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- 저자 : 전혁(Hyug Chun) (검색결과 4 건)
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감잎(Diospyos kaki L.)으로부터 정제한 보체계 활성화 다당류
정영주,전혁,김경임,안정희,신동훈,홍범식,조홍연,양한철,Jung, Yung-Joo,Chun, Hyug,Kim, Kyung-Im,An, Jeung-Hee,Shin, Dong-Hoon,Hong, Bum-Shik,Cho, Hong-Yon,Yang, Han-Chul 한국식품과학회 2002 한국식품과학회지 Vol.34 No.5
감잎으로부터 항보체 활성물질을 분리정제하기 위해 감잎 (250 g)을 $100^{\circ}C$에서 3시간 동안 열수 추출하고 분자량 10 kDa membrane을 사용하여 농축한 후 ethanol 침전과 methanol 추출을 통해 조다당류(DKC)를 얻었다. 조다당류의 정제는 DEAE-Toyopearl 650C와 Bio-gel P60을 사용하여 실시하였다. 정제된 DKC-1c는 $1000\;{\mu}g/mL$의 농도에서 고전경로를 통해서는 85.4% 활성화시켰고 부경로에서는 65.1% 활성화시켰다. 정제 다당류 DKC-1c는 분자량은 66.6 kDa이고 정제도가 높은 중성다당류로써 주요 구성당은 glucose(29.0 mol.%), arabinose(24.3 mol.%), galactose(16.2 mol.%) 순으로 검출되었다. 면역전기영동을 통하여 확인한 결과 DKC-1c는 C3를 부경로에서도 C3a와 C3b로 활성화시키는 complement activator임이 확인되었다. Cold and hot water fractions of Diospyros kaki were screened to determine its anti-complementary activity. Flour of Diospyros kaki leaf (250 g) was boiled at $100^{\circ}C$ for 3 h and passed through a membrane of 10 kDa molecular weight (DK-0). DK-0 was precipitated with ethanol and refluxed with methanol to obtain the crude polysaccharide (DKC). DKC-1 was isolated by ion exchange chromatography on DEAE-Toyopearl 650C, and DKC-1c was purified from DKC-1 by size exclusion chromatography on Bio gel P-60. The anti-complementary activities of DKC-1c at $1000\;{\mu}g/mL$ were 85.4 and 61.1% via whole and alternative pathways, respectively. DKC-1c was determined as a neutral polysaccharide composed of glucose (29.0 mol.%), arabinose (24.3 mol.%), and galactose (16.2 mol.%) with the molecular weight of 66.6 kDa. Results of agarose gel immunoelectrophoresis revealed DKC-1c, as a complement activator, cleaved C3 into C3a and C3b via both pathways.
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아가위(Crataegus pinnatifida Bunge)로 부터 HS 68세포의 MMP-1에 대한 저해활성 물질의 분리
이세영,전혁,조홍연,안정희,Lee, Se-Young,Chun, Hyug,Cho, Hong-Yun,An, Jeung-Hee 한국응용생명화학회 2003 한국농화학회지 Vol.46 No.1
피부노화는 크게 생리적 노화(chmnological aging)와 광노화(photoaging)로 나누어 진다. 진피세포와 표피세포에서 광노화는 MMP(Matrix metalloproteinase)의 분비량이 증가하면서 MMP와 TIMP(Tissue inhibitors of metalloproteinase)의 균형을 깨뜨려 진피층을 붕괴가 유도된다. 본 연구는 광노화 및 암 전이 과정, 관절염 등 여러 질병에서 주목받고 있는 MMP-1의 생성 억제활성물질을 120여종의 식용식물(edible plants)로부터 활성물질을 분리, 정제하고 정제물질의 일부 물리화학적 성질을 규명하였다. 표피세포(HaCaT)와 진피세포(HS68) 세포주를 이용하여 다양한 강도의 UVB를 조사하여 생성되는 MMP-1의 양과 감수성을 검토한 결과 HS68에서 UVB의 조사량에 비례하여 MMP 분비량이 증가되는 반면, HaCaT세포의 MMP 분비량은 유의적 차이를 보이지 않았다. MMP-1 생성량이 가장 높은 UVB 조사량은 35 $mJ/cm^2$ 내외이었고, UVB조사 후 분비되는 MMP-1의 양은 36-48시간대에 가장 높게 나타났다. MMP-1의 생성 억제활성을 검색한 결과 아가위(Crataegus pinnatifida Bunge)의 냉수분획층(CP)에서 최대활성을 나타내었다. CP를 periodate 산화 처리에서는 변화가 없으나 pronase 처리시 활성이 감소되는것으로 단백질이 활성의 본체임을 확인하였다. 정제는 CP의 ultrafiltration처리, DEAE-Tayopearl 650c, Butyl-Tayopearl 650M의 이온교환크로마토그래프와 Bio-Gel P-30겔 여과 크로마토그래프 통해서 MMP-1 억제 활성 분획층 CP-2Va-2를 정제하였다. CP-2Va-2의 MMP-1억제활성은 88.5%이었으며, 분자량은 HPLC로 확인한 결과 19kDa, SDS-PAGE에서는 20 kDa 확인됨으로써 monomer구조임을 알 수 있었다. MMP-1 inhibitory compounds were isolated from 120 Korean traditional edible plants. UP- 1 activity significantly increased linearly with increasing UVB dose in normal human foreskin fibroblast HS68 cell, showing maximum activity at approximately 35 $mJ/cm^2$, whereas in HaCaT cell, normal human keratinocyte, no increase was observed. Maximum secretion of MMP-1 after UVB treatment occurred around 36-48 k after treatment. MMP-1 inhibitory compound isolated from cold-water fraction of Cataegus pinnatifida Bunge showed the mort potent activity. The MMP-1 inhibitory compound was deduced as a peptide based on the fact that pronase digestion decreased the activity whereas periodate oxidation did not. The most potent UP- 1-inhibitory protein, CP-2Va-2, showing an activity of 88.5% against MMP-1, was isolated through sequential column chromatography on DEAE-Toyopearl 650C, Butyl-Toyopearl 650M, and Bio-Gel P-30. Molecular weight of CP-2Va-2 determined through high performance liquid chromatography and SDS PACE was 19 and 20 kDa. respectively, signifying a monomeric structure.
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아가위(Crataegus pinnatifida Bunge)로부터 HS 68세포의 MMP-1에 대한 저해활성 물질의 분리
이세영 ( Se Young Lee ),안정희 ( Jeung Hee An ),전혁 ( Hyug Chun ),조홍연 ( Hong Yun Cho ) 한국응용생명화학회 2003 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.46 No.1
MMP-1 inhibitory compounds were isolated from 120 Korean traditional edible plants. MMP-1 activity significantly increased linearly with increasing UVB dose in normal human foreskin fibroblast HS68 cell, showing maximum activity at approximately 35 mJ/cm^2, whereas in HaCaT cell, normal human keratinocyte, no increase was observed. Maximum secretion of MMP-1 after UVB treatment occurred around 36-48 hr after treatment. MMP-1 inhibitory compound isolated from cold-water fraction of Crataegus pinnatifida Bunge showed the most potent activity. The MMP-1 inhibitory compound was deduced as a peptide based on the fact that pronase digestion decreased the activity whereas periodate oxidation did not. The most potent MMP-1-inhibitory protein, CP-2Va-2, showing an activity of 88.5% against MMP-1, was isolated through sequential column chromatography on DEAE-Toyopearl 650C, Butyl-Toyopearl 650M, and Bio-Gel P-30. Molecular weight of CP-2Va-2 determined through high performance liquid chromatography and SDS PAGE was 19 and 20 kDa. respectively, signifying a monomeric structure.
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