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        Corynebacterium glutamicum의 탄소대사 및 총체적 탄소대사 조절

        이정기 ( Jeong Kee Lee ) 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 2010 한국미생물·생명공학회지 Vol.38 No.4

        본 총설에서는 아미노산의 공업적 생산균인 Corynebacterium glutamicum의 탄소 대사 및 이와 관련된 총체적 조절 메커니즘에 대한 최근의 연구를 정리하였다. C. glutamicum의 산업적 발효을 위한 기질로서 사용되는 당밀은 주로 sucrose, glucose, fructose로 이루어져 있으며, 이들 당은 phosphotransferase system을 통해서 수송된다. C. glutamicum의 탄소 대사 특징은 glucose가 다른 당이나 유기산 등과 함께 존재할 때, glucose와 이러한 탄소원 들을 동시에 대사한다. 그러나 glucose/glutamate 혹은 glucose/ethanol 등의 혼합물에서는 탄소원의 순차적 이용으로 인해 나타나는 diauxic growth 현상을 나타내며, 이러한 carbon catabolite repression(CCR) 현상은 E. coli나 B. subtilis 등에서 알려진 것과는 다른 독특한 분자적 메커니즘과 조절 circuits을 가지고 있음이 밝혀지고 있다. C. glutamicum의 CRP homologue인 GlxR은 acetate 대사를 포함하여 glycolysis, gluconeogenesis 및 TCA cycle 등을 포함하는 중심탄소대사 조절 뿐만 아니라, 다양한 세포 기능의 조절에 관여하는 총체적 조절 단백질로서의 역할이 제시되고 있다. C. glutamicum의 adenylate cyclase(AC)는 막과 결합된 class IIIAC 로서, 막 단백질의 특성상 아직 규명되어 있지 않은 세포 외부의 환경 변화에 대응하여 세포 내의 cAMP합성 수준을 조절할 수 있는 sensor로 추정할 수 있다. 특히 C. glutamicum의 경우 배지내 glucose 를 비롯한 탄소원과 cAMP 농도와의 관련성이 E. coli에서 알려진 교과서적 지식과는 상반되게 변화하는 경향을 보이고 있어, cAMP signaling에 의한 세포 내 regulatory network 등은 향후 풀어야 할 의문으로 남아있다. 탄소대사 조절의 최상위에 존재하며 global 조절자인 GlxRcAMP 복합체 이외에도 차상위 전사조절 단백질로서 RamB, RamA, SugR 등이 존재하여 다양한 탄소대사를 조절한다. 최근 들어서는 새로운 탄소원으로서 대두되고 있는 biomass 관련 기질들을 이용할 수 있는 C. glutamucum 균주 구축을 통하여 이용 기질의 범위를 확대시키고자 하는 연구 및 탄소 대사와 관련하여 L-lysine의 발효 수율 혹은 생산성을 향상시키고자 하는 다양한 분자적 균주 육종 연구 등이 수행되고 있다. In this review, the current knowledge of the carbon metabolism and global carbon regulation in Corynebacterium glutamicum are summarized. C. gluamicum has phosphotransferase system (PTS) for the utilization of sucrose, glucose, and fructose. C. glutamicum does not show any preference for glucose when various sugars or organic acids are present with glucose, and thus cometabolizes glucose with other sugars or organic acids. The molecular mechanism of global carbon regulation such as carbon catabolite repression (CCR) in C. glutamicum is quite different to that in Gram-negative or low-GC Gram-positive bacteria. GlxR (glyoxylate bypass regulator) in C. glutamicum is the cyclic AMP receptor protein (CRP) homologue of E. coli. GlxR has been reported to regulate genes involved in not only glyoxylate bypass, but also central carbon metabolism and CCR including glycolysis, gluconeogenesis, and tricarboxylic acid (TCA) cycle. Therefore, GlxR has been suggested as a global transcriptional regulator for the regulation of diverse physiological processes as well as carbon metabolism. Adenylate cyclase of C. glutamicum is a membrane protein belonging to class Ⅲ adenylate cyclases, thus it could possibly be a sensor for some external signal, thereby modulating cAMP level in response to environmental stimuli. In addition to GlxR, three additional transcriptional regulators like RamB, RamA, and SugR are also involved in regulating the expression of many genes of carbon metabolism. Finally, recent approaches for constructing new pathways for the utilization of new carbon sources, and strategies for enhancing amino acid production through genetic modification of carbon metabolism or regulatory network are described.

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        유두상 에크린 한선종

        이정기(Jeong Ki Rhee),오영진(Yung Jin Oh),조백기(Baik Kee Cho),허원(Won Houh),이교영(Kyo Young Lee),심상인(Sang In Shim) 대한피부과학회 1989 대한피부과학회지 Vol.27 No.5

        The papillary eccrine adenoma is a rare benign sweat gland neoplasm charscterized by potentislly locally aggressive clinical course. We report herein a case of papillsry eccrine adenoma in a 28-year-old female who presented single intradermal tumor on the right postauricular ares. Histopathological findings showed dilated ducts containing eosinophilic or keratinous materials and intraluminal papillary rowths,

      • KCI등재

        e스포츠의 긍정 및 부정적 효과에 관한 연구

        김정기(Jung Kee Kim),이정기(Jeong Ki Lee) 사이버커뮤니케이션학회 2010 사이버 커뮤니케이션 학보 Vol.27 No.4

        이 연구는 그동안 체계적인 연구가 이루어지지 않은 e스포츠 프로그램 시청 경험에 대하여 이용과 충족 분석틀을 활용하여 조사하였다. 구체적으로 e스포츠 시청동기 구조를 파악하고, 시청경험을 구성하는 주요 요인(시청동기, 시청량, 몰입, 자기개발감, 공격성)들 간의 구조적인 관계를 분석했다. e스포츠 프로그램을 시청하고 온라인 게임에 참여한 경험을 가진 적극적인 이용자 256명의 응답을 대상으로 한 분석결과에 따르면 e스포츠 시청 동기는 ‘현실회피’, ‘시간보내기’, ‘팬덤’, ‘게임학습’, ‘흥미/오락’, ‘대화’의 6개 동기구조로 구성되어 있었다. 구조 관계 분석은 현실회피 동기와 대화동기가 게임 몰입에 영향을 미치고 있음을 규명하였다. 몰입은 긍정적인 이용의 결과로서 자기 개발감과 부정적인 이용결과로서 공격성에 유의한 영향을 미치고 있었다. 연구 결과의 의의와 한계를 논의하고 후속연구의 필요성을 구체적으로 제안하였다. We investigated experiences growing out of uses and effects of online games by e-sports viewers. Employing uses and gratifications framework, we examined, specifically, motivations for watching e-sports on television (research question 1) and structural relations among viewing motives, viewing amount, flow with online game, and outcomes such as self-development and aggression (research question 2). Analyzing 256 respondents watching e-sports program on television and participating in online games, we found six motives for watching e-sports: “escape,” “pass time,” “fandom,” “game learning,” “interest/entertainment” and “conversation.” AMOS analysis demonstrated that the escape and conversation motive had influence positively on the flow with online games. Flow had significant impacts on self-development as a positive outcome as well as on aggression as a negative outcome. Where viewing amount was not a significant to construct the outcomes, motivations and flow were significant. Results were consistent with uses and gratifications findings that activeness of audience play a crucial role in the media uses and effects process. We discussed significance and limitations of the results and suggested research agenda for future study.

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        해양의 Pseudomonas sp. 로부터 분리한 alginate lyase 유전자의 promoter에 의한 대장균 내에서의 β-agarase 유전자의 발현과 catabolite repression의 변화

        진철호,박제현,한정현,최윤혁,이종희,이정기,공인수 한국산업미생물학회 2001 한국미생물·생명공학회지 Vol.29 No.2

        Strong promoter로 밝혀진 alginate lyase유전자의 promoter부위에 대한 특성을 검토하기 위해 alginate lyase유전자의 46개 N-terminal amino acid가 포함된 promoter부분과, 같은 균으로부터 분리한 β-agarase의 유전자를 연결시켜 agarase의 activity를 평판배지상에서 보다 쉽게 확인하는 방법으로 promoter의 활성을 측정한 결과 alginate lyase유전자 promoter에 의해서 β-agarase유전자의 대량발현이 유도되고 있었으며 glucose의 존재하에서 β-agarase유전자 발현이 일어나지 않는 catabolite repression양상을 나타내고 있다. PCR로써 alginate lyase 유전자의 promoter하류에 존재하는 alginate lyase의 46개 N-terminal amino acid 부분이 순차적으로 제거된 plasmid를 제조하여 대량발현을 조사한 결과 46개의 아미노산이 제거된 후에도 β-agarase의 활성에는 변화가 없어 46개의 N-말단이 정상적인 상태에서 발현에는 영향을 미치고 있지 않음을 확인할 수 있었다. 또한 alginate lyase유전자의 promoter region에 존재하는 가능한 2개의 promoter consensus sequence PⅠ, PⅡ를 subcloning한 결과 promoter PⅡ만이 존재할 때도 대량발현이 유도되고 있음을 확인할 수 있었으며 동시에 glucose가 존재할때 catabolite repression이 역시 나타나고 있어 이 부분이 발현 및 glucose에 의한 regulation에 매우 중요하게 작용하는 부분이라는 것을 확인할 수 있었다. Promoter is a key factor for expression of the recombinant protein. There many promoters for overexpression of protein in various organisms. The aly promoter of Pseudomonas sp. W7 isolated from marine environment was known to be a constitutive expression promoter of the alginate lyase gene, and it's promoter activity is repressed by glucose in Escherichia coli. To investigate the catabolite repression of the aly promoter and association between the promoter mutants, β-agarase gene, which was also cloned from Pseudomonas sp. W7 was connected to the aly promoter with the sequence the coding 46 N-terminal amino acids of the alginate lyase gene. The constructed plasmid was introduced into E. coli and the agarase activity was measured. Fourty six amino acids of the alginate lyase gene was serially deleted using PCR to the direction of 5' upstream region and subcloned. The agarase was overexpressed by the aly promoter and the production of agarase was repressed by the addition of glucose into culture media. Fourty six amino acids of alginate lyase did not affect the production of agarase at all. The deletion of a putative stem-loop structure in the aly promoter induced the decrease of β-agarase productivity.

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