http://chineseinput.net/에서 pinyin(병음)방식으로 중국어를 변환할 수 있습니다.
변환된 중국어를 복사하여 사용하시면 됩니다.
강호덕(Hoduck Kang),양희선(Hee-Sun Yang) 한국자원식물학회 2005 한국자원식물학회지 Vol.18 No.3
미류나무 절간조직(2년생)을 이용하여 식물생장조절물질이 함유된 MS배지에서 대량의 식물체를 증식시켰다. 대부분의 식물체는 BA 1.0 + TDZ 0.1 mg/L가 함유한 배지에서 줄기의 형성층 부분에서 절편당 24.6±4.6개의 줄기가 유기되었으며, 몇몇 줄기는 피목 부분의 조직에서 유기되었다. 신장된 줄기는 NAA 0.01 mg/L가 포함된 배지에서 94.6%의 발근이 이루어졌다. 신장된 줄기의 발근은 식물생장조절물질에 따라 차이를 보여 NAA와 IBA에서 90% 이상의 발근이 촉진되었으나, cytokinin류를 처리한 시료에서는 50% 이하의 낮은 발근율을 나타냈다. 발근된 유식 물체는 Cell-tray의 인공상토(peatmoss : vermiculite : perlite = 1 : 1 : 1)에 이식하여 8주간 생육후 98%의 높은 생존율을 나타냈다. 본 연구결과, 2년생 미루나무류의 줄기에서 직접 대량의 줄기를 유도하여 대량증식과정을 단순화 시켰을 뿐만 아니라 조직배양묘 경화시 multi-cap을 이용하여 생존율을 향상시킬 수 있었다. Mature nodal segments of 2-year-old greenhouse stock plant were cultured on Murashige and Skoog basal medium supplemented with the different kinds and various concentrations of cytokinins to produce multiple shoots in in vitro condition. The most adventitious shoots were produced from excised ends of nodal segments. The highest average number (24.6±4.6) of shoots was produced with the combination of BA 1.0mg/L and TDZ 0.1mg/L in MS medium. In addition, several shoots were formed from lenticels of bark cambium with the same treatment. These concentrations promoted high shooting capability upto 94.6% and NAA was the best cytokinin among five different PGR sources.
포플러의 미성숙 배와 캘러스에서 유전자총에 의한 GUS - gene 의 일시적 발현
강호덕,강상구,배한홍,박교수,( Ho Duck Kang,Sang Gu Kang,Han Hong Bae,Kyo Soo Park,Richard B . Hall ) 한국산림과학회 1997 한국산림과학회지 Vol.86 No.3
Excised immature ovules and calli derived from the stems of cottonwood were bombarded with microprojectiles carrying plasmid DNA containing CaMV-35S promoter and β-glucuronidase(GUS) gene. After bombarded, the expression of GUS gene was detected by the assay of 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-gluconide(X-gluc). Transient gene expression was measured by counting the number of distinct regions of GUS activity per explant. As major parameters, the number of shots and the period of exposure to X-gluc after the bombardment were investigated for detecting GUS gene expression. In this experiment, the percents of GUS gene expression showing spots were 56.8 from immature ovules and 75.9 from micro-calli of cottonwood species. Among the treatments, two consecutive shots and 48 hour exposure produced abet 25.75±2.77(per ovule), 11.43±1.22(per mini petridish) spots, respectively, Microprojectile particle bombardment provides a useful method to assay transient expression in both types of explants. Furthermore, our results represent that the excised ovule and/or the calli might be stably transformed by the biolistics.
강호덕,강상구,배한홍,박교수,Kang, Hoduck,Kang, Sang-Gu,Bae, Hanhong,Park, Kyo-Soo,Hall, Richard B. Korean Society of Forest Science 1997 한국산림과학회지 Vol.86 No.3
미류나무의 미성숙 ovule과 줄기로부터 유기된 캘러스에 plasmid pBI221 유전자를 유전자총을 이용하여 인위적으로 삽입하였다. Plasmid pBI221은 CaMV-35S 유전자에 의하여 발현되는 ${\beta}$-glucuronidase(GUS) reporter 유전자를 포함하고 있다. Plasmid pBI221이 물리적으로 삽입된 후 GUS 유전자의 발현정도는 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-${\beta}$-gluconide(X-glue)의 반응에 의해 분석되었고, 유전자의 일시적 발현현상은 ovule, 캘러스 시료에 X-glue substrate의 반응에 의하여 나타나는 뚜렷한 점(spot)의 수에 따라서 조사하였다. 본 실험에서 particle bombardment후 GUS유전자의 발현검정에 있어 가장 중요한 요인은 bombardment 횟수와 X-glue substrate에 노출된 시간이었다. X-glue substrate와의 반응결과, 캘러스와 ovule에서 각각 56.8%, 75.9%의 반응 점들을 나타냈다. 여러 처리중 두번의 연속적인 shot와 bombardment 이후, X-glue과 sample을 48시간 반응시킨 후 24시간 동안 alcohol로의 침지가 가장 많은 수의 점을 유기시켰고, 이들 반응으로부터 평균 $25.75{\pm}2.77$(ovule), $11.43{\pm}1.22$(calli)개의 반응 점을 보였다. 유전자총에 의한 외래 유전자 도입에 관한 본 연구는 두종류의 시료로부터 빠른 시간 내에 유전자 발현을 볼 수 있을 뿐만 아니라, 지금까지 Agrobacterium을 이용한 형질전환이 보고되지 않은 미류나무(Populus deltoides)의 형질전환 연구에 대체 방법을 제공하리라 생각된다. Excised immature ovules and calli derived from the stems of cottonwood were bombarded with microprojectiles carrying plasmid DNA containing CaMV-35S promoter and ${\beta}$-glucuronidase(GUS) gene. After bombarded, the expression of GUS gene was detected by the assay of 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-${\beta}$-gluconide(X-gluc). Transient gene expression was measured by counting the number of distinct regions of GUS activity per explant. As major parameters, the number of shots and the period of exposure to X-gluc after the bombardment were investigated for detecting GUS gene expression. In this experiment, the percents of GUS gene expression showing spots were 56.8 from immature ovules and 75.9 from micro-calli of cottonwood species. Among the treatments, two consecutive shots and 48 hour exposure produced about $25.75{\pm}2.77$(per ovule), $11.43{\pm}1.22$(per mini petridish) spots, respectively, Microprojectile particle bombardment provides a useful method to assay transient expression in both types of explants. Furthermore, our results represent that the excised ovule and/or the calli might be stably transformed by the biolistics.