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- 저자 : 이해선(Haesun Lee) (검색결과 7 건)
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이해선,Lee, Haesun 항공우주시스템공학회 2012 항공우주시스템공학회지 Vol.6 No.3
Every 3000 hour an aircraft is stricken by a lightning. Also the lightning damage to the aircraft during flight are continually occurred due to extreme weather phenomena such as global warming. Under the airworthiness standards, the aircraft must be designed to protect lightning. To show compliance for lightning, the test should be conducted by the actual lightning current and voltage waveform for the actual aircraft or parts. After test, structure damage is detected via visual inspection or NDI. Structure substantiation for damage is to show retaining limit or near limit load capability. This is conducted by test or analysis based on test. Thus, the aircraft should retain structural strength to land safely, even though the damage of aircraft fuselage from Lightning strike are occurred.
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이해선(Haesun Lee),박미령(Mi-Ryung Park),오건봉(Keon Bong Oh) 한국산학기술학회 2021 한국산학기술학회논문지 Vol.22 No.12
돼지와 영장류의 면역 차이로 이종이식 돼지 장기에서 보체 활성화, 염증반응 그리고 혈액 응고 등의 거부반응이 발생하며 수여 영장류를 사망에 이르게 한다. 인위적으로 Membrane cofactor protein(MCP) 및 Thrombomodulin(TBM)을 발현시키는 것은 이러한 거부반응으로부터 세포를 보호하고 영장류 생존기간을 연장한다고 보고되었으며 이전 연구에서 코돈 최적화 MCP(mMCP) 와 TBM cDNA를 활용한 발현 벡터를 구축한 바 있다. 본 연구의 목적은 항생제 저항성 유전자를 이용하지 않고 형질전환 세포 선별 시스템을 확립하며 alpha-1,3-Galactosyltransferase knock-out(GTKO)/mMCP/TBM 세포 라인을 개발하는 것이다. Nucleofection을 통해 mMCP/TBM 동시 발현 벡터를 도입한 GTKO 세포를 MCP에 대한 항체를 이용하여 MCP를 발현하는 세포만을 두 차례 분리하였다. 이를 통해 분리한 세포는 단일세포가 되도록 배양하였으며 유세포분석을 통한 MCP 발현 수준에 따라 단일 클론의 세포라인을 분류하여 선별하였다. 최종적으로 MCP 단백질 발현이 90% 이상인 GTKO/mMCP/TBM 유전자형 세포 라인 4종을 개발하였다. 선별된 클론들은 GTKO/mMCP/TBM 돼지 생산을 위한 핵이식 공여세포로 활용할 예정이다. 항생제 저항성 유전자를 사용하지 않는 선별 기술은 향후 의료용 원료 동물 생산에 효과적으로 활용될 수 있을 것으로 기대된다. The immunological barriers between pigs and primates result in complement activation, inflammation, and coagulation in xenografts, consequently leading to the recipient"s death. The intentional co-expression of membrane cofactor protein (MCP) and thrombomodulin (TBM) in pigs is known to contribute to the prolonged survival of xenografted recipient primates. In a previous study, we had constructed MCP/TBM co-expression vectors using codon-optimized MCP (mMCP) and TBM cDNA. The objectives of this study were to establish an antibiotic-free selection system and generate a pig cell line carrying mMCP and TBM expression vectors based on the alpha-1,3-galactosyltransferase knock-out (GTKO) genetic background. The mMCP/TBM co-expression vectors were introduced into GTKO pig fibroblasts. We isolated and selected only MCP-expressing cells using anti-MCP antibodies and cell separators twice. Additionally, we performed single-cell separation and clonal culture depending on the MCP expression level. Finally, we were able to obtain four GTKO/mMCP/TBM clones expressing MCP at levels of 90% and over. The selected clones will be used as donor cells for nuclear somatic cell transfer to produce GTKO/mMCP/TBM pigs for xenotransplantation. We believe that the antibiotic-free selection system established in this study could be useful to produce biomedical source animals without the antibiotic resistance gene.
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이해선(LEE, Haesun),한상진(HAN, Sangjin),이혜진(LEE, Hyejin) 대한교통학회 2016 대한교통학회 학술대회지 Vol.75 No.-
아파트 등 공동주택단지는 주차면의 확충, 주차 공간의 지하화, 단지 내 차량 동선 처리 및 감속 등의 노력이 지속적으로 이루어지고 있으나 공공에서 개발하는 단독주택지는 이러한 노력이 부족하다. 이 때문에 공동주택지보다 단독주택지에서 불법주•정차, 보차혼용 등 보행안전을 위협하는 요소가 많이 관찰된다. 본 연구는 단독주택지와 공동주택지의 사고율을 비교하여, 주거유형별로 보행자 안전에 차이가 있는지 살펴보고자 하였다. 분석을 위해 보험회사에서 제공하는 교통사고 자료를 통해 일산신도시에서 발생한 최근 5년간(2011~2015년)의 사고 자료를 공동주택지와 단독주택지로 구분하여 수집하였으며, SPSS 19.0을 활용하여 T-test를 실시하였다. 분석을 통해 두 집단간 차이가 있음을 확인하였고, 이는 주거유형에 따라 사고 발생 확률과 심각도가 달라질 수 있다는 것을 시사한다. 이는 상대적으로 가로환경이 열악한 단독주택지의 보행자 안전을 확보하기 위해서는 도시를 조성하는 단계에서부터 사고 위험을 높일 수 있는 요소를 파악하고 개선해나가야 함을 시사한다.
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이종이식에 활용할 α1,3-galactosyltransferase 비활성화 및 Membrane Cofactor Protein 발현 동형접합 형질전환 돼지 개발
이건섭,박상현,이해선,지수정,이주영,변승준,황성수,김경운,옥선아,오건봉,Lee, Gunsup,Park, Sang Hyoun,Lee, Haesun,Ji, Soo-Jeong,Lee, Joo Yung,Byun, Sung-June,Hwang, Seongsoo,Kim, Kyung Woon,Ock, Sun A,Oh, Keon Bong 한국수정란이식학회 2017 한국동물생명공학회지 Vol.32 No.3
Transplantation is considered to be a very useful approach to improve human welfare and to prolong life-span. Heterologous organ transplantation using pig organs which are similar to human beings and easy to make mass-production has known as one of the alternatives. To ensure potential usage of the pig organ for transplantation application, it is essentially required to generate transgenic pig modifying immuno-related genes. Previously, we reported production of heterozygous ${\alpha}1,3$-galactosyltransferase (GalT) knock-out and human membrane cofactor protein (MCP) expressing pig ($GalT^{-MCP/+}$), which is enforced for suppression of hyperacute and acute immunological rejection. In this study, we reported generation of homozygous pig ($GalT^{-MCP/-MCP}$) by crossbreeding $GalT^{-MCP/+}$ pigs. Two female founders gave birth to six of $GalT^{-MCP/-MCP}$, and seven $GalT^{-MCP/+}$ pigs. We performed quantitative real-time PCR, western blot, and flow cytometry analyses to confirm GalT and MCP expression. We showed that fibroblasts of the $GalT^{-MCP/-MCP}$ pig do not express GalT and its product Gal antigen, while efficiently express MCP. We also showed no expression of GalT, otherwise expression of MCP at heart, kidney, liver and pancreas of transgenic pig. Taken together, we suggest that the $GalT^{-MCP/-MCP}$ pig is a useful candidate to apply xenotransplantation study.
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돼지 형질전환 체세포에서 pWAP promoter 영역에서의 DNA 메틸화 비교
박미령(Mi-Ryung Park),이해선(Haesun Lee),오건봉(Keon Bong Oh) 한국산학기술학회 2021 한국산학기술학회논문지 Vol.22 No.12
DNA methylation는 포유동물에 있어 세포 기능 및 유전자의 안정화 조절로 생명을 유지하는 역할을 한다. 본 연구에서는 돼지 귀조직 유래 섬유아 세포에 돼지 유청 단백질과 사람 조직 플라스미노겐 벡터를 도입하여 메틸레이션 영역에 따른 변화를 비교 분석하였다. pWAP promoter 내 메틸레이션 패턴을 분석하기 위하여 동일한 passage 단계에 있는 세포를 배양하여 채취하였으며, bisulfite sequencing 방법으로 분석을 진행하였다. 그 결과 pWAP promoter 내 upstream 영역 두 부분에서 CpG islands가 있음을 확인하였다. pWAP promoter를 도입한 세포의 경우 5 region의 유전자 도입 그룹에서 유의적으로 메틸이션 패턴이 높게 나타남을 확인하였다. 또한, htPA 벡터를 도입한 세포의 경우 htPA1_4 그룹에서 유의적으로 높은 메틸레이션이 확인되었다. 메틸레이션 양상은 CpC islands 영역과 구축된 세포주에 따라 각기 다르게 나타남을 확인하였다. 이러한 결과는 프로모터 선별 및 세포주 구축이 형질전환 동물을 생산하는 데 있어 중요하게 작용할 수 있을 것으로 여겨지며, 유전자의 기능에 대한 연구에도 기초 자료로 활용 될 수 있을 것으로 사료된다. DNA methylation is vital in maintaining genomic stability and modulating cellular functions in mammalian cells. This study was performed to identify the differentially methylated region (DMR) in porcine whey acid protein (pWAP) and the human tissue plasminogen activator (htPA) vector of porcine ear fibroblast cells. To investigate the methylation patterns of the WAP promoter, cells were collected from the same passage and analyzed by the bisulfite sequencing method. Results showed that two cytosine-guanine dinucleotide (CpG) islands are present in the promoter region of pWAP. The methylation level of the CpG island 5 region was significantly higher in the pWAP transfected somatic cells than in the wild type (WT) somatic cells. In the htPA, transgenic cells were significantly higher in htPA1_4 cells than the other htPA transfected cells. The changing methylation pattern was observed in the promoter regions and established transgenic cell lines. Our data indicate that promoter selection and cell line construction can play an important role in the production of transgenic animals. Thus, these results can be used as basic data for research on the function of genes.
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