지역 특산 천연산물 전호, 파고지, 희첨 및 산수유의 동물세포간의 부착 억제효과

신진혁(Jin Hyuk Shin),차구용(Gu Yong Cha),김희진(Hui Jin Kim),황재호(Jae Ho Hwang),한경호(Kyeong Ho Han),서효진(Hyo Jin Seo),김민용(Min Yong Kim),오석중(Suk Jung Oh),김종덕(Jong Deog Kim) 한국생물공학회 2009 KSBB Journal Vol.24 No.6

많은 연구를 통해 세포간 부착은 신생혈관형성에 큰 영향을 미치며, 이러한 세포부착억제를 통해 직접적으로 신생혈관형성을 제어할 수 있다. 따라서 본 연구에서는 이러한 신생혈관형성 억제력을 가지는 지역 천연산물을 이용하여 HUVECs 및 U937 cells를 이용한 세포부착 억제정도를 확인하였다. 4가지 천연산물의 세포부착 억제력을 확인하기 위해 세포부착 억제실험을 3가지 방법으로 달리 하여 세포부착 억제정도를 확인한 결과 먼저, IL-1β 및 천연산물이 자극된 HUVECs 에 대한 U937 세포부착 억제실험에서는 전호, 파고지, 희첨 및 산수유의 농도 증가에 따라 전호의 경우 최고 0.2 mg/L에서 276%의 저해율을, 파고지의 경우 5 mg/L에서 220%, 희첨의 경우 10 mg/L에서 158%, 산수유의 경우 20 mg/L에서 132%의 저해효과가 있음을 보였다. 두 번째로 실시한 HUVECs에 대한 PMA 및 천연산물이 자극된 U937 세포부착 억제실험에서는 전호 0.2 mg/L에서 139%, 파고지 5 mg/L에서 442%, 희첨 10 mg/L에서 720%, 산수유 20 mg/L에서 664%의 저해율을 보임을 확인하였다. 마지막으로 실시한 IL-1β 및 천연산물 추출물이 자극된 HUVECs에 대한 천연산물 추출물이 자극된 U937 cells 의 세포부착 억제실험의 경우, 전호 0.2 mg/L에서 286%, 파고지 5 mg/L에서 146%, 희첨 10 mg/L에서 436%, 산수유 20 mg/L에서 297%의 저해율을 보였다. 이상의 3가지 방법으로 실시한 세포부착 억제실험에서 모두 각각의 천연산물 추출물의 농도증가에 따라 현저하게 그 부착력이 억제됨을 확인하였다. 따라서, 본 연구에서 사용된 전호, 파고지, 희첨 및 산수유는 세포부착을 억제함으로서, 신생혈관형성과 관련된 암 및 비만의 근본적인 치료제제로써 사용 가능함을 시사한다. For investigation of anti-angiogenesis mechanism of Anthrisci radix, Psoraleae semen, Siegesbeckiae herba and Corni fructus, anti-cell adhesion experiment was performed. The adhesion of U937 cells to IL-1β-stimulated HUVECs was completely suppressed by 276% at 0.2 mg/L of Anthrisci radix, 220% at 5 mg/L of Psoraleae semen, 158% at 10 mg/L of Siegesbeckiae herba and 132% at 20 mg/L of Corni fructus, respectively. And the adhesion of PMA-chemical stimulated U937 cells to HUVECs, it was inhibited 139% at 0.2 mg/L of Anthrisci radix, 442% at 5 mg/L of Psoraleae semen, 720% at 10 mg/L of Siegesbeckiae herba and 664% at 20 mg/L of Corni fructus. Also, the adhesion of chemical stimulated U937 cells to IL-1β/chemical stimullated HUVECs, it was inhibited by 286% at 0.2 mg/L of Anthrisci radix, 146% at 5 mg/L of Psoraleae semen, 436% at 10 mg/L of Siegesbeckiae herba and 297% at 20 mg/L of Corni fructus, respectively. It would be a useful substance for anti-cell adhesion based on anti-angiogenesis for anti-obesity and anti-cancer.

지역 특산 천연산물 전호, 파고지, 희첨 및 산수유의 항비만효과 규명

신진혁(Jin Hyuk Shin),차구용(Gu Yong Cha),김희진(Hui Jin Kim),황재호(Jae Ho Hwang),한경호(Kyeong Ho Han),서효진(Hyo Jin Seo),신태선(Tai Sun Shin),오석중(Suk Jung Oh),김종덕(Jong Deog Kim) 한국생물공학회 2009 KSBB Journal Vol.24 No.6

본 연구에서는 신생혈관형성 제어에 바탕을 둔 비만세포 제어 정도를 확인하기 위하여 4가지 지역 천연산물인 전호 (Anthrisci radix), 파고지 (Psoraleae semen), 희첨 (Siegesbeckiae herba) 및 산수유 (Corni fructus)를 이용한 지방 축적물 변화 및 기전을 확인하기 위해 3T3-L1 adipocyte를 이용한 Oil Red O 염색 및 western blot을 실시하였다. 그 결과 전호, 파고지, 희첨, 산수유의 세포 독성 이내의 농도 증가에 따라 지방 축적물이 감소됨을 보였다. 또한 western blot을 위해 lipogenesis와 관련된 SREBP-1 및 adipogenesis와 관련된 PPARγ와 C/EBPα의 신호전달 정도를 확인한 결과 4가지 지역 천연산물의 농도 증가에 따라 단백질의 발현양이 감소 됨을 확인하였다. 이는 4가지 지역 천연산물 추출물이 지방 분화와 관련된 신호분자를 차단함으로써 지방형성이 억제 되었음을 보였다. 따라서 4가지 지역 천연산물인 전호, 파고지, 희첨 및 산수유는 신생혈관형성 억제에 따른 항비만제 제로서의 이용 가능함을 시사하였다. 4 kinds of Regional Special Natural Products (RSNPs), such as Anthrisci radix, Psoraleae semen, Siegesbeckiae herba and Corni fructus were examined to verify for anti-obesity effect. PPARγ (peroxisome proliferator-activated receptor γ) from 3T3-L1 cell concerning adipocyte differentiation was suppressed by different concentraton of 4 RSNPs with western blot, when treated RSNPs" extract and MDI (IBMX, Dexamethasone, Insulin) at the same time. Also, SREBP-1 (Sterol regulatory element binding protein) controlling lipogenesis and PPARγ expression levels were reduced by these 4 RSNPs" extract, when these chemicals after differentiation of 3T3-L1 cell. And lipid droplets were reduced by 7.5%, 14.4%, 18.3% and 30% at different concentration of Anthrisci radix from Oil Red O staining. Also, it was reduced by 2%, 4.9%, 9.3% and 38% at different concentration of Psoraleae semen. For Siegesbeckiae herba, it was inhibited by 1.4%, 6.4%, 16.4% and 30.1%, respectively. And Corni fructus was also showed by 0.9%, 6.3%, 13.7% and 33% at same concentration of Siegesbeckiae herba. These 4 kinds of RSNPs were expected for a useful material for anti-obesity materials.

신생혈관형성억제작용을 기반으로 한 항비만제제의 선별 및 작용기전

신진혁(Jin Hyuk SHIN),이진희(Jin Hee LEE),강경완(Kyeong Wan KANG),황재호(Jae Ho Hwang),한경호(Kyeong Ho HAN),신태선(Tai Sun SHIN),김민용(Min Yong KIM),김종덕(Jong Deog KIM) 한국생물공학회 2009 KSBB Journal Vol.24 No.2

선별한 신생혈관형성억제제는 EGCG보다도 제어 효과가 나은 천연산물들 중에서 전호, 파고지, 희첨 및 산수유를 중심으로 그 기전을 밝히고자 하였다 . 세포독성은 전호는 0.3 ppm에서 약간의 독성을 나타 내었고, 파고지는 10 ppm까지는 독성을 나타내지 않았으며, 희첨 및 산수유는 25 ppm까지 독성을 나타내지 않았다. 세포부착억제작용은 신생혈관의 형성에 중요한 역할을 하기 때문에 cell adhesion 분자인 VCAM-1, ICAM-1 및 E-selectin들에 대하여 세포부착억제 작용의 정도를 ELISA법으로 살펴보았다. VCAM-1에 대한 천연산물의 작용은 전호 (0.2 ppm, 125%)>파고지 (0.5 ppm, 100%)> 희첨 (5.0 ppm, 114%)> 산수유 (5.0 ppm, 111.8%)의 순으로 저해의 강도가 높으며, ICAM-1은 전호 (0.25 ppm, 130%)>파고지 (0.5 ppm, 100%)>희첨 (5.0 ppm, 138%)> 산수유 (5.0 ppm, 66.7%)의 순으로 저해되는 것으로 나타났고, 그리고 E-Selectin은 전호 (0.25 ppm, 100%)> 파고지 (1.0 ppm, 128%)>희첨 (5.0 ppm, 120%)>산수유 (5.0 ppm, 100.7%)의 순으로 저해되는 것으로 나타났다. Western blot으로부터, 전호 추출물은 VE-cadherin과 β-catenin의 신호전달을 억제하였으며, 그 하위 신호 전달분자인 Akt도 억제하는 것으로 나타났고, 파고지는 β-catenin의 신호는 억제하지 않는 것으로 보이나, 그 하위그룹의 Akt의 신호전달을 억제하는 것으로 나타났다. 그리고, 희첨은 VE-Cadherin과 하위 그룹의 Akt를 농도의 증가에 따라 확실한 제어를 보이고 있음을 알 수 있었고, 산수유는 하위그룹의 Akt의 신호전달을 억제하는 것으로 나타났다. 4종류의 선택된 천연산물은 세포표면의 신호전달분자 그리고 그 하위 그룹의 Akt를 억제함으로써 NF-kB의 활성을 차단함으로써 신생혈관의 성을 억제하는 것으로 판단된다. 따라서 4종류의 천연산물 전호, 파고지, 희첨 및 산수유는 전반적으로 낮은 농도에서 세포부착인자의 발현을 억제하였고, 신호전달 분자들을 억제함으로써 신생혈관 형성 억제에 따른 항비만제제로서 충분한 가능성을 보였다. Anti-angiogenic mechanism was examined for anti-obesity agents with the extract of P.radix, P.semen, S.hebra and C.furctus through anti-cell adhesion effect and western blot. Cell adhesion molecules, VCAM-1 was supressed with the order of P.radix (0.2 ppm, 125%) > P.semen (0.5 ppm, 100%) > S.hebra (5.0 ppm, 114%) > C. furctus (5.0 ppm, 111.8%), ICAM-1 was inhibited by P.radix (0.25 ppm, 130%) > P.semen (0.5 ppm, 100%) > S.hebra (5.0 ppm, 138%) > C. furctus (5.0 ppm, 66.7%), E-Selectin was also supressed P.radix (0.25 ppm, 100%) > P.semen (1.0 ppm, 128%) > S.hebra (5.0 ppm, 120%) > C. furctus (5.0 ppm, 100.7%). And signal molecules, VE-cadherin was supressed by P.radix and S.hebra, β-catenin was inhibited by P.radix, and Akt was supressed all these 4 kinds of natural products. These P.radix, P.semen, S.hebra and C.furctus were showed the possibility of anti-obesity agents based on anti-angiogenesis.

In vivo and In vitro Antimicrobial Effects of Natural Antibiotics Present in Crude Extracts of Various Medicinal Plants

이문건,무하마드 임란 칸,서효진,신진혁,김민용,김종덕,Lee, Moon Geon,Khan, Muhammad Imran,Seo, Hyo Jin,Shin, Jin Hyuk,Kim, Min Yong,Kim, Jong Deog The Korean Society for Biotechnology and Bioengine 2017 KSBB Journal Vol.17 No.2

Bacteria are among the most common causes of severe diseases in both plants and animals. Salmonella spp. has deleterious effects and is the cause of various transmittable diseases. Because of strains resistivity, side effects and high prices of synthetic antibiotics, it has become essential to explore safe and economical natural sources of antibiotics. In this study, growth inhibitory effects of natural antibiotics present in crude extracts of Galla rhois, Thujae semen, Paeonia japonica, and Armeniacae semen were investigated both in vivo and iv vitro. Ethanol extracts of the above-mentioned plants were prepared and tested against seven serovars of Salmonella and Escherichia coli by disc diffusion method. In addition, the antibacterial effects of the plant extracts were determined in vivo using ducks as model animals. Reverse transcription-polymerase chain reaction was performed using blood and fecal samples of control, infected, and treated groups of the ducks to determine the gene expression levels of the bacteria. Our results confirmed that the Galla rhois ethanol extract had the highest antibacterial activity among the plant extracts when they were used individually. However, the Galla rhois, Thujae semen, and P. japonica ethanol extracts showed stronger antibacterial effects against all the bacterial species used when the extracts were combined at a ratio of 3:3:2, respectively.

Anti-cell Adhesion Effect of PLM-f74 with U937 Cell from Hallophilic Enterobacteria and Identification of Strain

Joong-Kwon LIM(임종권),Hyo-Jin SEO(서효진),Jin-Hyuk SHIN(신진혁),Se-Young LEE(이세영),Mln-Yong KIM(김민용),Jong-Deog Kim(김종덕) 한국생물공학회 2005 한국생물공학회 학술대회 Vol.2005 No.10

In vivo and In vitro Antimicrobial Effects of Natural Antibiotics Present in Crude Extracts of Various Medicinal Plants

Moon Geon Lee(이문건),Muhammad Imran Khan(무하마드 임란 칸),Hyo Jin Seo(서효진),Jin Hyuk Shin(신진혁),Min Yong Kim(김민용 ),Jong Deog Kim(김종덕) 한국생물공학회 2017 KSBB Journal Vol.32 No.1

Bacteria are among the most common causes of severe diseases in both plants and animals. Salmonella spp. has deleterious effects and is the cause of various transmittable diseases. Because of strains resistivity, side effects and high prices of synthetic antibiotics, it has become essential to explore safe and economical natural sources of antibiotics. In this study, growth inhibitory effects of natural antibiotics present in crude extracts of Galla rhois, Thujae semen, Paeonia japonica, and Armeniacae semen were investigated both in vivo and iv vitro. Ethanol extracts of the above-mentioned plants were prepared and tested against seven serovars of Salmonella and Escherichia coli by disc diffusion method. In addition, the antibacterial effects of the plant extracts were determined in vivo using ducks as model animals. Reverse transcription-polymerase chain reaction was performed using blood and fecal samples of control, infected, and treated groups of the ducks to determine the gene expression levels of the bacteria. Our results confirmed that the Galla rhois ethanol extract had the highest antibacterial activity among the plant extracts when they were used individually. However, the Galla rhois, Thujae semen, and P. japonica ethanol extracts showed stronger antibacterial effects against all the bacterial species used when the extracts were combined at a ratio of 3:3:2, respectively.

Nattokinase fibrinol의 섭취가 혈전 용해능 및 동맥경화에 미치는 영향

노경희(Kyung-Hee Noh),박충무(Chong-Mu Park),장지현(Ji-Hyun Jang),신진혁(Jin-Hyuk Shin),조미경(Mi-Kyung Cho),김정옥(Jeong Ok Kim),송영선(Young-Sun Song) 한국생명과학회 2009 생명과학회지 Vol.19 No.2

본 연구는 성인 흡연자를 대상으로 NKF 정제를 단기(4,000 U를 1회 투여)와 장기(2,000 U를 매일 1회 4주 투여) 실험을 통하여 NKF의 혈전용해 개선 및 항 동맥경화효과를 검증하였다. 임상대상자는 20세~31세의 건강한 성인으로 하루 흡연량이 하루 1갑 이상인 고혈압 또는 항 혈전증 약을 섭취하지 않는 사람을 선정하여 무작위로 placebo군과 NKF군으로 분류하여 이중맹검법으로 실험을 하였다. NKF와 placebo 정제는 (주)HK바이오텍에서 제공하였다. 단기시험은 placebo군(10명)과 NKF군(29명)을 대상으로 NKF 섭취전과 섭취 1, 2, 4시간에 혈전용해효과를 검토하였고, 장기시험은 placebo군 10명과 NKF군 15명에게 NKF 섭취 전과 섭취 후 매주 혈전용해효과 및 혈압개서효과를 검토하였다. 단기시험에서 fibrin clot 용해능은 placebo군에 비해 NKF군에서는 섭취 후 2시간에 유의적으로 증가하여 4시까지 그 활성이 유지되었다. ECLT도 NKF 섭취 후 시간이 경과함에 따라 placebo군에 비해 현저하게 감소되었으며 aPTT는 섭취후 4시에 섭취 전에 비해 12.5% 지연시키는 것으로 나타났다. 장기시험에서는 수축기와 이완기 혈압이 placebo군에서는 섭취 4주에 섭취 전에 비해 2.8%와 3.5%로 증가하였고 NKF군에서는 각각 1.3%와 1.0% 감소하여 두 군 모두에서 유의차는 없었다. Fibrin clot 용해능은 NKF군에서 1주에 증가하여 4주에도 높은 수준으로 유지되었고, ECLT는 NKF군은 섭취 전에 비해 1주에 현저하게 감소되어 4주 후까지 유사한 수준으로 유지하여 NKF의 효과를 볼 수 있었지만, placebo군에서는 효과가 없었다. 따라서 NKF는 PT와 aPTT를 개선하여 전 처리 기간 placebo군에 비해 혈액응고시간을 유의적으로 지연시켰다. 또한 NKF 섭취는 TG/HDL-cholesterol을 감소시켜 항 동맥경화 지수를 상승시키는 효과가 있었다. 이상의 결과로 미루어 볼 때 단기와 장기 임상시험에서 NKF는 fibrin clot 용해능을 증가시키고 ECLT를 감소시키며 PT와 aPTT를 지연시켜 혈전 용해능을 상승시키며, TG/HDL-cholesterol을 낮추어 혈중 지질수준을 개선하고 동맥경화를 예방하는데 유익하게 작용할 것으로 사료된다. Effects of Nattokinase fibrinol (NKF), defined as a fibrinolytic product, on fibrinolytic and atherogenetic markers were studied for healthy adults (20-31 years old), who is smoking more than 20 cigarettes per day. Subjects were divided into 29 for NKF group and 10 for placebo group in a short term study. They were given 2 tablets of NKF (4,000 unit) or placebo tablet and thereafter blood samples were collected at 0, 2, 4 hr prerid. For a 4-week long term study, 15 subjects for NFK group and 10 subjects for placebo group were supplemented one tablet of each NKF (2,000 unit) and placebo per day, respectively. Blood samples were collected at 0, 1, 2, 4 weeks later. The short-term experimental trial showed that NKF remarkably increased fibrinolytic activity at 2hr after consumption, which was maintained up to 4 hr, relative to that of placebo, while NKF reduced the euglobulin clot lysis time (ECLT) and retarded the activated partial thromboplastin time (aPTT), as compared to placebo group. NKF supplementation for 4 weeks elevated fibrinolytic activity, shortened ECLT and retarded aPTT. Furthermore, NKF supplementation increased anti-atherogenic index by decreasing triglyceride (TG) and elevating high-density lipiprotein (HDL)-cholesterol. These results indicate that NKF supplementation for short term or long term might have beneficial effects on preventing and treating cardiovascular disease by increasing fibrinolytic activity and improving atherogenic markers such as hyperlipidemia.

Trans 지방을 첨가한 찹쌀보리빵의 섭취가 건강한 성인의 혈장 지질수준과 지방산 조성에 미치는 영향

노경희(Kyung-Hee Noh),이영은(Young Huh),장지현(Ji-Hyun Jang),신진혁(Jin Hyuk Shin),이미옥(Mi-Ock Lee),이경식(Kyung-Sik Lee),이승환(Seong-Hwan Lee),김도훈(Do-Hoon Kim),박용규(Yong-Kyu Park),조경환(Kyung-Hwan Cho),송영선(Young-Sun Song 한국식품영양과학회 2009 한국식품영양과학회지 Vol.38 No.10

본 연구는 서울지역에 거주하는 건강한 성인 남녀(남자 29명, 여자 10명) 39명을 대상으로 trans 지방산 3.75 g을 각각 첨가한 찹쌀보리빵과 밀빵의 섭취가 혈중 지방산 조성과 지질 수준에 미치는 효과를 확인하기 위하여 실시하였다. 시험군은 밀빵 군(19명)과 찹쌀보리빵 군(20명)의 2군으로 분류하였으며 장기(6주) 임상시험으로 시행하였다. 밀빵 군은 밀가루 80 g에 trans 지방산 3.75 g을 첨가한 밀빵을, 찹쌀 보리빵 군은 β-glucan 5%를 함유한 찹쌀보리가루 40 g과 밀가루 40 g에 trans 지방산 3.75 g 첨가하여 찹쌀보리빵을 조제하여 제공하였다. 찹쌀보리빵을 섭취한 군에서는 섭취기간이 증가할수록 C18:3c,n-9 지방산을 제외한 지방산들의 농도가 낮아졌으며 특히 섭취 6주경과 후에서는 C16:0, C18:1t, C18:1c, C18:2t와 C18:2c의 농도는 밀빵을 섭취한 군에 비해 유의적으로 낮은 수준을 보였다. 밀빵을 섭취한 군에서 섭취기간이 증가할수록 C18:1t, C18:2c, C18:2t의 농도는 증가하는 것으로 나타난 반면 C18:0, C18:1c, C18:3c,n-9과 C18:3c,n-3의 농도는 감소하였고 C16:0와 C18:2c의 농도는 증가 후 일정수준을 유지하여 6주경과 후에서는 섭취 전보다 현저하게 높은 수준을 보였다. P/M/S 비를 보면 섭취 4주까지 두 군 모두에서 다가불포화지방산의 비가 증가한 반면 섭취 6주경과 후에서는 다소 감소하는 경향을 보였으며, 단일불포화지방산의 비는 찹쌀보리빵 군에서는 감소하는 추세이나 밀빵 군에서는 증가하는 경향을 보였다. 또한 혈중 trans 지방산을 비롯한 포화지방산 농도가 낮은 수준이었으며 또한 찹쌀보리빵의 섭취는 밀빵의 섭취에 비해 총 콜레스테롤 농도와 TG/HDL-C의 비를 감소시켰다. 이러한 결과는 찹쌀보리에 함유된 β-glucan이 trans 지방의 체내 흡수율을 저하시키거나 흡수속도를 느리게 하기 때문으로 사료된다. 따라서 이상의 결과에서 가공식품으로부터 공급되는 trans 지방의 체내 농도를 저하시키고 혈장 총 콜레스테롤 농도를 개선시키기 위해서는 밀가루 보다는 찹쌀보리를 활용한 형태로 섭취하는 것이 바람직하다고 하겠다. This study investigated the effect of waxy barley on the incorporation trans fat (tFA) into plasma lipid and lipid profile through 6 weeks trial. 39 healthy volunteers were divided into 2 groups and fed waxy barley bread (WBG) or wheat bread (WG) containing equivalent amounts of tFA (elaidic acid rich, 3.75 g/day), respectively. Plasma lipid profiles and fatty acid composition at 0, 2, 4, 6 weeks after a respective bread were studied. Plasma lipid was extracted by the method of Folch, esterified by acid transmethylation and analyzed by gas chromatography. The fatty acid composition reflected the fatty acid proportion of the test fat. However, consumption of waxy barley bread with tFA for 6 weeks affected plasma fatty acid composition including tFA. Incorporation of tFA into plasma lipid was significantly lowered compared to WBG than in WG after 6 weeks of consumption. Furthermore, saturated fatty acids such as C16:0 and C18:0 levels were also significantly lowered in WBG than in WG. Furthermore, plasma total cholesterol level and TG/HDL-cholesterol ratio were also significantly lowered in WBG compared to WG at 2, 4 and 6 weeks. These results suggest that waxy barley bread with high β-glucan lowered plasma trans, saturated fatty acid and total cholesterol levels though the inhibition of lipid absorption.

건강한 남자 대학생에서 민들레즙 보충이 알코올에 의한 산화적 스트레스 및 숙취에 미치는 효과

노경희(Kyung-Hee Noh),장지현(Ji-Hyun Jang),김진주(Jin-Ju Kim),신진혁(Jin-Hyuk Shin),김동규(Dong-Kyoo Kim),송영선(Young-Sun Song) 한국식품영양과학회 2009 한국식품영양과학회지 Vol.38 No.6

본 연구에서는 건강한 성인 남자를 대상으로 민들레즙이 알코올 섭취 후 산화적 스트레스 및 숙취에 미치는 효과를 확인하여 알코올 섭취로 인한 간 기능 보호와 숙취해소 효과를 가진 소재 개발을 위한 기초자료를 제공하고자 실시하였다. 대상자는 평균 주량이 소주 1병 이상으로 술을 즐겨 마시는 건강한 20대 식품전공 남자 대학생 9명을 선정하여 개인차를 없애기 위해 실험 시작 전 1주일 간 금주를 시켰으며 시험에 앞서 임상대상자들에게 본 연구에 대해 충분히 숙지시킨 후 안정된 분위기에서 시험을 cross over design으로 진행하였다. 대상자들에게 매일 민들레즙 220 mL씩 1주일간 보충시킨 후 각각 20% 에탄올을 함유한 소주 360 mL씩(에탄올 함량 72 g)을 섭취시켰다. 술은 자유로운 분위기에서 1시간 내에 다 마시게 하였으며 두 번의 실험 사이에는 2주간의 wash-out period를 가졌다. 민들레즙을 보충한 군에서 알코올 섭취 후 혈중 HDL-C 농도가 유의적으로 (p<0.01) 증가하였으며 LDL-C 농도는 현저하게 감소하였고 ADH와 ALDH 활성을 향상시켜 에탄올과 아세트알데히드 농도를 다소 저하시키는 것으로 나타났다. 총 항산화능과 지질과산화 정도는 민들레즙 보충에 따른 군 간의 유의적인 차이를 보이지 않았으나 민들레즙을 보충한 군에서는 알코올 섭취 후 다소 지질과산화가 감소되는 경향을 보였다. 적혈구의 항산화 효소계 활성은 GSH-red와 catalase 활성이 민들레즙을 보충한 군에서 유의적으로(p<0.05) 증가되는 것을 알 수 있었으며 알코올 섭취로 인한 임파구의 DNA 손상정도는 민들레즙의 보충에 따른 유의적인 차이는 보이지 않았지만 민들레즙을 보충한 군에서 알코올에 의한 임파구 DNA 손상을 다소 억제시키는 경향이 있는 것으로 나타났다. 음주 동안과 술 마신 다음날에 나타나는 숙취증상에 대한 설문조사에서는 각 문항에서 민들레즙 보충에 따른 유의적인 차이는 보이지 않았다. 이상의 결과들로 미루어 볼 때 민들레즙 보충이 알코올 섭취 후 HDL-C 농도를 증가시켰고 ALDH 활성을 향상시켜 혈중 아세트알데히드 농도를 감소시키며 GSH-red와 catalase 활성을 증가시켜 체내에서 알코올에 의한 산화과정이나 지질과산화 생성을 다소 억제하는 것으로 보인다. 이러한 결과는 민들레에 포함되어 있는 유효 물질이 숙취해소와 간 기능 보호 및 항산화 효과를 나타내는 것으로 사료되며, 따라서 민들레즙이 알코올에 의한 간 기능 보호, 숙취해소 및 항산화 효과를 가진 기능성 물질로서의 가능성을 보여준다고 할 수 있겠다. This study was designed to investigate the effect of dandelion juice supplementation on attenuation of oxidative stress and hangover after drinking alcohol in healthy college male students. This human trial was conducted by two phase cross over design with two weeks wash out period. The subjects (age 24~28 years) were volunteers who had more than 72 g of ethanol drinking capacity. Dandelion group was given dandelion juice 220 mL daily for 7 days. Biochemical markers were determined in blood samples taken at 0 and 150 minutes after administration 72 g of alcohol. The levels of plasma glutamic oxaloacetic transaminase, glutamic pyruvic transaminase, lactate dehydrogenase and bilirubin, the indicators of liver cell damage, were not significantly different between groups. No significant differences in lymphocyte DNA damage level between groups was observed. However, plasma acetaldehyde dehydrogenase (ALDH) and high density lipoprotein cholesterol levels were significantly (p<0.01) increased in dandelion supplemented group compared to that of control group. Furthermore, activities and protein expressions of glutathione-reductase and catalase of erythrocytes were significantly elevated in dandelion supplemented group compared to that of control group. From the above results, it is concluded that dandelion juice supplementation can reduce oxidative stress and hangover syndrome through the elevation of ALDH and antioxidative enzyme system in healthy male adults.

BALB/C Mice에서 노루궁뎅이버섯 균사체 보충이 LPS로 인한 산화적 스트레스와 염증 반응에 미치는 효과 및 기전

장지현(Ji-Hyun Jang),노경희(Kyung-Hee Noh),최지나(Ji-Na Choi),진경숙(Kyong-Suk Jin),신진혁(Jin-Hyuk Shin),온준호(Joon-Ho On),조정원(Chung-Won Cho),정우식(Woo-Sik Jeong),김묘정(Myo-Jeong Kim),송영선(Young-Sun Song) 한국식품영양과학회 2010 한국식품영양과학회지 Vol.39 No.2

본 연구는 in vivo에서의 6주령의 BALB/C 생쥐(평균체중 24.73±0.11 g)에게 1주일 간 노루궁뎅이버섯 균사체 (Hericium erinaceus mycelia)를 첨가한 식이를 급여한 후 내독소인 LPS로 인한 산화적 스트레스 및 염증반응에 미치는 영향을 조사하고자 하였다. 실험군은 5군으로 분류하였으며 정상 대조군(NC)과 양성 대조군(LC)은 chow를, HMP 10%군과 HMP 3%군은 chow에 노루궁뎅이버섯 균사체를 각각 3%와 10%를 첨가하였으며 HMP 대조군(HMP-C)은 chow에 노루궁뎅이버섯 균사체를 10% 첨가하여 pellet 형태로 조제하여 1주일 간 각각의 실험 식이를 급여하였다. LC군과 HMP 3% 및 HMP 10%군은 각각 LPS(100 ㎎/㎏ BW)를 투여하였으며 NC군과 HMP-C군은 생리식염수를 LPS와 동일한 농도로 투여하였다. 실험동물의 식이효율은 노루궁뎅이버섯 균사체를 보충한 군에서 저하되었으며 노루궁뎅이버섯 균사체의 보충군에서 체중감소 효과를 보였다. 노루궁뎅이버섯 균사체 10%를 보충한 HMP-C군과 HMP 10%군은 분변의 배설량이 가장 많았고 분변 중 총 지방 양은 노루궁뎅이버섯 균사체를 섭취한 군에서 높은 수준을 보였으나 섭취량에 따른 현저한 차이는 보이지 않았고, 혈장 TG 함량은 군 간에 유의적인 차이는 보이지 않았으나 노루궁뎅이버섯 균사체 10%를 첨가한 식이를 섭취한 군에서 다소 높은 경향을 보였다. 분변 100 g 당 β-glucan의 함량은 노루궁뎅이버섯 균사체 3%를 보충한 군에서 가장 높았다. 혈장의 ALT 수준은 LPS를 투여한 후 8시간 경과 후에는 LC군에서 현저하게 증가한 반면 노루궁뎅이버섯 균사체를 첨가한 식이를 급여한 HMP 3%와 HMP 10%군에서는 유의적으로(p<0.05) 저하되어 NC군과 비슷한 수준을 보였다. 간에서의 SOD, GSH-red, GSH-px 활성은 LPS 투여 후 LC군에 비해 노루궁뎅이버섯 균사체를 섭취한 군에서 증가하였으며 GSH-red의 단백질 발현과 GSH 함량 또한 높아지는 것으로 나타났다. 이상의 결과로 미루어 볼 때 노루궁뎅이버섯 균사체의 보충은 내독소인 LPS로 유도된 산화적 스트레스에 저항하여 간 기능을 보호하는 효과가 있는 것으로 보이며 그 기전으로는 항산화 효소계 활성과 GSH-red 단백질 발현 증가, 그리고 GSH 수준 향상 등을 열거할 수 있다. This study was carried out to investigate the anti-oxidative and anti-inflammatory actions of Hericium erinaceus mycelia in BALB/C mice injected with lopopolysaccharide (LPS), called endotoxin. Mice (6 weeks of age) weighing approximately 24.73±0.11 g were divided into 5 groups and were fed on the experimental diets containing Hericium erinaceus mycelia powder (HMP) for 1 week. Experimental groups were NC (normal control), HMP-C (HMP control), LC (LPS control), HMP 3%, and HMP 10%. Endotoxin shock was induced by intraperitoneal injection of LPS (100 ㎎/㎏ BW). NC and HMP-C groups were injected with saline solution (100 ㎎/㎏ BW). Food efficiency ratio were significantly (p<0.05) decreased in the HMP supplementation groups. Total fat and β-glucan excretion were higher in HMP supplementation groups than NC and LC groups, while plasma TG level was not different among groups. Plasma ALT levels were significantly (p<0.05) lower in the HMP supplementation groups than in LC group at 8 hr after LPS injection, while tumor necrosis factor-α and interleukine-6 levels of plasma were not different among groups. Hepatic superoxide dismutase, glutathione-reductase (GSH-red), and glutathione-peroxidase activities were higher in the HMP supplementation groups than in LC group at 4 hr after intraperitoneal injection of LPS. Hepatic GSH levels and protein expression of GSH-red was significantly (p<0.05) higher in the HMP supplemented groups than in LC group at 1 hr, 4 hr and 8 hr after LPS injection. From the above results, it is concluded that Hericium erinaceus mycelia may ameliorate hepatic oxidative stress by LPS through the elevation of hepatic glutathione level and antioxidant enzyme activities, which support the hepatoprotective effect of Hericium erinaceus mycelia.