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Potato virus Y (PVY) detection in a single aphid by one‐step RT‐PCR with boiling technique
김주일,차덕재,권민,Rameswor MAHARJAN 한국곤충학회 2016 Entomological Research Vol.46 No.4
Potato virus Y (PVY) (Potyviridae: potyvirus) is a serious emerging virus affecting seed potato worldwide. It affects the seed potato by transmitting non‐persistently via aphids. Sometimes this virus induces symptomless infection and is hard to detect in potato. So, it requires a specific and quick diagnosis for efficient examination. Recently, a reverse‐transcription polymerase chain reaction (RT‐PCR)‐based PVY detection method has been developed from plant as well as insect vectors. However, it is a complex and time consuming method. Here, we developed a simple PVY detection method that uses boiling for releasing the viral RNA from aphid stylets, and amplification by PVY‐specific primers located in the viral coat protein gene. The method is suitable for various strains. This simplified method could save time compared to earlier detection methods because of the simplified RNA extraction step. Following this procedure, we tested this one‐step RT‐PCR‐based PVY detection method by using three PVY vectoring aphid species (Myzus persicae, Aphis gossypii and Macrosiphum euphorbiae) as well as other sucking insects such as thrips, Frankliniella occidentalis. The reliability of a newly developed primer set was suitable for RT‐PCR and procedures were successfully demonstrated for virus detection. This PVY detection method is rapid, easy to use and suitable for large‐scale testing in laboratories of seed potato, and could potentially be applied to virus‐free seed potato production.
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기후변화에 따른 솔껍질깍지벌레의 생리, 생태 변화에 대한 연구
김동수,차덕재 한국응용곤충학회 2017 한국응용곤충학회 학술대회논문집 Vol.2017 No.10
솔껍질깍지벌레 (Matsucoccus thunbergianae) 는 주로 우리나라 해안지방의 곰솔 (Pinus thunbergii) 을 가해하는협식성 곤충류이다. 과거 본 대상 종에 대한 생태연구는 주로 70, 80년대에 수행되었다. 하지만, 전 지구적인 기후변화의추세와 마찬가지로, 과거 솔껍질깍지벌레 성충 우화시기에 대한 생태연구가 진행된 우리나라 전남 및 경남 지역의2 ~ 3월 평균기온이 1.5 ℃ 상승함에 따라, 성충 우화시기 변화 및 생리, 생태학적 변화가 있을 것으로 추정된다.따라서, 본 연구는 2016년 3월부터 5월까지 수컷 유인 페로몬 트랩을 이용하여, 수컷의 우화시기 및 크기를 조사하였으며, 동년 7월부터 10월까지 시기별 정착약충을 채집하여 크기 변화를 조사하였다. 본 연구 결과, 수컷 성충의 우화는3월 초에 시작되어, 우화 최성기는 3월 중순이었다. 이는 과거 80년대 후반에 비해 우화 최성기가 약 13 ~ 15일앞당겨진 것으로 확인되었다. 수컷 성충 크기 변화는 없었지만, 정착약충은 정착약충 초기에 비하여 0.11 ± 0.008mm의 장축 성장이 이루어짐을 확인하였다.
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