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베타글루칸 함량이 높은 큰느타리버섯 선발을 위한 SCAR marker 개발
김수철,김혜수,조용운,류재산,조수정,Kim, Su Cheol,Kim, Hye Soo,Cho, Yong Un,Ryu, Jae-San,Cho, Soo Jeong 한국버섯학회 2015 한국버섯학회지 Vol.13 No.1
본 연구는 큰느타리버섯의 베타글루칸 고함유 형질에 관련된 SCAR marker를 개발하기 위해 수행되었다. operon사의 OPA(20개), OPB(20개), OPL(20개), OPP(20개), OPR(20개), OPS(20개) 등 총 120개 primer를 random primer(10 mer)로 사용하여 대립 계통 9종과 베타글루칸 고함유 계통 9 종을 대상으로 RAPD를 이용한 bulked segregant analysis를 실시하여 OP-R03 primer로부터 대립 계통에는 나타나지 않고 베타글루칸 고함유 계통에만 나타나는 특이적인 RAPD 밴드를 얻었다. OP-R03 primer를 이용한 RAPD 결과, 약 91 bp 부근에서 베타글루칸 고함유 계통에 특이적인 DNA 밴드가 관찰되었으며 이 DNA 밴드의 염기서열 말단을 근거로 SCAR 마커로 사용할 specific primer인 OP-R03-1-F와 OP-R03-1-R를 디자인하였다. SCAR 마커 OP-R03-1-F/-1-R primer를 이용하여 PCR을 수행한 결과에서도 91 bp 부근에서 대립 계통과 구별되는 DNA 밴드가 베타글루칸 고함유 계통에서 확인되었으며 random primer인 OP-R03 primer를 이용하여 PCR을 수행했을 때보다 재현성이 높고 진한 DNA 밴드임을 확인할 수 있었다. In this study, SCAR marker that differentiates Pleurotus eryngii strains with higher ${\beta}$-glucan from control strain was developed. Genomic DNAs of 9 control strains of Pleurotus eryngii and 9 Pleurotus eryngii strains with higher ${\beta}$-glucan were analyzed by bulked segregant analysis (BSA) using randomly amplified polymorphic DNA (RAPD). One-hundred twenty RAPD primers were screened on bulked DNA samples and a unique DNA fragment with the size of 91 bp was yielded by OP-R03 primer from the Pleurotus eryngii strains with higher ${\beta}$-glucan. A sequence characterized amplified region (SCAR) marker, designated as OP-R03-1-F and OP-R03-1-R, was designed on the basis of the determined sequence. The PCR analysis with the OP-R03-1 primer showed that this SCAR marker can clearly distinguish the Pleurotus eryngii strains with higher ${\beta}$-glucan from the control strains.
흰쥐의 적출된 심장에서 Verapamil이 허혈성 심근에 미치는 효과
김수철,조규석,박주철,유세영,Kim, Su-Cheol,Jo, Gyu-Seok,Park, Ju-Cheol,Yu, Se-Yeong 대한흉부심장혈관외과학회 1997 Journal of Chest Surgery (J Chest Surg) Vol.30 No.2
Using isolated rat heart preparations, we observed the protective effe ts of verapamil cardioplegia on ischemic myocardial injury. Isolated rat hearts were subjected to global ischemia at $25^{\circ}C$ Twenty four isolated Sprague Dawley rat hearts underwent 30 minutes of the retrograde nonworking perfusion with Krebs-Henseleit buffer solution followed by $25^{\circ}C$ cardioplegic solution (St. Thomas'Hospital Cardioplegic Solution) for 60 minutes. Before ischemic arrest, rat hearts were treated with cold cardioplegic solution in control group (n=12) and cold cardioplegic solution with verapamil (1 mg/L) in experimental group (n=12). After 60 minutes of ischemia, hemodynamic and biochemical parameters such as heart rate, left ventricular pressure (LVP), + dp/dt max, coronary flow and creatine phosphokinase (CPK) were measured before giving cardioplegia and 30 minutes after reperfusion. Verapamil group exhibited greater recovery of heart rate, LVP, +dpldt max, coronary flow and CPK than control group (p < 0.05). 저자들은 흰쥐의 적출된 심장을 이용하여 Verapamil이 허혈성 심근에 대하여 심근보호효과가 있는지를 관찰하였다 흰쥐의 적출된 심장은 허혈상태에서 심근온도가 $25^{\circ}C$가 되게 유지하였다. 24마리의 흰쥐로부터 적출된 심장을 Krebs-Henseleit완충액을 사용하여 30분간의 비작업성 역관류로 안정시킨 후 $25^{\circ}C$의 심정지액 (St. Thomas' Hospital Cardioplegic Solution)에 60분 동안 저장하였다. 허혈성 심정지를 유도하기 전에 적출된 심장을 저온의 심정지액으로 처리한 군을 대조군(n=12)으로 하고, Verapamil 이 첨가된 저온의 심정지액으로 처리한 군을 실험군(n=12)으로 하였다. 60분 동안의 허혈성 심정지후 심정지전에 측정했던 혈역학적 및 생화학적 지표인 심박동수, 좌심실압, +dpfdt max, 관상관류량과 CPK치를 재관류후 30분에 재측정하여 심정지전과 비교하여 심기능 회복 정도를 관찰하였다. Verapamil이 첨가된 저온의 심정지액을 사용한 실험군이 심박동수, 좌심실압, +dp/dt max, 관상관류량과 CPK치에서 대조군에 비하여 유의하게 높은 회복율을 나타내었다(p <0.05).
김수철(Su Cheol Kim),권현숙(Hyun Sook Kwon),김철환(Chul Hwan Kim),김혜수(Hye Soo Kim),이창윤(Chang Yun Lee),조수정(Soo Jeong Cho) 한국생명과학회 2016 생명과학회지 Vol.26 No.8
본 연구에서는 천연물 유래 항산화 소재로서 흰색 느티만가닥버섯(Hypsizygus marmoreus)의 부위별 이용 가능성을 알아보기 위하여 흰색 느티만가닥버섯을 갓(pileus)과 대(stipe)로 분리하여 열수와 80% 에탄올에 침지한 다음 부위별 항산화 활성을 조사하였다. 흰색 느티만가닥버섯은 에탄올 추출물(갓 부위 923.47±0.18 mg GAE/100g, 대 부위 324.05±0.03 mg GAE/100 g)에 비해 열수 추출물(갓 부위 1137.39±0.38 mg GAE/100 g, 대 부위 700.86±0.06 mg GAE/100 g)의 총 폴리페놀 함량이 높게 나타났고 대 부위보다는 갓 부위의 총 폴리페놀 함량이 높게 나타났다. DPPH 라디칼 소거 활성은 10 mg/ml의 농도에서 에탄올 추출물 갓 부위의 활성이 47.32±0.23%로 가장 높았으며 ABTS 라디칼 소거 활성도 10 mg/ml의 농도에서 에탄올 추출물 갓 부위의 활성이 57.33±0.10%로 가장 높았다. 환원력과 ORAC 지수는 에탄올 추출물에 비해 열수 추출물이 높게 나타났고 환원력은 갓 부위와 대 부위에 큰 차이가 없었으나 ORAC 지수는 대 부위보다는 갓 부위가 높게 나타났다. 흰색 느티만가닥버섯 추출물의 세포 독성은 WST-1 assay를 이용하여 추출물이 RAW 264.7 세포에 미치는 영향으로 평가하였다. 이상의 결과를 종합해보면, 흰색 느티만가닥버섯의 총 폴리페놀 함량과 항산화 활성은 추출물의 농도가 증가함에 따라 증가하는 경향을 나타내었으며 대 부위보다는 갓 부위의 항산화 활성이 우수하였다. Hypsizygus marmoreus (white cultivar), also called white beech mushrooms, are edible mushrooms commercially cultivated in Korea and Japan. This study was carried out to evaluate the antioxidant properties of H. marmoreus. H. marmoreus fruit bodies were divided into pileus and stipe. The pileus and stipe were extracted into water and 80% ethanol and their antioxidant activities were analyzed. The total polyphenol content was highest in the water extract (pileus 1137.39±0.38 mg of GAE (gallic acid equivalents)/100 g, stipe 700.86±0.06 mg of GAE/100 g) compared to the ethanol extract (pileus 923.47±0.18 mg of GAE/ 100 g, stipe 324.05±0.03 mg of GAE/100 g). Ethanol extracts from pileus showed better scavenging ability on DPPH (47.32±0.23% at 10 mg/ml) and ABTS (57.33±0.10% at 10 mg/ml) than the stipe and water extract groups. Water extract from pileus were more effective in reducing power and ORAC (oxygen radical absorbance capacity) value than stipe and ethanol extract. The toxicity of water and ethanol extracts was investigated using WST-1 (Water Soluble Tetrazolium salt) assay on the mouse macrophage cell line RAW 264.7. Overall, total polyphenol content and antioxidant activities of extracts from H. marmoreus increased in a dose dependent manner while pileus was showed better total polyphenol content and antioxidant activities than stipe.