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Site-specific Mutagenesis에 의한 PRD1 DNA Polymerase의 활성부위 결정
황정원,정구홍 한국미생물학회 1991 미생물학회지 Vol.29 No.4
The PRD1 DNA polymerase is a small multi-functional enzyme containing conserved amino acid sequences shared by family B DNA polymerases. Thus the PRD1 DNA polymerase provides an useful model system with which to study structure-functional relationships of DNA polymerase molecules. In order to investigate the functional and structural roles of the highly conserved amino acid sequences, we have introduced three mutations into a conserved amino acid of the PRD1 DNA polymerase. Genetic complememtation study indicated that each mutation inactivated DNA polymerase catalytic activity.
Dual Affinity Tag 을 이용한 Human Hepatitis B Virus Polymerase 의 발현과 정제
이영일,정구홍,곽동석,김자영 한국유전학회 1996 Genes & Genomics Vol.18 No.2
To improve human hepatitis B virus (HBV) polymerase expression in E. coli, we introduced His_6 tag to the C-terminus of HBV polymerase. This expression vector, pMPH can direct expression of HBV polymerase with maltose binding protein (MBP) at its N-terminus and a His_6 tag at its C-terminus. This allows for the purification of full-size HBV polymerase by a sequential two-step procedure on amylose resin and Ni^(2+)-NTA resin. When MBP/Pol/His fusion protein was purified using amylose resin affinity chromatography, DNA-dependent DNA polymerase (DDDP) specific activity was 3.8 fold higher, and RNA-dependent DNA polymerase (RDDP) specific activity was 2.3 fold higher than those of MBP/Pol fusion protein. In addition, In situ activity gel assay showed that the polymerase activity of MBP/Pol/His fusion protein was higher than that of MBP/Pol fusion protein. Based on these data, the fusion of MBP/Pol protein with His_6 tag increased the stability of polymerase and prevented its degradation. Since His_6 tag is chelated Ni^(2+)-NTA resin, amylose column-purified recombinant protein was reloaded on the second Ni^(2+)-NTA column. The polymerase activity of this Ni^(2+)-NTA column-purified MBP/Pol/His fusion protein was higher than that of amylose column purified MBP/Pol/His fusion protein or MBP/Pol fusion protein. The DDDP specific activity was 16.5 fold higher, and the RDDP specific activity was 5.0 fold higher than that of MBP/Pol fusion protein.
Aspergillus nidulans내에서 Aspergillus awamori의 Glucoamylase 유전자 발현
김석준,유준희,정구홍 한국미생물학회 1993 미생물학회지 Vol.31 No.2
A awamori 의 glucoamylase 유전자와 A. nidolans 의 trpC maker 유전자를 가진 A. nidulans 의 expression vector 를 만들었다. 이재조합 plasmid 를 트립토판 영양요구주의인 A. nidulans B17 에 형질전환시켰다. Southern blotting 으로 vector DNA 가 A. nidulans 의 chromosomal DNA 에 integration 된 것을 확인하였다. Northern blotting 의 결과, glucoamylase 유전자는 induction 조건에서 mRNA 를 합성하였다. glucoamylase 의 역가가 형질전환체에서 증가하였으며, nondenaturing polyacrylamide gel 에서 glucoamylase 의 활성이 나타났다. The A. nidulans expression vector which contained trpC marker gene from A. nidulans was constructed to produce glucoamy]ase. The recombinant plasmid was introduced into auxotrophic mutant A. nidulans B17. Southern blot analysis of the genomic DNA from transformant showed that pKHG2 DNA had integrated into the A. nidulans chromosomes. Northern analysis of the total RNA from transform ant showed that mRNA of glucoamylase gene was synthesized in induction condition. Specific activity of glucoamylase was increased in transform ants. G]ucoamylase was shown to be active in non-denaturing acrylamide gel.
복싱에어로빅 여성참여자들의 참여동기가 여가만족에 미치는 영향
김진표(Kim, Jin-Pyo),정구홍(Jeong, Gu-Hong),김주영(Kim, Ju-Young) 용인대학교 무도연구소 2011 武道硏究所誌 Vol.22 No.2
이 연구는 복싱에어로빅 여성참여자들의 참여동기가 여가만족에 미치는 영향을 살펴보고 참여동기를 독립변인으로 여가만족에 미치는 영향을 규명하고자 한다. 이에 따른 자료처리는 SPSS 15.0 프로그램을 이용하여 빈도분석, 일원변량분석, 상관분석, 회귀분석을 실시하였다. 이상과 같은 연구방법 및 자료분석 결과를 기초로 하여 이 연구에서 도출된 결과는 다음과 같다. 첫째, 인구통계학적 특성별 참여동기는 모든 요인에서 유의한 차이가 없는 것으로 나타났다. 즉 연령별에서는 내적ㆍ외적동기에서 20세이하가 가장 높게 나타났으며 무동기에서는 21-30세가 가장 높게 나타났고 최종학력별에서 고졸 이하가 모든 요인에서 가장 높게 나타났다. 월수입별에서는 201-300만원이 모든 요인에서 가장 높게 나타났다. 둘째, 인구통계학적 특성별 여가만족은 모든 요인에서 유의한 차이가 없는 것으로 나타났다. 즉 연령별에서는 심리적ㆍ신체적만족에서 31-40세가 가장 높게, 교육적ㆍ사회적ㆍ휴식적ㆍ환경적만족에서는 20세이하에서 가장 높게 나타났다. 최종학력별에서는 심리적ㆍ환경적만족에서 고졸이하가 가장 높게 나타났으며 교육적ㆍ사회적ㆍ휴식적?ㆍ신체적만족에서 대졸이상이 가장 높게 나타났다. 월수입별에서는 심리적ㆍ교육적ㆍ휴식적ㆍ신체적ㆍ환경적만족에서 201-300만원이 가장 높게, 사회적만족에서는 301만원 이상이 가장 높게 나타났다. 셋째, 심리적ㆍ교육적ㆍ사회적ㆍ휴식적만족에서 유의한 영향을 미치는것으로 나타났으며 내적ㆍ외적ㆍ무동기의 순으로 정(+)적 영향을 미치는 것으로 나타났다. 신체적ㆍ환경적만족에서 유의한 영향을 미치고 내적ㆍ외적동기의 순으로 정(+)적 영향을 미치며, 무동기는 부(-)적 영향을 미치는 것으로 나타났다. 이와 같은 연구결과를 종합해 볼 때 참여동기는 여가만족을 높이는데 매우 중요한 변인임을 확인할 수 있다. This study intends to look into an influence on satisfaction with leisure of women"s participation in boxing aerobic and examines an influence on satisfaction with leisure by an independent factor of participation motive. This study performed Frequency Analysis, One Way ANOVA, Correlation Analysis, and Regression Analysis with SPSS 15.0 program to process the materials. First, participation motive, classified with demo-statistic traits, had no significant difference in all of the factors. That is, motives, inner and outer, were highest in younger than 20 years, no motive was the highest in 21-30 years, and lower than graduation from highschool was the highest in all of the participation motive factors. Second, satisfaction with leisure, classified with demo-statistical traits, didn"t have a significant difference in all of the factors. Third, the motive had a significant difference in psychological, educational, sociological, and rest satisfaction, positive(+) influence in order of inner, outer, and no motive. But, no motive had a negative influence. As a result, the participation motive is an important factor in enhancing satisfaction with leisure.