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SHR 랫드에서 Streptozotocin 유발 당뇨가 소장 흡수세포의 형태학적 변화와 Na⁺-의존성 D-Glucose 수송에 미치는 영향
장인석(In-Surk Jang),채갑용(Kab-Ryong Chae),임철주(Chul-Joo Lim),강태석(Tae-Seok Kang),김용규(Yong-Kyu Kim),김철규(Chuel-Kyu Kim),황진희(Jin-Hee Hwang),황대연(Dae-Youn Hwang),안병우(Byeong-Woo Ahn),조정식(Jung-Sik Cho) 한국실험동물학회 1998 Laboratory Animal Research Vol.14 No.2
등줄쥐(Apodemus agrarius Pallas), KK 마우스 및 Chinese Hamster에 있어서 고지방사료 급여의 영향
채갑용(Kab-Ryong Chae),김용규(Yong-Kyu Kim),강태석(Tae-Surk Kang),김철규(Chuel-Kyu Kim),장인석(In-Surk Jang),황진희(Jin-Hee Hwang),황대연(Tae-Yeon Hwang),임철주(Chul-Joo Lim),이은(Euen Li),조정식(Jung-Sik Cho) 한국실험동물학회 1999 Laboratory Animal Research Vol.15 No.1
임철주,황진희,채갑용,김용규,김철규,장인석,조용연,황대연,백상기,조정식 식품의약품안전청 1997 식품의약품안전청 연보 Vol.1 No.-
SV4O T Ag은 그 발암성f_로 인해 동물세포 형질전환에 널리 사용되교 있다. 인체 질환 모질로서의 형질전환동물에 있어서_윤방암을 유발하기 위해 유선 조직 특이 벡터(PMMST)를 MMT:V LTR promoter와 RSV enhancer를 SV4O T Af와 연결하여 제작하였다. Microinjection에 앞서 이 PMMST의 mouse mammary epithelial cell(템011)에서의 안정적인 발현을 확인하기 위하여 calcium phosphate 침전법을 이용하여 transfection시키고 G4l8로 selection한 후 Prolactin과 dexamethasone으로 induction 하쳤다. PMMST의 딘Cll 내 도입은 PCR 로 확인하였고 안정적 발현은 RT-PCR로 확인하였다. 발현결과로서는 1:GF가 포함되지 않고 Prolactin, dexa-rnethasone, insulin으로 induction 한 경우에서 SV4O T Ag이 안정적으로 발현하였다. 향후 계속적인 연구를 통하여 발현룰 증명된 MMST를 마운스 수정란 전핵에 미싸주입하여 경질전환동물을 개발하므로써 미세주입된 유전자 발쳔 및 병리 ·생리 분자생물학적 분석 기술을 통해 유방암 모델동물로서의 유용성을 평가하고, 여기서 확립한 다양한 질환모칠 동물 개발 기술에 응용하고자 한다. SV4O T Ag has been extensively used for the transfection of animal cells because of its oncogenic potential. To dev·slop a mouse diseasr model relatea to breast tumor, a mammary gland ex-pression vector (PMMST) ·uas constructed with SV4O T Ag under control of mouse marumary tumorvirvs tTR promoter. In this study, the expression of PMMST was verified in mouse mammary gland epi-thelial eells (HCll ) before Inicroinjection of the gene into mouse eggs. PMMST was transfected by calci-um phosphate precipitatiou methodr selected with e418, and its expression was induced by treatment oflactogenic hormones. The inltroduction of the PMMST was anatyEed by PCR and the expression was ana-lyzed by RT- PCR. The reTult showed that PMMST was expressed only by epithelial growth factor(EGF) free media containing prolactin, dexamethasone and insulin in HCll cells.
등줄쥐(Apodemus agrarius Pallsa)에 있어서 α-amylase의 특성연구(Ⅱ) : 당뇨 모델동물로서 등줄쥐의 유용성
채갑용,임철주,김용규,김철규,장인석,황진희,황대연,조성화,이은,조정식 식품의약품안전청 1997 식품의약품안전청 연보 Vol.1 No.-
등줄쥐를 실험동물로서 유풍성을 증진하고 당뇨 모델동물간의 생리적 발칠 특성을 연구하기 위하여 비만 감수성 동물에 특이적으로 비만을 유발하는 사료 모델인 고지방사료(34% 지방에너지/총에너지)를 등줄쥐 및 당뇨 모델동물(KK 마우스와 chinese hamster)에 급여하여 당뇨 및 비만의생리적 특성을 연구하였다. 각 동물은 4-6주령의 수컷 24마리, 총 72마리를 10준간 급여하였다. 이들의 결과 빅만 감꼭성 모질사료인 고찌방사료 급여에 의하예 딘K마 우스는 고혈당,혈중 지질함량 및 leptin이 현저한 증가가 나타나인간의 비만형 당뇨모델동물로서 고지방에 민감한 반응을 나타내고 있는 반면에 IDDM이 다발하는 chinese hamster에서는 영향을 나타나지 않는 것으로 나타났고 등줄쥐는 KK마우스 및 chinese hamster에 비하여 혈중 중성지질 및 cholesterol 함량이 현저히 낮고 고지방 사료에는 민감한 반응을 나타내지 깥아 지방대사에는 현저한 항상성은 있으나 혈당 및 혈중 인슬린 함량이 높은 당뇨모질동물로서 가능성을 시사하고 있다. The levels of enzyme activity (o-amylase), metabolite (serum glucose, cholesterol, triglyceride) and peptide hormones (insulin, leptin) were exarBined fn striped field mice and the diabetesmodel animals fed moderatelr high fat diet for 10 weeks. Four-six weeks old of male animal in stripedfield mice, KK mice and chinese hamsters were used in this experimrnt and fed pelleted diet containiBgmoderately high fat diet wifh 34% of energy supplied as fat. At the ending 70 days of feeding, blood wasquickly collected from hea3f puncture and parotid gland, pancreas, liver and kidneys were removed.Serum were prepared for engfme activity, metabolite and peptide hot·none levels. As a result of experi-meBt, a moderately high fElt diet gave rise to significant increase in blood glucose, lipid and leptin i8KK mice, kRown as a mode:1 animal for human diabetes(non- insulin dependent diabetes Taellitvs). How-ever, a high fat diet did not induce a sigBifincantly change in chinese hamsters knoweB as a insulin de-Thus, strired field mice indicated a potentially useful aBiinal model for diabetes to studf of mechanismunderlying in development of diabetes.
황진희,황대연,김용규,채갑용,강태석,임철주,김철규,장인석,김연주,백상기,조정식 식품의약품안전청 1998 식품의약품안전청 연보 Vol.2 No.-
SV4O Tag은 oncogenesis potential 때문에 진핵세포유전자의 organization 및 발현연구에 광범위하게 이용되어왔다. SV4O 739에 의한 종앙발생은 739발현이 G,기 세포에서 감소되고,5기, G2-M기 세포에서 각각 증가되가 매문에 G,기의 단축, G,-M기의 증가와 관련있음을 암시한다. 형질전환동물과 그 세포주는 SV4O fag과 세표주기조절 단백질들간의 상호작용에의한 tumorigenesis의 기작등을 분석연구하는데 효과적으로 제공필 수 있다. 본연구는 유방암형질전환마우스를 개발하기위하여 mouse mammary tumor virus(MMTV) LTR promoter의 조절하에서 SV4O Tag oncogene을 발현하도록하는 hybrid gene을 제작하여 마우을 수정란에 주입하였다. 그 결과 132수의 산자를 생산하였으며 이증 4마리의 형질전환동물을 확인하였으며, 이중 3마리를 line 형성을 위해 계대사육중이다. 앞으로 이들로부턴 tumor 형성확인,세포주 생산 및 인체질환모텔동물로서의 유용성을 평가하는데 매우 유용하다. Simian virus 40 (SV4O) large T antigen(Tag) have functions to initiate the precess that lead to the development of or·ethal and bulbourethal gland after 7 moBths of age in human. Tumor pro-gressing in these organs correlates to the level of 7ag that resulted in reduced the percentage ☞』 e,-phase eells and increased percentage of S- and Gr+M-phase cells in exponentially growing fecrobBeatcells. The effect is the result of reduced G, and increased e,M celt cycle phase duration caused by Tag.Transgenic animal model and its cell lines may provide an opportunity for analyBing molecuBar mocha-nisms involved in the tumorigenesis which are caused by the iuteractions between Tag a.Id cell cycleregulatory proteins. To generate transgenic model mice, a hybrid gene combining SV4O Tag viraloncogene under control of Inouse mammary tumor virus (MMTV)'LTR promoter were constructed(PMMST) and were then microinjcted into fertilized eggs of mice. By analyring of PCR from the mousetail DNA 4r3E132 founder were identified as a transgenic mice and were bred in our mice colony. ThesetransgeBic mouse are available for further analyzing of tissue-specifie expression.