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- 저자 : 이은계 ( Eun Gae Lee ) (검색결과 4 건)
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이승헌,이은계,김수연,조상래,박영길,배길한,Lee, Seung-Heon,Lee, Eun-Gae,Kim, Su-Yeon,Cho, Sang-Nae,Park, Young-Kil,Bai, Gill-Han 대한결핵및호흡기학회 2005 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.58 No.2
Background : Priming and boosting vaccination strategy has been widely explored for new vaccine development against tuberculosis. As an effort to identify other vaccine candidates, this study was initiated to evaluate protective efficacy of adenylate kinase (AK), nucleoside diphosphate kinase (NdK), and heat shock protein 70 (Hsp70) of Mycobacterium tuberculosis. Method : M. tuberculosis genes encoding AK, NdK, and Hsp70 proteins were amplified by PCR and cloned into E. coli expression vector, pQE30. Recombinant AK, NdK, and Hsp70 was purified through Ni-NTA resin. To evaluate immune responses, we performed enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for IgG isotype and $IFN-{\gamma}$ after mice were immunized subcutaneously with recombinant proteins delivered in dimethyl dioctadecylammonium bromide (DDA). Immunized- and control groups were challenged by aerosol with M. tuberculosis. The spleens and lungs of mice were removed aseptically and cultured for CFU of M. tuberculosis. Result : Vaccination with recombinant proteins AK, NdK, and Hsp70 delivered in DDA elicited significant level of antibody and $IFN-{\gamma}$ responses to corresponding antigens but no protective immunity comparable to that achieved with Mycobacterium bovis BCG. Conclusion : Recombinant proteins AK, NdK, and Hsp70 do not effectively control growth of M. tuberculosis in mice when immunized with DDA as an adjuvant. 배 경 : 최근 결핵에 대한 새로운 백신 개발은 초회 면역 방법 및 추가 면역 방법을 이용하는 방향으로 연구되고 있다. 본 실험은 새로운 백신 후보 물질로서의 가능성을 알아보기 위하여 결핵균 adenylate kinase (AK), nucleoside diphosphate (NdK) 및 heat shock protein 70(Hsp70)의 결핵균에 대한 방어면역효능을 측정하였다. 방 법 : 재조합 단백질들을 정제하기 위하여 중합효소 연쇄반응으로 증폭한 결핵균 유전자 단편들을 E.coli expression vector, pQE30에 클로닝한 후, Ni-NTA resin을 이용하여 정제하였다. DDA와 재조합 단백질들을 마우스에 면역주사하고 면역반응 생성 유무를 확인하기 위하여 항체와 $IFN-{\gamma}$ 생성능을 측정하였다. 면역주사 한 마우스에 결핵균을 공기 감염시킨 후, 폐와 비장을 분리하여 결핵균 생균수 실험을 하였다. 결 과 : 재조합 단백질 AK, NdK 와 Hsp70을 면역보강제인 DDA를 이용하여 면역주사 한 결과에서, 생리식염수 혹은 DDA를 면역주사 한 마우스에 비교하여 재조합 단백질을 면역주사 한 마우스에서는 각 항원에 대해 항체와 $IFN-{\gamma}$ 생성능이 높게 나타났으나 결핵균에 대한 효과적인 방어면역효능은 나타나지 않았다. 결 론 : 마우스를 모델로 한 결핵균에 대한 방어면역효능 실험에서, 면역보강제 DDA를 이용한 재조합 단백질 AK, NdK 및 Hsp70을 면역주사 한 경우에는 결핵균의 성장을 효과적으로 조절하지 못하였다. 혼합 단백질 혹은 다른 T세포 면역보강제의 사용에 의한 추시가 필요하다.
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마우스 결핵 모델에서 Isoniazid를 제외한 표준치료의 예비 연구
심태선 ( Tae Sun Shim ),이은계 ( Eun Gae Lee ),최창민 ( Chang Min Choi ),홍상범 ( Sang Bum Hong ),오연목 ( Yeon Mok Oh ),임채만 ( Chae Man Lim ),이상도 ( Sang Do Lee ),고윤석 ( Youn Suck Koh ),김우성 ( Woo Sung Kim ),김동순 ( Dong 대한결핵 및 호흡기학회 2008 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.65 No.3
연구배경: Isoniazid (INH, H)는 4제 표준 항결핵치료의 근간이 되는 중요한 약제이지만 INH를 제외하여도 치료효과에 차이가 없다는 일부 보고들이 있다. 본 연구는 초기 결핵 생쥐 모델을 이용하여 항결핵 표준병합치료에서 INH의 유용성을 평가하였다. 방법: 140마리의 C57BL/6 생쥐를 Glas-Col 장비를 이용하여 약 100개의 H37Rv가 호흡기로 감염되도록 하였다. 감염 4주 후부터 다양한 약제의 조합으로 4~8주간 치료를 시행한 후 감염 후 28주까지 주기적으로 각각 4마리에서 폐와 비장을 적출하여 결핵균 수를 측정하였다. 1군은 약물치료를 시행하지 않은 대조군이었으며, 2군은 INH, rifampicin (RMP, R), ethambutol (EMB, E), pyrazinamide(PZA, Z)로 4주 치료하였고(4HREZ), 3군은 1HREZ/3REZ, 4군은 4REZ, 5군은 4HREZ/4HRE, 6군은 1HREZ/3REZ/4RE, 7군은 4REZ/4RE이었다. 결과: 4주 치료한 군(2~4군)은 치료종료 시점에 폐에서 균이 배양되지 않았으나 치료 종료 12주, 20주 시점에서 다시 균이 검출되었다. 8주 치료한 군(5~7군)은 모두 치료시작 1주까지는 균수가 증가하였다가 2주 후부터 감소하여 치료시작 4주 시점에는 모두 균이 배양되지 않았다. 이후 8주간의 치료를 종료하고 종료 후 16주간 경과 관찰할 때까지(감염 후 28주) 모두에서 균이 배양되지 않았다. 비장에서는 감염 4주 후부터 균이 배양되었다. INH를 전혀 사용하지 않은 7군에서는 치료시작 4주 시점부터 균이 배양되지 않고 이후 감염 28주 시점까지 지속적으로 균이 배양되지 않았다. 반면에 INH를 지속적으로 사용하거나 일시적으로 사용한 5, 6군에서는 치료시작 4주 이후 시점에도 간헐적으로 균이 배양되었다. 결론: 초기 결핵 생쥐 모델에서 INH의 제외는 표준요법의 치료효과에 영향을 미치지 않았다. 향후 만성 결핵생쥐 모델을 이용한 추후 연구가 필요하다. Background: Isoniazid (INH, H) is a key drug of the standard first-line regimen for the treatment of tuberculosis (TB), yet some reports have suggested that treatment efficacy was maintained even though INH was omitted from the treatment regimen. Methods: One hundred forty C57BL/6 mice were infected with the H37Rv strain of M. tuberculosis with using a Glas-Col aerosol generation device, and this resulted in depositing about 100 bacilli in the lung. Four weeks after infection, anti-TB treatment was initiated with varying regimens for 4-8 weeks; Group 1: no treatment (control), Group 2 (4HREZ): 4 weeks of INH, rifampicin (R), pyrazinamide (Z) and ethambutol (E), Group 3: 1HREZ/3REZ, Group 4: 4REZ, Group 5: 4HREZ/4HRE, Group 6: 1HREZ/3REZ/4RE, and Group 7: 4REZ/4RE. The lungs and spleens were harvested at several time points until 28 weeks after infection, and the colony-forming unit (CFU) counts were determined. Results: The CFU counts increased steadily after infection in the control group. In the 4-week treatment groups (Group 2-4), even though the culture was negative at treatment completion, the bacilli grew again at the 12-week and 20-week time points after completion of treatment. In the 8-week treatment groups (Groups 5-7), the bacilli did not grow in the lung at 4 weeks after treatment initiation and thereafter. In the spleens of Group 7 in which INH was omitted from the treatment regimen, the culture was negative at 4-weeks after treatment initiation and thereafter. However, in Groups 5 and 6 in which INH was taken continuously or intermittently, the bacilli grew in the spleen at some time points after completion of treatment. Conclusion: TThe exclusion of INH from the standard first-line regimen did not affect the treatment outcome in a murine model of TB in the early stage of disease. Further studies using a murine model of chronic TB are necessary to clarify the role of INH in the standard first-line regimen for treating TB.
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Near-infrared (NIR) 영상기법을 이용한 생체 내 수지상세포의 이동
이준호(Jun-Ho Lee),정남철(Nam-Chul Jung),이은계(Eun Gae Lee),임대석(Dae-Seog Lim) 한국생물공학회 2012 KSBB Journal Vol.27 No.5
Matured dendritic cells (DCs) begin migration with their release from the bone marrow (BM) into the blood and subsequent traffic into peripheral lymphoid and nonlymphoid tissues. Throughout this long movement, migrating DCs must apply specialized skills to reach their target destination. Non-invasive in vivo cell-tracking techniques are necessary to advance immune cell-based therapies. In this study, we used a DiD cell-tracking solution for in vivo dendritic cell tracking in naive mice. We tracked DiD (non-invasive fluorescence dye)-labeled mature dendritic cells using the Near Infrared (NIR) imaging system in normal mice. We examined the immunophenotype of DiD-labeled cells compared with non-labelled mature DCs, and obtained time-serial images of NIR-DC trafficking after mouse footpad injection. In conclusion, we confirmed that DiD-labeled DCs migrated into the popliteal lymph node 24 h after the footpad injection. Here, these data suggested that the cell tracking system with the stable fluorescence dye DiD was useful as a cell tracking tool to advance dendritic cell-based immunotherapy.
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이승헌 ( Seung Heon Lee ),이은계 ( Eun Gae Lee ),김수연 ( Su Yeon Kim ),조상래 ( Sang Nae Cho ),박영길 ( Young Kil Park ),배길한 ( Gill Han Bai ) 대한결핵 및 호흡기학회 2005 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.58 No.2
배경 : 최근 결핵에 대한 새로운 백신 개발은 초회 면역 방법 및 추가 면역 방법을 이용하는 방향으로 연구되고 있다. 본 실험은 새로운 백신 후보 물질로서의 가능성을 알아보기 위하여 결핵균 adenylate kinase (AK), nucleoside diphosphate (NdK) 및 heat shock protein 70 (Hsp70)의 결핵균에 대한 방어면역효능을 측정하였다. 방법 : 재조합 단백질들을 정제하기 위하여 중합효소 연쇄반응으로 증폭한 결 Background : Priming and boosting vaccination strategy has been widely explored for new vaccine development against tuberculosis. As an effort to identify other vaccine candidates, this study was initiated to evaluate protective efficacy of adenylate kina
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