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변성 고성능 액체 크로마토그래피를 이용한 한우, 젖소 그리고 혼입육의 구분
안영창,조민호,서재원,윤일규,정덕현,이은영,남윤형,박수민,장원철,Ahn, Young-Chang,Cho, Min-Ho,Seo, Jae-Won,Yoon, Il-Kyu,Jung, Duck-Hyun,Lee, Eun-Young,Nam, Youn-Hyoung,Park, Su-Min,Jang, Won-Cheoul 대한화학회 2009 대한화학회지 Vol.53 No.6
In the meat industry, correct breed information in food labeling is required to assure meat quality. Genetic markers provide corroborating evidence to identify breed. We described the development of DNA markers to discriminate between Korean beef cattle (Hanwoo), Holstein, and mixed cow beefs. As most breeds are standardized for coat colour, the melanocortin 1 receptor (MC1R) gene, involved in the regulation of eu/pheomelanins synthesis, has been suggested as marker for breed traceability of products of animal origin. We also designed sex-determining region Y (SRY) gene specific primers for Y chromosome detection. In this study, fragments of MC1R gene and SRY gene were amplified by multiplex-PCR and subjected to digestion by MspA1I restriction endonuclease. Reaction products were analysised by denaturing high performance liquid chromatography (DHPLC). As a result, we identified 6 DHPLC peak types from MC1R gene and SRY gene analysis. DHPLC method showed more sensitive than RFLP method for DNA fragments analysis. Therefore, DHPLC method can apply to identify for Hanwoo, Holstein and mixed beef. 정육 사업에서 고기의 원산지와 종을 표기 하는 것은 육질의 판단에 영향을 미친다. 유전자 마커는 종을 판별하기 위한 증거로 사용되므로, 우리는 한우와 젖소 그리고 혼입육을 판단 할 수 있는 유전자 마커의 개발 계획을 수립하였다. 소의 모든 종은 모색 유전자에 의하여 그 종이 결정 되며 모색 유전자의 조절에 의하여 유멜라닌 또는 페오멜라닌이 합성되고, 이로 인하여 모색에 차이가 생기는 점을 이용하여, 종을 판별하는 유전자 마커로 사용된다. 암소와 수소를 판별하기 위하여 Y 염색체 상에 존재하는 성 결정 부위 유전자에 대응하는 프라이머를 제작하였다. 본 연구에서는 모색 유전자와 성 결정 유전자를 다중 중합효소연쇄반응(multiplex-PCR)을 이용하여 증폭하였고, 증폭 산물을 제한 효소 MspA1I로 소화 시켰다. 이 반응물을 변성 고성능 액체 크로마토그래피(denaturing high performance liquid chromatography, DHPLC)를 이용하여 분석하였다. 분석 결과 6가지의 크로마토그램을 확인 할 수 있었고, DHPLC 분석 방법은 한우, 젖소 그리고 혼입육을 쉽게 구별해 낼 수 있었다.
안영창,남윤형,박수민,조민호,서재원,윤일규,박용현,장원철,Ahn, Young-Chang,Nam, Youn-Hyoung,Park, Su-Min,Cho, Min-Ho,Seo, Jae-Won,Yoon, Il-Kyu,Park, Yong-Hyun,Jang, Won-Cheoul 대한화학회 2008 대한화학회지 Vol.52 No.3
결핵은 전 세계적으로 심각한 공중보건문제로 남아있다. 최근에는 결핵의 발병률이 증가하고 있는 추세이며 이에 따른 결핵의 정확한 조기치료와 심각한 부작용, 그리고 전염을 방지하기 위해서는 신속하고 정확한 결핵의 진단이 절실하게 필요하다. 본 연구에서는 결핵유전자를 빠르게 검출하는데 있어서 등온증폭법이 가지고 있는 높은 특이성과 신속성에 대하여 평가하였다. 결핵 DNA의 순차적 10배위 정량희석 DNA를 사용하였으며 일반PCR 방법과 등온증폭법의 실험방법의 검출한계, 민감성, 특이성, 재현성을 비교하였다. 그 결과 등온 증폭법은 빠른 증폭 시간과 높은 민감성, 높은 특이성을 가지고 있었으며 병원이나 연구실, 진단 검사실 등에서 결핵유전자를 빠르고 정확하게 진단할 수 있는 유용한 방법이 될 수 있을 것이다. Mycobacterium tuberculosis (MTB) remains a major worldwide public health problem. In recent years, the incidence of MTB has been rising. Rapid and reliable diagnosis of Mycobacterium tuberculosis is essential to initiate correct treatment, avoid severe complications, and prevent transmission. LAMP was used to develop a rapid and sensitive laboratory diagnostic system for the MTB. In this research, the loop-mediated isothermal amplification method (LAMP) that amplifies DNA with high specificity and rapidity at an isothermal condition was evaluated for rapid detection of MTB. Undiluted DNA (2.10 × 106 copy/mL), 10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5 and 10-6 (copy/mL) of MTB DNA were amplified by PCR and LAMP to determine the sensitivity of the assay. At results, the LAMP assay reported here has the advantages of rapid amplification, high sensitivity, and high specificity and will be useful for rapid and reliable clinical diagnosis of MTB in hospital clinical laboratory.
안일엽(Il-Yeup Ahn),이상신(Sang-Shin Lee),김태현(Tae-Hyun Kim),송민환(Min-Hwan Song),원광호(Kwang-Ho Won),김재호(Jae-Ho Kim) 대한전자공학회 2007 대한전자공학회 학술대회 Vol.2007 No.7
본 논문에서는 beacon을 기준으로 동기화된 노드들 간의 데이터 전송을 위한 프로토콜로써 실시간성과 낮은 전력 소모를 보장하고 있다. 이 프로토콜은 노드가 주위 센서 노드로부터의 데이터를 모아서 계단 형태로 부모 노드에게 동기회 되어 전송하는 Sync Stair 센서 네트워크 프로토콜이며, 기본적으로 TDMA를 기반으로 동기화 되며 데이터 전송을 위해 CSMA-CA를 사용한다. Sync Stair 네트워크는 Branch 노드와 Sensor 노드의 2 종류의 디바이스 타입이 존재한다.
등온 증폭법과 Real-time PCR을 이용한 Salmonella 검출
안영창,조민호,윤일규,정덕현,이은영,김진호,장원철,Ahn, Young-Chang,Cho, Min-Ho,Yoon, Il-Kyu,Jung, Duck-Hyun,Lee, Eun-Young,Kim, Jin-Ho,Jang, Won-Cheoul 대한화학회 2010 대한화학회지 Vol.54 No.2
살모넬라는 음식과 식수에서 흔히 나오는 중요한 병원체로 세계 곳곳에서 급성 위장염과 같은 감염증을 일으키며, 일반적으로 인간의 혈청형 임상종으로는 Salmonella enterica의 혈청형인 S. Typhimurium과 S. Enteritidis가 있다. 일반적인 검출 방법으로 살모넬라를 기본으로 하여 선택적인 배양으로 샘플을 수집하였고 살모넬라를 일으키는 군체의 특징을 생화학과 혈청학상인 테스트를 하였으나 이러한 방법들은 일반적으로 시간이 걸리고 높은 감도를 보이지 않았다. 최근, 등온증폭반응법과 real-time PCR법을 이용하여 높은 감도, 특이성으로 현재 병원성 박테리아에 빠르게 수행할 수 있게 되었다. 본 연구에서는 등온증폭반응과 real-time PCR법을 사용하여 S. Typhimurium과 S. Enteritidis의 검출하였다. 선택적인 타겟 유전자로, invA를 살모넬라종의 염기서열에 특이적으로 임의복제 하였다. 등온증폭반응과 real-time PCR은 살모넬라종으로부터 임의의 염기서열을 증폭하여 검출하였고, invA는 S. Typhimurium과 S. Enteritidis의 두 가지 종을 모두 검출하였다. 이러한 등온증폭반응과 real-time PCR법으로 S.Typhimurium과 S. Enteritidis의 검출 가능성을 보였으며, 살모넬라 종에 대한 특이성, 민감성을 갖춘 유용한 검출방법을 제시하였다. Salmonella is an important food-and water-borne pathogen associated with acute gastrointestinal illnesses around the world. The most common serotypes isolated from humans are Salmonella enterica serotype Typhimurium (S. Typhimurium) and S. Enteritidis. Traditional detection methods for Salmonella are based on cultures using selective media and characterization of suspicious colonies by biochemical and serological tests. These methods are generally time-consuming and not so highly sensitive. Recently, the Loop Mediated Isothermal Amplification and real-time PCR has been used as a highly sensitive, specific, and rapid test for the presence of pathogenic bacteria. In this study, a LAMP and real-time PCR was used to detect S. Typhimurium and S. Enteritidis. We selected target genes, which were the in invA and a randomly cloned sequence specific for the genus Salmonella. With LAMP and real-time PCR, random sequence was detected from Salmonella spp, invA were detected from all strain of S. Typhimurium and S. Enteritidis. This assay indicate that the specificity, sensitivity and rapid of the LAMP and real-time PCR make them potentially valuable tools for detection of S. Typhimurium and S. Enteritidis.
안일엽(Il-Yeup Ahn),이상신(Sang-Shin Lee),김재호(Jae-Ho Kim),김태현(Tae-Hyun Kim),송민환(Min-Hwan Song),원광호(Kwang-Ho Won) 대한전자공학회 2007 대한전자공학회 학술대회 Vol.2007 No.11
본 논문에서는 Active-Sleep을 반복하는 기준 노드의 주기적인 beacon 전송에 대하여 동기를 실제로 구현할 때 유용하게 사용할 수 있는 정형화된 적응형 동기화 방법을 제시한다. 일반적으로 센서 노드는 주기적인 패킷 전송이나 수신을 위해 내부적으로 타이머를 사용하는데 타이머는 하드웨어적으로 노드에 탑재되어 있는 Crystal의 오차로 인해 각 노드가 사용하는 타이머는 서로 차이가 있다. 이 때문에 센서 노드는 기준 노드의 beacon을 수신하여 동기화를 맞출 때 시간이 지날수록 beacon 수신을 하지 못해 동기가 깨지는 경우가 발생하고 있다. 본 논문은 기준 노드의 beacon에 동기를 맞추기 위해 이러한 타이머 오차를 인정하고, 이 오차와 Sleep 및 Active 주기에 따른 누적 오차에 안정적으로 beacon을 수신할 수 있는 동기화 방법을 제안한다.
무선 센서네트워크에서의 Sleep beacon mechanism과 beacon scheduling
안일엽(Il-Yeup Ahn),김재호(Jae-Ho Kim),이상신(Sang-Shin Lee),문연국(Yeon-Kug Moon),송민환(Min-Hwan Song),원광호(Kwang-Ho Won) 대한전기학회 2009 정보 및 제어 심포지엄 논문집 Vol.2009 No.10
본 논문에서는 Sleep beacon을 이용한 MAC Superframe 구조를 소개하고 이를 위한 Beacon Scheduling 방법을 제안한다. Sleep beacon을 이용한 Superframe은 IEEE 802.15.4를 바탕으로 한다. IEEE 802.15.4의 Superframe에서 CFP(Contention Free Period)를 제거하고, 한 개의 beacon을 수신하는 것 대신에 여러 개의 beacon을 수신하는 BOP(Beacon Only Period)[1]를 추가하였다. 구조 또한 CAP와 Inactive 구간이 바뀌어 있는 구조로 beacon을 수신한 후 Active 구간이 아닌 Inactive 구간이 된다. 이 beacon을 Sleep beacon이라 하고 Sleep 구간을 위한 beacon으로 사용된다. Beacon scheduling 방법은 이러한 구조를 기반으로 beacon의 충돌을 회피하는 방법으로 모든 노드들이 CAP를 공유하면서 서로 안정적으로 통신할 수 있는 방법이다.