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      • 인간 유전체 프로젝트, 기술의 경향과 윤리

        이병욱 고신대학교 자연과학연구소 2010 고신대학교 자연과학연구소 논문집 Vol.18 No.-

        Since the human genome projects, the enormous amounts of the human genetic information have been being produced. As results, the newly emerging fields such as genomics and proteomics as well as the traditional molecular genetics and biochemistry has been more extensively and intensively being studied. It is thought that these studies will provide the ways of treating today ’s incurable diseases including many genetic disorders, cancer etc. There, however are also social, cultural and religious issues and concerns in these new fields. 1n this review, the human genome projects itself will be explained, and then the new academic branches derived from it will be introduced. Finally, social ethics problems caused by these newly developing techniques will be discussed from a christian point of view 인간 유전체 프로젝트가 완료된 이후에 순수 유전학 빛 생화학 연구가 더욱 복잡한 양상을 보이며 확장이 되고 있으며, 동시에 방대한 유전체 정보를 기반으로 하는 유전체학 및 단백질체학 등 새로운 학문분야가 활발하게 연구되는 중이다. 이런 연구들은 인류의 난치병으로 남아 있는 유전병들은 비롯하여 암 등의 많은 난치병들을 치료할 수 있는 방법을 제시할 수 있을 것으로 평가되고 있다. 하지만 이런 정보들이 개인과 사회에 미칠 윤리적 문제에 대한 많은 걱정과 논쟁이 있음도 부인할 수가 없다. 본 총설에서는 유전체 프로젝트에 대한 설명과 함께, 이로부터 파급된 현재의 기술 동향과 함께 사회 윤리적 문제점을 기술하고, 이에 의해서 얻어진 결과들에 대해서 기독교적인 관점에서 고찰해 보았다

      • Escherichia coli에서 SAM synthetase 유전자들의 클로닝 및 발현

        박성철;이병욱 고신대학교 자연과학연구소 2007 고신대학교 자연과학연구소 논문집 Vol.14 No.-

        SAM synthetase는 methionine을 전구체로하여 세포 내의 메칠기 (CH_(3-)) 제공자인 S- adenosylmethioine(SAM)을 합성하는 효소이다. Corynebacterium glutamicum, C. ammoniagenes 및 Saccharomyces cerevisiae의 SAM syntheetase를 인코딩하는 유전들을 pfu DNA 종합효소로 증폭하여, 발현 벡터인 pT7-7에 삽입한 후에 Escherichia coli BL2(DE3)로 형질전환하였다. 형질전환체로부터 IPTG에 발현되어진 약 43 kDa의 SAM synthetase를 SDS-PAGE를 이용하여 확인하였다. SAM synthetase is an enzyme that synthesizes S-adenosylmethionine (SAM) from methionine as precursor. Genes encoding SAM synthetases from Corynebacterium glutamicum, C. arrononiagenes and Saccharomyces cerevisiae were amplified by PCR with pfu DNA polymerase, subsequently inserted into the expression vector pT7~7, and transformed to the Escherichia coli BL2KDE3) strain. Transformants were cultured, induced by IPTG and their crude extracts were subject to SDSᅳPAGE. About 43 kDa highly-expressed protein bands were observed.

      • 미토콘드리아 16S rDNA 서열을 통한 부산 지역 반딧불이의 분자분류 연구 방법

        김상래,문태영,이병욱 고신대학교 자연과학연구소 2006 고신대학교 자연과학연구소 논문집 Vol.13 No.-

        최근 분류학은 형태형질 분석을 중시하는 전통분류기법과 함께 염기서열의 유전적 변이를 분석하는 분자분류학이 발달하고 있다. 최근에는 유전적 변이를 측정하기 위해 주로 종과 속의 분화에 따른 다양성을 나타내는 미토콘드리아 16S rDNA 서열을 이용한다. 이 실험은 부산에서 채집된 애반딧불이와 파파리반딧불이의 미토콘드리아 16S rDNA의 서열을 중합효소연쇄반응(PCR)으로 증폭한 후에 클로닝하고 서열을 분석하여 GeneBank에 보고된 유사종의 서열들과 비교하여 계통도를 도출하는 기준방법을 개발한 결과를 정리하였다. Contemporary taxonomy has been led to molecular taxonomy anyzing genetic variation of gene sequences with traditional taxonomy emphasizing morphological characters. Recently to measure genetic variation, it has been investigated the mitochondrial 16S rDNA sequences implying divergence of species and genera. This is the result obtained by comparing mt 16S rDNA of Lucidia lateralis Motschulsky and Hotaria papariensis Doi sampled in Busan Metropolitan City with the other firefly species registered in GeneBank.

      • Pseudomonas syringae ice nucleating protein 유전자의 yeast에서의 발현

        김은정,이병욱 고신대학교 자연과학연구소 2002 고신대학교 자연과학연구소 논문집 Vol.11 No.-

        Gram 음성 세균인 Pseudomonas syringae로부터 INP (ice nucleating protein)를 코딩하는 inaZ 유전자를 PCR로 클로닝하여 메탄올 자화효모균들인 Pichia pastoris 및 Hansenula polymorpha에서 각각 AOX promoter와 MOX promoter를 이용하여 발현하였다. INP 앞에 S. cerevisiae의 α-factor의 signal peptide 서열을 삽입하여 분비를 유도하였다. 발현 결과 P. pastoris의 세포 내에서 크기가 132 kDa인 INP가 고농도로 발현되었고, 수율을 낮았지만 세포 밖으로 분비된 INP도 확인할 수 있었다.

      • Multidrug efflux systems의 보유 가능성을 갖는 Escherichia coli의 분리

        김은정,김은경,정석훈,이병욱 고신대학교 자연과학연구소 2002 고신대학교 자연과학연구소 논문집 Vol.11 No.-

        여러 항생제에 내성을 보유한 세균의 출현은, 이 세균들에 감염되었을 경우 치료할 항생제의 선택 폭이 좁아지거나 없게 되므로 치명적인 결과를 야기하게 된다. 고신대 의대 임상 병리실험실에서 분리된 Escherichia coli와 Klebsiella sp.를 각각 56 종류씩 인계를 받아서 ampicillin의 내성을 조사한 결과 E. coli 4개 균주 및 Klebsiella sp. 1개 균주를 제외한 모든 균주가 ampicillin 10000g/m1의 농도에서 성장하였다. Ampicillin과 에너지 생성 저해제인 CCCP (m-chlorophenyhydrazone)를 첨가한 경우에 이들 균주들의 성장 유무를 조사하였을 때에 E. coli 7개 균주가 성장에 저해를 보였다. 이들 7개 균주는 kanamycin, erythromycin 및 vibramycin에 모두 내성을 보였으며 일부는 rifampicin에 대한 내성도 보유하고 있었다. 플라스미드의 보유여부를 조사한 결과 5개 균주가 플라스미드를 보유한 것으로 조사되었으나 형질전환 시에 2 종류의 플라스미드만이 ampicillin 내성을 보유한 것으로 나타났다. 이는 이들 항생제의 내성에 관여하는 유전자들이 모두 혹은 일부가 염색체 상에 존재함을 의미한다. Emerging pathogenic bacterial strains having multi-drug resistance have limited use of antibiotics to treat bacterial infection. The growth of the 56 Escherichia coli strains and 56 Klebsiella sp. strains isolated at the Kosin University Medical Center were examined with the different concentration of ampicillin. All but 4 E. coli strains and 1 Klebsiella sp. strain survived the concentration of ampicillin 1000μ g/ml. Addition of CCCP (m-chlorophenyhydrazone) to ampicillin inhibited growth of 7 E. coli strains, indicating that they may use efflux systems to pump out harmful drugs. All 7 strains appeared to be resistant to kanamycin, erythromycin and vibramycin. 4 strains possessed full or partial resistance to rifampicin. 5 of these 7 strains have plasmids. However, when they were transformed into E. coli DH5a and examined if they render transformants antibioticresistant abilities, only two plasmids conferred ampicillin resistance. This results indicate that the all or some genes which are involved in multi-drug resistance may be located on the chromosome.

      • Neurospora crassa 발현 백터의 조립

        Lee, Bheong-Uk 고신대학교 자연과학연구소 2000 고신대학교 자연과학연구소 논문집 Vol.10 No.-

        붉은 빵곰팡이 Neurospora crassa는 균류의 포자형성에 관한 연구, 특히 발생에 관련된 유전자 조절 연구의 대표적 생명체로 사용되어져 왔다. N. crassa의 분자생물학적 연구를 촉진하기 위한 pBLX-I 플라스미드가 조립되었다. 이 플라스미드의 특징은 여러개의 단일 클로닝부위, 발현 유발이 가능한 qa-2 프로모터 서열, qa-4 전사 종료 서열, 상동재조합에 의해 서 염색체 내의 his-3 부위로 도입이 가능하도록 하는 his-3 유전자의 일부 서열 및 pUC19 을 기본 골격으로 가지고 있다. 클로닝 부위는 제한효소들인 NruI, NsiI, SpeI, MluI, BamHI, ApaI, NotI, 및 SmaI로 유일하게 절단되도록 구성되었다. Neurospora crassa, the orange bread mold has become a model system for the study of fungal sporulation, more specifically, developmental gene regulation. To facilitate the molecular studies with N. crassa, an expression vector plasmid, pBLX-I was constructed. The features of the plasmid are the multiple cloning sites, the inducible qa-2 promoter sequence, the qa-4 terminator sequence, a partial his-3 gene sequence for homologous integration into the his-3 locus, and pUC19 base containing ampicillin-resistant gene. The multiple cloning sites contain unique restriction endonuclease digestion sequences for NruI, NsiI, SpeI, MluI, BamHI, ApaI, NotI, and SmaI.

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