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      • KCI등재

        L-AHG-mediated Suppression of M1 Polarization and Pro-inflammatory Signaling Pathways in LPS-stimulated RAW264.7 Macrophages

        Won Young Jang(장원영),Shin Young Park(박신영),Ki Youn Kim(김기윤),Do Youn Jun(전도연),Young-Seuk Bae(배영석),Young Ho Kim(김영호) 한국생명과학회 2024 생명과학회지 Vol.34 No.7

        아가로오스의 효소가수분해산물로 부터 확보할 수 있는 3,6-무수갈락토오스(L-AHG), 네오아가로비오스(NA2), 네오아가로테트라오스(NA4) 및 네오아가로헥사오즈(NA6)의 항염증 활성을 규명하고자, 마우스 대식세포주 RAW264.7 세포를 대장균 유래 지질다당류(LPS)로 자극할 때 세포표면의 TLR4 수용체의 역할을 통해 유도되는 친염증성 M1 분극화 및 이에 따른 친염증성 반응에 미치는 영향을 조사하였다. 그 결과로서, 이들 아가로오스 분해산물들 중에서 단당류인 L-AHG만이 유일하게, LPS 자극에 의해 RAW264.7 세포에서 유도될 수 있는 M1 분극화의 대표적인 마커인 iNOS 효소의 발현과 이에 따른 NO 생성을 농도의존적으로 현저하게 저해하였고 염증 매개체인 프로스타글란딘 E2의 생성을 촉매하는 COX-2의 발현 수준도 LPS 자극후에는 증가하였지만, L-AHG의 존재에 의해서는 그 증가 수치가 다소 저해되는 것으로 나타났다. 이때 RAW264.7 세포에 대한 L-AHG의 세포독성은 확인되지 않았다. 또한 L-AHG는 LPS로 처리된 RAW264.7 세포내에서 유도되는 친염증 신호전달경로에 있어서 초기 신호전달 단계인 TAK1 활성화 단계까지는 별 영향을 나타내지 않았으나 TAK1의 촉매작용에 의한 JNK 및 p38 MAPK의 활성화 인산화(activating phosphorylation)는 현저하게 저해되었다. 특히, 대식세포의 친염증 신호전달경로에서 TAK1 활성화는, 그 하류 단계에서 NF-kB의 활성화가 성공적으로 일어날 수 있도록 해주며, 또한 TAK1에 의한 하류 신호분자인 p38 MAPK 활성화는 NADPH 활성화 및 이에 따른 친염증성 ROS 분자들의 생성을 유발하기 때문에, LPS에 의해 자극된 대식세포내의 친염증 신호전달경로에 있어서 TAK1-JNK/p38 MAPK 경로의 L-AHG에 의한 저해는 대식세포의 M1 분극화 및 친염증 반응을 억제하는 효과적인 기전이 되며, 그 활용성이 크게 기대된다. 아울러 L-AHG가 LPS와 RAW264.7 세포의 표면분자인 TLR4와 상호작용을 방해할 수 있는지에 대해서도 유세포분석기와 형광표지가 된 FITC-LPS를 이용하여 조사한 결과, L-AHG는 대식세포의 표면에서 이루어지는 LPS-TLR4 상호결합은 방해하지 않는 것으로 확인되었다. 이는 L-AHG의 항염증 작용의 표적이 LPS가 TLR4 수용체를 통해 유도하는 세포 내 신호전달경로에 있음을 지지해 준다. 이상의 연구결과들은 아가로오스 유래 희귀 단당류인 3,6-무수갈락토오스(L-AHG)가 LPS 자극에 의해 유발되는 RAW264.7 마우스 대식세포의 M1 분극화 및 염증 반응에 대해, TLR4의 친염증 신호전달경로의 TAK1-JNK/p38 MAPK 단계를 저해하는 항염증 활성을 효과적으로 발휘할 수 있음을 시사한다. This study aimed to examine the influence of 3,6-anhydroxygalactose (L-AHG) on the pro-inflammatory M1 polarization and pro-inflammatory responses observed in the RAW264.7 mouse macrophage cell line following stimulation with lipopolysaccharides (LPS). L-AHG exhibited a significant and dose-dependent inhibition of inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression, a hallmark of M1 polarization, and subsequent NO production in LPS-stimulated RAW264.7 cells. Furthermore, the LPS-induced upregulation of cyclooxygenase-2 (COX-2), which drives the production of prostaglandin E2, an inflammatory mediator, was also inhibited by L-AHG. L-AHG did not affect the LPS-triggered Toll-like receptor 4 (TLR4)-mediated pro-inflammatory signaling pathway, which culminated in the activation of transforming growth factor-β-activated kinase 1 (TAK1). However, it was observed to inhibit the generation of reactive oxugen species (ROS) in a dose-dependent manner, as well as the TAK1-driven activation of JNK and p38 MAPK. Given that the active p38 MAPK is known to contribute to the assembly of active nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) oxidase, which catalyzes the intracellular generation of pro-inflammatory ROS in LPS-stimulated macrophages, the dose-dependent reduction in the LPS-induced ROS generation by L-AHG may be mainly due to the prevention of TAK1-driven activation of p38 MAPK. Together, these results demonstrate that the L-AHG-mediated inhibition of the TAK1-JNK/p38 MAPK activation phase of the pro-inflammatory signaling pathway in LPS-stimulated RAW264.7 cells by L-AHG represents a promising mechanism for suppressing M1 polarization and pro-inflammatory responses in macrophages.

      • KCI등재

        Cellvibrio sp. KY-GH-1의 아가로오스 당화 관련 엑소형 GH50A β-아가레이즈와 GH117A α-NABH의 특성 및 NA2와 L-AHG 양산에의 적용 가능성

        장원영(Won Young Jang),이희경(Hee Kyoung Lee),김영호(Young Ho Kim) 한국생명과학회 2021 생명과학회지 Vol.31 No.3

        최근, 본 연구진은 담수 환경 유래 한천 분해 세균인 Cellvibrio sp KY-GH-1 (KCTC13629BP)의 전체 유전체 염기 서열을 분석하여 아가로오스를 L-AHG 및 D-갈락토오스로 가수분해시키는 아가레이즈들을 암호화하는 유전정보를 탐색하였다. 그 결과, KY-GH-1 균주는 유전체 상의 약 77 kb 길이의 아가레이즈 유전자 클러스터 내에 9개의 β-아가레이즈 유전자들과 2개의 α-네오아가로비오스 가수분해효소(α-NABH) 유전자들을 지닌 것으로 나타났다. 이러한 유전자 정보를 바탕으로 KY-GH-1 균주가 한천을 탄소원으로 자화하기 위해 단량체인 L-AHG와 D-갈락토오스로 분해시키는 공정은, 엔도형 GH16 β-아가레이즈, 엔도형 GH86 β-아가레이즈 등에 의해 개시되어 NA4, NA6, NA8 등을 생성시킨 후, 이들에 대해 엑소형 GH50 β-아가레이즈가 추가로 작용하여 NA2를 생성시키고, 이어서 GH117 α-NABH가 작용하여 생성된 NA2를 단량체 L-AHG와 D-갈락토오스로 분해함으로써 종결되는 것으로 예측되었다. 대장균 발현 시스템과 PET-30a 벡터를 함께 사용하여, KY-GH-1 균주 유래의 GH50 패밀리 β-아가레이즈 유전자들(GH50A, GH50B, GH50C)과 GH117 패밀리 α-NABH 유전자들(GH117A α-NABH, GH117B α- NABH)을 발현시켜 His-태그 재조합 효소단백질들로 확보하여, 이들 효소단백질을 이용하여 효소 활성을 비교 분석한 결과, 재조합 GH50A β-아가레이즈가 세 개의 GH50A 패밀리 β-아가레이즈 동위효소들 중에서 가장 높은 엑소형 β-아가레이즈 활성을 나타내며, 또한 재조합 GH117A α-NABH가 NA2를 L-AHG와 D-갈락토오스로 강력하게 가수분해할 수 있으나 재조합 GH117B α-NABH는 NA2 가수분해 활성이 없음을 확인하였다. 연이어 GH50A β-아가레이즈 및 GH117A α-NABH의 효소 특성을 추가로 조사하였다. 아울러 이들 각 효소가 나타내는, 아가로오스를 분해하여 NA2를 생성시키는 효율성과 NA2를 분해하여 L-AHG 및 D-갈락토오스를 생성시키는 효율성을 평가하였다. 본 총설에서는, L-AHG 및 D-갈락토오스의 양산을 위한 아가로오스의 효소적 가수분해에 성공적으로 활용될 수 있을 것으로 기대되는, 담수 유래 한천 분해 세균 Cellvibrio sp. KY-GH-1 유래의 재조합 GH50A β-아가레이즈 및 GH117A α-NABH의 장점들에 대해 기술한다. Recently, we sequenced the entire genome of a freshwater agar-degrading bacterium Cellvibrio sp. KY-GH-1 (KCTC13629BP) to explore genetic information encoding agarases that hydrolyze agarose into monomers 3,6-anhydro-L-galactose (L-AHG) and D-galactose. The KY-GH-1 strain appeared to possess nine β-agarase genes and two α-neoagarobiose hydrolase (α-NABH) genes in a 77-kb agarase gene cluster. Based on these genetic information, the KY-GH-1 strain-caused agarose degradation into L-AHG and D-galactose was predicted to be initiated by both endolytic GH16 and GH86 β-agarases to generate NAOS (NA4/NA6/NA8), and further processed by exolytic GH50 β-agarases to generate NA2, and then terminated by GH117 α-NABHs which degrade NA2 into L-AHG and D-galactose. More recently, by employing E. coli expression system with pET-30a vector we obtained three recombinant His-tagged GH50 family β-agarases (GH50A, GH50B, and GH50C) derived from Cellvibrio sp. KY-GH-1 to compare their enzymatic properties. GH50A β-agarase turned out to have the highest exolytic β-agarase activity among the three GH50 isozymes, catalyzing efficient NA2 production from the substrate (agarose, NAOS or AOS). Additionally, we determined that GH117A α-NABH, but not GH117B α-NABH, could potently degrade NA2 into L-AHG and D-galactose. Sequentially, we examined the enzymatic characteristics of GH50A β-agarase and GH117A α-NABH, and assessed their efficiency for NA2 production from agarose and for production of L-AHG and D-galactose from NA2, respectively. In this review, we describe the benefits of recombinant GH50A β-agarase and GH117A α-NABH originated from Cellvibrio sp. KY-GH-1, which may be useful for the enzymatic hydrolysis of agarose for mass production of L-AHG and D-galactose.

      • KCI등재

        코레일의 조직특성과 직무특성 그리고 리더십이 종사원의 燒盡에 미치는 영향 연구

        장원영(Jang, Won-Young),이승철(Yi, Seung-Cheol) 한국물류학회 2015 물류학회지 Vol.25 No.3

        본 연구는 코레일의 인적자원관리 측면에서 나타나는 소진의 문제점을 파악, 소진을 사전예방하고 경감시킬 수 있는 대응방안을 모색하여 효율적인 자원 관리를 위한 참고자료를 제공하는데 목적을 두고 있다. 이에 대한 연구결과는 다음과 같다. 우선, 코레일 종사원의 소진에 미치는 영향을 분석한 결과, 팀워크와 조직분위기, 직무의 성격과 관리자의 리더십이 소진에 깊은 영향을 미치고 있는 것으로 나타났다. 각 요인별 결과를 살펴보면, 첫째, 조직의 팀워크와 분위기, 직무성격, 관리자의 리더십이 정서적 고갈에 미치는 영향에 대한 분석 결과, 각각의 특성이 부정적일수록 종사자의 정서적 고갈은 높아지는 것으로 나타났다. 둘째, 조직 특성에서 오는 팀워크와 분위기, 직무특성, 관리자의 리더십이 성취감 저하에 미치는 영향을 분석한 결과, 각각의 특성이 부정적일수록이 종사자의 성취감 저하는 월등히 높아졌다. 셋째, 코레일의 조직 특성과, 직무 특성, 관리자의 리더십이 비인격에 미치는 영향에 대한 분석 결과, 각각의 요소가 부정적일때, 종사자의 비인격 수준은 매우 높은 것으로 나타났다. 이러한 결과를 종합해 볼 때, 코레일의 조직 특성에서 오는 팀워크와 분위기, 직무 특성과 성격 그리고 관리자의 리더십은 코레일 종사원의 소진에 매우 깊은 영향을 미치고 있다는 것을 알 수 있었다. 따라서, 코레일 종사원의 소진을 최소화할 수 있는 대책을 제시한다. This study aims to identify the problems of burnout in terms of human resources management in KORAIL and provide fundamental data, which is helpful for efficient human management and innovative busines management, in order to seek preventive solutions on reducing the burnout. The results of the study are as follows. First, the analysis of the influence on the burnout of human resources shows that teamwork, working environment, job characteristics, and manager’s leadership have huge impact on its burnout. Second, the regressive analysis for the effect of the teamwork and working environment, job characteristics, and manager’s leadership on emotional burnout proves that its employees’ emotional burnout has escalated, as the factors become negative. Third, the regressive analysis for the effect of the teamwork and working environment, job characteristics, and manager’s leadership on a sense of accomplishment illustrates that its employees’ sense of achievement has dropped, as the factors turn out to be negative. Fourth, the regressive analysis for the effect of the teamwork and working environment, job characteristics, and manager’s leadership on impersonality demonstrates that the level of its employees’ impersonality has increased, as the factors grow to be negative. Considering the results of the previous analysis, the teamwork, working environment, job characteristics, and manager’s leadership embedded in the organizational characteristics of KORAIL have deeply influenced on the burnout of its employees. Therefore, this study proposes comprehensive measures to minimize the burnout.

      • Synthesis of rGO/V₂O<SUB>5</SUB> hybrid composites for energy storage applications

        Won Young Jang(장원영),Jeong Min Kim(김정민),Jaesool Shim(심재술) 대한기계학회 2021 대한기계학회 춘추학술대회 Vol.2021 No.11

        Both reduced graphene oxide(rGO) and vanadium pentoxide nano-rods were prepared each to each by using a facile approach and were synthesized a facile stirring method at room temperature in the hybrid composites where V₂O<SUB>5</SUB> were assembled on the surface of rGO sheets. These synthesized materials were confirmed by various analytical techniques such as X-ray diffraction, scanning electron microscopy and high-resolution transmission electron microscopy. And even interestingly, some part of rGO was turned out to be 2~4nm, so-called quantum dots, next generation material for the energy storage material. The hybrid composites showed better structural properties than that of pure material, causing higher electrochemical properties in various ways. Moreover, the material is profitable for simplified fabrication and scalable production owing to its economical method. Such impressive results would incite new chances for the material to solve low energy density problem in commercial applications.

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      • SCOPUSKCI등재

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