E3 ubiquitin ligase, Nedd4l, is an essential gene for hearing

Hyehyun Min,Heiyeun Koo,Jae Hwan Oh,Sung Huhn Kim,Jinwoong Bok 한국실험동물학회 2022 한국실험동물학회 학술발표대회 논문집 Vol.2022 No.1

F9 EC 세포에서 레티노산에 의해 유도되는 Hoxc 유전자의 발현에 히스톤 메틸화가 미치는 영향

민혜현(Hyehyun Min),김명희(Myoung Hee Kim) 한국생명과학회 2015 생명과학회지 Vol.25 No.6

Hox 유전자는 호메오도메인을 포함한 전사인자로써, 발생 과정 중 전후축을 따라 몸의 형태 형성을 조절하는 역할을 한다. 레티노산(RA)은 발생 과정에서 필수적인 형태형성인자이며 세포의 특성을 결정하는데 중요한 조절자이다. 특히, RA는 생쥐나 인간으로부터 만들어진 배아암종(EC)세포에서 Hox 유전자의 발현을 조절한다고 밝혀져 있다. 또한 RA에 의한 세포 분화와 유전자 조절 과정에 히스톤 변이가 중요한 역할을 하는 것으로 보고되어 있다. 히스톤 변이가 RA에 의해 유도되는 Hox 유전자의 발현에 특이적인 역할을 할 것으로 유추되기 때문에, 이 연구의 목적은 F9 생쥐배아 기형암종세포에서 RA에 의해 유도되는 Hoxc 유전자의 순차적인 발현이 히스톤 변이에 의해 일어나는 것인지를 조사하는 것이다. Hox 유전자의 발현 양상과 히스톤 변이는 semi-quantitative RT-PCR, RNA-sequencing과 chromatin immuno-precipitation (ChIP)-PCR 기법을 이용하여 관찰하였다. RA 처리 후(0일(D0), 1일(D1), 3일(D3)), Hoxc4 유전자의 발현(D1)은 Hoxc5부터 ?c10 유전자(D3)보다 먼저 시작되었다. Hox가 발현하지 않는 D0 샘플은 전사 억제 마커인 H3K27me3이 모든 Hoxc 좌위에 강하게 표지 되어 있었으나 D1과 D3 샘플에서는 모든 좌위의 H3K27me3 표지가 확연히 줄어들어 있었다. 전사 발현 마커인 H3K4me3가 Hoxc 유전자의 순차적인 발현과 더 연관성이 있는 것으로 보이는데 D1에서 Hoxc4 발현과 함께 H3K4me3이 표지 되어 있었고, D3에서는 Hoxc 유전자 발현과 함께 모든 좌위에서 H3K4me3 마커가 존재했기 때문이다. 모든 결과를 종합해 보았을 때 F9 세포에서 RA에 의해 유도된 Hoxc 유전자의 순차적인 발현은 Hoxc 좌위에서 H3K27me3가 사라지고, H3K4me3가 표지 되는 히스톤 메틸화의 변이에 의해 결정되는 것으로 사료된다. Hox genes encode a highly conserved family of homeodomain-containing transcription factors controlling vertebrate pattern formation along the anteroposterior body axis during embryogenesis. Retinoic acid (RA) is a key morphogen in embryogenesis and a critical regulator of both adult and embryonic cellular activity. Specifically, RA regulates Hox gene expression in mouse- or human-derived embryonic carcinoma (EC) cells. Histone modification has been reported to play a pivotal role in the process of RA-induced gene expression and cell differentiation. As histone modification is thought to play an essential role in RA-induced Hox gene expression, we examined RA-induced initiation of collinear expression of Hox genes and the corresponding histone modifications in F9 murine embryonic teratocarcinoma (EC) cells. Hox expression patterns and histone modifications were analyzed by semiquantitative RT-PCR, RNA-sequencing, and chromatin immuno-precipitation (ChIP)-PCR analyses. The Hoxc4 gene (D0) was initiated earlier than the Hoxc5 to ?c10 genes (D3) upon RA treatment (day 0 [D0], day 1 [D1], and day 3 [D3]). The Hox nonexpressing D0 sample had a strong repressive marker, H3K27me3, than the D1 and D3 samples. In the D1 and D3 samples, reduced enrichment of the H3K27me3 marker was observed in the whole cluster. The active H3K4me3 marker was closely associated with the collinear expression of Hoxc genes. Thus, the Hoxc4 gene (D1) and all Hoxc genes (D3) expressed H3K4me3 upon transcription activation. In conclusion, these data indicated that removing H3K27me3 and acquiring H3K4me3 regulated RA-induced Hoxc gene collinearity in F9 cells.

Anti-inflammatory activity of 6-O-phospho-7-hydroxycoumarin in LPS-induced RAW 264.7 cells

Hyehyun Hong,Tae-Jin Park,Sungchan Jang,Min-Seon Kim,Jin-Soo Park,Won-Jae Chi,Seung-Young Kim 한국응용생명화학회 2022 Journal of Applied Biological Chemistry (J. Appl. Vol.65 No.1

Esculetin (also known as 6, 7-dihydroxycoumarin) a type of coumarin, has been exhibited anti-inflammatory and antiaging effects. Biorenovation is the microbe-mediated enhancement of biological efficacies and structurally diversified compounds relative to their substrate compounds. The production of different kinds of esculetin derivatives using Bacillus sp. JD3-7 and their effects on lipopolysaccharide (LPS)-triggered inflammatory response in RAW 26.7 cells were assessed. One of the biorenovation products, identified as esculetin 6-O-phosphate (ESP), at concentrations of 1.25, 2.5, and 5 μM inhibited the LPSstimulated production of inflammation markers of nitric oxide synthase 2 and cyclooxygenase 2 as well as their respective enzymatic reaction products of nitric oxide and prostaglandin E2 in the order of increasing concentrations (1.25, 2.5, and 5 μM). Additionally, ESP treatment suppressed the LPS-stimulated secretion of pro-inflammatory cytokines of interleukin (IL)-1β, IL-6, and tumor necrosis factor- α. Furthermore, these antiinflammatory effect of ESP was associated with the downregulation of mitogen-activated protein kinase signaling, that is, extracellular signal-regulated kinase, c-Jun NH2-terminal kinase, and p38 mitogen-activated protein kinase signaling pathways. This study would therefore provide interesting insights into the biorenovationassisted generation of a novel anti-inflammatory compound. ESP may be used to develop treatments for inflammatory disorders.

Effect of Natural Essential Oils on the Quality Maintenance of Paprika and Tomato

Min-Sun Chang,Miji Park,Hyehyun Lee,Nan Zun Hlaing Phyu,Byung Sun Lim,Ji Gang Kim,Gun-Hee Kim 한국식품영양과학회 2014 한국식품영양과학회 학술대회발표집 Vol.2014 No.10

수소연료전기자동차의 열관리 시스템 시뮬레이션 모델 개발

강혜현(Hyehyun Kang),김우재(Woojae Kim),김영섭(Youngseob Kim),이호식(Hosik Lee),강상규(Sanggyu Kang),민경덕(Kyoungdoug Min) 한국자동차공학회 2021 한국자동차공학회 학술대회 및 전시회 Vol.2021 No.11

Melanin Inhibitory Effect of Tuber himalayense Isolated in Incheon, Korea

( Byeong Min Choi ),( Minkyeong Kim ),( Hyehyun Hong ),( Tae-jin Park ),( Changmu Kim ),( Jin-soo Park ),( Won-jae Chi ),( Seung-young Kim ) 한국미생물생명공학회 2024 Journal of microbiology and biotechnology Vol.34 No.4

There has been a growing interest in skin beauty and antimelanogenic products. Melanogenesis is the process of melanin synthesis whereby melanocytes are activated by UV light or hormone stimulation to produce melanin. Melanogenesis is mediated by several enzymes, such as tyrosinase (TYR), microphthalmia-associated transcription factor (MITF), tyrosinase-related protein-1 (TRP-1), and TRP-2. In this study, we investigated the effect of Tuber himalayense extract on melanin synthesis in α-melanocyte-stimulating hormone (α-MSH)-treated B16F10 melanoma cells. We confirmed that T. himalayense extract was not toxic to α-MSH-treated B16F10 melanoma cells and exhibited a significant inhibitory effect on melanin synthesis at concentrations of 25, 50, and 100 μg/ml. Additionally, the T. himalayense extract inhibited melanin, TRP-1, TRP-2, tyrosinase, and MITF, which are enzymes involved in melanin synthesis, in a concentration-dependent manner. Furthermore, T. himalayense extract inhibited the mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathways, such as extracellular signal-regulated kinase-1/2 (ERK), c-Jun N-terminal kinase (JNK), and p38. Therefore, we hypothesized that various components of T. himalayense extract affect multiple factors involved in melanogenesis in B16F10 cells. Our results indicate that T. himalayense extract could potentially be used as a new material for preparing whitening cosmetics.

Effect of Luteolin-7-O-glucoside on Melanin Synthesis

Byeong Min CHOI,Hyehyun HONG,Taejin PARK,Seung-Young KIM 한국생물공학회 2022 한국생물공학회 학술대회 Vol.2022 No.9

Biorenovation 생물전환 기법을 이용한 비트 추출물의 LPS로 유도된 RAW 264.7 세포에 대한 항염증 효과

홍혜현(Hyehyun Hong),박태진(Taejin Park),강민성(Min-Sung Kang),김승영(Seung-Young Kim) 한국생물공학회 2021 KSBB Journal Vol.36 No.2

Biorenovation is a method of modifying the structure of a wide range of substrates such as chemical compounds and plant extracts by microbial enzymes, which can reduce cytotoxicity and improve biological activity. In this study, biorenovation was applied to Beta vulgaris (BV) to produce biorenovation product (BVB), and anti-inflammatory activity was investigated in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 macrophages. As a result, BVB inhibited nitric oxide (NO) production at a non-toxic concentration in a concentration-dependent manner, and inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2) and pro-inflammatory cytokine interleukin-6 (IL-6), prostaglandin E₂ (PGE₂), interleukin-1β (IL-1β). Our study shows that BVB exhibits anti-inflammatory activity by inhibiting the production of various inflammatory mediators. Moreover, it suggests that biorenovation has potential usefulness in the development of anti-inflammatory drugs.

LPS로 유도된 R AW 264. 7 대식세포에서 Naringenin-7-O-phosphate의 항염증 활성

홍혜현 ( Hyehyun Hong ),박태진 ( Tae-jin Park ),최병민 ( Byeong Min Choi ),이유정 ( Yu-jung Yi ),김승영 ( Seung-young Kim ) 한국응용생명화학회 2023 Journal of Applied Biological Chemistry (J. Appl. Vol.66 No.-

플라보노이드는 광범위한 생물학적 활성을 가진 중요한 식물 2차 대사 산물로, 본 연구에서 사용된 naringenin (NN)은 자몽에 가장 풍부한 플라바논의 하나로 간 보호, 항지질 과산화 및 항암 활성에 관한 연구가 보고되었다. 우리는 이전 연구에서 biorenovation 기법을 NN에 적용하여 naringenin-7-O-Glucoside (prunin), naringenin-7-O-phosphate (N7P), 6''-O-Succinyl prunin과 같은 3가지 유도체를 합성하였으며 그 중 생물학적 및 물리화학적 특성이 보고되지 않은 N7P가 NN보다 45배 증가한 수용해도를 나타냄을 확인하였다. 따라서 본 연구에서는 N7P의 추가적인 생리활성 조사하고자 RAW 264.7 세포에서 항염증 활성을 평가하였으며 N7P는 세포 독성이 나타나지 않는 농도에서 유효한 inducible NO synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2) 억제 활성을 보였으며 이들의 발현 경로를 유의하게 억제함으로써 nitric oxide (NO) 및 prostaglandin E₂ (PGE₂)를 효과적으로 억제하였다. 뿐만 아니라 pro-inflammatory cytokines 인 tumor necrosis factor-α (TNF-α)와 interleukin-6 (IL-6)의 발현 또한 유의하게 억제하는 것으로 확인되었다. 이러한 결과를 근거로 N7P가 다양한 염증 인자를 표적으로 하는 항염증 소재로 적용될 수 있음을 제안한다. The most abundant flavanone of grapefruits, naringenin (NN), is well known for its hepatoprotective, anti-lipid peroxidation and anti-carcinogenic effects. We generated three derivatives from NN using this technique in previous studies. Among them, it was confirmed that naringenin-7-O-phosphate (N7P), whose biological and physicochemical properties were not reported, showed a water solubility 45 times higher than that of NN. Therefore, in this study, the anti-inflammatory activity was evaluated in RAW 264.7 cells to investigate the potential physiological activity of N7P. As a result, N7P showed nitric oxide (NO) inhibitory activity at concentrations that did not show toxicity. In addition, prostaglandin E₂ (PGE₂) showed significant inhibitory activity from the lowest concentration of 12.5 μM and showed increased inhibitory activity compared to NN. In addition, as a result of western blot, N7P showed increased cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibitory activity than NN, and effectively inhibited NO and PGE₂ by significantly inhibiting their expression pathways. N7P also inhibited inflammatory cytokines, including tumor necrosis factor-α, interleukin-6. Based on these results, we propose that N7P can be used as a potent anti-inflammatory agent.

국립대전현충원에서 분리한 남조류 구슬말(Nostoc commune)의 항염증 효과

Hong Hyehyun,Bae Eun Hee,Park Tae-Jin,Kang Min-Sung,Kang Jae Shin,Chi Won-Jae,Kim Seung-Young 한국응용생명화학회 2022 Journal of Applied Biological Chemistry (J. Appl. Vol.65 No.2

구슬말(Nostoc commune Vaucher ex Bornet & Flahault)은 이형세포를 갖는 특징으로 다른 목들과 구분되는 남조류의 일종으로 극지방에서 열대지역까지 광범위한 지역에 분포하며 단세포가 연결되어 형성된 수많은 trichome들이 점액질에 둘러 쌓인 형태로 커다란 군체를 형성한다. 주로 토양, 암반, 잔디 위 등에 서식한다고 알려져 있으나 흔히 관찰되지 않기 때문에 현재 연구가 거의 없는 실정이다. 이에 본 연구에서는 토양 남조류인 N. commune HCW0811을 분리 및 동정하였으며 항염증 활성을 조사 하고자 하였다. 그 결과 N. commune HCW0811는 LPS로유도된 RAW 264.7세포에서 80%이상의 세포 생존율을 나타내었으며 NO, PGE2 및 TNF-α, IL-6, IL-1β의 생성을 효과적으로억제하였다. 또한 western blot assay를 통해 iNOS, COX-2 및MAP kinase (p38, ERK1/2, JNK)와 NF-κB 세포내 신호전달 경로에서의 단백질 발현을 조사한 결과 이들의 발현이 유의하게억제됨을 확인하였다. 본 연구에서는 이러한 결과를 근거하여HCW0811가 다양한 염증 인자를 표적으로 하는 피부 면역 질환을 포함한 염증성 질환의 예방과 치료를 위한 항염증 기능성 화장품 및 식품소재로의 개발가능성을 제시한다.