative growth is worried about less quality. That's why we needs more research about the facility for an geriatrics hospital. The people who suffered from senile disease needs more treatment days in the ward of geriatric hospital. so we have to consider about better condition in ward of geriatrics than in general. Better environment for eldery is included not only the ward space but also the corridor and the dayroom. This study which it performed to improve their habitability is researched on public space. and this reserch deal with general feature against a public space in the ward of geriatric, and investigate 2 facility for divede the the general feature of the space. and this investigate is recorded according to behavior of patients. It can find us which factor of the space is prefered by them.

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