모기업 협력업체 산업안전보건관리에 대한 인식

이경용,이관형,오지영,서남규,손두익,갈원모,신문진 한국안전학회 2003 한국안전학회지 Vol.18 No.4

This study is planned to investigate the attitude toward the safety and health management of contractor comparry. Under the contract based production system, all of activities including safety and health management in the contractor company are depended upon the contract. How to make contract influence the worker's health of contractor company. Work's health of contractor company can be protected by efforts of company of contract-out and contractor company, especially their safety managers. The modelling of the effective safety and health management system for contractor company should consider the need of safety manager of each company and employer of contractor company. Data is collected from safety managers of 3 contract out companies as electronic and electrical manufacturing industry and 55 safety managers, 57 employers of their contractor companies using self administered survey with structured questionnaire. The most of all respondents want to support from the contract out companies. The most important items supported from contract out company is the information based on the safety information network between each company. Safety manager and employer of contactor company also itemized safety education and training in the supporting system from contract out company. These results can be generalized to survey on the other industries.

敗令散 및 補中治濕湯이 Puromycin Aminonucleoside로 誘發된 白鼠의 腎症에 미치는 影響

梁文浩,曺東鉉,安世永,鄭定烈,杜鎬京 慶熙大學校韓醫科大學韓醫學硏究所 1995 慶熙韓醫大論文集 Vol.18 No.2

The effects of Paeryungsan and Bojungchiseubtang on rats with nephrosis induced by a single intravenous injection of puromycin aminonucleoside(PAN), 2.5mg/100g of body weight were evaluated in the present study. The effects of Paeryungsan and Bojungchiseubtang on PAN nephrosis were evaluated by measuring ①the concentrations of albumin, total protein, total lipid, cholesterol, triglyceride, creatinine, blood urea nitrogen and uric acid in the serum, ②the amount of volume, protein, glucose and creatinine of the 24hours urine ③the concentration of blood in the urine, intake water, and by observing the changes of microscopic findings of kidney. The results are summerized as follows; 1. In the control group, the concentrations of cholesterol, creatinine, blood urea nitrogen in the serum, the amount of protein and glucose of 24 hours urine, creatinine of 24 hours urine and 24 hours urine volume on the 22th day were significantly increased. On the other hand, the concentration of albumin in the serum, the amount of creatinine of 24 hours urine on the 8th day, the volume of 24 hours urine and the intake water on the 8th, 15th day were decreased significantly. Electron microscopic findings were the segmental obliteration of the foot processes, swelling and villous transformations of the visceral epithelial cells and partial increase of the mesangial matrix. 2. In Paeryungsan group, the decrease of albumin in the serum and intake water were inhibited significantly. But the increase of the concentrations of cholesterol and blood urea nitrogen in the serum were inhibited significantly. And the amount of creatinine of 24 hours urine was increased significantly. There was no significant difference between Paeryungsan group and the control group in electron microscopic findings. 3. In Bojungchiseubtang group, the decrease of albumin in the serum and intake water were inhibited significantly. But the increase of the concentrations of cholesterol, total lipid, creatinine, blood urea nitrogen in the serum and the amount of protein in the 24 hours urine were inhibited significantly. The concentration of protein in the serum was increased significantly. There was no significant difference between Bojungchiseubtang group and the control group in electron microscopic findings. To conclude, PAN nephrosis was induced by a single intravenous injection of PAN 2.5mg/100g of body weight on rats. It can be inferred that Paeryungsan group has the effects of improving hypoalbuminemia in nephrotic syndrome and relieving azotemia when nephrotic syndrome is accompanied by the acute renal failure. It can be inferred that Bojungchiseubtang may improve proteinuria, hypoalbuminenia, hyperlipidemia in nephrotic syndrome. But there was no significant difference between Paeryungsan and the control group, between Bojungchiseubtang group and the control group in electron microscopic findings. So I hope that there will be further studies on the effect on the alterations of glomerular polyanion sites, and on the functioning mechanism of Paeryungsan and Bojungchiseubtang in the future.

Epstein-Barr virus(EBV)와 연관된 Nasal type T/Natural Killer(NK)-cell lymphoma 1예

지두현,최지호,성경제,문기찬,고재경 울산대학교 의과대학 1996 울산의대학술지 Vol.5 No.1

Nasal type T/NK-cell lymphoma는 병리조직학적으로 응고성 괴사가 동반된 혈관중심성 침윤을 특징으로하며 T-cell과 NK-cell 항원을 모두 표현하는 면역조직화학염색 소견을 보이는 매우 드문 피부 림프종으로서 EBV와의 연관성이 흔히 보고되고있다. 저자들은 42세 여자에서 발생한, 전신적인 홍반성 구진, 판, 결절의 임상양상을 보였으며 피부 병변에서의 EBV-encoded RNA(EBER)에 대한 in situ hybridization상 양성소견을 보였고 전산화단층촬영, 골주사, 갈륨주사 등의 검사상 비강, 위장관 및 다른 내부장기 침범소견은 보이지 않아서 피부에만 국한된 경우로 사료되는 nasal type T/NK-cell lymphoma 1예를 보고하는 바이다.

Phytochrome이 보리잎 Protoplast의 팽윤에 미치는 영향

홍경애,송성준,송필순,유장걸,문두길 제주대학교 방사능이용연구소 1986 연구보고 Vol.2 No.-

암조건에서 생육시킨 보리(Hordeum valgare)잎의 생장점 부근에서 분리한 Protoplast가 적색광 처리에 의해서 팽윤되었고 적외선광에 의해서는 적색광 효과과 소멸되었다. 이 사실은 Protoplast의 팽윤이 Phytochrome에 의해서 조절됨을 시사하는 것이나 Phytochrome의 작용기작을 알기 위해서는 다각적인 연구가 필요하다. 실험결과로 부터 적색광 처리시간은 2분 적색광 처리후 배양시간은 2시간이 적당함을 알았다. Protoplast 배양액의 Sorbitol 농도에 따른 크기변화는 농도가 낮을수록 커졌으며 0.4M 이하에서는 Protoplast가 파괴되었다. Light effect on the size of protoplasts isolated from etiolated barley leaves was studied. Red light irradiation caused a swelling of protoplasts while little change in size found under the dark condition. Photoreversibility by red light and far-red light was found in protoplast swelling, indicating the involvement of phytochrome. Action mechanism of phytochrome on protoplast swelling should be clarified in aspect of growth regulators and intermediates involved. Two minute irradiation time and two hour incubation after red light treatment were found sufficient to induce protoplast swelling. The protoplasts were swollen according to the sorbitol concentration of incubation media but destroyed below 0.4M-sorbitol concentration.

Clozapine이 인체내에서 인간조직적합성항원에 미치는 영향

강병조,김문두,곽경필 경북대학교 의학연구소 2000 경북대학교병원의학연구소논문집 Vol.4 No.1

The histocompatibillty antigen (human leukocyte antigen : HLA) has been used for organ transplantation, discrimination of one's real children and transfusion, etc. The objective of this study was to find out how dozapine affects HLA class I and II type in the humanbody when therapeutic doses are applied. The subject consists of 3 persons for lass I and class II They were administered for about 3 months with clozapine 157-250mg/day (mean dally dose 200mg). Analysis of HLA lass I type was the microcytotoxicity test of Terasaki and class II type was PCR method of Erhich. The results were as followings: Two of 3 were changed in HLA-A, B, C type. All three were not chanced in HLA-DR type. In conclusion, the short-term application, about 3 months, of therapeutic dose of clozapine is not considered to bring about changes in DNA level.

림프구에 대한 clozapine의 생체내 유전독성

임정호,곽경필,김문두,강병조 대한생물치료정신의학회 1997 생물치료정신의학 Vol.3 No.1

최근 난치성 정신분열증 환자에서 가장 효과적인 약으로 알려진 clozapine은 골수에 작용하여 심각한 부작용인 무과립 구증을 일으킬 수 있다. 무과립구증의 원인 및 기전에 대한 연구는 매우 많으나 현재까지 확실한 결론이 나지 않은 상태이다. 저자들은 clozapine의 이러한 골수 독성에 근거하여 clozapine이 인체내에서 염색체에 어떤 변화를 주는지 아닌지를 알아보기 위해 clozapine 단독치료를 시행한 환자에게서 치료전과 치료중에 얻어진 말초혈액 림프구를 배양하여 염색체에 어떤 변화가 생기는지를 조사하였으나, clozapine에 의한 염색체의 자발적인 변이는 관찰되지 않았다. Objective : Many drugs and environmental chemicals can induce aneuploidy or chromosome instability in vivo or in vitro. Modification of the fidelity of cellular division may occur via a variety of mechanisms and chemical interactions. The clozapine is new antipsychotic drug with superior effect than classic antipsychotics. But, it may produce agranulocytosis and seizure in some patients. Agranulocytosis is a serious side effect of this drug but the cause and mechanism of this side effect is not clearly explained. Some study suggested that oxidative stress can induce chromosome aberration and the other study suggested that clozapine produce free radical and it can induce oxidative stress on some kind of cells. Therefore we decided to investigate whether clozapine and its metabolites can induce genotoxic effect in vivo. Method : The patients were chronic schizophrenic patients without a treatment at least one year. Diagnosis was made by DSM-IV criteria and agreed by both of two psychiatrists. Blood sampling was done before the treatment and during the treatment with considerable time interval. We used peripheral blood lymphocyte culture method and we counted the numerical aberrations, sister chromatid exchanges. Results : Chromosome aberration was not detected in all samples. Conclusion : Clozapine did not induce spontaneous chromosome aberration to human lymphocytes in vivo.

새 교육과정에 의한 중학교 과학교과서(1 및 2)중 생물영역에 대한 분석적 연구

조운복,정경규,문두호 부산대학교 사범대학 과학교육연구소 1985 科學敎育硏究報 Vol.12 No.-

In the science textbooks 1 and 2 according to the new educational curriculum, the results of investigation and analysis of biology course are as follow: 1. Science textbooks 1 and 2 consist of four parts: Earth science, biology, chemistry and physics. The area of biology was emphasized. 2. In the contents of the book, the levels of science textbook 1 was emphasized on 'individual' (65.7%), science textbook 2, on 'tissue and organ' (68.3%), and 'diversity and unity' (64.4%) were emphasized in textbook 1, and 'structure and function' (76.2%) in textbook 2 as a themes. 3. In view of the experiment and observation, there was not any experiment in textbook 1, but there were many observation (14 times) and study (45 times). On the contrary many experiments (9 times) have been performed in science textbook 2, but few observation (1 times) and study (13 times) comparing with textbook 1. The temes of experiments and observation many dealt with 'formation' in science textbook 1, but textbook 2 dealt with 'structure and function'. 4. The kinds of organisms which are use in experiments and observation were total 19 kinds, 12 in textbook 1 and 7 in textbook 2. It was show that water grass (3 times) and sprouted bean (2 times). There were total 11 kinds of chemicals in using frequency. They are 4 in textbook 1 and 7 in textbook 2. Much used chemical was iod-iodine solution. In using 36 kinds of instruments in total, such as 16 in textbook 1 and 20 in textbook 2, among these instruments in total, such as 16 in textbook 1 and 20 in textbook 2, among these instruments three were used duplicately. The using frequency order of the instruments is as follow: microscope> test tube, spoid, magnifying glass> water tank, slide glass. 5. This new science textbook contains total 164 pieces of pictures and photos which are affluent in chromaticity, such as 92 in textbook 1, and 72 in thextbook 2. So these science textbook lie emphasis in causing learns to have interest in their study and investigate.

백서 뇌하수체 성장호르몬 종양세포의 Chicken Lysozyme 유전자 갑상선호르몬 반응요소에서 갑상선호르몬 수용체 역동학에 미치는 T₃효과 분석

이성진,박철영,정인경,홍은경,최철수,김현규,김두만,유재명,임성희,최문기,유형준,박성우,Larsen, P. Reed 대한내분비학회 2003 Endocrinology and metabolism Vol.18 No.4

연구배경: 유전자 전사과정은 증강부위 (enhancer) 또는 억제부위(silencer)의 복합작용을 통하여 조절되며 chicken Iysozyme 유전자의 억제부위는 두 개의독립적인 전사인자 결합부위 (Fl과 F2)를 가지는데 Fl부위는 75~93 kD 크기의 NePl 단백질이 결합하는 위치인 반면 역위회문구조(inverted palindrome, InvPal)의 F2 부위는 갑상선호르몬 수용체가 결합하는 갑상선호르몬 반응요소인 동시에 갑상선호르몬 수용체에 대해 높은 친화력을 가지고 있다. 실험적으로 Fl부위 또는 F2 부위 (이하 F2-TRE 부위)를 각각 다량체화(multimerization) 하였을 때 전사억제효과가 증가하였다는 연구 결과는 Fl 부위와 F2-TRE 부위가 서로 독립적으로 기능하는 구조임을 시사하고 있으며chicken Iysozyme 유전자의 억제부위가 완전한 전사억제효과를 가지기 위해서는 Fl 부위와 F2-TRE 부위가 모두 필요함이 보고 되어 있다. 현재 갑상선호르몬에 의한 chicken Iysozyme 유전자 조절기전을 규명하기 위해 많은 연구가 이루어지고 있으나 73 자극 전 ·후 갑상선호르몬 수용체의 역동학에 대해서는 아직까지 거의 보고된 바 없으며 이와 관련하여 저자들은 치근 사람의 간암세포주인 HepG2 세포에서 T₃ 자극전 ·후 갑상선호르몬 반응요소인 IRE2 부위에 대한 갑상선호르몬 수용체의 결합이 교대로 이루어지고 있음을 염색체 면역침전법 (chromatin immunoprecipitation, ChIP) 및 정량적 중합효소연쇄반응을 이용하여 확인한 바 있다. 이에 저자들은 본 연구에서 F2-lRE 부위를 포함하는 백서 뇌하수체 종양세포주인 GC8 세포를대상으로 염색체 면역침전법과 중합효소연쇄반응을 이용하여 갑상선호르몬 자극 전 후 시간적 순서에 따라 F2-TRE 부위에 결합하는 갑상선호르몬 수용체의 결합양상 변화를 분석함으로써 갑상선호르몬 수용체의 역동학적 모델을 제시하여 보고자 하였다. 방법: thymidine kinase(TK) promoter의 5' 부위에 chicken Iysozyme silencer의 고친화력 갑상선호르몬 반응요소(F2-TRE 부위)가 삽입된 플라스미드,mouse TRα gene이 삽입된 플라스미드, neomycinresistance gene이 삽입된 플라스미드를 백서 뇌하수체성장호르몬 종양세포인 GC 세포에 각각 주입하여 제작한 GC8 세포주를 사용하였다. 100 αM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 TRαl, TRβl, TRβ2 항체를 이용하여 염색체 면역침전법과 고식적 중합효소연쇄반응 및 정량적 중합효소연쇄반응을 시행하였다. 각 갑상선호르몬 수용체 항체의 양을 1.5μL에서 4.5μL로 바꾸어 첨가한 후 동일한 방법으로 염색체 면역침전법을 반복하여 시행하였다. 100nM T₃를 투여하기전과 투여한 후 20분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 8시간, 12시간 뒤 TRαl, TRβl, TRβ2 항체를 이용하여 염색체 면역침전법을 시행하였다. 100nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 TRαl, TRβl, TRβ2 단백질의 발현량을 알아보고자 Western blot을 시행하였다. 결과: 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 염색체 면역침전법과 F2-TRE 시발체를 이용한 고식적 중합효소연쇄반응을 시행하였을 때 T₃를 투여한 후 12시간 뒤 TRα1과 TRβ2의 결합은 증가한 반면 TRβl의 결합은 감소하였다. 정량적 중합효소연쇄반응으로 갑상선호르몬 수용체의 결합량을 측정하였을 때TRα1은 T₃ 투여 전 1.01에서 T₃ 투여 후 2.73으로 유의하게 증가하였으며 TBβl은 T₃ 투여 전 4.59에서 T₃투여 후 2.06으로 유의하게 감소하였고 TRβ2는 T₃ 투여 전 2.53에서 T₃ 투여 후 2.98로 증가하는 경향을보였다(TRα1, Δ=+170.3%, p<0.05; TRαl, Δ=-55.1%, p<0.05; TRβ2, Δ=+17.8%). 정량적 중합효소연쇄반응으로 측정한 갑상선호르몬 수용체의 전체 결합량은 T₃ 투여 전 8.13에서 T₃ 투여 후 7.77로 감소하였으나 통계적으로 유의하지 않았다(Δ=-4.4%).100nM T₃ 투여 전 ·후 시간별로 염색체 면역침전법과 정량적 중합효소연쇄반응을 시행하였을 때 TRα1 결합량은 T₃ 투여 후 20분과 6시간 뒤 각각 증가하였으며 TRβ2 결합량은 T₃ 투여 후 20분 뒤 최고치까지 증가하였다가 2시간 뒤부터 감소하였다. 그러나 TRαl 결합량은 T₃ 투여 후 1시간 뒤 최저치까지 감소되었다가 이후 지속적으로 유지되는 경향을 보였다. 100 nM T₃ 투여 전과 투여 후 2시간 뒤 갑상선호르몬 수용체의 결합량을 비교하였을 때 TRα1은 219.8% (1.01→3.23), TRβ2는 9.9% (2.53→2.78) 증가하였으나 TRβ1은 52.9% (4.59-)2.16) 감소하였으며 결합량 변화의 방향은 100 naM T₃ 투여 후 4시간 뒤와 6시간 뒤 갑상선호르몬 수용체 결합량 변화의 방향과 일치하였다(TRα1, 2.89→4.09, Δ =+41.5%; TRβl, 2.33→2.04, Δ=-12.4%; TRβ2, 2.57→2.59, Δ=10.8%). 갑상선호르몬 수용체 항체를 1.5 μL 또는 4.5 μL 투여한 후 F2-TRE부위에 대한 염색체 면역침전법 및 정량적 중합효소연쇄반응을 각각 시행하였을 때 첨가한 갑상선호르몬 수용체 항체의 양에 따른 갑상선호르몬 수용체결합량의 유의한 차이는 없었다. 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 Western blot을 시행하였을 때 갑상선호르몬 수용체 발현량의 유의한 차이는 관찰되지 않았다. 결론: 본 연구에서 관찰된 T₃ 자극 전 · 후 chickenIysozyme 유전자의 F2-TBtE 부위에 대한 갑상선호르몬 수용체 이성체의 교대현상 및 시간적 순서에 따른 갑상선호르몬 수용체 결합양상의 변화가 나타내는 의미에 대하여 추시 연구가 필요함은 물론 추가적으로 다른 유전자 또는 다른 종류의 세포주를 대상으로 T₃자극에 따른 갑상선호르몬 수용체 결합양상의 변화와유전자 발현을 검토하여야 할 것이다. 한편 본 연구 결과만으로는 갑상선호르몬 수용체 역동학에 대한 많은 의문점을 풀 수 없음에도 불구하고 아직까지 국내외적으로 갑상선호르몬 수용체의 역동학에 대한 연구 결과가 거의 없는 현실을 고려하여 볼 때 본 연구는 제한적이나마 일정한 농도의 갑상선호르몬 자극 전ㆍ후chicken Iysozyme 유전자의 F2-TRE 부위에서 갑상선호르몬 수용체의 교대현상을 재확인하였다는 점과 갑상선호르몬 자극 전 · 후 시간적 순서에 따른 갑상선호르몬 수용체의 역동학적 모델을 처음으로 제시하였다는 점에서 의의가 있을 것으로 생각된다. Background: The regulation of gene transcription can be controlled by both positive (enhancer) and negative (silencer) regulatory sequences. Several enhancer and silencer elements have been described in the 5' region of the chicken lysozyme gene. The silencer located at -2.4 kb upstream of the chicken lysozyme gene is composed of two separate modules (Fl and F2) that can function as silencers by themselves, but also show synergistic repression after multimerization. The F1 module is bound by a protein termed NePl and F2 module, a F2 thyroid hormone response element (F2-TRE), and can be bound by the thyroid hormone receptor (TR). F2-TRE has an inverted palindromic structure, with high affinity to TR. Although many current reported results have tried to explain the regulatory mechanism of chicken lysozyme gene expression due to the thyroid hormone, there have been few studies that clarify the TR dynamics in the F2-TRE of the chicken lysozyme gene, either with or without exposure of the thyroid hormone. Here, the changes in the TR binding patterns in the F2-TRE of the chicken lysozyme gene are described, both before and after T₃ stimulation over time. Methods: Using the stably transfected rat pituitary somatotroph tumor cell line, GC8 cells, with the F2-TRE inserted 5' to the thymidine kinase (TIC) promoter, together with a mouse TRα - expressing plasmid, a chromatin immunoprecipitation (ChIP) technique was employed to reveal the TR-TRE interaction before and after T₃ stimulation. Following the cross-linking and sonication of the cells, the immunoprecipitation was performed overnight, at 4℃, with TRαl, TRβl and TRβ2 antibodies, respectively. The binding patterns and amounts of TRαl, TRβ1 and TRβ2 to the F2-TRE, before and after 12 hours of 100nM T₃ stimulation, were analyzed using conventional and quantitative real-time polymerase chain reactions (RQ-PCR). The ChIP technique was used to give a basal value for 20 minutes and 1, 2, 4, 6, 8 and 12 hours after the 100nM T₃ stimulation, and RQ-PCR was then performed. Western blot with TRαl, TRβl and TRβ2 antibodies were also performed. Results: After 12 hours of 100 nM T₃ stimulation of the GC8 cells, the TRα1 and TRβ2 binding to the F2-TRE increased, but the TRβ1 binding to the F2-TRE decreased, by conventional PCR. Although all the TR isoforms were bound to the F2-TRE by RQ-PCR, the TRαl binding to the F2-TRE, after 12 hours of l00nM T₃ stimulation, was significantly increased (1.01→2.73, Δ =+170.3%, p<0.05), but the change in the amount of TW2 binding was not significant (2.53→2.98, Δ=+17.8%). The TRβl binding was significantly decreased compared with that of the basal level (4.59→2.06, Δ=-55.1%, p<0.05). The total TR bindings to the F2-TRE had a tendency to decrease after 12 hours of 100 nM T₃ stimulation (8.13→7.77, Δ=-4.4%). The binding patterns and amounts of TRαl, Tβl and Tβ2, both before and after the 100 nM T₃ stimulation, were also identified over time. While the TRβl bindings to the F2-TRE after 1 hour of l00nM T₃ stimulation were acutely reduced, those of the TRαl at 20 minutes and 6 hours were increased. The TRβ2 bindings showed a maximal increase at 20 minutes. The directions of the TR binding patterns, between the before and after 2 hours of 100nM T₃ stimulation, were identical to those for between 4 and 6 hours of T₃ stimulation. There was no significant difference in the TR bindings to the F2-TRE in relation to the amounts (1.5 vs. 4.5μ I) of TR antibodies used during the ChIP assays. The Western blots showed no significant change of the levels of each TR isoform proteins, either before or after 12 hours of exposure to 100nM T₃. Conclusion: These results show the dynamic binding patterns of the TR isoforms to the F2-TRE of the chicken lysozyme gene, both before and after T₃ stimulation, over time. Further investigation, however, will be needed to clarify the mechanisms of our observations. The ChIP technique may then be used to reveal the dynamic models of the cofactors, as well as TR isoforms, in the TR-regulated transcription machinery (J Kor SOC Endocrinol 18:379-391, 2003).

제1형 탈요오드효소 유전자 갑상선호르몬 반응요소에서 T₃자극에 따른 갑상선호르몬 수용체 역동학 모델

이성진,박철영,정인경,홍은경,최철수,김현규,김두만,유재명,임성희,최문기,유형준,박성우,Larsen, P. Reed 대한내분비학회 2003 Endocrinology and metabolism Vol.18 No.3

연구배경: 제1형 탈요오드효소의 발현에 관여하는 hdiol 유전자는 5 flanking region 내 서로 다른 특성을 가진 두 종류의 갑상선호르몬 반응요소, 즉 TREI과 TRE2를 가지고 있음이 알려져 있다. 사람의 간암세포주인 HepG2 세포에서 T₃를 투여하였을 때 hdiol유전자의 전사작용이 급격하게 증가하는데 hdiol mRNA가 충분히 발현하기 위해서는 두 종류의 갑상선호르몬 반응요소가 모두 필요함이 보고 되어 있으나 T₃ 투여시 갑상선호르몬 반응요소와 결합하는 갑상선호르몬 수용체의 역동학에 대해서는 아직까지 연구된바 없다. 한편 현재까지 보고 된 연구 결과들은 갑상선호르몬 자극이 없더라도 갑상선호르몬 수용체와 갑상선호르몬 반응요소가 서로 지속적으로 상호작용 한다는 전제 조건을 바탕으로 하고 있는데 아직까지 이러한 가정은 간접적으로만 증명되어 있는 상태이다. 이에 저자들은 본 연구에서 사람의 간암세포주인 HepG2세포를 대상으로 염색체 면역침전법과 중합효소연쇄반응을 이용하여 갑상선호르몬 자극 전·후 hdiol 유전자의 갑상선호르몬 반응요소에 결합하는 갑상선호르몬 수용체의 결합양상 변화를 분석함과 동시에 갑상선호르몬 자극 전에도 갑상선호르몬 수용체와 갑상선호르몬 반응요소가 서로 결합된 상태로 존재함을 직접적으로 확인하고자 하였다. 방법: 사람의 간암세포주인 HepG2 세포를 대상으로 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 TRα1, TR 1, TR 2 항체와 IREI, TRE2에 상보적인 시발체를 이용하여 염색체 면역침전법과 고식적 중합효소연쇄반응 및 정량적 중합효소연쇄반응을 시행하였다. 100nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 hdiol mRNA 발현량의 변화를 정량적으로 측정하기 위하여 역전사 중합효소연쇄반응을 시행하였다. 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 TR4'1, TR 1, TR 2 단백질의 발현량을 알아보고자Western blot을 시행하였다. 결과: 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 염색체 면역침전법과 TREI 시발체를 이용한 고식적 중합효소연쇄반응을 시행하였을 때 T₃ 투여 전후 TREI 부위에는 TRgl이 결합하였으며 T₃를 투여한 후 TRal 결합이 감소하였다. 정량적 중합효소연쇄반응으로 TR4'1 결합량을 측정하였을 때 T₃ 투여 전3.74에서 T₃ 투여 후 1.97로 감소하여 통계적으로 유의한 차이를 나타내었다(Δ=-47.3%, p<0.05). T₃ 투여 전 ·후 TRβl과 TRβ2의 결합은 관찰되지 않았다. 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 염색체 면역침전법과 TRE2 시발체를 이용한 고식적 중합효소연쇄반응을 시god하였을 때 T₃ 투여 전ㆍ후 TRE2 부위에는 TRα1, TR 1, TR 2가 모두 결합하였으며 T₃를 투여한 후 TRα1과 TR 1의 결합은 감소하였으나 TR 2의 결합은 증가하였다. 정량적 중합효소연쇄반응으로 갑상선호르몬 수용체의 결합량을 측정하였을 때 TRαl은 T₃ 투여 전 10.41에서 T₃ 투여 후 3.01, TRβl은 T₃ 투여 전 12.56에서 T₃ 투여 후 2.93으로 유의하게 감소하였으며 TRβ2는 T₃ 투여 전 9.17에서 T₃ 투여 후 9.84로 증가하는 경향을 보였다(TRα1, Δ=-71.1%, p<0.05; TR 1, Δ=-76.7%, p<0.05; TR2, Δ=+7.3%). 정량적 중합효소연쇄반응으로 측정한 갑상선호르몬 수용체의 전체 결합량은 T₃ 투여 전 32.14에서 T₃ 투여 후 15.78로 감소하여 통계적으로 유의한 차이를 나타내었다(Δ=-50.9%, p.0.05). 갑상선호르몬 수용체 항체를 1.5μL와 4.5μL 첨가한 후TREI과 TRE2에 대하여 염색체 면역침전법 및 정량적 중합효소연쇄반응을 각각 시깡하였을 때 첨가한 갑상선호르몬 수용체 항체의 양에 따른 갑상선호르몬 수용체 결합량의 차이는 없었다. 100 nM T₃를 투여하기전과 투여란 후 12시간 뒤 역전사 중합효소연쇄반응 및 hdiol cDNA 시발체를 이용한 정량적 중합효소연쇄반응을 시행하였을 때 T₃를 투여한 후 hdiol mRNA발현량은 2.03배 증가하였다(p<0.001). 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 Western blot을 시행하였을 때 갑상선호르몬 수용체 발현량은 유의한 차이가 없었다. 결론: 현재까지 갑상선호르몬 수용체의 역동학에 대한 연구가거의 이루어지지 않았던 실정을고려하여볼 때 본 연구는 제한적이나마 일정한 농도의 갑상선호르몬 자극 전 · 후 갑상선호르몬 수용체 결합양상의 변화, 특히 T₃ 자극 전 hdiol 유전자의 TREI 부위에서 TRal이 억제자 (silencer)로서 작용할 가능성 및 T₃자극 전 · 투 TRE2 부위에서 갑상선호르몬 수용체 교대현상을 처음으로 제시하였다는 점에서 의의가 있으며 향후 다른 종류의 세포주 및 체내에서 갑상선호르몬 자극 전 후 갑상선호르몬 수용체 결합양상의 변화 및 유전자 발현에 미치는 영향을 연구할 필요가 있으리라 생각된다. 한편 염색체 면역침전법을 통해 HepG2 세포에서 T₃ 자극이 없더라도 갑상선호르몬 수용체와 갑상선호르몬 반응요소 사이에 지속적인 상호작용이 존재할 뿐 아니라 갑상선호르몬 반응요소에 대한 갑상선호르몬 수용체의 결합이 교대로 이루어지고 있음을 직접적으로 확인할 수 있었으며 향후 T₃ 자극 전 · 후 갑상선호르몬 수용체를 통한 유전자 전사조절기전에 관여하는 전사인자와 역동학적 기전을 규명함에 있어서 염색체 면역침전법과 정량적 중합효소연쇄반응이 매우 유용하게 이용될 수 있을 것이다. Background: Type 1 iodothyronine deiodinase (Dl), the product of the hdiol gene, is involved in thyroid hormone activation by the deiodination of thyroxine (T4) to form 3,5,3'-triiodothyronine (T3). Recent studies have identified two thyroid hormone response elements (TREs) in the 5 ' flanking region of the hdiol gene. TRE1, proximal to TRE in the hdiol gene, consists of a direct repeat of thyroid hormone receptor (TR) binding octamers with 10 bp separating the two TR binding sites. The upstream TRE, TRE2, is a classical direct repeat of retinoid X receptor (RXR)/TR binding half-sites with a 4-bp separation. There are few studies clarifying the TR dynamics in the TRE of a specific gene with or without the exposure of activated thyroid hormone. We evaluated TR binding patterns in the proximal and distal TREs of the hdiol gene before and after T₃ stimulation. Methods: We employed chromatin immunoprecipitation (ChIP) technique to investigate the TR- TRE interaction before and after T₃ stimulation in human hepatocellular carcinoma HepG2 cell line. Following cross-linking and sonication of the cells, immunoprecipitation was performed overnight at 4℃ with TRαl, TRβ1 and TRβ2 antibodies. We analyzed the binding patterns and amounts of TRαl, TRβl and TRβ2 to TREl and TRE2 before and after 12 hours stimulation with 100 nM T3 by using conventional and quantitative real-time polymerase chain reactions (RQ-PCR). Reverse transcriptional PCR (RT-PCR) and Western blot with TR 1, TR 1 and TR 2 antibodies were performed to measure the levels of hdiol mRNA and TR 1, TR 1 and TR 2 proteins before and after 12 hours exposure to l00nM T3. Results: In TRE1, TRαl binding was significantly decreased after 12 hours stimulation with l00nM T3 (3.74→97, Δ=-47.3%, p<0.05), but TRβ1 and TRβ2 bindings were not detected by conventional PCR and RQ-PCR. Although all TR isoforms were bound to TRE2, the binding patterns were quite different. While TRα1 and TRβ1 bindings to TRE2 after 12 hours stimulation with 100 nM T3 were significantly decreased (10.41→3.01, Δ=-71.1%, p<0.05; 12.56 →2.93, Δ =-76.7%, p<0.05, respectively), TRβ2 binding was increased but not significantly (9.17 →9.84, Δ =+7.3%). Total TR bindings in TRE2 were significantly decreased after 12 hours stimulation with 1OOnM T₃ (32.14 →15.78, Δ=-50.9%, p<0.05). The TR bindings to TREl and TRE2 were not significantly different by the amounts of TR antibodies used during ChIP assays. The levels of hdiol mRNA were significantly increased, 2.03 times, after 12 hours exposure to l00nM T3 (p<O.001). Western blot showed no significant change of the level of each TR isoform protein before and after 12 hours exposure to 100nM T3. Conclusion: Our results demonstrate the dynamics of TRal at proximal TRE (TRE1) and the switching phenomenon of TR isoforms at distal TRE (TRE2) of the hdiol gene after T3 stimulation. Further investigation, however, is needed to clarify the mechanisms of these observations (J Kor SOC Endocrinol 18:283-295, 2003).

부신피질 호산성 과립세포종 1예

이성진,이호권,박철영,정인경,홍은경,오기원,김현규,김두만,유재명,임성희,최문기,유형준,박성우 대한내분비학회 2004 Endocrinology and metabolism Vol.19 No.1

저자들은 건강검진에서 시행한 복부 초음파검사상 우연히 좌측 부신 종괴가 발견되어 복부 전산화 단층 촬영검사와 호르몬검사를 시행한 후 부신피질 악성종양과의 감별 진단을 위해 부신절제술과 전자현미경검사를 포함한 병리조직학적 검사를 시행하여 부신피질호산성 과립세포종으로 진단한 증례를 경험하였기에 문헌고찰과 함께 이를 보고하는 바이다. Oncocytomas are neoplasms, histologically are composed of epithelial cells, with abundant, acidophilic and granular cytoplasm. Electron microscopic studies of oncocytomas have shown that the cytoplasm of oncocytes is packed with mitochondria. The adrenal gland is a very rare anatomical site for oncocytomas, and to the best of our knowledge, only thirty-six cases of adrenal oncocytomas have been described. Herein, a case of a large adrenal mass in a forty-year-old man, which was incidentally detected by abdominal ultrasonography, is presented. This patient demonstrated no clinical manifestation associated with adrenal hyperfunction. Hormonal studies showed no abnormal findings, except for a mild elevation of the 24-hour urinary VMA level. Abdominal computed tomography with enhancement revealed a large, well-defined left adrenal mass, measuring 5.0×4.2 ×3.0 cm. The patient underwent a left adrenalectomy, and a light microscopic examination confirmed an adrenocortical oncocytoma, with characteristic oncocytes and polygonal, abundant, eosinophilic and granular cytoplasm. The tumor cells were positive for cytokeratin and vimentin as well as S-100, but negative for chromogranin on immunohistochemical staining. An electron microscopic examination demonstrated closely packed mitochondria, containing intramitochondrial inclusions. After surgery, there was no evidence of a recurrent or distant metastatic disease at the 5 month follow-up. In summary, an extremely rare case of a man with an adrenocortical oncocytoma is reported, which was confirmed by histological examinations, including electron microscopy (J Kor Soc Endocrinol 19:82∼89, 2004).