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        효소적 가수분해를 이용한 청각으로부터 생리활성 물질의 추출 및 가수분해물의 생리활성

        이가화(Ka-Hwa Lee),Mahinda Senevirathne,안창범(Chang-Bum Ahn),제재영(Jae-Young Je) 한국식품영양과학회 2010 한국식품영양과학회지 Vol.39 No.7

        본 연구에서는 청각으로부터 생리활성물질을 추출하기 위해서 친환경적인 효소적 방법을 이용하여, 이들 효소 가수 분해물의 TPC, TFC, 항산화 활성, acetylcholinesterase (AChE) 저해 활성 및 항염증 활성을 측정하였다. 청각의 단백질 및 탄수화물 가수분해물의 TPC는 TFC보다 높은 함량을 나타내었으며, 단백질 가수분해물이 탄수화물 가수 분해물보다 높은 TPC를 나타내었다. 청각 가수분해물의 항산화 활성은 DPPH radical 소거 활성으로 측정하였고, 단백질 가수분해물에서는 Flavourzyme 가수분해물이 활성이 높았고, 탄수화물 가수분해물에서는 Promozyme 가수분해물이 높은 DPPH radical 소거 활성을 나타내었다. 따라서 두가지 가수분해물을 이용하여 hydrogen peroxide 소거능, Fe²? 킬레이팅 및 reducing power를 측정한 결과 두 가수분해물 모두 우수한 항산화 활성을 나타냄을 알 수 있었다. 또한, hydroxyl radical로 유도된 DNA 손상을 효과적으로 억제하였다. AChE 저해 활성에서는 Flavourzyme 및 Dextrozyme 가수분해물이 각각 우수한 AChE 저해 활성을 나타내었다. 청각 가수분해물의 RAW264.7 세포주에 대한 세포독성을 검토한 결과 세포독성을 나타내지 않았으며, lipopolysaccharide(LPS)로 유도된 nitric oxide(NO) 생성 억제능에서는 모든 가수분해물이 유의적(p<0.05)으로 NO의 생성을 억제하였다. We extracted bioactive materials from Codium fragile by enzymatic hydrolysis using four different proteases (Alcalase, Flavourzyme, Neutrase, and Protamex) and seven different carbohydrases (amyloglucosidase (AMG), Celluclast, Dextrozyme, Maltogenase, Promozyme, Termamyl, and Viscozyme), and evaluated their biological activities such as antioxidant, anti-acetylcholinesterase (AChE), and anti-inflammatory effects. All enzymatic hydrolysates showed good DPPH radical scavenging capacities, in particular, Flavourzyme and Promozyme hydrolysates possessed the highest activity. The two hydrolysates also exhibited strong hydrogen peroxide scavenging activity, Fe²? chelating activity, and reducing power in a dose-dependent manner. Furthermore, the two hydrolysates effectively protected DNA damage induced by hydroxyl radical by measuring the conversion of supercoiled DNA to the open circular DNA. All enzymatic hydrolysates also showed high anti-AChE inhibitory activities in a dose-dependent manner, and did not showed any significant cytotoxicity on RAW264.7 cells (p<0.05). In addition, the enzymatic hydrolysates significantly (p<0.05) inhibited lipopolysaccharide inducednitric oxide production on RAW264.7 cells. These results suggest that the enzymatic extracts from Codium fragile would be good source as an ingredient of functional foods.

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        Bacillus sp. MR2에 의한 망간단괴의 생물용출

        최성찬,이가화,이홍금,Choi, Sung-Chan,Lee, Ga-Hwa,Lee, Hong-Keum 한국미생물학회 2009 미생물학회지 Vol.45 No.4

        비황화광물인 망간단괴에서 일부 미생물은 비효소학적 과정을 통해 간접적으로 망간(II)을 용출시킬 수 있다. 이때 환원적 용해를 일으킬 수 있는 대사산물의 생성을 위해 제공되는 탄소 및 에너지원인 glucose, sucrose, galactose 등은 생물용출 기술의 장점인 경제성을 저하시키는 원인이 되고 있다. 본 연구에서는 저렴한 탄소 및 에너지원으로 corn starch를 이용하면서 망간(II) 용출능력을 지닌 종속영양 미생물로서 Bacillus sp. MR2에 의한 망간(II)의 용출 특성을 알아보았다. 망간(II)의 용출은 MR2의 생장에 수반되어 일어났으며[25.6 g Mn(II) $kg^{-1}$ nodule $day^{-1}$], 24시간 이후에는 생성된 망간(II)의 일부가 망간단괴 입자에 다시 흡착되는 경향을 보였다. 분쇄물을 dialysis tube (MWCO 12,000)에 넣어 MR2와의 접촉을 막았을 때도 유사한 정도의 결과[24.6 g Mn(II) $kg^{-1}$ nodule $day^{-1}$]를 보여 세포와 망간단괴의 직접적 접촉이 필요 없이 세포외 분비물질에 의해 환원적 용해가 일어남을 알 수 있었다. 실험에 적용된 영향요인들의 범위에서 최적 용출조건을 분석한 결과, $25\sim35^{\circ}C$, pH 5~7, 접종밀도 1.5~2.5% (v/v), 분쇄물의 농도 2~3 g/L 및 입자크기 <75 ${\mu}m$일 때가 가장 효율이 높았다. 비록 입자의 크기가 작을수록 망간(II) 용출속도가 증가했지만 분쇄에 더 많은 에너지가 요구되므로 경제성을 고려한다면 <212 ${\mu}m$가적절한 수준으로 제시될 수 있었다. 이상의 효율적인 망간단괴의 용출 조건 규명은 기존의 물리화학적 금속 회수기술에 비해 적은 비용과 에너지가 요구되는 환경친화적 생물용출 기술의 진보에 도움을 줄 것으로 기대된다. Some microorganisms are capable of leaching Mn(II) from nonsulfidic manganese ores indirectly via nonenzymatic processes. Such reductive dissolution requires organic substrates, such as glucose, sucrose, or galactose, as a source of carbon and energy for microbial growth. This study investigated characteristics of Mn(II) leaching from manganese nodules by using heterotrophic Bacillus sp. strain MR2 provided with corn starch as a less-expensive substrate. Leaching of Mn(II) at 25.6 g Mn(II) $kg^{-1}$ nodule $day^{-1}$ was accompanied with cell growth, but part of the produced Mn(II) re-adsorbed onto residual $MnO_2$ particles after 24 h. Direct contact of cells to manganese nodule was not necessary as a separation between them with a dialysis tube produced similar amount [24.6 g Mn(II) $kg^{-1}$ nodule $day^{-1}$]. These results indicated an involvement of extracellular diffusible compound(s) during Mn(II) leaching by strain MR2. In order to optimize a leaching process we tested factors that influence the reaction, and the most efficient conditions were $25\sim35^{\circ}C$, pH 5~7, inoculum density of 1.5~2.5% (v/v), pulp density of 2~3 g/L, and particle size <75 ${\mu}m$. Although Mn(II) leaching was enhanced as particle size decrease, we suggest <212 ${\mu}m$ as a proper size range since more grinding means more energy consumption The results would help for the improvement of bioleaching of manganese nodule as a less expensive, energy-efficient, and environment-friendly technology as compared to the existing physicochemical metal recovery technologies.

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        한 , 중 청소년 수련활동에 관한 연구

        오치선(Chi Sun Oh),권일남(Il Nam Kwon),이가화(Jia Hua Li),번신민(Xin Min Fang) 한국청소년학회 1997 청소년학연구 Vol.4 No.-

        현재 실시되고 있는 청소년 수련프로그램을 통해 청소년이 느끼는 교육 정도를 파악하며, 수련 전·후의 변화에 대해 느끼는 정도를 파악하고, 각국별 수련프로그램 개선에 대한 요구를 분석하여 수련프로그램의 발전방향을 모색하는 것이 본 연구의 목적이다. 이 연구목적을 달성하기 위하여 한국의 북부, 중부, 남부의 수련원 1곳씩 도합 3개의 수련원과 중국의 북부, 중부, 남부의 수련원 1곳씩 도합 3개의 수련원을 선정하여 설문조사를 실시하였으며 응답자 1,577명의 응답 내용을 분석 및 해석하여 다음의 결과를 발견했다. 한국과 중국 모두 `학교의 결정`에 의해 참여하였으며, 수련활동을 받고 난 후의 인식은 한국과 중국 청소년 모두 수련활동을 긍정적으로 평가하고 있었다. 수련활동의 문제점은 한국 청소년들은 `내용이 유사함`에, 중국 청소년들은 `흥미있는 프로그램의 미흡`을 제일 먼저 꼽았다. 개선사항으로 한국 청소년은 시설개선에 대한 요구와 다양한 프로그램의 참여를 위해 기간을 연장하거나 수련교육 참여전 사전교육을 강화해 주기를 희망하고 있는 반면, 중국 청소년들은 체육설비 강화, 전문장소 설립 등 시설개선에 대한 요구가 큰 것 이었다. The objective of this study is as follows; This is to seek after 1) the standard of education that youths feel through the training program for youths carried out now, 2) the standard which youths feel change before and after the training, and 3) a way of development toward the training program after analyzing request for improvement of the training program by each country. In order to achieve the above-mentioned objectives, one center at a place in the north in the middle, and in the south of Korea, total three training centers and one center at a place in the north, in the middle, and in the south of China, total three training centers were chosen, and a questionaire was carried out, and 1,577 respondents showed following reaction at the major-findings of interpreting the content of answer. The motive to participate in the training activity was risen form the decision of school in China as well as Korea, and a cognition of the youths of Korea and China after making the training activity was changed to affirmation. The problem of the training activity responds a similarity of content to Korean youths and insufficiency of interest in the program to Chinese youths, so they showed a big gap in the sense of matter. In the matters of improvement, Korean youths requested for improvement of facilities, strengthening practical instruction before participation in the training activity, and lengthening the period of participation in the diverse program, and Chinese youths, for strengthening sports facilities, establishing professional center, and improvement of facilities.

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